银杏多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的研究

为研究银杏多糖对小鼠淋巴细胞的免疫调节作用,无菌分离小鼠脾淋巴细胞,制备淋巴细胞悬液,实验设空白组、阳性组（终浓度为5 μg/mL的左旋咪唑）、银杏多糖处理组（终浓度为25、50、100、200、400 μg/mL）。采用MTT法检测银杏多糖对淋巴细胞增殖的影响,流式细胞术检测银杏多糖对淋巴细胞周期的影响,ELISA法检测银杏多糖对淋巴细胞白细胞介素-4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）分泌量的影响,qRT-PCR法检测银杏多糖对淋巴细胞IL-4、IFN-γ mRNA表达的影响。结果显示,与空白组相比,银杏多糖处理组和阳性组的淋巴细胞增殖指数均极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL银杏多糖处理组的淋巴细胞增殖指数低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。与空白组相比,25~400 μg/mL银杏多糖处理组G₀/G₁期占比极显著降低、S期和G₂/M期细胞总占比极显著增加（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL时G₀/G₁期占比降低、S期和G₂/M期细胞总占比极显著升高（P<0.01）。与空白组相比,阳性组、25、100、200 μg/mL银杏多糖处理组的IFN-γ/IL-4比值均极显著低于空白组（P<0.01）,400 μg/mL银杏多糖处理组的IFN-γ/IL-4比值极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,100、200 μg/mL银杏多糖处理组IFN-γ/IL-4比值低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。与空白组相比,银杏多糖处理组和阳性组的细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量及其mRNA相对表达量均极显著高于空白组（P<0.01）;与阳性组相比,200 μg/mL银杏多糖处理组的细胞因子IFN-γ、IL-4分泌量及其mRNA相对表达量低于阳性组,但无统计学意义（P>0.05）。由此可见,银杏多糖可以通过增加小鼠脾淋巴细胞增殖、减少G₀/G₁期细胞的阻滞、促进DNA合成、促进细胞因子IFN-γ、IL-4的分泌及其mRNA的表达、维持IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）动态平衡,来提高机体免疫功能。     

苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响（网络首发、推荐阅读）

以苦瓜多糖(MCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的MCP体外刺激,检测MCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mRNA表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(P<0.05),MCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05);与空白组相较,细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌量最大增幅分别为:42.73%、18%、27.81%、29.42%;IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的mRNA表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,MCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mRNA表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。     

紫薯花色苷对小鼠淋巴细胞免疫功能的调节作用

为探讨紫薯花色苷(PSPA)免疫调节作用,制备小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测不同浓度PSPA对淋巴细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测不同浓度PSPA对淋巴细胞膜表面标志和细胞周期的影响。结果:PSPA各浓度组淋巴细胞刺激指数均极显著(p<0.01)高于空白对照组;PSPA 20 mg/mL浓度组淋巴细胞刺激指数极显著(p<0.01)高于阳性对照组。PSPA 2.5 mg/mL浓度组淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值显著(p<0.05)高于空白对照组,PSPA 5、10和20 mg/mL浓度组淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值均极显著(p<0.01)高于空白对照组;PSPA 2.0浓度组淋巴细胞亚群CD4+CD8+百分率均极显著(p<0.01)高于阳性对照组。PSPA各浓度组处于S期的淋巴细胞的百分率均极显著(p<0.01)高于空白对照组。PSPA 20 mg/mL浓度组处于S期的淋巴细胞的百分率均极显著(p<0.01)高于阳性对照组。表明PSPA通过促进淋巴细胞增殖、提高CD4+/CD8+亚群比值、增加进入S期细胞的百分率,从而调节淋巴细胞的免疫功能。结论:PSPA具有明显的免疫调节活性。     

大枣多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的研究

研究大枣多糖对小鼠淋巴细胞的免疫调节作用。将小鼠淋巴细胞无菌分离,制备细胞悬液,设计空白组、阳性对照组（左旋咪唑）以及不同质量浓度的大枣多糖组（终浓度为20、40、80、160和320 μg/mL）。按照MTT法观察大枣多糖对小鼠淋巴细胞增殖的影响情况;采用ELISA法观察大枣多糖对小鼠淋巴细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-10、IL-12水平的影响;QRT-PCR检测大枣多糖对小鼠淋巴细胞IL-2、IL-6、IL-10、IL-12信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。在20~320 μg/mL浓度范围内,大枣多糖能促进小鼠淋巴细胞增殖,同时提高细胞因子的分泌量,进而促进细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12 mRNA表达。在20~320 μg/mL浓度范围内,大枣多糖通过诱导淋巴细胞增殖、淋巴细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12分泌以及mRNA表达,从而提高机体免疫功能。     

蟾酥水提取物对小鼠免疫功能的影响

研究新提取的蟾酥水提取中试产品体内外对小鼠免疫功能的调节作用。体内实验设蟾酥水提取物的高(2mg/kg)、中(1mg/kg)、低(0.5mg/kg)剂量组、左旋咪唑组和生理盐水组,连续腹腔注射给药3d后分别测定小鼠脾脏和胸腺指数、血液白细胞分类计数、血清中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ浓度和脾淋巴细胞体外增殖能力;无菌分离健康小鼠的脾淋巴细胞进行体外培养,加入不同质量浓度的蟾酥水提取物(20、10、5μg/ml),协同LPS或Con A共同孵育48h后,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖能力和ELISA法测定脾淋巴细胞上清液中的IL-2、IL-12、IL-4和IFN-γ含量。该蟾酥水提取物能协同Con A和LPS促进脾T、B淋巴细胞的体外增殖能力(P0.01),促进免疫器官生长。明显提高小鼠血清和脾淋巴细胞上清液中IL-2、IL-4、IL-12和IFN-γ水平(P0.01)。该蟾酥水提取物中试产品通过促进小鼠免疫细胞的增殖活性和细胞因子的分泌水平而发挥其免疫调节作用。     

白藜芦醇改善γ射线诱导的T-淋巴细胞损伤大鼠的免疫功能

本文研究了白藜芦醇改善γ射线诱导的T-淋巴细胞损伤大鼠的免疫功能。选取SPF级50只SD健康大鼠，随机分为空白组、模型组、低剂量组（20 μmol/L）、中剂量组（40 μmol/L）和高剂量组（80 μmol/L），建立γ射线诱导的T淋巴细胞损伤模型大鼠。建模成功后，对大鼠进行白藜芦醇灌胃处理，按实验设计对大鼠细胞T细胞增殖率、T淋巴细胞核因子-kB（Nuclear factor kB，NF-kB）表达、T淋巴细胞（CD3、CD4、CD8）、干扰素-γ（Interferon-γ，IF-γ）、白介素-12（Interleukin-12，IL-12）、白介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白介素-3（Interleukin-3，IL-3）水平进行检测。结果表明，中剂量组（40 μmol/L）白藜芦醇的T细胞增殖率、CD3、CD4、CD8、CD4/CD8分别为2.15%、54.15%、35.11%、21.45%、2.11。白藜芦醇对T细胞分泌的IF-γ、IL-12、IL-4、IL-3的水平分别为21546.15 pg/mL、212.15 pg/mL、645.56 pg/mL、221.15 pg/mL，与其他实验组均呈显著差异（p<0.05），说明白藜芦醇能够明显抑制调节T细胞，改善大鼠的免疫功能。     

乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用

探讨乳铁蛋白对环磷酰胺所致小鼠免疫失衡的保护作用。Balb/c小鼠随机分为6组,正常对照组,模型对照组,乳铁蛋白组(5、25、50、500 mg/kg)。连续灌胃给药27 d,第27天给药后除正常对照组外,其他小鼠均腹腔注射环磷酰胺80 mg/kg,继续灌胃至第30天,末次给药24 h后,放射免疫分析方法测定各组小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞。酶联免疫分析方法检测血清细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4,IL-10的变化。与正常对照组相比,模型小鼠外周血CD4+T、CD8+T百分率明显增加;血清IFN-γ明显降低(p<0.01),IL-4明显增高(p<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显下降(p<0.01);乳铁蛋白25、50、500 mg小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞百分率明显降低(P<0.01或P<0.05)。乳铁蛋白500 mg组小鼠血清IFN-γ较模型组明显增高(p<0.05),乳铁蛋白50、500 mg小鼠血清IFN-γ/IL-4比值趋于正常。乳铁蛋白能不同程度修复环磷酰胺所致小鼠免疫失衡状态,具有免疫保护作用。     

白藜芦醇对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响

研究了白藜芦醇(Res)对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A(Con A)、脂多糖(LPS)以及5、10、20、40μg/m L不同浓度的Res,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:Res能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能与Con A协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。综上,Res能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。     

菠萝蜜多糖对脾淋巴细胞抗氧化作用及免疫功能的影响

本研究旨在探明菠萝蜜多糖(polysaccharide from jackfruit pulp,JFP-Ps)对正常小鼠脾淋巴细胞增殖和免疫调节的影响。通过体外小鼠脾淋巴细胞的培养实验,测定不同质量浓度JFP-Ps对正常小鼠脾淋巴细胞增殖、抗氧化能力(总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活力和丙二醛(malonic dialdehyde,MDA)含量)及细胞因子(肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β))分泌水平的影响。结果显示,JFP-Ps可促进小鼠脾淋巴细胞增殖,质量浓度为80μg/mL和160μg/mL时效果显著(P0.05);当JFP-Ps质量浓度为40μg/mL甚至更高时,T-AOC及GSH-Px、SOD和CAT活力显著升高(P0.05),但MDA含量显著降低(P0.05);JFP-Ps在质量浓度40~160μg/mL范围内可显著促进脾淋巴细胞TNF-α、IFN-γ和IL-1β的分泌(P0.05)。结果表明JFP-Ps的免疫增强活性可能与其促进小鼠脾淋巴细胞增殖、提高抗氧化活性及诱导细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1β分泌水平有关。     

苦丁茶冬青多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的免疫调节和抗氧化作用

本文通过体外培养小鼠脾脏淋巴细胞研究苦丁茶冬青多糖对正常小鼠脾脏淋巴细胞免疫调节和抗氧化作用的影响。测定了不同浓度的苦丁茶冬青多糖（polysaccharide from Ilex kudingcha C.J. Tseng）对脾脏淋巴细胞体外增殖能力、抗氧化酶（SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT）活力、丙二醛（MDA）含量及炎性细胞因子（TNF-α、IFN-γ和IL-1β）分泌水平的影响。结果显示，小鼠脾脏淋巴细胞的增殖与苦丁茶冬青多糖浓度呈正相关，在80和160 μg/mL浓度时，吸光度值分别为0.38和0.41，与空白对照组（0.31）相比具有极显著差异（P<0.01）；SOD、T-AOC、GSH-Px和CAT活力随苦丁茶冬青多糖浓度的增加而增强，浓度为160 μg/mL时，抗氧化酶活力分别为4.54 U/mg蛋白、1.06 mmol/mg蛋白、799.01 mU/mg蛋白和806.85 U/mg蛋白，与空白对照组相比具有极显著性差异（P<0.01）；此外，与空白对照组相比，苦丁茶冬青多糖显著降低MDA含量、促进NO分泌和促进脾脏淋巴细胞分泌TNF-α、IFN-γ和IL-1β。本研究结果表明苦丁茶冬青多糖可通过促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖、增强细胞抗氧化能力及诱导炎性细胞因子分泌等发挥其免疫增强活性，该研究可为苦丁茶冬青的开发和利用提供理论支撑。     

沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性

本实验在体外应用脂多糖（lipopolysaccharides,LPS）诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立炎症模型的基础上,探讨沙葱总黄酮水洗组分的体外抗炎活性。应用CCK-8法检测0、50、100、200、400、800 μg/mL沙葱总黄酮水洗组分对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活力的影响;将细胞分为空白对照组、LPS应激模型组及不同质量浓度沙葱总黄酮水洗组分预处理组,采用Griess法及酶联免疫吸附测定法分别测定各处理组细胞上清液中NO浓度和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素（interleukin,IL）-1β、IL-6、IL-10的质量浓度,反转录实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各处理组细胞中诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、髓样分化蛋白（myeloid differential protein,MyD）88、核因子 κB（nuclear factor κB,NF-κB）mRNA的表达水平。结果显示：与对照组相比,沙葱总黄酮水洗组分在50～800 μg/mL时对小鼠腹腔巨噬细胞无明显细胞毒性作用。与LPS应激模型组相比,沙葱总黄酮水洗组分能够极显著抑制促炎介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.01或P＜0.001）;高度显著提高抗炎细胞因子IL-10质量浓度及其mRNA的表达（P＜0.001）,且呈剂量依赖效应;极显著降低MyD88、NF-κB mRNA的表达水平（P＜0.01或P＜0.001）。由此得出,沙葱总黄酮水洗组分对LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞具有抗炎作用,其抗炎活性可能是通过抑制促炎性介质NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌并提高抗炎性细胞因子IL-10的质量浓度实现的,其作用机制可能与NF-κB信号通路有关。     

菠萝蜜低聚肽的免疫调节作用研究

目的:探究菠萝蜜低聚肽(jackfruit oligopeptides,JOPs)免疫调节功能。方法:采用SPF级雌性BALB/c小鼠为实验对象,进行8项免疫实验测定,系统评价不同干预剂量(0.20、0.40、0.80 g/kg·bw)JOPs对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、自然杀伤细胞(nature killer cell,NK细胞)活性以及T淋巴细胞亚群的影响。结果:与空白对照组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著提高(P<0.05),且JOPs 0.40 g/kg·bw剂量组脾脏指数显著高于乳清蛋白组(P<0.05);与空白对照组及乳清蛋白组相比,JOPs 0.40、0.80 g/kg·bw剂量组ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、足跖增厚度、溶血空斑数、碳廓清吞噬指数a、巨噬细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性显著提高(P<0.05),JOPs 0.80 g/kg·bw剂量组血清溶血素含量、CD3+T细胞数量、CD4+T细胞百分比及CD4+CD25+/CD4+、CD4+/CD8+比值显著提高(P<0.05);各JOPs剂量组对小鼠体重增长、胸腺指数均无显著性影响(P>0.05)。结论:JOPs可提高机体适应性免疫及固有免疫功能,起到免疫增强作用。     

蜂胶乙醇提取物对小鼠主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:探究蜂胶乙醇提取物（ethanol extracts of propolis,EEP）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的小鼠主动脉内皮细胞（mouse aortic endothelial cell,MAEC）炎症因子损伤的保护作用。方法:将细胞分为对照组,LPS模型组,蜂胶低（2.5 μg/mL）、中（5 μg/mL）、高（10 μg/mL）剂量组。采用CCK-8检测MAEC的细胞增殖率,ELISA酶联免疫吸附实验测定MAEC炎症细胞中TNF-α、IL-6的含量,Western Blot法测定MAEC炎症细胞中ICAM-1、VCAM-1、MCP-1的表达水平。结果:与对照组相比,LPS组MAEC的细胞增殖率极其显著降低（P<0.001）,ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、TNF-α以及IL-6的水平极其显著升高（P<0.001）。经不同浓度EEP处理后,MAEC的细胞增殖率显著上升（P<0.05或P<0.01）,TNF-α、IL-6的含量以及ICAM-1、VCAM-1、MCP-1表达水平降低,各蜂胶组与LPS组相比均有显著性差异（P<0.01或P<0.001）。结论:EEP能够抑制LPS诱导的MAEC中炎症因子的表达,对血管内皮细胞具有保护作用。     

大孔树脂分离纯化熟地黄黄酮及其对小鼠运动耐力的影响

采取动态吸附与洗脱单因素实验优化大孔树脂纯化熟地黄黄酮的工艺条件,并将动物小鼠随机平均分为空白对照组(0.1 mL/g 生理盐水)、阳性对照组(0.10 mg/g 西洋参)、低(0.05 mg/g)、中(0.10 mg/g)、高剂量(0.15 mg/g)纯化产物组,连续灌胃30 d后,对各组小鼠进行负重游泳试验,通过对负重游泳时间、肌糖原、肝糖原、血清中尿素氮、乳酸等指标的测定,考察熟地黄黄酮纯化产物对小鼠运动耐力的影响。结果表明,大孔树脂纯化熟地黄黄酮的最佳提取工艺为:pH为5,质量浓度为8 mg/mL的样品溶液60 mL,以2 mL/min流速,上样至H103大孔树脂饱和吸附后,采用150 mL 80%乙醇溶液,以1 mL/min流速洗脱,产物黄酮的含量由2.52%提高至12.18%。与空白对照相比,不同剂量的纯化产物可显著延长小鼠游泳力竭时间(P<0.05,P<0.01),提高体内肝、肌糖原的储备(P<0.05,P<0.01),加快乳酸代谢(P<0.05,P<0.01),并降低血清中尿素氮的生成(P<0.05,P<0.01),表明熟地黄黄酮有助于增强机体的运动耐力。     

Immunomodulatory activities of common vegetables and spices of Umbelliferae and its related coumarins and flavonoids

Carrots, celery, coriander, fennel and parsley of the Umbelliferae family have been used as common vegetables and spices in many different cultures of the world. In this study, we evaluated the immunomodulatory activities of coumarins and flavonoids obtained from the above foods on human peripheral blood mononuclear cells (PBMC). Studies were conducted on lymphocyte transformation, ELISA assay and flow cytometry. Results provided the evidence of a health-modulating effect of these vegetables and spices which possessed a direct role in immunomodulatory function. Some of non-nutritional constituents of these foods such as coumarins and flavonoids also exhibited a similar immunomodulatory activity. At non-cytotoxic concentrations, the above phytoconstituents exhibited three types of immunomodulation including type 1 of PHA, ConA and quercetin (increased lymphocyte activation and IFN-γ secretion); type 2 of isopimpinellin (enhanced lymphocyte activation) and type 3 of rutin, bergapten and xanthotoxin (elevated IFN-γ secretion). The augmentation of lymphocyte proliferation was closely correlated to an increase in the number of lymphocyte cells including CD8⁺ T cells and activated PBMC, whereas elevation of IFN-γ secretion was due to the activated CD8⁺ T cells.     

免疫调节性袋泡茶配方优化及功能性评价

目的：以绿茶、黄芪、党参、枸杞子、大枣为原料研制一款具有增强免疫力的功能性袋泡茶。方法：以感官评价为指标,应用正交试验结合模糊数学综合评定法优化袋泡茶配方,采用苯酚-硫酸法检测样品中总多糖含量。将SPF级昆明小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组(1.40 mg/kg BW的蛋白粉)和袋泡茶低(0.52 g/kg BW)、中(1.04 g/kg BW)、高剂量组(1.56 g/kg BW),除空白对照组外,其余各组小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型,连续给药21 d后测定小鼠体重和脏器指数;流式细胞术检测小鼠脾脏淋巴细胞CD3⁺细胞、CD4⁺细胞、CD8⁺细胞及CD4⁺CD8⁺细胞比例值;ELISA法测定小鼠血清中干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)含量。结果：袋泡茶的最佳配方为黄芪、党参、枸杞子、大枣、绿茶量分别为茶袋内容物总质量的13.00%、26.30%、20.50%、20.50%、19.70%,多糖含量为33.84±0.52 mg/g。药效实验结果...