优选南极磷虾蛋白肽抗氧化活性组分

目的制备南极磷虾抗氧化肽,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽成分。方法采用脱脂、酶解、超滤等手段制备南极磷虾抗氧化肽;以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、抗氧化能力指数3个抗氧化指标和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)活力2个酶活力指标为评价指标,优选出抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分;基于G-25凝胶层析技术对抗氧化活性最好的南极磷虾肽组分进行分离纯化,进一步基于电子顺磁共振(electron paramagnetic resonance,EPR)方法测定洗脱后各峰的DPPH自由基清除率,得到抗氧化活性最好的南极磷虾抗氧化肽组分。结果通过抗氧化指标测定,截留分子量3～10 KDa的肽的DPPH自由基清除率最高,为(30.10±1.10)%,截留分子量3 KDa的南极磷虾肽的ABTS清除能力和抗氧化指数较好,则IC50值为(0.74±0.08) mg/mL、氧化自由基吸收能力(oxygen radical absorbance capacity, ORAC)值为6.39±0.21;通过酶活力指标测定,截留分子量3 KDa的肽的SOD活力和CAT活力最好,分别为(45.7±0.13)U/mg和(17.1±0.19)U/mg蛋白质。对截留分子量3KDa和3～10KDa的南极磷虾肽进行G-25分离纯化后,测定各组分的DPPH自由基清除率,可知截留分子量3～10KDa的F2-2峰清除率最好,为(51.55±1.54)%。结论基于EPR方法优选出分子量为3～10 KDa的南极磷虾肽的F2-2组分的DPPH自由基清除率最高。     

六盘水苦荞麦活性肽的体外抗氧化活性的研究

以苦荞麦蛋白为原料,经过酶解制备出苦荞麦活性肽,并采用HPLC将提取的苦荞麦活性肽进行纯化分离,制备出3个不同的肽段(5.8、7.1、32 min 3个峰值的样品)。采用DPPH、ABTS、羟基自由基3种方法检测苦荞麦3个不同肽段的抗氧化效果。试验表明,分离出来的3个肽段都具有抗氧化能力。对DPPH自由基的清除作用中,3个活性肽浓度均为0.1 mg/m L时,清除率分别为48.42%、62.06%、56.87%;对OH自由基的清除作用中,3个活性肽浓度为0.1 mg/m L时,清除率分别为45.07%、63.29%、48.10%;在对ABTS~+自由基的清除作用中,3个活性肽浓度为0.1 mg/m L时,清除率分别为53.07%、69.32%、46.01%。结论:分离出来的3个肽段都具有较强的抗氧化能力,其中以7.1 min收集的样品2对DPPH自由基、羟基自由基、ABTS~+自由基的抗氧化作用最强,均达到60%以上。     

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。     

发酵芝麻粕中芝麻小肽的分离纯化及其体外抗氧化活性

研究芝麻粕固态发酵过程中产生的小肽的抗氧化活性。从发酵芝麻粕中提取活性小肽,通过SephadexG-15分离纯化,得到3个分子质量不同的小肽,经测定分别是三肽、四肽、六肽。分别测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基的活性、用水杨酸法测定其清除羟自由基(·OH)的活性、用铁离子还原法测定其的总还原力。1mg/mL小肽粗提液、三肽和四肽的DPPH自由基清除率为90%,六肽为80%;0.6mg/mL三肽和四肽的·OH清除率均达到100%,而小肽粗提液和六肽为90%;4mg/mL的小肽粗提液、四肽、六肽和2mg/mL三肽的总还原力相当于0.5mg/mL谷胱甘肽。结果表明:固态发酵芝麻粕中的小肽具有较强的还原力,对DPPH自由基和·OH均具有较强的清除作用,且抗氧化性随着小肽分子质量的降低而增强。     

诺邓火腿抗氧化肽的分离纯化与鉴定

提取诺邓火腿抗氧化肽,经过Sephadex G-25凝胶色谱进行分离纯化,对各组分进行体外抗氧化试验(清除·OH、清除DPPH自由基、螯合Fe~(2+))研究抗氧化活性;将抗氧化活性最强的组分经葡聚糖凝胶G-15(Sephadex G-15)凝胶色谱再次分离纯化,最后对抗氧化活性最强的组分通过基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)对抗氧化肽进行测序鉴定。试验结果:诺邓火腿抗氧化肽经Sephadex G-25凝胶色谱进行分离纯化后得到4个组分(A、B、C和D),其中组分C的抗氧化活性最强,质量浓度为1 mg/mL时,·OH清除率、DPPH自由基清除率和Fe~(2+)螯合率分别达到50.01%、48.32%和34.37%,与其他组分(A、B和D)相比,差异极显著(p0.01);组分C经Sephadex G-15凝胶色谱分离纯化的5个组分(C_1、C_2、C_3、C_4和C_5),其中C_3组分抗氧化活性最强,质量浓度为1 mg/m L时,·OH清除率、DPPH自由基清除率和螯合Fe~(2+)分别达到73.01%、51.21%和65.23%,与其他组分(C_1、C_2、C_4和C_5)相比,差异极显著(p0.01);通过MALDI-TOF-MS对C_3组分抗氧化肽进行测序鉴定,得到抗氧化肽序列。     

中华圆田螺肉抗氧化肽的分离纯化及小鼠体内外活性研究

采用超滤、大孔树脂、凝胶过滤色谱和半制备液相色谱对中华圆田螺肉的酶解液进行分离纯化,以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、铁离子还原能力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC)为指标,制备抗氧化肽,并通过小鼠体内抗氧化酶活性及MDA生成量进行测定试验。结果表明:分子质量1kDa部位的抗氧化活性最强,分离出的混合物抗氧化肽纯度达到90%。体外抗氧化活性显示,该抗氧化肽的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、ORAC均为最高,且ORAC与谷胱甘肽相比效果无显著差异(P0.05),通过小鼠体内抗氧化酶及MDA增加值的测定显示,除GSH-PX外,试验组与谷胱甘肽阳性对照组无显著差异(P0.05),说明试验所获得的抗氧化肽具有和谷胱甘肽相当的抗氧化活性,具有深层的开发利用价值。     

合浦珠母贝肉短肽的分离及其抗氧化活性研究

为制备具有抗氧化能力的合浦珠母贝肉活性肽,本文采用Sephadex G-25分子筛层析法对合浦珠母贝肉酶解产物进行分离,测定分离到的各活性组分分子量及其总抗氧化活性、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。结果表明,合浦珠母贝肉酶解产物经Sephadex G-25分离得到6个主要活性组分,相对分子量分别为1437.5、833.7、421.9、244.7、89.0、17.4u,其中功能短肽F1(1437.5u)、F2(833.7u)、F4(244.7u)的抗氧化效果较强,特别是F2(833.7u)短肽具有最强的总抗氧化能力、DPPH自由基清除能力及羟自由基清除能力。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化活性肽的开发提供理论技术依据。     

酶解虾副产物制备抗氧化肽的研究

以虾副产物为原料,采用α-胰凝乳蛋白酶和嗜热菌蛋白酶进行酶解制备抗氧化肽。酶解液经透析、Sephadex G-15凝胶过滤层析、离子交换色谱和反向高效液相色谱分离,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力和铁离子还原能力(FRAP)为指标进行纯化,得到了高抗氧化活性组分F1。质谱分析结果表明组分F1中有三个肽,对这三个肽进行序列合成并测定其活性,发现十肽GCKVALIVVG的活性最高,其DPPH自由基清除能力按抗坏血酸当量计(AAE)为(16.10±0.02)μmol AAE/g pro,铁离子还原能力为(245.37±0.03)μmol AAE/g pro。本实验研究制备并分离纯化得到高活性的抗氧化肽,为虾副产物的生产应用提供了理论依据。     

鹿茸抗氧化多肽高压脉冲电场辅助酶法提取及纯化工艺优化

以鹿茸渣为研究对象,利用高压脉冲电场辅助菠萝蛋白酶制备鹿茸抗氧化肽,并进行分离纯化。以水解度和DPPH·清除率为评价指标,通过单因素及响应面优化试验对鹿茸渣制备抗氧化活性多肽的酶解工艺进行优化。采用大孔吸附树脂对鹿茸抗氧化肽进行脱盐及纯化,并分析纯化后鹿茸肽的抗氧化活性。结果表明,抗氧化活性肽的最佳制备工艺为:底物浓度15%、酶添加量7.04 U/mg,电场强度17.3kV/cm,脉冲数7,该条件下制备的鹿茸蛋白水解液对DPPH·清除率达(74.76±2.03)%。75%乙醇溶液洗脱组分C3对DPPH·、·OH及O_2~-·的清除率最高,相比粗多肽的抗氧化活性大幅提高,鹿茸抗氧化肽具有较强的抗氧化活性,是制备抗氧化活性肽的良好原料。     

合浦珠母贝抗氧化肽的性质及应用研究

以合浦珠母贝肉抗氧化肽为原料,研究其抗氧化活性、DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除能力、羟自由基清除能力、亚油酸过氧化反应、红细胞溶血实验、保湿活性及添加到化妆品中的抗氧化效果。结果表明：合浦珠母贝肉抗氧化肽具有较强的抗氧化能力,DPPH自由基清除率为77.7%;超氧阴离子清除率为46.3%;羟自由基清除率为33.5%;抗亚油酸过氧化能力和抑制膜脂质过氧化能力均较强;具有良好的吸湿及保湿能力。合浦珠母贝抗氧化肽在营养霜中的最佳添加量为1%,此时DPPH自由基清除率和羟自由基清除率分别为48.34%±2.96%、33.52%±2.34%,具有良好的抗氧化活性和稳定性,为合浦珠母贝抗氧化肽在化妆品种的应用提供了理论基础。