纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）发酵鱿鱼碎肉的工艺优化

为进一步提高鱿鱼碎肉的利用价值,本实验以鱿鱼碎肉作为纳豆芽孢杆菌发酵基质,研究料液比、葡萄糖添加量、发酵pH值、发酵时间和发酵温度对鱿鱼碎肉发酵效果的影响。在以单因素试验确定发酵时间72 h和发酵温度37 ℃的条件后,再对料液比、发酵pH值和加糖量进行三因素三水平的Box-Behnken响应面试验分析,以发酵液的氨基态氮含量为响应值,得到纳豆芽孢杆菌发酵鱿鱼碎肉最佳条件为：料液比1∶1.2（m/V）、发酵pH 8.8和加糖量3.13%。在最优发酵条件下,鱿鱼碎肉发酵液的氨基态氮实际含量达到2.457 mg/mL。氨基酸分析结果显示鱿鱼碎肉发酵液富含具有鲜味和甜味特征的谷氨酸（84.141 mg/g）、天冬氨酸（49.480 mg/g）和甘氨酸（49.425 mg/g）,达到氨基酸总量的39.05%。必需氨基酸总量为149.320 mg/g,占氨基酸总量的31.86%。Sephadex G25凝胶过滤层析显示鱿鱼碎肉纳豆芽孢杆菌发酵液由多肽、小肽及游离氨基酸组成。     

纳豆芽孢杆菌的发酵工艺研究

从纳豆中筛选得到一株纳豆芽孢杆菌，研究了该菌在液体摇瓶发酵中，培养基成分和发酵条件等因素对纳豆激酶产量的影响。在20L发酵罐放大培养时纳豆激酶的产率可以达到2031．5U／mL。     

益生菌纳豆芽孢杆菌的筛选

益生菌克服了非营养性添加剂特别是抗生素带来的负面效应,它是无污染、无残留、抗疾病、促进动物生长的天然添加剂,在饲料工业中得到了广泛的应用.本文以豆豉为原料,分离鉴定出了KT-1,KT-4,KT-9和KT-14四株纳豆芽孢杆菌菌株,同时依据菌株在使用过程中应具备的几个基本条件,从四种菌株中筛选出了对温度、pH、抗生素有较强耐受性;对病原菌有强抑制能力和对有益菌有良好共生能力;同时又具有较好产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶能力的优良益生菌纳豆芽孢杆菌菌株KT-9.     

益生菌纳豆芽孢杆菌的筛选

益生菌克服了非营养性添加剂特别是抗生素带来的负面效应，它是无污染、无残留、抗疾病、促进动物生长的天然添加剂，在饲料工业中得到了广泛的应用。本文以豆豉为原料，分离鉴定出了KT-1，KT-4，KT-9和KT-14四株纳豆芽孢杆菌菌株，同时依据菌株在使用过程中应具备的几个基本条件，从四种菌株中筛选出了对温度、pH、抗生素有较强耐受性；对病原菌有强抑制能力和对有益菌有良好共生能力；同时又具有较好产蛋白酶、淀粉酶和纤维素酶能力的优良益生菌纳豆芽孢杆菌菌株KT-9。     

芽孢杆菌固态发酵对麦麸改性和呕吐毒素的影响

文章旨在从环境中分离一株高效降解呕吐毒素DON的微生物,研究该菌株固态发酵麦麸后营养品质和DON含量的影响。该研究利用筛选培养基从玉米浆中获得一株芽孢杆菌YH103,形态鉴定结合分子生物学鉴定YH103为贝莱斯芽孢杆菌。将该菌株制备成菌粉,每克菌粉含有活菌108个。按3%菌粉添加量加入到麦麸中,料液比2:1,37℃下发酵7 d,DON含量显著下降(P﹤0.05),总酚含量、抗氧化性、可溶性戊聚含量显著增加(P﹤0.05),其变化趋势为先升高后降低,总蛋白质含量总体差异变化不大,持水性升高,持油性在168 h显著下降(P﹤0.05)。结论：贝莱斯芽孢杆菌固态发酵麦麸在48～72 h麦麸DON含量最低和营养成分最高,可以提高麦麸的质量安全,同时增加了麦麸的营养品质,并改变麦麸的加工性能,为麦麸深加工研发提供参考。     

传统大豆发酵食品中纳豆芽孢杆菌的分离及纳豆发酵

以我国传统大豆发酵食品和稻草样品为来源,根据蛋白酶和纳豆激酶活性、产聚谷氨酸(poly-L-glutamic acid,γ-PGA)性能和生物素依赖特性进行筛选,分离获得了8株具有纳豆芽孢杆菌特性的枯草芽孢杆菌菌株。利用16S～23S rRNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列对分离菌株进行系统发育分析,结果显示其与已报道的纳豆芽孢杆菌菌株以较高的相似性(93%～97%)聚类一簇,独立于同种内的其他枯草芽孢杆菌。其中TC100和TC103菌株制作的纳豆粗酶液中的纳豆激酶活性最高,分别为550 U/mL和519 U/mL。HN48和TC100菌株发酵纳豆的感官效果最好,评价分数均为19分。综上所述,本研究根据纳豆芽孢杆菌特有的性状,有效分离获得了具有纳豆芽孢杆菌特性的8株菌株,通过菌株形态和ITS基因序列的系统发育分析确定分离菌株均属纳豆芽孢杆菌,8株分离菌株均能产纳豆激酶,发酵生产纳豆的感官效果良好,有望作为纳豆生产的工业菌株。     

纳豆芽孢杆菌的功能及其应用

本文系统地阐述了纳豆芽孢杆菌的各种生理功能 ,并介绍了几种应用实例。     

一株降解呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的筛选与鉴定

目的:分离筛选能够降解呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)的芽孢杆菌,以用于该毒素的生物降解。方法:采集霉变秸秆、土壤和粪便样品,先将样品加热80℃后,取上清液接种到以DON为唯一碳源的分离培养基富集DON降解菌。以LB培养基分离纯化富集菌,然后对分离到的菌株进行DON毒素降解能力检测。对降解能力最强的菌株进行形态学观察、生理生化实验和16S r DNA序列鉴定。结果:从16株分离菌中筛选得到一株对DON降解能力最强的菌株B.JG05,降解率最高可达80.61%,且对含DON饲料的降解率为82.68%。该菌株呈短杆状,能形成芽孢;生理生化特性符合蜡样芽孢杆菌的基本特征;16S r DNA序列进化树分析表明该菌株与蜡样芽孢杆菌的亲缘关系最近。结论:筛选获得了一株高效降解DON的蜡样芽孢杆菌B.JG05,为饲料和食品中DON毒素的生物降解提供了可能。     

酶联免疫法检测芽孢杆菌对小麦中呕吐毒素降解效果的研究

以小麦为样品,利用酶联免疫法对芽孢杆菌降解酶降解小麦中呕吐毒素进行分析。试验结果表明,降解酶浓度、反应温度和反应时间是影响降解酶降解DON的关键因素。在降解酶浓度50μg/mL、反应温度30℃、反应时间18 h、pH 8.5的条件下,降解率为88.1%。     

基于qPCR快速检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的研究

为了建立基于QPCR的快速方法检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌,首先采用煮沸法提取蜡样芽孢杆菌基因组DNA,并利用普通PCR方法验证引物特异性,然后通过在米饭样品中添加目标菌,模拟受污染的实际样本,用QPCR技术定量检测米饭中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌。结果表明该方法具有快速、特异性强、灵敏度高和稳定性好的优点,能对产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌定量。不经过增菌培养,实际样品的检测限为9.8×101CFU/g;经过2 h的增菌培养,检测限能达到100CFU/g;并且米饭中添加其他杂菌后,不影响对蜡样芽孢杆菌的检测。建立的QPCR方法适用于米饭等相关淀粉类食品中产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌的检测,从而为监测该菌所致食品污染以及早期相关食物中毒提供快速定量检测方法。     

Bacillus natto TK-1产脂肽发酵条件的优化

对BacillusnattoTK-1产脂肽的发酵条件进行了优化。优化后发酵条件为:60mL培养基装于500mL三角瓶中,接种量3%,温度37℃,床转速110r/min。优化后,发酵液的相对溶血率提高了70%。     

紫外光辐照对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的去除作用

目的：研究紫外光辐照对脱氧雪腐镰刀菌烯醇（deoxynivalenol,DON）和T-2毒素的去除作用。方法：测定不同辐照时间、不同辐照距离、不同pH值条件下紫外光辐照对DON和T-2毒素影响,采用高效液相色谱-质谱联用技术测定毒素及其衍生物,外标法定量。结果：经紫外光辐照后,溶液中DON、T-2毒素的质量浓度均随着辐照时间的延长而不断减小,随着辐照距离和pH值的减小而不断减小。pH 7的1.0 μg/mL DON、T-2毒素溶液,在紫外灯功率20 W、辐照距离150 mm条件下辐照60 min后,DON、T-2毒素去除率分别为（84.90±2.52）%、（74.60±2.74）%。紫外光辐照后,毒素溶液中不含有已知的毒素衍生物,可能被转化成新的未知产物。结论：在非碱性条件下,紫外光辐照对DON、T-2毒素具有明显的去除作用。     

不同加工方法对小麦粉中呕吐毒素的影响

通过比较使用不同加工方法对小麦籽粒不同部位呕吐毒素（DON）含量的影响,得出：1、皮粉、芯粉中DON的含量低于全麦粉中DON的含量,DON主要分布于小麦的表皮附近。2、小麦制粉前进行筛杂或清洗对降低DON的效果不同。筛杂对降低皮粉、芯粉中DON的效果更好,清洗对降低粗麸、细麸中的DON效果更好。3、使用不同加工方法产生的小麦粉或麦麸中DON含量几乎相同。4、当全麦粉的DON含量低于1.56 mg/kg时,通过筛杂、清洗、磨粉后芯粉的DON含量可能会低于1 mg/kg的规定值。     

纳豆菌抗菌蛋白的稳定性

本对纳豆菌抗菌蛋白的稳定性进行了研究，考察了温度、pH值、NaCl、金属离子、EDTA和一些食品添加剂对其抗菌活性的影响。并对抗菌蛋白在保存中的活性变化进行了测试。     

纳豆菌生产微量生理活性物质的研究

高桥和宫城纳豆菌接种于大豆豆渣或大豆煮汁粉培地都能增殖。固体培养时,只有宫城菌在20%豆渣培地能生产出2,6-吡啶二羧酸。液体培养时,0.5%大豆煮汁粉培地比2%大豆煮汁粉培地生产了多量的2,6-吡啶二羧酸;同样的液体培养条件,高桥菌比宫城菌能生产出更多的维生素K2(MK-7)。     

Growth characteristics of Bacillus subtilis (natto) in milk

In this paper, Bacillus subtilis (natto) was incubated to develop a possible functional ingredient in ice cream. A lab‐scale culture revealed that incubation in the sterilised milk without dilution and concentration at 37°C for 28 h could obtain ideal growth characteristics of Bacillus subtilis (natto), especially with continuous aeration. Following freezing operation of the cultured milk, survival content of Bacillus subtilis (natto) was at 49–92%, while nattokinase activity was conserved at 62–98% comparing with the initial contents, which indicating a potential for application of natto functional ingredient in frozen milk products.     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是单端孢霉烯族化合物,是镰刀菌产生的次级代谢产物。DON存在于农作物以及食品和饲料中,世界上许多地区都有DON毒素的检出报道。由于其具有较强毒性,不仅对农业经济造成严重的损失,而且严重威胁人类和动物的健康,引起一系列不良反应例如呕吐、腹泻、胃肠道出血等。本文从DON的毒性作用、检出量、影响DON含量的因素、降解方法四方面进行综述。     

纳豆菌微生态制剂的稳定性研究

分别考察温度、pH值、胆盐、消化酶对纳豆菌微生态制剂的影响,以及纳豆菌制剂在保藏过程中的稳定性。结果表明,纳豆菌制剂能耐酸碱、胆盐、胃蛋白酶和胰蛋白酶,能保证足够数量的活菌在肠道定植并发挥作用。而且,纳豆菌制剂对温度影响不敏感,80℃处理60min后,活菌数几乎无变化;在室温下保藏具有很好的稳定性,4℃冷藏具有较好的稳定性,但-20℃冷冻保藏效果较差。     

Characterization of fermented black soybean natto inoculated with Bacillus natto during fermentation

BACKGROUND: To make nutrients more accessible and further increase biological activity, cooked black soybeans were inoculatedwith Bacillus natto and fermented at 37 °C for 48 h. The changes in physiochemical properties of fermented black soybean natto were investigated. RESULTS: The inoculation procedure significantly increased moisture, viscosity, color, polyphenol compounds and anthocyanin, and significantly decreased hardness after 48 h fermentation. Fibrinolytic and caseinolytic protease, β‐glucosidase activities, TCA‐soluble nitrogen, and ammonia nitrogen contents in the inoculated samples significantly increased as fermentation time increased. Genistin and daidzin concentrations gradually decreased with increased fermentation time. However, genistein and daidzein increased with fermentation time, which reached 316.8 and 305.2 µg g^?1 during 48 h fermentation, respectively. DPPH radical scavenging activities of the fermented black soybeans increased linearly with fermentation time and concentration. Compared with the soaked black soybeans and cooked black soybeans, the fermented black soybeans with B. natto resulted in higher scavenging activity towards DPPH radicals, which correlated well with the content of total phenols (r = 0.9254, P < 0.05) and aglycone isoflavone (r = 0.9861, P < 0.05). CONCLUSION: Black soybean natto fermented by B. natto has the potential to become a functional food because of its high antioxidant activity. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

纳豆菌产抗菌物质培养条件的研究

以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为指示菌，分别从培养基成分和发酵条件确定了纳豆菌液体发酵产生的抗菌物质抑制金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最佳备件。并对抗菌物质的部分理化性质热稳定性、酸碱稳定性、金属离子的影响等进行了研究。结果表明，抗菌物质具有良好的热稳定性、酸碱稳定性，添加金属离子对抑茸效果有促进作用的有Ca^2＋，Al^3＋，Mg^2＋，Fe^2＋，而Cu^2＋，Mn^2＋，Zn^2＋则抑制抗菌物质的产生。