微生物添加剂中枯草芽孢杆菌的测量不确定度评估体系建立

目的:研究旨在实验室环境条件下建立微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌活性成分检测方法的评价体系并使用该方法进行测定。方法:本实验依据现行通用标准GB/T 26428—2010、JJF1059.1—2012和RB/T151—2016,进行了微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌中活性成分的菌落总数不确定度考察。结果:创建了微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌活性成分的菌落总数不确定度研究方法,扩展不确定度U=4.59%(包含因子k=2),样品的范围在6.2×10⁹～8.5×10⁹cfu/g之间,符合误差允许范围。结论:建立了一种微生物饲料添加剂中枯草芽孢杆菌活性成分的菌落总数不确定度检测方法,通过不确定分量分析可以发现,实验室在进行枯草芽孢杆菌活菌计数试验过程中,主要影响因素顺序为:稀释>溶解>重复性>称量>移取。该方法适合于实验室内操作,可在不同实验室内进行推广应用。     

益生菌类保健食品中双歧杆菌计数不确定度的评定

依据《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》(GB 4789.35-2016),益生菌类保健食品中的双歧杆菌计数的样品稀释和加样过程中,既可以使用1 mL无菌吸量管也可以使用微量移液器。本研究的目是比较两种量具对双歧杆菌计数的测量不确定度产生的影响。根据中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布的《测量不确定度评定与表示》(JJF 1059.1-2012),对益生菌类保健食品中双歧杆菌计数的测量不确定度进行评定。不确定度评定主要从影响较大的样品制备、样品稀释、加样和重复检测等几方面进行,样品的双歧杆菌计数过程中样品稀释和加样时分别使用1 mL无菌吸量管和微量移液器。当包含率在95%时,使用吸量管进行稀释和加样时,样品中双歧杆菌计数检测结果的扩展不确定度U为0.28,样品双歧杆菌数的对数值区间为9.35～9.91,样品中双歧杆菌数的置信区间为(2.2～8.1)×10~9CFU/g。以移液器作为稀释和加样量具,扩展不确定度U为0.36,样品中双歧杆菌数的对数值区间为9.43～10.15,样品双歧杆菌数的置信区间为(2.7～14)×10~9CFU/g。益生菌类保健食品中双歧杆菌的数量较大,稀释倍数大,因此样品稀释引入的不确定度均较大,约占90%。样品稀释和加样过程中使用吸量管与使用移液器相比,使用吸量管带入的不确定度均略小,而使用吸量管对A类不确定度的影响比使用移液器略大。使用吸量管双歧杆菌计数检测结果的扩展不确定度略低。另外,使用两种量具对同一益生菌类保健食品中双歧杆菌进行计数,结果差异显著。     

能力验证乳粉中乳酸菌计数不确定度的评定

目的对能力验证乳粉样品中乳酸菌计数进行不确定度评定。方法依据能力验证作业指导书和GB4789.35-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验乳酸菌检验》进行测定,再根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》对不确定度来源进行分析和评定。结果乳酸菌计数过程中,分散性对结果不确定贡献较大,因此测定结果的不确定度采用检测结果的分散性进行评定。6份样品乳酸菌计数结果扩展不确定度为分别为0.02012、0.04337、0.01992、0.03296、0.02182和0.031379(P=95%,k=2.09)。结论此方法适用于类似检测条件下乳酸菌计数不确定度的评定。     

地衣芽孢杆菌对有害微生物的拮抗作用

地衣芽孢杆菌与双歧杆菌、乳酸菌、病原菌进行混合培养,发现其对病原微生物有抑菌作用,而对双歧杆菌、乳酸菌有促菌或共生作用。     

食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的评定

依据国家标准和测量不确定度的评定方法以及国际通行的普松理论(poisson theory),评定食品中大肠菌群检测结果的不确定度.通过分析影响食品中大肠菌群平板计数结果的不确定度来源,建立一种简单适用的大肠菌群平板计数不确定度评定方法.结果表明,影响食品中大肠菌群平板计数结果不确定度的主要因素为取样量的不确定度、稀释倍数的不确定度、加样体积的不确定度、平板上大肠菌群数量的不确定度和煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管产气比例产生的不确定度,其中后两者产生的不确定度所占分量最大.     

洁净室中沉降菌测量不确定度评定

目的 计算洁净室中沉降菌测量的不确定度。方法 建立数学模型, 评估和量化沉降菌测定过程中可能产生影响的各个不确定度分量, 分别计算A、B类各不确定度分量值、合成标准不确定度、扩展不确定度。结果 沉降菌的菌落数为4个/皿时, 其合成标准不确定度为0.861个/皿, 取包含因子k=2(置信概率为95%), 沉降菌的扩展不确定度为U=uc×k =0.861×2≈2个/皿; 洁净区沉降菌结果为 (4±2)个/皿, k=2。结论 对于洁净室沉降菌的不确定度评定, 其中A类不确定度这一分量占比最大, B类不确定度各个分量值均很小, 所以进行沉降菌的不确定度评定时主要是以A类不确定度为主, B类不确定度所带来的影响可以忽略不计。     

羽绒羽毛微生物检测嗜温性需氧菌计数检验中不确定度的评定

微生物不确定的评定主要是针对定量测试,本文法按照纺织行业方法标准<水洗羽毛羽绒试验方法>FZ/T 80001-2002中嗜温性需氧菌计数检测方法对本实验室样品进行嗜温性需氧菌计数检测后,采用不确定度评定中的A类评定方进行了该检测方法的不确定度评定.     

食品中金黄色葡萄球菌平板计数不确定度评定

为更好地评估食品中金黄色葡萄球菌指标。方法 按GB 4789.10—2010方法检验食品中金黄色葡萄球菌,按JJG 196—2006对菌落平板计数结果进行不确定度评定。结果 测量结果的扩展不确定度为U=0.072×lgT(T-食品中金黄色葡萄球菌菌落数),k=2。结论 测量不确定度评定可更为准确地评价食品质量,确保出厂食品的安全。     

用Biolog微生物自动分析系统鉴定大曲中地衣芽孢杆菌的研究

从大曲中分离到一株细菌,初步鉴定为地衣芽孢杆菌,利用Biolog微生物自动分析系统对它做了进一步的鉴定,确定其为地衣芽孢杆菌.     

地衣芽孢杆菌在营养肉汤中生长模型的建立

考察了温度、Na Cl质量分数及p H值对地衣芽孢杆菌在营养肉汤中生长特性的影响,建立了15~45℃下地衣芽孢杆菌的生长模型。结果表明:地衣芽孢杆菌的最适的生长温度范围为30~37℃,Na Cl质量分数范围为0~3%,p H值范围为5.0~8.0。在15、20、25℃时其生长曲线用MMF模型拟合较好,在30、37℃用Richards模型拟合较好,其相关系数较高,均大于0.998。相反,在45℃其生长曲线只能用Logistic方程拟合,且相关系数较低,仅为0.907。     

An improved direct viable count for the enumeration of bacteria in milk

The direct viable count (DVC), a microscopic method for the enumeration of viable bacteria, was modified by replacing nalidixic acid with ciprofloxacin. This modification made it possible to apply this method to a variety of Gram-negative and Gram-positive bacteria which was not previously possible. Of the four antibiotics tested (nalidixic acid, novobiocin, ciprofloxacin and mitomycin C), ciproofloxacin and mitomycin C were the only ones effective for use in the DVC with all of the bacteria tested. In addition, ciprofloxacin could be used at a single concenration (1 μg/ml) while adjustments were necessary with the other antibiotics when examining bacteria from different genera and, in some instances, from different species. The use of ciprofloxacin in the DVC resulted in viable cells that had elongated by 5–11 times their original length. We conclude that the modified DVC will be useful in growth and survival studies of bacterial pathogens and spoilage organisms in milk and other foods     

固定化地衣芽孢杆菌产弹性蛋白酶的研究

为提高弹性蛋白酶的发酵产能,构建地衣芽孢杆菌连续发酵产弹性蛋白酶的生产工艺,本研究采用单因素试验及响应面分析法对地衣芽孢杆菌凝胶包埋固定化的工艺进行探讨,并对固定化细胞的发酵产酶性能进行分析。结果表明,地衣芽孢杆菌的适宜固定化体系是聚乙烯醇（polyving akohol,PVA）、海藻酸钠（sodium alginate,SA）和CaCl2,质量分数分别为8.22%、2.27%和2.42%,固定化交联剂硼酸的质量分数为4%;固定化地衣芽孢杆菌发酵产弹性蛋白酶的活力可达到386 U/mL,是相同接种量的游离细胞发酵酶活力的87%;固定化的地衣芽孢杆菌凝胶球具有很好的稳定性,在摇瓶发酵的条件下可连续使用10 批次以上。以上结果表明,复合凝胶包埋制备的固定化地衣芽孢杆菌细胞可用于连续发酵产弹性蛋白酶的生产工艺。     

利用地衣芽孢杆菌发酵生产3-羟基-2-丁酮初步研究

初步研究了摇瓶条件下地衣芽孢杆菌发酵生产3-羟基-2-丁酮的工艺条件。分析了摇瓶发酵中菌体生长、产物合成和pH的变化情况;考察了发酵温度、装液量、种龄、接种量等条件对发酵的影响;研究了地衣芽孢杆菌利用不同碳源发酵生产3-羟基-2-丁酮的情况,选取了最适碳源,在此基础上进行了补糖试验;最后采用正交试验方法对培养基进行了优化。在优化的发酵条件下,采用分批补糖的工艺,摇瓶发酵产量可稳定在20 g/L以上,为3-羟基-2-丁酮的工业化生产提供了一定的基础。     

地衣芽孢杆菌固体发酵培养基优化研究

研究了麦麸含量、加水量、碳源、氮源等对地衣芽孢杆菌固体发酵产碱性蛋白酶的影响。采用正交试验法优化发酵培养基配方,确定最佳发酵条件为:麦麸20 g,大豆分离蛋白30%,加水量160%,麦芽糖5%,MgSO40.6%,(NH4)2SO40.5%,K2HPO40.5%,吐温-80 0.05%,发酵时间72 h,在此发酵条件下,酶活力最高达到16 08 U/mL。     

地衣芽孢杆菌感受态细胞的诱导形成及其高效电转化方法

通过体外处理诱导地衣芽孢杆菌产生感受态性能 ,同时调整参数 ,建立了感受态细胞对质粒 pAPR的高效电转化方法 .当质粒DNA为 1.5 μg/mL、转化时电压为175 0V时 ,可得到 2 6 1个转化子 ,经鉴定均为阳性克隆子 .此为以芽孢杆菌为宿主进行高效电转化及为建立适合工业应用的分泌型表达载体提供参考 .     

Oxygen Requirements of Bacillus licheniformis and Bacillus subtilis in Tomato Juice; Ability to Grow in Aseptic Packages

Tomato juice was inoculated with spores of Bacillus subtilis and Bacillus licheniformis, placed in jars sealed with four polymers: oriented polypropylene (OPP), low density polypropylene with 4.5% ethyl vinyl acetate (LDPE + EVA), polyvinylidene chloride (PVDC), and polyethylene teraphthalate (PET); used in aseptic packages, serving as lids, heated in a boiling water bath for 10 min, and incubated at 35°C for up to 100 days. B. subtilis and-B. licheniformis grew at the surface of the food when OPP and LDPE + EVA were used, which caused the pH to rise above 4.6 in 60 days and above 5.0 within 100 days. The oxygen partial pressures were 0.20 and 0.18 atm per day, and the oxygen permeation ratios were 5.64 and 0.76 cc/day for LDPE + EVA and OPP, respectively.     

乳酸菌活菌数对酸乳理化特性的影响

研究了酸乳发酵过程中乳酸菌数量变化的规律,并进一步研究酸乳发酵过程中乳酸菌数量变化与pH值、黏度、滴定酸度和氨基酸态氮含量等理化特性的相互影响。结果表明,在酸乳发酵过程中,酸乳中乳酸菌活菌数与酸乳的理化特性有交互影响;酸乳的pH值、黏度、氨基酸态含量等理化特性的变化趋势与乳酸菌活菌数的变化趋势是一致的。     

菌落总数测定结果不确定度的评定

目的对质控样中菌落总数测定结果进行不确定度评定。方法菌落总数测定依据GB4789.2-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定》进行测定和结果判断,再根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》的规定,对测定过程中引入的不确定度分量进行评定,然后采用合成的方法来计算和评定菌落总数的不确定度。结果扩展不确定度为0.08,结果对数值取值区间为(3.85±0.08),取反对数取值区间则为(5900, 8500)。结论本方法可有效评定菌落总数的不确定度。