大头菜发酵过程中生香酵母的分离、筛选及鉴定

为筛选酱油渣发酵适用乳酸菌,利用MRS培养基从酱油渣中分离、纯化得到4株乳酸菌HT4、HT102、HT160、HT197,通过形态学观察、生理生化特征试验及16S r RNA基因序列分析对菌株进行鉴定,并研究其生长特性。生理生化试验及16S rRNA基因序列分析结果鉴定菌株HT4为乳酸乳球菌霍氏亚种(Lactococcuslactis subsp.hordniae),菌株HT102为乳酸乳球菌乳亚种(Lactococcus lactis subsp. lactis),菌株HT160为副干酪乳杆菌坚韧亚种(Lactobacillus paracasei subsp. tolerans),菌株HT197为副干酪乳杆菌副干酪亚种(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)。乳酸菌生长特性的研究表明,37℃条件下培养,菌株HT4、HT102、HT160、HT197的生长趋势相似,接种3 h后乳酸菌生长进入对数生长期,接种12 h后进入稳定期,在30 h左右达到最大OD600 nm值,分别为1.524、1.600、1.556、1.576,试验表明在37℃培养条件下菌株的生长强度顺序为:HT102HT197HT160HT4。综上所述,从酱油渣中分离得到4株乳酸菌,为其益生特性研究奠定基础,为酱油渣的再次发酵提供乳酸菌资源。     

酒曲中生香酵母的分离及生理生化鉴定

从酒曲中筛选出11株生香酵母,并对其形态及生理生化特性进行研究,确定其种属。筛出菌后进行发酵测发酵液中总酯含量,选出高产优质菌株。在11株产酯酵母中,产酯最高的菌株是X7,其发酵液总酯含量达到1.78 g/L。     

酱香型白酒酒糟中生香酵母的筛选及鉴定

从酱香型白酒酒糟中通过液态发酵初筛获得7株高产乙酸乙酯的菌株,将其进行固态发酵,其发酵产物经气相色谱（GC）检测共得到64种挥发性化合物,通过主成分分析表明,菌株Y3、Y19和Y22的发酵产物相似。其中,菌株Y3和Y19的乙酸乙酯产量显著高于其他菌株（P＜0.05）,其次是菌株Y22,但与对照组相比,菌株Y19的吡嗪产量显著减少（P＜0.05）,菌株Y22的高级醇产量显著增加（P＜0.05）,均不利于酱香型白酒的生香呈味。故最终选用菌株Y3为生香酵母,通过菌种鉴定,确定该菌株为毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）。     

酒曲中生香酵母的分离鉴定与产酯工艺优化

用添加30U／mL硫酸链霉素抑制霉菌方法从酒曲中富集和筛选出具有典型酵母菌落特征的菌株,通过鉴定实验确定为生香酵母。选取其中10株进行发酵,比较它们发酵酒的酒精度、总酸和总酯,筛选出酒精度和总酯含量最高的菌株是Y2-7。通过发酵条件优化和小试,得到蒸馏酒（60％,v／v）中总酯含量迭2．1g／L,酒液酯香明显。     

梅兰春酒醅中生香酵母的分离鉴定及其发酵面包香气成分分析

从梅兰春酒醅中分离筛选生香酵母菌,经26S r DNA D1/D2区域序列分析法鉴定其种属,通过固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(solid phase microextraction-gas chromatography-mass spectrometry,SPME-GC-MS)分析其发酵液的挥发性香气成分,应用生香酵母发酵面团制作面包,进行感官评定并利用SPME-GC-MS分析面包香气成分。结果表明:分离筛选得到2株产独特香气的酵母菌,两者的发酵液均具有强烈的酒香和酯香风味,分子鉴定结果为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)。酯类和醇类是该生香酵母菌发酵液中主体香气成分,乙酸乙酯、乙酸异戊酯、异戊醇和乙醇是其中相对含量较高的四种风味物质,尤其乙酸乙酯相对含量高达50%以上。利用生香酵母发酵面团制作的面包,感官评定得分明显高于普通酵母面包,其面包芯具有淡淡的怡人清香和果香味。与普通酵母面包相比,生香酵母面包中的醇类、酯类等各类风味物质的含量都得到了大幅度提升,尤其是异戊醇、乙酸乙酯、乙酸异戊酯、苯乙醇、乙酸苯乙酯等增加幅度尤为明显。     

自然发酵甜面酱中生香酵母的鉴定及发酵代谢产物的研究

从自然发酵甜面酱中筛选出6株生香酵母,利用18SrRNA基因序列扩增及同源性分析,确定菌株TMJJ1,TMJJ2,TMJJ3归属为Debaryomyces hansenii(汉逊德巴利酵母),TMJJ4,TMJJ5为Saccharomyces cerevisiae(酿酒酵母),TMJJ6为Rhodotorula mucilaginosa(胶红酵母);利用顶空固相微萃取-气质联用技术对生香酵母的发酵代谢产物进行了检测,结果表明:相同条件下,6株生香酵母产生的芳香物质种类和含量存在较大差异,为生香酵母在甜面酱生产中的应用奠定基础。     

酿酒糟醅中生香酵母的筛选及培养条件

为了提高浓香型白酒品质,作者以酿酒糟醅为原料,采用平板涂布法分离纯化出酵母菌,再通过液态发酵筛选出高产酯的菌株,并对其进行生理生化鉴定及26S rDNA同源性分析,最后采用响应面法对菌株的培养条件进行优化。结果表明：作者从酿酒糟醅中分离出1株产香浓郁的菌株,编号为S5。经鉴定S5菌株为异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）。优化后的最佳培养条件为初始pH 4.95,发酵时间3 d,初始糖（葡萄糖）质量浓度6 g/dL,在此条件下发酵液中总酯质量浓度为7.67 g/L,比优化前提高了64.2%.由此可见,S5菌株对浓香型白酒品质的提高具有潜在的应用价值。     

天然酱醪中生香酵母的分离鉴定及香气特征分析

从风味良好的天然酱醪中分离、筛选获得一株优良的生香酵母HT.Y309,在香气、生长速度、耐盐性、产乙醇能力方面具有明显优势。通过菌落和细胞形态分析、生理生化特征分析和18SrRNA序列分析,该菌株被鉴定为鲁氏酵母。采用同步蒸馏萃取法与气相色谱-质谱联用相结合的方法,对比添加和未添加HT.Y309发酵的酱油挥发性风味成分,研究HT.Y309香气特征及对酱油风味的贡献。结果表明,添加鲁氏酵母HT.Y309发酵所得的酱油的主要挥发性风味特征成分是正丙醇、正丁醇、异丁醇、异戊醇和β-苯乙醇等多元醇,糠醛、苯乙醛等醛类物质以及4-羟基-2-乙基-5-甲基-3-呋喃酮。     

耐高渗酵母的分离、筛选及鉴定

建立了从含糖量高的花粉、未经加工的蜂蜜、水果、发酵物等样品中分离耐高渗酵母的简单方法，共分离得到1株极耐高渗酵母，并通过生理生化实验及形态学观察对其进行了鉴定，确定其为酿酒酵母属的酿酒酵母。     

柑橘果皮中生香酵母的筛选及挥发性香气成分分析

目的从微生物众多的柑橘中筛选得到生香酵母。方法从四川地区的柑橘果皮中筛选出4株产生浓郁香味的生香酵母,通过形态学、生理生化特征和ITS序列特征进行分析鉴定,并利用顶空固相微萃取-气质联用技术检测其发酵产生的挥发性香气,依据风味贡献理论比较不同菌株发酵的主体香气成分。结果 4株菌株(Y3、Y7、Y11、Y13)分别鉴定为桔假丝酵母(Candida quercitrusa)、蜜二糖假丝酵母(Candida melibiosica)、毕赤酵母(Pichia sp.1 TMS-2011)、异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus),Y3的主体香味成分为2-壬醇、苯乙醇,Y7、Y11、Y13最主要的香气成分均为苯乙醇,且苯乙醇相对含量均在30%以上。结论分离得到的生香酵母具有发酵增香功能,在柑橘果醋工业化生产中潜力巨大。     

陶融型大曲中产香微生物的筛选及鉴定

本研究从陶融型大曲微生物资源中筛选产香功能性微生物,研究其与大曲香味物质之间的联系,并对产香功能菌株进行分子生物学鉴定。采用传统微生物分离法从不同发酵阶段的陶融型大曲中分离纯化获得细菌37株,酵母22株。以小麦固体培养基为底物对各菌株进行单菌产香实验,经闻香评定,菌株YSY04发酵后能产生浓郁的香味。采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对这该菌株的发酵产物进行挥发性成分检测,发现该菌株的发酵产物中香味物质种类丰富,其中吡嗪类物质、苯乙醇、愈创木酚、2,3-丁二醇和萜烯类等香味物质为陶融型大曲的重要香味成分。因此,可初步认定菌株YSY04为陶融型大曲的产香功能菌。经形态学观察和分子生物学鉴定,菌株YSY04为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomycesanomalus)。     

浓香型大曲中产香微生物的筛选及鉴定

本研究从传统浓香型大曲微生物资源中筛选产香功能性微生物,研究其与大曲香味物质之间的联系,并对产香功能菌株进行分子生物学鉴定。采用传统微生物分离法从不同发酵阶段的浓香型大曲中分离纯化获得细菌22株,酵母6株。以小麦固体培养基为底物对各细菌、酵母菌株进行单菌产香实验,经闻香评价,菌株X19和J3发酵后能产生浓郁的香味。采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术对这两株菌的发酵产物进行挥发性成分检测,发现菌株X19和J3的发酵产物中香味物质种类丰富,其中吡嗪类物质、苯乙醇、愈创木酚等香味物质为浓香型大曲的重要香味成分。因此,可初步认定菌株X19和J3为浓香型大曲的产香功能菌。经形态学观察和分子生物学鉴定,菌株X19为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),菌株J3为异常威克汉姆酵母(Wickerhamomyces anomalus)。     

传统麸醋醋醅中一株产香酵母的筛选鉴定及生长特性研究

实验从四川麸醋醋醅中初筛分离得到12株酵母,以其发酵香味、产酒精量和产酯量为标准,筛选得到一株编号为6的菌株,在适宜条件下,其产酒精能力达到0.8825 mL/dL,产酯量达到3.66 g/L.经菌落特征观察和镜检及Biolog微生物自动鉴定系统对这一株菌种进行鉴定,编号为6的菌种被鉴定为粟酒裂殖酵母.同时对其生长特性进行研究.     

佛手果醋乙醇发酵优良酵母菌的选育及鉴定

佛手汁酿制果醋的过程需要优先利用酵母菌将糖发酵为酒精,但佛手汁中的柠檬苦素会抑制酵母生长。为避免其对酵母酒精发酵能力的影响,作者利用佛手为原料,结合醋酸发酵的选育方式,筛选适合佛手果醋乙醇发酵的酵母菌株。从自然发酵的佛手汁中,分离得到85株酵母菌株。经过杜氏小管初筛,以产乙醇能力、起酵速度、有机酸生产能力为指标进行复筛和醋酸发酵试验,最终得到优良菌株FS-ZJQ。经18S r DNA序列鉴定该酵母菌株为酿酒酵母。其在糖度18°Bx的佛手汁中,25℃发酵7 d可产乙醇8.49%,发酵液中萜烯类化合物、酯类化合物质量分数高,分别占挥发性风味成分的58.83%、16.44%;经醋酸发酵后,非挥发酸质量浓度可达5.06mg/mL。菌株FS-ZJQ对糖度、pH、乙醇的耐受性较好。     

产香白地霉菌株筛选鉴定及其代谢产物分析

微生物代谢是白酒风味的重要来源之一,筛选优质产香微生物对于白酒质量的提高具有重要的意义.本研究以牛栏山酒厂菌种库为筛选源,从中挑选出优质生香微生物9株,并通过感官品评,进一步筛选出1株适合牛栏山白酒特点的产香菌株.采用传统微生物学和现代分子生物学的方法对其进行了鉴定,初步确定为白地霉菌株.同时,对其产香特性进行了研究,发现其主要代谢产物有乙酸、乙酸乙酯、乙醛、乙缩醛、苯乙醇和多种高级醇,与牛栏山及清香型白酒的风格特点具有密切联系.     

生香酵母Yeast-1液态发酵培养条件优化

以酵母菌体个数为主要参考指标,研究不同碳源、氮源、pH值、温度对培养酵母菌体数的影响.在单因素实验基础上采用响应面Box-Behnken试验设计,建立4因素的二次多项式回归方程模型.优化试验结果显示,酵母数最佳的参数是葡萄糖浓度10.52％、蛋白胨浓度5.06％、KH2PO4 1‰、MgSO4· 7H2O 1‰、pH 6.28、温度28.76℃,在此条件下菌体数量达7.71×108个.经验证试验,实验值与预测值基本相符.     

民间传统酒曲主要微生物的分离及鉴定

酿造酒的独特风味、质量与酒曲中的微生物密切相关.从选取的民间传统酒曲中主要分离得到酵母茵和根霉菌,还有少量曲霉茵等.通过对其微生物进行茵落特征、茵体形态观察和生理生化特征检测,鉴定出酵母茵有3类,分别为酒香酵母属(Brettanomyces)、假丝酵母属(Candida)、毕赤氏酵母属(Pichia);根霉菌有2类,分别为米根霉(Rhizopus chinensis)和华根霉(Rhizopus oryzae).