白鲢鱼骨胶原低聚肽螯合钙的结构表征及其促细胞增殖作用

为开发一种具有良好吸收性和高利用率的补钙产品——胶原低聚肽螯合钙,探究其结构特征及其对细胞的促生长作用。分别采用傅里叶红外光谱、紫外光谱、荧光光谱和差示热量扫描仪对胶原低聚肽螯合钙冻干样品进行表征分析,利用293Ad5+人肾细胞进行增殖培养试验,结果表明:胶原低聚肽中氨基上的氮原子与羧基上的氧原子均参与了钙离子的螯合反应,它们之间主要是配位结合。差示热量扫描(DSC)曲线表明:胶原低聚肽螯合钙具有比胶原低聚肽更好的稳定性。采用MTT法检测不同剂量组胶原低聚肽螯合钙对293Ad5+人肾细胞培养24h的相对增殖活力,结果表明胶原低聚肽螯合钙安全性高,在一定程度上促进了细胞的增殖。     

酪蛋白磷酸肽锌螯合肽的分离及结构性质表征

酪蛋白磷酸肽(Casein Phosphopeptides,CPPs)是一类具有二价金属元素螯合活性的多肽集,而定向获得特异性营养元素螯合活性的酪蛋白磷酸肽具有理论和实际意义。采用Q强阴离子交换色谱和高效反相制备色谱(RP-HPLC)连续色谱方案分离碱性蛋白酶酶解得到的CPPs,获得锌高螯合活性的CPPs,并运用氨基酸组成、紫外光谱、红外光谱、固体核磁共振~(13)C谱、~1H谱、~(31)P谱表征分析酪蛋白磷酸肽螯合锌(CPP-Zn)的螯合性质。结果表明:CPPs经连续色谱分离可得具有高锌螯合活性的肽,其锌螯合活性可达88.68μg/mg。螯合前后CPPs的结构及氨基酸组成发生了明显变化,其中的磷酸基团参与了螯合,推测其主要结合位点是—COOH、—NH_2及P—OH中的—OH。     

牡蛎低聚肽的结构表征及体外抗氧化作用

以去壳牡蛎肉为原料,通过二步酶解法制备牡蛎低聚肽。在对其基础理化成分、氨基酸组成、相对分子质量分布分析的基础上,用扫描电镜、紫外全波长扫描和圆二色光谱对其结构进行表征,从DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力、氧自由基吸收能力（ORAC）和还原能力4个方面研究其体外抗氧化能力。结果表明：牡蛎低聚肽中蛋白质和肽含量分别为（67.57±0.53）%,（55.34±0.45）%,必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别为22.11%,21.43%,分子质量1 000 u以下的组分占91.16%。牡蛎低聚肽呈明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,在波长267 nm处有最大吸收峰。二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规卷曲含量分别为（5.5±0.2）%,（3.1±0.3）%,（35.7±2.8）%,（19.9±1.1）%和（34.7±1.9）%。牡蛎低聚肽对DPPH自由基的半抑制浓度（IC50值）约为9.7 mg/mL,ORAC值为（181.75±7.26）μmol Trolox/g。当其质量浓度为5.0 mg/mL时,对ABTS自由基清除能力与0.06 mg/mL的VC相当;当其质量浓度为3.0 mg/mL时,还原能力与0.01 mg/mL的VC相当。     

牡蛎氨基酸螯合锌体外抗氧化作用研究

研究了牡蛎氨基酸螯合锌体外抗氧化能力,测定了牡蛎氨基酸螯合锌对DPPH自由基、超氧阴离子自由基(O~-_2·)、羟基自由基(·OH)3种常见自由基的清除能力及其抗氧化值。结果表明:牡蛎氨基酸螯合锌具有较好的体外抗氧化能力,随着浓度的增加,牡蛎氨基酸螯合锌对DPPH、O~-_2·、·OH自由基的清除能力逐渐增强,抗氧化值也随之增加。当浓度0.01 g/m L时,对DPPH、·OH自由基的清除率分别为88.43%、82.64%。     

菜籽源锌螯合肽的制备、纯化和结构解析

采用碱性蛋白酶水解菜籽蛋白制备水解物,运用固定金属亲和层析(IMAC-Zn2+)和葡聚糖凝胶G25(Sephadex G25)层析分离纯化;利用反相高效液相色谱(RP-HPLC)和电喷雾电离质谱(ESI-MS)鉴定序列;采用EDTA络合滴定法(ECT)、双硫腙比色法(DCM)、原子吸收光谱(AAS)和电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)检测锌螯合率。试验表明:菜籽蛋白的4 h水解物锌螯合潜力最佳;分离该水解物获得3个肽组分(I,Ⅱ和Ⅲ),其中Ⅱ和Ⅲ具有锌螯合能力;进一步分离后分别获得3个(Ⅱ-1,Ⅱ-2,Ⅱ-3)和2个肽组分(Ⅲ-1和Ⅲ-2),组分Ⅱ-3的锌螯合率最高,高于同浓度的谷胱甘肽(GSH)(P0.05);鉴定Ⅱ-3序列获得4条肽,即Ala-Arg(AR),Asn-Ser-Met(NSM),Gly-Lys-Arg(GKR)和Glu-Pro-SerHis(EPSH)。其中NSM的锌螯合率最高,来源于菜籽蛋白NADH-enoyl-ACP reductase Chain A序列中的296-298氨基酸残基。因此,菜籽蛋白可以作为微量元素螯合肽的优良来源。     

乳清蛋白钙螯合肽的分离及结构性质表征

目的:酶解乳清蛋白,通过连续色谱手段分离出强钙螯合活性的肽,再通过结构表征研究其钙螯合性质。方法:酶法水解制备乳清蛋白多肽,采用DEAE-650M阴离子交换色谱、Sephadex G-25凝胶过滤色谱、C18反向高效液相色谱(RP-HPLC)分离乳清蛋白酶解产物,得到特异性的钙螯合肽。采用核磁共振、X射线衍射、TGDSC、Zeta电位结构表征分析钙螯合性质。结果:乳清蛋白多肽经分离纯化得到具有强钙螯合力的肽,命名为WPH-13。其钙螯合活性为63.49μg/mg,结构鉴定发现钙离子可能被一个或多个WPH-13包裹在中央,主要结合位点是羰基氧和氨基氮。与钙结合后p H稳定性和热稳定性提高,抗氧化活性加强。结论:从乳清蛋白中分离得到的钙螯合肽具有较高的钙螯合活性。通过结构性质鉴定研究螯合物的作用机理,为第3代补钙剂的生产应用奠定基础。     

玉米肽-锌螯合物结构表征及抗氧化活性分析

以玉米肽(corn peptide,CP)为参照研究玉米肽-锌(CP-Zn)螯合物的结构表征和体内抗氧化活性变化。采用氨基酸分析、紫外扫描、红外光谱研究结构变化;对小鼠灌胃不同剂量的CP、CP-Zn(低、中、高剂量组分别为50、150、250 mg/(kg·d)),测其血清、肝脏中丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力,分析比较CP、CP-Zn体内抗氧化活性。结果表明:螯合前后氨基酸组成、紫外吸收光谱、红外吸收光谱存在明显变化,Zn2+与—COOH、—NH_2、C=O进行了配位;CP高剂量、CP-Zn高、中剂量能显著降低小鼠血清、肝脏中MDA含量(P0.05或P0.01),提高SOD活力(P0.01)、GSH-Px活力(P0.05或P0.01),CP-Zn抗氧化活性优于CP。由此可见,CP-Zn属于螯合物,同时具有增强CP抗氧化活性的作用。     

硫酸软骨素螯合锌的制备、表征及体外生物活性

本研究利用正交试验优化硫酸软骨素螯合锌制备工艺条件.选用硫酸软骨素与硫酸锌为原料,以锌螯合率为指标,通过单因素实验及正交试验考察pH、反应时间、硫酸软骨素与七水合硫酸锌质量比、反应温度对锌螯合率的影响.采用紫外光谱分析、傅里叶红外光谱分析、扫描电镜分析、热重分析、X射线衍射分析等方法对硫酸软骨素螯合锌进行结构表征.利用...     

花生蛋白钙螯合肽的制备、富集及表征

本文对花生蛋白钙螯合肽的制备工艺进行了研究,并对所得水解产物及其钙螯合物进行了表征。结果表明,在6种市售的蛋白酶中,Alcalase 2.4L对花生蛋白的水解能力最强,其与ProteAXH进行分步复合水解可进一步提高水解效果,在最适条件下所得花生肽的钙结合能力达到了84.09 mg/g、蛋白质回收率高达87.89%;采用酸法脱酰胺可显著提高花生肽的钙结合能力,在最适条件下可达到132.04 mg/g;利用大孔树脂DM301对脱酰胺花生肽进行富集可进一步提高其钙结合能力,在最优条件下可高达164.34 mg/g。荧光光谱及圆二色谱分析证实花生肽与钙离子发生了螯合作用,红外光谱分析则表明花生肽主要通过其羧基与钙离子进行结合。因此,花生肽是一种潜在的钙螯合剂,这对于花生蛋白的高值化综合利用具有重要的参考价值。     

牡蛎肽-锌纳米粒对大鼠促锌吸收及抗氧化效果的研究

通过构造缺锌大鼠模型,研究牡蛎肽-锌纳米粒(OPZNPs)对缺锌大鼠的补锌及抗氧化效果。结果表明,经过4周的补锌,OPZNPs使缺锌大鼠的增重率、锌表观吸收率、血清、肝脏、股骨锌含量显著增加,同时显著降低丙二醛(MDA)含量,显著升高总抗氧化活性(T-AOC)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,补锌和增强机体抗氧化活性的效果显著优于硫酸锌。OPZNPs有望成为新型的补锌制剂。     

小麦低聚肽螯合铁的制备与结构表征

以小麦低聚肽和FeCl₂为原料,采用单因素试验和响应面中心组合设计法研究了制备小麦低聚肽螯合铁的最佳工艺,结果表明：温度为60℃,肽盐质量比为6∶1,pH为5,螯合反应时间为55.0 min时,螯合率为(62.61±0.84)%,产物得率为(51.13±1.16)%。通过傅里叶变换红外光谱分析小麦低聚肽螯合前后结构特征变化,结果表明：螯合前后物质的结构发生了变化,对光吸收性能发生改变,螯合物中Fe²⁺与NH₂⁺以及—COO—形成配位键,说明成功生成了一种新型小麦低聚肽铁螯合物,具有营养保健和补铁功能价值。     

鳕鱼皮源锌肽螯合物结构表征及基于Caco-2细胞模型评价其促锌吸收特性

本文研究一种新型鳕鱼皮胶原蛋白源锌螯合肽(Gly-Pro-Ala-Gly-Pro-Arg)与锌离子的螯合物,探究其结构,利用Caco-2细胞模型评估其对锌的转运吸收特性,为开发锌源补充剂提供理论依据。通过质谱、圆二色谱、红外光谱技术对锌肽螯合物进行结构表征,结果显示其空间构象发生改变,氨基、羧基及酰胺键参与锌离子配位,其中锌螯合活性为(7.21±1.34)μg/mg。以Caco-2单层细胞模型评价促锌转运吸收作用,结果表明,锌肽螯合物促锌转运作用显著,且与转运时间呈正相关;锌肽螯合物在中、低浓度时促锌吸收明显,而在高浓度时,对锌抑制吸收,抑制作用主要体现在30~120 min。     

玉米低聚肽螯合钙的结构表征及其体外稳定性

以玉米低聚肽和氯化钙为原料制备玉米低聚肽螯合钙,通过分析氨基酸组成、电镜扫描、紫外扫描来表征玉米低聚肽螯合钙的结构特征,并分析其体外稳定性。结果表明：玉米低聚肽经过螯合后,结构和形态都发生了改变;有吸收峰且吸收强度有很大的变化;玉米低聚肽螯合钙在20～80℃、非强酸强碱、胃蛋白酶消化作用下,均具有较好的稳定性。     

牡蛎肽抗氧化和对T淋巴细胞增殖作用的影响

目的:主要对牡蛎肽的基本理化指标进行了测定,并对其清除细胞内ROS含量的能力和T淋巴细胞增殖影响进行研究。方法:采用AAPH[2,2’-Azobis(2-methylpropionamidine)dihydrochloride]诱导的Hep G2细胞氧化应激模型评价牡蛎肽缓解细胞内ROS水平的影响,应用刀豆蛋白(Con A)诱导小鼠T-淋巴细胞增殖,选取WST-8法检测不同浓度牡蛎肽对小鼠脾细胞和T淋巴细胞增殖的影响。结果:牡蛎肽主要含有相对分子量低于1000 u的八肽以下的短肽,具有抑制细胞内ROS生成的能力,并对Con A诱导的T-淋巴细胞增殖有抑制作用。结论:牡蛎肽具有显著的抗氧化能力和抑制T淋巴细胞增殖作用。     

牡蛎源肽锌纳米粒体外胃肠道消化稳定性及作用机制

本研究旨在探究体外模拟消化对牡蛎源肽锌纳米粒(OPH-Zn)稳定性及其结构的影响,揭示OPH-Zn在胃肠道消化过程中的动态变化规律。采用各种光谱仪(紫外、红外和荧光)、电镜(扫描和透射)以及粒度仪测定模拟消化液中OPH-Zn的锌含量、表面形貌、二级结构以及粒径分布变化。研究发现,OPH-Zn总锌含量高达228.89±2.53 mg/g;在模拟胃液消化过程中,OPH-Zn和ZnSO₄对照中可溶性锌含量变化不大,且两个样品无显著差异(P>0.05);转为模拟肠液消化时,OPH-Zn和ZnSO₄的锌溶解性分别降低了28.07%和55.31%(P<0.05),与ZnSO₄相比,OPH-Zn可溶性锌含量显著高于ZnSO₄(P<0.05);光谱分析发现,OPH-Zn在模拟胃液和肠液中保持相对稳定,但在由胃液过渡到肠液时,Zn2+与肽键中氧原子和氮原子的配位作用发生变化,电镜结果显示不同消化程度的OPH-Zn表面微观结构和颗粒大小也存在一定差异。结果表明,OPH-Zn在模拟胃肠道消化中具有一定的...     

酶法制备花生源锌螯合肽工艺

分别采用碱性蛋白酶(alcalase)、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶对花生蛋白进行水解,结果表明,胰蛋白酶是制备花生源锌螯合肽的最佳水解酶。基于螯合率,对胰蛋白酶酶解花生蛋白工艺条件进行优化,通过正交试验确定最佳反应条件为:底物浓度3%、酶解温度50℃、pH 6、酶解时间2 h。在该条件下,螯合率为52.71%。研究表明花生源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,为新型补锌剂开发提供理论依据。     

谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺优化及其结构表征

目的 优化谷朊粉钙离子螯合肽制备工艺并对其结构进行表征。方法 以水解度为指标,探究温度、时间、pH及加酶量等因素对谷朊粉酶解的影响;以钙离子螯合肽生成量为指标,探究不同因素对钙离子螯合肽生产量的影响;并根据结果进行Box-Behnken响应面实验优化螯合工艺。通过扫描电镜分析和红外分析对谷朊粉钙离子螯合肽进行表征。结果 最佳酶解工艺为:液料比17.5:1(mL/g)、碱性蛋白酶和风味蛋白酶添加比例为3:1、加酶量5000 U/g、酶解pH 9、酶解温度50℃、酶解时间4.0 h;优化后的最佳螯合工艺为:螯合温度38℃、肽液浓度13.5%、肽钙比5:1、螯合时间12.0 min、螯合pH 7、静置时间35 min、无水乙醇添加量为7倍体积,在此条件下钙离子螯合肽得率为50.85%。扫描电镜结果显示,螯合肽外观发生明显改变,更有利于吸收;红外光谱分析表明,钙离子可能与谷朊粉多肽上的-NH、-COOH结合。结论 本研究建立的谷朊粉酶解工艺、钙离子螯合工艺可行,可为谷朊粉深加工和产品研发提供思路与理论参考。     

鲐鱼暗色肉肽锌螯合物的制备及结构表征

为生产易被人体消化吸收的锌补充剂,提高鲐鱼暗色肉的附加值,本研究将鲐鱼暗色肉寡肽与锌进行螯合.以鲐鱼暗色肉蛋白肽(相对分子质量小于3000)为原料,采用超声法制备鲐鱼暗色肉肽螯合锌.以螯合得率和螯合率为指标,采用单因素与响应面结合的方法,对螯合工艺进行优化,并对螯合物进行氨基酸、能谱分析.结果 表明,最佳螯合工艺条件为...     

河蚬抗氧化肽—锌螯合物的制备及结构表征

以河蚬肉为蛋白源,添加中性蛋白酶进行酶解,采用葡聚糖凝胶G-50分离纯化得抗氧化肽,根据螯合最佳工艺制备抗氧化肽—锌螯合物,采用茚三酮法和硫化钠法对螯合产物进行定性分析,并通过紫外、红外、荧光光谱、X射线衍射和扫描电镜对产物结构进行分析。结果表明:所得螯合产物是一种抗氧化肽—锌螯合物;抗氧化肽中的羧基、氨基及酰胺键均参与了螯合反应,反应前后肽结构发生了显著变化;根据已得图谱分析可初步预测河蚬抗氧化肽—锌螯合物的结构。     

罗非鱼鳞胶原肽螯合锌抗氧化及抑菌活性研究

以罗非鱼鳞为原料,制备了胶原肽及胶原肽螯合锌,研究并比较了其体外抗氧化及抑菌活性。基质辅助激光解析电离飞行时间质谱图表明了罗非鱼鳞胶原肽螯合锌的生成。氨基酸分析显示,罗非鱼鳞胶原肽富含羟脯氨酸、甘氨酸以及天冬氨酸,与锌离子螯合后,氨基酸的组成与比例有所变化,其中天冬氨酸与谷氨酸占总氨基酸的比例分别由19.72%和8.79%增加到22.73%和9.71%。体外抗氧化实验表明,罗非鱼鳞胶原肽螯合锌对DPPH自由基、羟自由基的清除率IC₅₀值分别为3.69和6.59 g/L,并且具有较强的Fe³⁺还原能力,螯合锌的抗氧化活性明显优于胶原肽。抑菌实验显示罗非鱼鳞胶原肽螯合锌对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色假丝酵母等4种指示菌均表现出明显的抑制作用,而罗非鱼鳞胶原肽无抑菌效果。由此可见,罗非鱼鳞胶原肽螯合锌有望作为一种潜在的抗氧化、抑菌剂。