PITC柱前衍生反相高效液相色谱法测定维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量

建立反相高效液相色谱法检测维生素功能饮料中L-赖氨酸和牛磺酸的含量的分析方法。维生素功能性饮料中的L-赖氨酸和牛磺酸通过苯异硫氰酸酯(PITC)柱前衍生,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯胺基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经RP-HPLC梯度洗脱后检测维生素功能饮料中L-赖氨酸盐酸盐和牛磺酸的含量。使用ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×150mm 5-Micron),流动相A为0.1mol/L的乙酸钠溶液,流动相B为乙腈;流速为1.0mL/min;检测波长为254nm;柱温27℃;进样量20μL。牛磺酸和L-赖氨酸在线性范围内相关系数r0.999,回收率大于97.6,日内RSD分别为0.54%和0.46%(n=6)。结果表明本方法操作性强、灵敏度高,适用于维生素功能饮料中牛磺酸和L-赖氨酸的检测。     

程序进样-柱前衍生-高效液相色谱法测定乳制品中牛磺酸含量

建立快速高效检测乳制品中牛磺酸含量的程序进样-柱前衍生-高效液相色谱法。该方法对牛磺酸提取试剂、衍生化试剂、衍生方式、仪器色谱条件进行优化。通过设定进样程序,简化样品前处理衍生操作,大幅度缩短了检测时间。试验结果表明,方法加标回收率为99.2%～104.0%,相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）为3.22%～5.25%,线性相关系数R2=0.999 9,定量限为0.2 mg/100 g。同时对牛乳羊乳中的牛磺酸含量进行测定,结果显示全脂牛奶粉和全脂羊奶粉中牛磺酸的含量范围分别为2.89mg/100g～7.42mg/100g和36.6 mg/100 g～60.4 mg/100 g;纯牛奶和纯羊奶中牛磺酸的含量范围分别为0.37mg/100 g～0.68 mg/100 g和4.20 mg/100 g～6.10 mg/100 g。羊乳的牛磺酸均明显高于牛乳,其含量比值≥9,差异显著。     

柱前衍生高效液相色谱法测定饮料中4-甲基咪唑的含量

建立了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法测定饮料中4-甲基咪唑含量的方法。以C_(18)柱为色谱柱,乙腈和0.02 mol/L的乙酸铵水溶液为流动相,梯度洗脱,荧光检测器检测。该方法快速、准确,在0.05～1.0 mg/ L范围内线性相关系数为r~2=0.998 5,平均回收率达到71.6%～88.7%,相对标准偏差为3.6%～5.5%。方法的最低检测浓度为10.0μg/L。     

高效液相色谱法测定奶茶饮料中茶黄素含量

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定奶茶饮料中茶黄素的含量。方法奶茶样品经0.1%乙酸乙醇沉淀蛋白后,5000 r/min离心5 min,取上清液进行检测。采用0.5%乙酸(A)和乙腈(B)作为流动相进行梯度洗脱,二极管阵列检测器在280 nm处进行监测,流速1.5 m L/min,色谱柱温度40℃,外标法定量。结果本方法可以实现4种目标化合物的分离检测,4种茶黄素的回收率在89.06%~96.51%范围内,相对标准偏差小于5%(n=5)。结论该方法前处理时间短、操作简便、稳定性好、准确度高,可用于奶茶饮料中茶黄素的测定。     

超高效液相色谱法测定饮料中咖啡因含量

目的 建立超高效液相色谱法测定饮料中咖啡因含量。方法 样品经预处理后, 所得溶液均过 0.22 μm滤膜, 经C18色谱柱分离, 以水和甲醇为流动相, 梯度洗脱, 流速为0.21 mL/min, 二极管陈列检测器进行分析。结果 咖啡因为1.0~100 μg/mL浓度范围内呈线性关系, 线性相关系数为0.9994, 加标回收率在90.3%~98.4 %之间, 相对标准偏差小于10 %(n=6), 检出限为0.05 mg/kg。结论 该方法操作简单、干扰小, 准确度可靠, 能够分析饮料中咖啡因。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸含量

运用柱前衍生-高效液相色谱法测定暗纹东方鲀肉中牛磺酸的含量,以邻苯二甲醛为衍生剂,样品液与衍生剂进行衍生反应的体积比为1∶1,反应时间为1 min,甲醇-乙腈-水(体积比10∶20∶70)为流动相,采用XbridgeTMC18色谱柱,波长为330 nm,流速1 mL/min,进样量20μL的条件下检测样品中的牛磺酸。结果表明:牛磺酸的线性范围为5～30μg/mL,相关系数R2为0.999 1,回收率范围95.35%～98.19%,变异系数(RSD)=2.03%～3.71%(n=3),样品6次重复测定的RSD=0.51%,最小检出限1.14μg/mL。     

HPLC法柱后衍生测定乳制品中牛磺酸的含量

建立了高效液相色谱法测定乳制品中牛磺酸含量的方法。采用荧光检测器，柱后OPA衍生剂衍生，色谱柱为Waerts氨基酸分析柱，柱温为25℃，流动相流速为0．4mL／min，衍生剂流速为0．4mL／min。标准曲线相关系数为0．9749；回收率为95．6％；8次样品测定SD为0．3832，变异系数为1．2136％。     

柱前衍生法测定功能性饮料与口服液中的牛磺酸

采用丹磺酰氯柱前衍生法检测功能性饮料和口服液中的牛磺酸的含量,使用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析衍生产物,其中色谱配有可变波长紫外检测器,检测器波长设为254 nm。选用C18色谱柱进行产物分离,流动相选用乙酸钠水溶液-乙腈(30∶70,体积比)等度洗脱,柱温设为25℃,样品进样量为5μL。检测结果表明牛磺酸浓度为5μg/mL～50μg/L时,牛磺酸衍生物峰面积对浓度呈现良好的线性关系,相关系数为0.999。采用单因素和正交试验相结合的方法确定了最佳反应条件。结果表明衍生温度35℃,衍生时间35 min,衍生剂用量300μL,衍生溶液pH 9.5时,衍生物峰面积达到最大。在此试验条件下6组重复性试验衍生物峰面积相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.4%,重复性较好。对功能性饮料和口服液中牛磺酸进行检测,测量值与标识值误差在-10.0%～+10.0%,样品加标回收率为90.0%～108.0%,样品平行测试的偏差小于3.0%,此种方法反应条件温和,操作简单。     

高效液相色谱法测定牡蛎中牛磺酸含量

目的:通过优化流动相组成,制定牛磺酸的标准工作曲线,评价牛磺酸测定的稳定性及准确性。测定不同条件下提取的牡蛎牛磺酸样品,建立并评价高效液相色谱法测定牡蛎中牛磺酸含量的方法。方法:采用水煮法提取牡蛎中的牛磺酸,分别用HCl和NaOH溶液除去其中的酸性蛋白质和碱性蛋白质,经浓缩、乙醇脱水,制得牡蛎牛磺酸粗品;用邻苯二甲醛(OPA)法柱前衍生3min;色谱柱为AgilentEclipseXDB-C18,流动相流速0.50mL/min,检测波长360nm,柱温30℃。结果:优化得到测定牡蛎牛磺酸的流动相为20%乙腈和80%水,牛磺酸的出峰时间为3.858min,走样时间为7min,此时牛磺酸和牡蛎提取物中的其它成分完全分离(R>1.5)。牛磺酸质量浓度在5～60μg/mL范围具有良好的线性(R2=0.9946),最低检出限0.02μg/mL,最低定量限0.07μg/mL,平行样品的相对标准偏差(RSD)1.31%～4.48%。相同样品4h内测定的RSD为4.93%,样品测定的回收率95.82%～98.03%。随着提取温度的升高,牡蛎牛磺酸的提取率上升,当提取温度100℃时,牡蛎中牛磺酸的提取率达219.42mg/100g。结论:所建立的方法专属性好,灵敏度高,可精确测定牡蛎提取物中的牛磺酸含量。     

柱前衍生高效液相色谱法测定水产品中羟脯氨酸含量

建立水产品中羟脯氨酸含量的柱前衍生高效液相色谱测定方法。样品经酸水解,丹酰氯衍生,C1 8柱分离,紫外检测器检测。结果表明,羟脯氨酸与其他氨基酸较好分离,在0.5～20μg/mL范围内线性关系良好(r>0.9999),检出限0.5μg/mL,平均回收率80.2%～103%,RSD范围3.2%～5.6%。该方法灵敏、准确,适用于水产品中羟脯氨酸含量的测定。     

柱前衍生高效液相色谱法检测水产品中甲醛的含量

目的建立柱前衍生高效液相色谱法检测水产品中甲醛含量。方法样品经绞碎匀浆后,经2,4-二硝基苯肼-乙酸钠缓冲液衍生液(1:1,V:V)于60℃衍生1 h,冰浴冷却后的衍生物直接上高效液相色谱检测,以ODS-C_(18)柱子为分离柱,甲醇-水(70:30,V:V)为流动相等度洗脱,二极管阵列检测器在365 nm波长处检测,外标法定量。结果甲醛在0~10 mg/L浓度范围内线性关系良好,线性相关系数为0.9994,方法检出限为0.5mg/kg。空白样品在1.0、5.0和20.0 mg/kg添加水平下,回收率在88.2%~95.3%之间,RSD在0.75%~1.82%之间。对水产品9种样品中的甲醛进行了测定,其中6个样品检出甲醛,含量范围为1.51~64.04 mg/kg。结论该方法简便、灵敏、准确,可适用于水产品中甲醛含量的分析。     

超高效液相色谱法同时测定饮料中的17种食品添加剂

目的 建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定饮料中安赛蜜、柠檬黄、苯甲酸、新红、苋菜红、糖精钠、靛蓝、山梨酸、胭脂红、日落黄、诱惑红、阿斯巴甜、酸性红、亮蓝、喹啉黄、赤藓红、专利蓝v共17种食品添加剂的方法.方法 样品经乙腈除去蛋白、用水稀释,采用迪马EndeavorsilTM C18反相色谱柱(1.8 μm×2.1 mm×l00 mm)分离,以乙腈-乙酸铵(20 mmol/L,pH5.8～6.0)为流动相进行梯度洗脱,在30℃柱温、0.3 ml/min流速下,采用二极管阵列检测器多波长分析,外标法定量.结果 在10 min内可以实现17种食品添加剂的完全分离;在0.025～25.0 mg/L范围具有良好的线性关系,回归系数均大于0.998,检出限为0.000 70 ～0.007 4 mg/L;定量限为0.002 4 ～0.043 0 mg/L;标准加入的平均回收率为86.4％ ～ 104.8％,相对标准偏差值为0.25％～9.6％.结论 该方法简便、快速、分离效果好、灵敏度高,适用于饮料中17种添加剂的检测需求.     

钛胶反相高效液相色谱法测定饮料中的咖啡因

建立了利用钛胶反相柱快速测定饮料中咖啡因的含量的高效液相色谱方法.色谱条件:分离柱为Titania Sachtopore - RP柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm),柱温30℃,流动相为水∶甲醇=83∶17 (V/V),流速1 mL/min,检测波长273nm.线性范围为12 - 900μg/mL,此范围内标准曲线线性良好(R2=0.9998).最低检出限(S/N =3)为0.03 μg/mL,样品加标回收率范围为98.6％～102.2％,精密度即相对标准偏差(n=9)小于0.23％.本法简单易操作、分析速度快,精密度和准确度均取得满意效果,适用于各种饮料样品中咖啡因的定量分析.本研究不仅是对食品中咖啡因检测方法的补充,更重要的是发挥了钛胶固定相不可比拟的优势.     

高效液相色谱法测定乳制品中纳他霉素分析方法的改进

目的优化高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定乳制品中纳他霉素含量的分析方法。方法对测定纳他霉素GB/T 21915-2008《食品中纳他霉素的测定》的高效液相色谱法中样品的提取溶剂、蛋白沉淀剂、色谱流动相及流速进行优化,并对优化后的方法进行方法学验证。结果选择10%的冰乙酸水溶液作为样品提取溶剂;乙酸锌和亚铁氰化钾作为蛋白沉淀剂;甲醇-水-冰乙酸(60:40:2,V:V:V)作为流动相;流速为1.0 mL/min。可以在7 min内完成对目标物的分离,线性方程为Y=43315X-1751,r~2=0.99997,方法平均回收率在98.5%~106.3%之间,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于2.2%,方法检出限为0.02 mg/L。结论该方法前处理简单,回收率及灵敏度高,准确度和稳定性好,适用于对纯牛奶、乳酸菌饮料、奶粉等乳制品中纳他霉素的分离和定量检测。     

高效液相色谱法测定饮料中三氯蔗糖的含量的优化

目的优化高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测饮料中三氯蔗糖的含量。方法采用配备示差折光检测器的高效液相色谱仪,使用C18反相色谱柱,选择甲醇:0.125%磷酸氢二钾=40:60(V:V)作为流动相,在0.8 m L/min的流速下进行检测。结果该方法在20~400 mg/L范围内,三氯蔗糖的浓度与峰面积的相关性良好,标准曲线为Y=207.99X+274.1,r=0.9999,改进后方法回收率在94.28%~107.16%之间,改进后检出限为0.0024 g/kg。结论该方法不仅能够达到国家标准的要求,并且快速、灵敏、环保,提高了高效液相色谱检测饮料中三氯蔗糖的检测效率和安全性。     

高效液相色谱法测定功能性食品中维生素C的含量

目的建立高效液相色谱法测定功能性食品中维生素C的含量。方法采用Venusil XBP C_(18)(L)柱(4.6mm×250 mm,5mm)为色谱柱,0.1%的草酸溶液为流动相,流速为0.5 m L/min,柱温为25℃,检测波长为245nm,样品经L-半胱氨酸-三乙胺溶液还原后,测定维生素C的含量,进样量20mL。结果维生素C在2.056~30.84mg/m L浓度范围内呈良好线性关系(r=0.9999),定量限为0.03726mg/m L,检出限为0.01242mg/m L,回收率为99.89%,RSD为0.31%(n=6);样品经L-半胱氨酸-三乙胺溶液还原后稳定性、重复性好。结论本方法简便快捷、适用范围广、准确度高、精密度好,可广泛用于功能性食品中维生素C含量的测定。     

高效液相色谱法同时测定果醋饮品中7种有机酸的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定果醋饮品中的7种有机酸(柠檬酸、苹果酸、乳酸、酒石酸、富马酸、丁二酸及乙酸)含量。方法样品经稀释后过0.45μm水相滤膜,采用Welch Ultimate AQ-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)分离,以0.1%磷酸和甲醇(97:3, V:V)为流动相进行等度洗脱,柱温为40℃,流速为0.5 mL/min,在波长210 nm处进行检测,外标法定量。结果 7种有机酸在12 min内完全分离,相关系数均在0.997以上,检出限为0.12～0.4mg/L,加标回收率为95.4%～101.5%,相对标准偏差为1.19%～3.59%。结论该方法适用于果醋饮品中7种有机酸含量的测定。     

高效液相色谱法测定乳粉中维生素E方法的优化

目的优化GB5009.82-2016《食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》中高效液相色谱法测定维生素E的样品制备和色谱分析条件。方法样品经乙醇-氢氧化钾水浴皂化后,石油醚-乙醚萃取,氮吹至尽干,甲醇溶解幵过滤,采用甲醇:四氢呋喃=99:1(V:V)作为流动相进行等度洗脱,外标法定量。结果本方法在10 min内完成维生素E的4种异构体的分离分析,精密度、线性良好。4种异构体在0.5、15和40μg/m L添加水平的回收率为96.1%~101.2%,维生素E的相对标准偏差小于1.7%(n=10),方法定量限为100μg/100g。结论优化后的方法快速、准确、灵敏,适合乳粉中维生素E异构体的快速准确测定。     

高效液相色谱法测定运动饮料中13种食品添加剂

目的建立高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时快速测定运动饮料中13种食品添加剂的检测方法。方法在40℃柱温,1.0 m L/min流速下,选取phenomenex C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,在0.02 mol/L乙酸铵(p H 6.86)和甲醇为流动相条件下进行梯度洗脱,采用二极管阵列检测器在230 nm波长处进行检测,外标法定量,实现同时对13种食品添加剂的分离。结果该方法线性良好,相关系数均大于0.990,检出限为0.2~0.5 mg/kg,平均回收率为81.0%~107.7%,相对标准偏差(relative standard deviations,RSDs)为1.00%~5.49%。结论建立的高效液相色谱法满足同时检测运动饮料中13种食品添加剂的要求,操作简单、灵敏度高、重复性好。     

高压液相色谱法快速测定饮料中的五种食品添加剂

目的 建立一种高压液相色谱方法同时检测饮料制品中3种甜味剂(安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜)和2种防腐剂(苯甲酸、山梨酸)。方法 样品采用起始流动相稀释后直接过膜分析, 色谱分离在极性修饰XAqua C18色谱柱上进行, 流动相采用50 mmol/L pH 4.5 KH2PO4和乙腈, 梯度模式洗脱, 流速2 mL/min, 柱温40 ℃, 6 min内即可完成一次分离分析, 加上4 min梯度平衡时间, 10 min内即可完成平衡及分离。结果 5种食品添加剂在0.5~50 mg/L内线性关系良好, 相关系数r2均大于0.9999。在两种饮料基质中添加50、100、150 mg/kg 3个浓度水平, 方法回收率为96.48%~105.64%, 相对标准偏差为0.21%~5.39%; 以信噪比S/N =3计算, 方法检测限为0.02~0.08 mg/L。结论 建立的分析方法快速、准确, 可满足饮料中甜味剂和防腐剂的同时检测。