红薯叶不同溶剂提取物抗氧化性及活性成分鉴定

研究不同极性溶剂对红薯叶中酚类化合物的提取以及提取物抗氧化性的影响,并鉴定提取物中的主要抗氧化成分组成。分别采用极性不同的7 种溶剂（蒸馏水、甲醇、无水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和氯仿）从红薯叶中提取多酚,并评价提取物中总酚、总黄酮和花青素的含量,以及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力和还原能力,最后运用高效液相色谱-串联质谱（high performance liquidchromatography tandem mass spectroscopy,HPLC-MS/MS）技术分析抗氧化活性最好的提取物中多酚的主要组成成分。结果表明：提取溶剂的极性对红薯叶中多酚类化合物的提取效率和提取物抗氧化活性有很大的影响,水提物具有最高的粗提物得率（（37.13±1.60）%）,而甲醇提取物中总酚含量（13.80 mg GAE/g）和总黄酮含量（（5.68±0.35）mg QE/g）最高,且具有最好的DPPH自由基清除能力（IC50为0.32 mg/mL）与还原能力（ρ0.5为0.95 mg/mL）。采用HPLC-MS/MS从红薯叶甲醇提取物中鉴定9 种、初步鉴定3 种酚类化合物,鉴定的化合物为咖啡酸、对羟基苯甲酸、1-咖啡酸奎宁酸、3-咖啡酸奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、3,4,5-三咖啡酰奎尼酸和金丝桃苷。     

6 种东北地区红树莓果渣提取物的抗氧化活性差异

以东北地区6 种红树莓果实加工后的果渣提取物为实验材料,研究其总酚、总黄酮、原花青素、花色苷含量和体外抗氧化活性的差异。结果表明：宝石红果渣提取物中总酚、总黄酮和原花青素含量最高,分别为14.18、3.71、15.28 mg/g;哈瑞太兹果渣提取物中花色苷含量最高,为0.68 mg/g;菲尔杜德和野生果果渣提取物的总还原能力与VC接近;除哈瑞太兹外,其他品种红树莓果渣提取物对（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-二氮-双（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulfonic acid) radical,ABTS+·）的清除率均大于VC。相关性分析结果表明红树莓果渣提取物的总还原能力与总黄酮、原花青素含量的相关性较大;对DPPH自由基的清除率与原花青素、花色苷含量的相关性较大;而对ABTS＋·的清除率与总酚和总黄酮含量的相关性较大。在6 个红树莓品种中,菲尔杜德和野生果果渣提取物具有较强的抗氧化活性。     

红树莓不同溶剂提取物抗氧化活性

以红树莓鲜果为原料,采用体外抗氧化方法研究不同溶剂提取对红树莓抗氧化活性的影响。分别以水、25%乙醇、50%乙醇、75%乙醇、100%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇为提取溶剂,测定提取物中总酚、黄酮、原花青素和花色苷含量;研究提取物体外抗氧化活性的差异;对活性物质含量与抗氧化能力进行相关性分析。结果表明,50%乙醇粗提物的总酚、黄酮、原花青素和花色苷含量均最高,分别为257.19、10.48、406.45、22.47 mg/100 g;7种不同红树莓提取物中50%乙醇提取物的总还原力与V_C相近,50%和75%乙醇提取物对DPPH·清除能力强于V_C,7种溶剂提取物对羟基自由基清除能力均弱于V_C;红树莓7种溶剂提取物中总酚与对DPPH·的清除率及总还原能力的相关性较大。比较发现,50%~75%的乙醇水溶液能够更好的溶出红树莓中的活性成分,而具有更强的抗氧化活性。      

枣花蜜酚类化合物组成及其抗氧化活性分析

以陕西佳县、府谷、大荔、渭南4 个地区枣花蜜为研究对象,测定其理化指标、酚类化合物含量、体外抗氧化活性、对·OH诱导的pBR322质粒DNA氧化损伤的保护作用及过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠淋巴细胞DNA氧化损伤的保护作用。结果表明,枣花蜜总酚含量为196.55～454.95 mg/kg,总黄酮含量为22.03～39.40 mg/kg;高效液相色谱-电喷雾-四极杆-飞行时间串联质谱分析发现枣花蜜中含有15 种酚类化合物,包括4 种酚酸和11 种黄酮类化合物;体外抗氧化实验表明,枣花蜜具有较强的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力（半抑制浓度为38.03～122.81 mg/mL）、Fe2＋络合能力（110.93～158.46 mg/kg）和Fe3＋还原力（166.68～365.06 mg/kg）;此外,枣花蜜对·OH诱导的pBR322质粒DNA氧化损伤有保护作用且能显著降低H2O2诱导的小鼠淋巴细胞DNA氧化损伤。本实验的研究结果可为枣花蜜资源的开发利用提供理论参考。     

海蒿子多酚组分的化学成分、抗氧化和降血糖活性分析

以海蒿子为研究对象,首先从中提取游离酚(free phenolics,FP)、酯(esterified-bound phenolics,EP)和糖苷结合酚(glycoside-bound phenolics,GP)3种不同存在形式的可溶性多酚,并采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法分析各多酚组分的化学成分;其次,评价各多酚组分的体外抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性。结果发现海蒿子中可溶性多酚以结合态为主,GP的总酚含量(68.30 mg/g)最高,EP的总黄酮含量(83.49 mg/g)最高。从3个多酚组分中共鉴定出22个化合物,其中包括3种酚类化合物、4种黄酮和2种酚酸。生物活性研究表明：GP的细胞抗氧化活性(细胞抗氧化值为18.18μmol/g)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(IC₅₀=84.6μg/mL)和2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基(IC₅₀=127.01μg/mL)清除能力最强。EP的氧自由基吸收能力(5 322.85μmol/g)和α-葡萄糖苷酶抑制活性(IC₅₀     

发酵红树莓汁乳酸菌的筛选及抗氧化活性研究

从抗氧化活性、胃肠道环境耐受性、抑菌性能及菌体生长能力四个方面选出优良乳酸菌株,并对菌株发酵红树莓（Rubus idaeus L.）汁进行研究。结果表明,从12株乳酸菌中筛选出了1株优良副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）YJ1,菌株YJ1发酵红树莓汁中总黄酮和总酚含量分别增加了23.00%、18.58%,与未发酵的红树莓原汁相比,发酵后的红树莓汁体外抗氧化活性极显著提高（P＜0.01）,其DPPH和羟基自由基清除能力分别提高了22.92%、15.63%;2,2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（ABTS）和铁离子还原/抗氧化能力（FRAP）法测定的总抗氧化能力分别增加了36.31%、39.48%。     

红树莓发酵果酒及其抗氧化活性

以成熟期红树莓为主要原料,建立最适发酵果酒制备工艺,终点时刻果酒酒精度为12.0%vol,花色苷含量为11.49 mg/100 mL,总黄酮含量为49.78 mg/100 mL。对不同红树莓果酒进行·OH和O2-·的抗氧化评价,结果表明果酒样品具有较强的抗氧化效果。HUVEC试验结果表明,样品对t-BHP诱导的细胞损伤具有良好缓解效果,细胞中GSH-PX释放量可达136.15 U/mg,抗氧化效果显著。试验结果为红树莓产业的高值化加工利用提供技术参考。     

灰树花抗氧化活性多酚的提取纯化及其鉴定

以抗氧化活性为指标,通过单因素试验和正交试验对灰树花多酚提取工艺进行优化,确定最佳提取条件为提取时间2.5 h,提取温度70 ℃,料液比1∶50（g∶mL）。提取的多酚经大孔树脂NKA-Ⅱ动态吸附和解吸得到3个不同多酚组分,分别为体积分数为20%、40%及60%乙醇洗脱物。以DPPH自由基清除率、羟基自由基清除率以及总还原力为指标测定不同组分的抗氧化活性,结果表明,体积分数为40%乙醇洗脱物的抗氧化作用最强。采用高效液相色谱-串联质谱对体积分数为40%乙醇洗脱物多酚组分进行分离鉴定,通过对应的质谱结果分析可推测其中的多酚组分包括2-羟基丁二酸、香豆酸、3-羟基白藜芦醇、白藜芦醇、二羟基苯乙酸、咖啡酸和4-羟基苯甲酸等物质。     

红树莓花色苷的提取及抗氧化活性研究

采用酸化乙醇法提取红树莓中的花色苷,通过正交试验确定花色苷提取的最佳条件,同时对红树莓花色苷提取物的抗氧化活性进行研究。结果表明,以盐酸酸化的80%乙醇溶液(pH3)按1:20(g/mL)的料液比在60℃提取红树莓1.5h,此条件下,鲜果中花色苷提取量达0.625mg/g。在实验范围内,红树莓花色苷提取物的还原能力、对羟自由基和超氧阴离子自由基的抑制率均随质量浓度的升高而增加。红树莓花色苷提取物抑制羟自由基和超氧阴离子自由基的半数有效浓度(EC50)分别为0.175mg/mL和0.699mg/mL,说明红树莓花色苷提取物抑制羟自由基比抑制超氧阴离子自由基的能力强。     

树莓叶茶和嫩尖茶抗氧化活性成分研究

目的 研究树莓叶茶和嫩尖茶的抗氧化活性成分。方法 对树莓叶茶和嫩尖茶的鞣花酸、黄酮和多酚含量进行了测定, 并与绿茶炒青进行了比较, 在此基础上考察了不同种类茶叶对DPPH和ABTS自由基的清除能力。结果 树莓叶茶和嫩尖茶的鞣花酸含量较为丰富, 最高达26.75 mg/g, 是特级炒青6.8倍, 黄酮含量也较绿茶炒青高, 达18~22 mg/g; 树莓嫩尖茶的多酚含量同炒青接近, 均超过180 mg/g, 两者的抗氧化活性均较强, 而树莓叶茶的总多酚含量较低, 仅为绿茶和树莓嫩尖茶36%~39%, 抗氧化活性较弱。相关性分析发现茶叶样品的抗氧化活性与多酚含量呈极显著正相关。结论 树莓叶茶抗氧化性较弱, 而嫩尖茶具有较强的抗氧化活性, 可以加以推广。     

基于代谢组学技术的玛咖产地鉴别

采用代谢组学的方法,基于超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱对不同产地的玛咖进行产地鉴别和各产地代谢物差异分析。通过正交偏最小二乘判别分析成功区分玛咖的5 个产地,并对各个产地玛咖的代谢物进行靶标和非靶标代谢组学分析,其中靶标代谢组学分析共鉴定出28 种代谢物,包括玛咖酰胺、玛咖烯、芥子油苷、生物碱、甾醇、多酚和黄酮,非靶标代谢组学分析鉴定出玛咖的产地标志物。结果表明代谢组学方法可以用于玛咖产地鉴别以及全组分的鉴定。     

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定饮用水中双酚A和双酚S

建立一种饮用水中痕量双酚A和双酚S的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱检测方法。水样中双酚A和双酚S经HLB固相萃取柱富集,甲醇洗脱并浓缩,再以1 mmol/L氟化铵-乙腈为流动相,经C18色谱柱分离,采用电喷雾离子源、质谱多反应监测模式分析。该方法对水样体积为500 mL时双酚A和双酚S检出限分别可达到1.0 ng/L和0.2 ng/L,在低、中、高3 个加标水平下两者的平均回收率分别为88.3%～114.8%和83.7%～98.2%,相对标准偏差分别为10.0%～16.2%和5.9%～12.3%。该方法灵敏度高、定性准确、操作简单高效,适用于饮用水中双酚A和双酚S的定性定量分析。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定禽蛋中 苏丹红的残留量

目的建立禽蛋中苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ染料残留的液相色谱-串联质谱的检测方法。方法禽蛋样品中的苏丹红经溶解、冷冻离心及过滤提取纯化,经ZorbaxSB-C_(18)(2.1 mm×50 mm, 3.5μm)色谱柱,以乙腈和0.2%的甲酸水溶液为流动相进行等度洗脱,温度为35℃,流速为0.2mL/min,外标法定量。结果在1～50μg/kg的浓度范围内,线性关系良好(r0.99),样品中的检出限0.5μg/kg,分析时间仅为5 min,加标回收率为69.5%～108.2%,相对标准偏差为1.6%～17.5%。结论该方法准确、快速、灵敏度高,适用于禽蛋中苏丹红染料的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱测定干红葡萄酒中18 种花色素单体方法的建立

目的：利用超高效液相色谱-串联质谱技术同时测定干红葡萄酒中18?种花色素单体。方法：将酒样用5%酸化甲醇溶液（含1%甲酸,V/V）稀释500?倍后,滤液经Phenyl-Hexyl色谱柱梯度洗脱,电喷雾离子源正离子模式检测,多反应监测,气帘气压力30?psi,离子喷雾电压5?500?V,离子源温度500?℃,分析时间20?min。结果：18?种花色素单体在10.0、20.0、50.0?μg/L添加水平的加标回收率在95%～100%之间,R2大于0.999,相对标准偏差在1.71%～2.87%之间,检出限在0.2～3.5?μg/L之间,定量限在0.4～11.5?μg/L之间。结论：该方法前处理简便、灵敏度高、分析时间短,精密度和准确性良好,可用于干红葡萄酒中18?种花色素单体的同时检测。     

超高效液相色谱串联质谱法测定牛奶中三氮脒残留

目的 本研究旨在结合超高效液相色谱－串联质谱(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)技术,建立简便、快速的样品前处理方法,对牛奶中的痕量三氮脒残留进行检测。方法 用1%乙酸乙腈溶液振荡提取后,在-4℃条件下高速离心,取上清液旋转蒸干后,用10%乙腈水溶液复溶,用超高效液相色谱-串联质谱仪在正离子扫描及多反应监测(multiple reaction monitoring, MRM)模式下分析,外标法定量。结果 牛奶中三氮脒的检出限(limit of detection, LOD)为5 μg/kg,定量限(limit of quantification, LOQ)为15 μg/kg,在20~1000 μg/L浓度范围内线性良好,相关系数(r)为0.9993。将所研究的方法应用于实际牛奶样本中,其加标回收率在81.65%至85.49%之间,日内精密度分别在4.5%~5.5%,日间精密度在5.9%~8.2%之间。结论 本方法采用振荡提取加低温高速离心净化的前处理方法,简单快速,结合UPLC-MS/MS,可实现痕量水平残留的高灵敏度检测,适用于快速、高灵敏检测牛奶及其他动物源性食品中的三氮脒残留。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定柑橘中11种保鲜剂残留

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定柑橘中多菌灵、噻菌灵、嘧霉胺、抑霉唑、甲基硫菌灵、咪鲜胺、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯和2,4-D的分析方法。方法 用乙腈作为提取剂, 振摇30 min后加入5 g氯化钠静置30 min, 上清液过滤待UPLC-MS/MS分析。采用ACQUITY UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)进行液相色谱分离, 以0.1%甲酸0.5 mmol/L甲酸铵和甲醇作为流动相进行梯度洗脱。采用多反应监测模式进行质谱测定, 以基质配制标准溶液外标法定量。结果 11种保鲜剂在1.0~100 μg/L范围内线性关系良好(r2＞0.999), 方法最低检出限为0.03~0.21 μg/kg, 最低定量限为0.07~0.5 μg/kg; 在3个添加水平为1.0、5.0、10.0 μg/kg时, 回收率为75.1%~110.4%, 相对偏差为0.4%~9.8%。对26个柑橘样品进行分析, 多菌灵、咪鲜胺和对羟基苯甲酸丙酯在所有样品中均有检出, 2,4-D在25个样品中有检出, 嘧霉胺检出率最低, 仅在一个样品中检出。从品种上看, 柠檬的平均用药量最大(2285.51 μg/kg), 其次是橙类、橘类、柑类和金橘。结论 该方法简便、灵敏、准确, 适用于柑橘中多种保鲜剂的同时测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定3种水产品中氯霉素、四环素含量

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)同时测定3种水产品中氯霉素、四环素的方法。方法 样品经Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液(pH=4.0±0.5)提取, HLB柱净化, 采用色谱柱Waters Acquity BEH C18柱(50 mm×2.1 mm, 1.7 μm)分离。电离方式为氯霉素使用电喷雾负离子模式; 四环素使用电喷雾正离子模式。检测方式为多反应监测。 结果 该法线性关系良好, 相关系数大于0.999; 平均回收率为80.4%~97.8%; RSD均小于5%。结论 该方法操作简便快速, 准确度高, 可作为水产品中氯霉素、四环素的测定方法。     

超高效液相色谱串联三重四极杆质谱测定蜂蜜中氯霉素残留

目的建立超高效液相色谱串联三重四极杆质谱法测定蜂蜜中氯霉素残留的分析方法。方法样品经乙酸乙酯提取,过固相萃取小柱净化,用Waters BEH C_(18)柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,流动相为0.05%氨水/乙腈梯度洗脱,内标法定量,电喷雾离子MRM(multiple reaction monitoring)模式检测。结果该方法的检出限为0.01 ng/mL,样品的定量限为0.1μg/kg,线性范围为0.01～5.0 ng/mL,平均回收率为92%～105%,相对标准偏差小于4%。结论该方法灵敏、准确、快速,能满足蜂蜜中氯霉素的监督检测。     

2017~2018年云南省9种新鲜鱼类产品中4种硝基呋喃代谢物的检测

目的 对2017~2018年云南省9种鱼类水产品中的4种硝基呋喃类药物呋喃它定(furaltadon)、呋喃西林(furacilin)、呋喃妥因(titrofuranyoine)、呋喃唑酮(furazolidonum)的相关代谢物3-Amino-5-morpholinomethyl- 2-oxazolidinone(AMOZ)、1-Aminohydantoin(AHD)、Semicardazide(SEM)、3-Amino-2-oxazolidinone(AOZ)进行检测。方法 每年从云南昆明(9份)、曲靖(9份)、玉溪(9份)、昭通(9份)、红河(9份)、普洱(9份)、文山(9份)、德宏(9份)共8个地市的超市和农贸市场随机取样72份, 2年共采样144份。将样品搅碎后在酸性条件(盐酸水解)下用2-NBA衍生剂衍生一夜(约16 h), 采用液液萃取的方式净化, 利用超高效液相色谱-串联质谱仪测定。用内标法定量。结果 云南省部分水产品中硝基呋喃类药物残留水平超标。结论 此方法可对当地的食品安全提供保障。     

超高效液相色谱串联质谱法测定烟草中的噁霉灵残留

为降低烟草中噁霉灵检测中的基质干扰,提高检测灵敏度和和稳定性,通过试验建立了以QuEChERS为样品前处理方法、液相色谱串联质谱仪为检测仪器的烟草中噁霉灵残留检测方法。样品加水浸润后,经丙酮提取、盐析试剂包除水、石墨化炭黑除杂后,采用Agilent ZORBAX 300SB-C8液相色谱柱（2.1 mm×100 mm,1.8 μm）分离,甲醇-水程序洗脱,ESI雾化,串联质谱MRM检测。结果发现,该方法在0.0025~0.0500 mg/L范围内线性良好,决定系数r²=0.9996,定量检测限1.06 μg/L,回收率在90.8%~92.0%之间,相对标准偏差为5.1%。运用该方法测定烟草中的噁霉灵,操作简单,检测精度高,满足CORESTA对烟草农残检测的要求。