响应面法优化粗糙脉孢菌番茄红素的皂化提取工艺及其抗氧化活性

本文研究了皂化反应结合有机溶剂对粗糙脉孢菌番茄红素提取的影响。通过单因素实验和响应面法对皂化提取条件进行了优化,包括皂化温度、皂化时间及NaOH浓度;同时以β-胡萝卜素、V_C及V_E为对照,测定了粗糙脉孢菌番茄红素对DPPH·、O₂-·、·OH三种自由基的清除能力,并通过FRAP法测定其抗氧化能力。结果表明,最佳皂化工艺条件为:皂化温度58 ℃、皂化时间21 min、NaOH浓度0.06 mol/L,在此条件下番茄红素得率为(1.620±0.011) mg/g,比未皂化时提高了38.46%,抗氧化试验结果表明粗糙脉孢菌番茄红素具有良好的体外抗氧化活性,当其浓度为250 μg/mL时对DPPH·及O₂-·的清除活性最强,分别为86.43%、90.21%;当其浓度为1200 μg/mL时,对·OH的最大清除率为85.83%。     

刺果番荔枝叶多酚提取工艺优化及其体外抗氧化活性

本试验选用原料为刺果番荔枝叶,使用乙醇溶剂提取其中的多酚类物质,分别比较乙醇体积分数、提取温度、液料比、提取时间4个要素对多酚提取量的影响,并采用响应面法中的Box-Benhnken中心组合试验确定最优提取工艺。采用DPPH自由基、羟自由基(·OH)法研究刺果番荔枝叶多酚抗氧化活性,比较在最优工艺条件下提取的刺果番荔枝叶多酚与抗坏血酸的清除能力。结果表明:乙醇体积分数55%、液料比50:1 (mL/g)、提取时间96 min、提取温度60 ℃时,多酚提取量最大,达到(20.37±0.34) mg/g。刺果番荔枝叶多酚对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的半抑制浓度(IC₅₀)分别为133.33、264.65 μg/mL,样品在试验范围内的最大清除率分别为(51.34%±2.68%)、(52.50%±2.29%)。综上表明,刺果番荔枝叶多酚具有较好的抗氧化能力。     

微波辅助法提取火龙果果皮色素及其功能活性研究

优化火龙果果皮色素的微波辅助法提取工艺,并对色素的功能特性进行初步研究。以火龙果果皮为原料,在单因素实验的基础上,采用正交实验设计对火龙果果皮色素的提取工艺进行优化,并研究了真空干燥色素的抗氧化活性和抑菌活性。结果表明:在料液比1∶50 (g/mL)、乙醇浓度20%、微波功率440 W、微波处理时间60 s的条件下,火龙果果皮色素的提取效果最佳,色素得率为1.074%;2~10 mg/mL提取物对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)和DPPH·均具有清除作用,其中对O₂-·的清除效果最好,比V_C的清除效果略低;提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度为1.25 mg/mL,最低杀菌浓度为2.5 mg/mL,抑制效果最好,其次金黄色葡萄球菌、副溶血弧菌、志贺氏菌和蜡状芽孢杆菌。本研究优化了微波辅助提取火龙果果皮色素的工艺条件,所得提取物有较好的抗氧化活性,且对常见食源性病原菌有较强的抑菌活性。     

四种小浆果浆汁活性成分及其抗氧化活性

为了对树莓、蓝莓、黑果腺肋花楸及蓝靛果四种小浆果浆汁进行初步活性评价,测定了四种小浆果浆汁的多酚、超氧化物歧化酶(SOD)、花色苷及总黄酮含量,并研究其体外抗氧化活性。结果发现,蓝靛果的多酚(4.659 mg/mL)、SOD(115.38 mg/mL)及总黄酮(10.717 mg/mL)是其他三种小浆果含量的1.5~7倍,花色苷(3.768 mg/mL)则是黑果腺肋花楸含量的14倍左右。以V_C作阳性对照,蓝靛果体外抗氧化效果最优,对·OH、DPPH·自由基的清除及对脂质过氧化的抑制作用的IC₅₀值分别为2.066 mg/mL、61.342 μg/mL和181.590 μg/mL,对O₂-·自由基的清除效果并没有明显优势。活性成分含量与抗氧化活性相关性分析表明,四种小浆果浆汁中多酚、花色苷、SOD及总黄酮含量与对·OH、O₂-·、DPPH·自由基的清除率及对脂质过氧化的抑制率均呈正相关性,且相关性显著。四种小浆果浆汁均具有较好的体外抗氧化活性,蓝靛果显示了最佳的抗氧化活性。     

复合酶法提取长白木根总黄酮工艺优化及抗氧化活性研究

研究纤维素酶/果胶酶复合酶法提取长白楤木根中总黄酮的最佳工艺条件。以总黄酮得率为考察指标,通过Box-Behnken设计-响应面法,优化长白楤木根中总黄酮的提取工艺。结果表明,复合酶法提取长白楤木根总黄酮的最佳工艺为:复合酶添加量(质量分数为5%,纤维素酶:果胶酶=1:1)、提取时间为50 min、液料比为40:1 (mL/g)、乙醇体积分数为50%。在此条件下长白楤木根总黄酮的提取量达到最大值为8.6±0.05 mg/g。当长白楤木根总黄酮浓度为0.15 mg/mL时,对DPPH·、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O₂-·)清除能力较好,自由基清除率分别为96.3%、70.1%、44.1%,且清除自由基的能力比V_C更高。本研究得出了纤维素酶果胶酶复合酶法提取长白楤木根中总黄酮的最佳工艺条件,且提取出的长白楤木根总黄酮具有较强的体外抗氧化能力。     

刺参粗多糖保护线粒体及其作用机制

通过Fe2+/V_C系统诱发肝线粒体脂质过氧化,采用硫代巴比妥酸显色法测定刺参粗多糖(Stichopus japonicuscrude polysaccharide,SJCP)对丙二醛(MDA)含量的影响;并测定SJCP对Fe2+的螯合作用、三种主要活性氧(ROS)(超氧阴离子(O₂-·)、羟自由基(·OH)、过氧化氢(H₂ O₂))的清除作用和对还原力的影响。结果表明SJCP对丙二醛含量的升高有极显著的抑制作用(p < 0.01);当SJCP浓度为0.333 mg/mL时,其螯合率才达到30.86%,远不如EDTA组;随着SJCP浓度的升高,其对线粒体O₂-·、·OH、H₂ O₂三种主要ROS的清除率也逐渐增大,还原力也随剂量的增加而增强,但弱于BHT组。说明SJCP能在一定程度上抑制线粒体发生脂质过氧化;具有一定的Fe2+螯合能力;能通过温和的抗氧化作用及清除ROS作用来保护线粒体,从而维持机体的健康。     

玛咖多肽的制备及抗氧化活性研究

以水解度为考察指标,在单因素实验基础上,利用正交实验优化酶解玛咖粗蛋白制备玛咖多肽的工艺,同时通过·OH、DPPH·及O₂-·清除实验研究提取过程中产生的玛咖醇提液以及在最适条件下制得的玛咖多肽的抗氧化活性,并对玛咖多肽进行氨基酸组成分析。结果表明,酶解玛咖粗蛋白的最适酶是碱性蛋白酶,酶解制备玛咖多肽的最适条件是酶解时间4 h、酶解pH为10.5、酶解温度55℃、加酶量1.6×104 U/g,在此条件下,玛咖粗蛋白的水解度为(31.55%±0.74%)。稀释一倍的玛咖醇提液对各自由基清除率为最大,对DPPH自由基的清除率为94.44%,对·OH的清除率为85.05%,对O₂-·清除率为53.85%。玛咖多肽对·OH、DPPH·及O₂-·的IC₅₀值分别为0.85、0.44、0.86 mg/mL,且表现出一定的量效关系。另外,玛咖多肽中Tyr、His、Lys、Pro四种氨基酸含量为16.98%,其氨基酸组成与抗氧化活性存在一定关系。该结果说明玛咖醇提液及玛咖蛋白均具有一定的抗氧化活性。     

樱花叶总黄酮的超声波法提取工艺优化及其抗氧化能力的研究

本文以樱花叶为研究对象,采用超声波法提取樱花叶总黄酮,确定樱花叶总黄酮的最佳提取工艺条件,并对其抗氧化能力进行探究。樱花叶总黄酮的最佳提取条件为:乙醇浓度60%,料液比1:35 g/mL,超声功率50 W,提取温度70 ℃,提取时间50 min,此条件下,樱花叶总黄酮的得率高达14.74%。樱花叶总黄酮的抗氧化能力结果表明,樱花叶总黄酮提取液的质量浓度越大,对·OH、DPPH·以及NaNO₂的清除能力就越强。当樱花叶总黄酮的质量浓度为1.2 mg/mL时,对·OH的清除能力为79.12%,当樱花叶总黄酮的质量浓度为0.5 mg/mL时,对DPPH·的清除能力为94.60%,当樱花叶总黄酮的质量浓度为1.4 mg/mL时,对NaNO₂的清除能力为66.55%。由此可见,樱花叶总黄酮具有较好的抗氧化活性,为研究开发樱花叶总黄酮提供了一定的理论依据。     

响应曲面法优化黄参茎叶多酚的提取工艺及其抗氧化活性

研究黄参茎叶多酚的超声波辅助提取工艺及抗氧化活性,以响应曲面法优化黄参茎叶多酚的超声波辅助提取工艺,同时以分光光度法测定提取物的还原力,对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除作用。结果表明:黄参茎叶多酚的最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数75%、提取温度70℃、料液比(g/mL)1∶35、提取时间30 min,此时多酚得率为1.1448%;黄参茎叶多酚对羟基自由基、DPPH自由基具有良好的清除能力,同时还具有一定的还原能力,并且在0.1~0.6 mg/mL质量浓度范围内,黄参茎叶多酚对羟基自由基、DPPH自由基的清除率高于BHT,表明其具有良好的抗氧化作用,可作为天然抗氧化剂进一步开发和利用。     

乙醇/硫酸铵双水相体系提取蕨麻多糖及其抑菌抗氧化活性

利用乙醇/(NH₄)₂SO₄在水溶液中形成的双水相体系作为多糖提取剂,采用响应曲面结合BBD中心组合实验设计,优化了蕨麻多糖双水相提取工艺;以滤纸片扩散半径作为抑菌活性考察指标;采用硫酸亚铁-过氧化氢-水杨酸氧化法和焦性没食子酸自氧化化法考察蕨麻多糖对活性自由基的清除能力。实验结果表明,在最佳提取条件下(1∶35 (g/mL),55 ℃,60 min),蕨麻多糖得率(14.46%±0.12%);抑菌实验结果表明,蕨麻多糖对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌属于抑菌高敏感型,对枯草芽孢杆菌属于抑制中度敏感型;蕨麻多糖对三种菌的抑制作用说明,多糖具有一定的抑制细菌活性,且对于不同的菌种的抑制作用具有选择性。抗氧化活性研究表明,蕨麻多糖具有清除自由基的能力,对·OH及O₂-·的清除率分别为(76.38%±0.21%)和(25.01%±0.14%);对应的极限浓度分别为3.6 mg/mL和3.0 mg/mL。以上实验结果说明,通过响应曲面优化结合BBD实验设计,能够确定蕨麻多糖提取因素与得率之间的二次函数模型,为多糖的提取提供了定性与定量评价指标;同时蕨麻的体外抑菌抗氧化活性表明,蕨麻多糖具有一定的体外抑菌抗氧化活性。     

响应面法优化超声波辅助提取黑加仑多酚工艺及其抗氧化活性分析

为提高黑加仑多酚的提取效率,采用乙醇溶液作为提取溶剂,超声波辅助对黑加仑果中多酚进行提取。通过单因素实验考察了乙醇体积分数、超声波功率、提取时间、料液比对黑加仑果多酚提取量的影响。在单因素实验的基础上,结合响应面试验优化提取工艺,并对黑加仑果多酚的抗氧化活性进行分析。结果表明:响应面法得到的黑加仑果多酚最佳提取工艺为:乙醇体积分数50%,超声波功率300 W,提取时间20 min,料液比1:10 g/mL。在上述提取条件下,黑加仑果多酚提取量为538.00 mg/100 g。抗氧化活性表明,黑加仑果多酚对DPPH自由基、羟自由基和ABTS+自由基清除率的IC₅₀值分别为7.97、7.92和5.26 mg/mL,表明黑加仑果多酚具有较好的抗氧化活性。该结果可为黑加仑果多酚的工业化生产提供参考。     

荠菜多糖的超声波提取工艺及其抑菌活性的研究

采用超声波技术提取荠菜多糖,以正交实验设计优化提取工艺条件。结果表明:荠菜多糖的最优提取工艺条件为:超声波功率400W、超声波处理时间35min、料液比1∶20、浸提温度70℃,荠菜粗多糖的提取率高达8.26%。为进一步研究荠菜多糖对几种常见肠道致病菌的抑制效果,进行了体外抑菌实验并测定了最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,荠菜多糖对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌都有一定的抑制效果,且随着荠菜多糖浓度的增加其抑菌效果逐渐增强。最小抑菌浓度分别为大肠杆菌8.0mg/mL,枯草杆菌6.0mg/mL,金黄色葡萄球菌10.0mg/mL,沙门氏菌10.0mg/mL。     

响应面法优化辣木籽多酚提取工艺及其抗氧化活性

本研究目的是确定辣木籽多酚的最佳提取工艺,并对其抗氧化活性进行初步研究。利用响应面法对辣木籽多酚的提取工艺进行了优化,以多酚提取量为指标,就乙醇体积分数、浸提温度、浸提时间和料液比进行了单因素实验,基于Box-Behnken和Design-Expert V8.0.6,进行了四因素三水平响应面法优化,并测定了辣木籽多酚提取物中植物活性成分含量以及其体外抗氧化活性。结果表明,回归模型极为显著(p<0.0001),可以对辣木籽多酚含量进行很好的分析和预测;优化后的最佳提取条件为:乙醇体积分数66.78%、浸提温度75.9 ℃、料液比1:12 g/mL、浸提时间1.24 h,此条件下模型预测的最大提取量为4.134 mg/g,实测值为(4.125±0.017) mg/g,与预测值无显著性差异。辣木籽多酚提取物具有较强的体外抗氧化活性,其总抗氧化活性、DPPH·和ABTS+·清除能力、FRAP还原力分别为(43.52±8.47)、(0.571±0.017)、(1.413±0.032)、(0.731±0.040) mg TEs/g extract。此优化工艺可行,辣木籽多酚具有一定的抗氧化能力。     

紫苏叶黄酮、多酚提取工艺优化及不同品种抗氧化活性比较

紫苏(Perilla frutescens (L.) Britt.)是食药两用植物之一,本研究为比较不同品种紫苏叶(‘韩国绿色PF1’,‘中国PF2’,‘韩国紫色PF3’,‘韩国双色PF4’,‘中国双色PF5’)中黄酮和多酚提取量,并探讨其体外抗氧化活性,利用单因素实验和正交试验法优化紫苏叶黄酮和多酚提取工艺。结果表明：最佳工艺参数为乙醇浓度75%、料液比1:80 g/mL、提取时间2 h、提取温度70℃,此提取条件下,黄酮、多酚提取量最高,分别为(16.82±0.60)和(80.42±2.66) mg/g。不同品种紫苏叶中,PF3的多酚提取量最高(17.77±0.29) mg/g,PF5黄酮提取量最高(80.42±2.66) mg/g。抗氧化活性结果表明,不同品种紫苏叶均具有良好的抗氧化活性,其中PF5的ABTS⁺自由基清除率(IC50 150.31±2.46μg/mL)、DPPH自由基清除能力(IC50 88.04±3.61μg/mL)及总还原能力最强(P<0.05)。相关性分析表明,多酚提取量与ABTS⁺自由基清除率、总还原力呈显...     

月桂酰基谷氨酸钠辅助微波萃取杜仲叶总多酚及提取物活性研究

摘要： 目的 优化氨基酸表面活性剂月桂酰基谷氨酸钠(lauroyl glutamate sodium, LGS)辅助微波萃取杜仲叶总多酚的提取工艺,并比较不同提取工艺得到的提取物(水提物、LGS水提物、醇提物)的体外抗氧化能力及对酪氨酸酶的作用。方法 采用单因素试验结合响应面法,以总多酚得率为评价指标,对杜仲叶LGS辅助微波萃取总多酚进行工艺优化;采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)对不同工艺得到的提取物进行活性成分对比分析,并对不同提取物的抗氧化活性及对酪氨酸酶的作用进行比较。结果 杜仲叶LGS辅助微波萃取的最佳工艺为：LGS浓度2.4×10-2 mol/L,料液比1:27(g/mL),静置时间78 min,微波功率 200 W,微波时间2.6 min,提取2次,得到的LGS提取液总多酚得率为(60.20±0.65 mg/g),显著优于水提液(45.75±0.38 mg/g,P<0.05),更接近醇提液(76.62±0.52 mg/g)。杜仲叶多酚特征成分绿原酸在提取物中的含量为醇提液13.18±0.33 mg/g) > LGS水提液(12.40±0.24 mg/g) > 水提液11.18±0.27 mg/g),与总多酚提取得率一致。三种提取物对DPPH?、ABTS?、?OH、PTIO?的清除率无显著差异（P > 0.05）,均随其质量浓度升高而增强。三种提取物对酪氨酸酶的促进作用表现为醇提物> LGS水提物>水提物,与总多酚/绿原酸提取得率保持一致。分子对接结果显示绿原酸能增强酪氨酸酶与左旋多巴的结合力,改变左旋多巴与酪氨酸酶的结合位点,从而推动左旋多巴氧化进程。结论 所选取的提取工艺合理、可行,LGS辅助微波提取可提高杜仲叶总多酚得率,得到的提取物具有良好的体外抗氧化能力,并可提高酪氨酸酶活性。     

微波辅助提取橄榄苦苷及其抗氧化性能研究

以油橄榄叶为原料,研究微波辅助提取橄榄苦苷的最佳工艺。通过单因素实验考察了溶剂种类,提取时间、提取温度、提取功率、乙醇浓度和料液比对橄榄苦苷得率的影响。在单因素实验的基础上,选取提取时间、提取温度和料液比进行L₉(33)正交实验,结果表明,最优提取条件为:乙醇浓度75%,料液比1:50 g/mL,提取温度40℃,提取时间3 min,提取功率600 W。在该条件下橄榄苦苷得率为(8.06%±0.06%),总多酚、总黄酮含量为(7.85%±0.01%)和(2.20%±0.11%),而热浸提橄榄苦苷的得率为(6.61%±0.16%),总多酚、总黄酮含量为(6.99%±0.13%)和(1.25%±0.11%)。同时探讨了不同干燥方式对DPPH自由基清除能力的影响,发现鼓风干燥(30℃)的效果高于真空干燥和真空冷冻干燥,其IC₅₀值分别为0.65、0.71和0.69 mg/mL。微波辅助提取橄榄苦苷等活性物质的含量高于热浸提,鼓风干燥(30℃)优于其他干燥方式,本文为油橄榄叶活性物质的提取和保存提供借鉴。     

短梗大参多酚的提取及体外抗氧化性研究

为开发利用短梗大参树皮中的活性成分,本文对影响短梗大参多酚提取量的工艺参数(提取溶剂、乙醇体积分数、料液比、提取温度和提取时间)进行了优化;以DPPH自由基清除率和羟基自由基清除率为指标,研究了短梗大参多酚的体外抗氧化性能。结果表明:短梗大参多酚提取的最优工艺条件为乙醇体积分数50%、料液比1:40 (g/mL)、提取时间50 min、提取温度45 ℃,在该参数条件下多酚提取量为(0.320±0.02)mEq GA/g;短梗大参多酚对DPPH、羟自由基均具有较好的清除效果,其半清除浓度(EC₅₀)分别为43.4 μg/mL和37.6 μg/mL。短梗大参多酚具有较好的体外抗氧化活性,可作为一种潜在的抗氧化剂进行开发利用。     

响应面优化鸡油菌多酚的超声辅助提取工艺及其抗氧化活性

以鸡油菌为原料获得鸡油菌多酚提取的最佳工艺条件,采用超声波辅助乙醇提取法,以料液比、超声温度、乙醇浓度、超声时间为单因素,利用Box-Behnken方法进行四因素三水平的实验设计优化了多酚最佳提取工艺条件。同时,以超高效液相色谱质谱技术UPLC-MS对鸡油菌中的多酚成分进行了分析,采用DPPH法、ABTS法、FRAP法对多酚进行了体外抗氧化活性评价。此外,比较了乙醇浸提、索式热回流提取与超声波辅助乙醇提取三种方法对鸡油菌多酚含量的差异。结果表明:采用超声波辅助乙醇提取鸡油菌多酚的最佳条件为料液比1:32（g/mL）、超声温度40 ℃、乙醇浓度40%、超声时间21 min;超声辅助提取多酚的量最大,为11.80 mg/g;浸提多酚含量为8.60 mg/g;索式热回流多酚含量为3.60 mg/g。UPLC-MS分析结果表明鸡油菌多酚提取物主要包含没食子酸、咖啡酸和丁香酸酚类成分;与传统方法比较,超声波辅助提取法是一种简单快速高效的多酚提取方法;三种体外抗氧化活性试验表明,鸡油菌多酚具有较强的体外抗氧化活性。     

白肉番石榴总黄酮提取工艺优化及体外抗氧化活性分析

对白肉番石榴中总黄酮的提取工艺进行优化,并研究其体外的抗氧化活性。以珍珠番石榴(白肉)的叶、皮为原料,在单因素实验的基础上,以总黄酮提取量为指标,采用正交试验优化获得了番石榴叶、皮中总黄酮的提取工艺。在此基础上提取番石榴果肉中的总黄酮,然后比较番石榴叶、皮、果肉中黄酮的体外抗氧化作用。结果表明,番石榴叶、皮的总黄酮的最优提取工艺略有差异。番石榴叶总黄酮的提取最优工艺为:乙醇浓度50%,提取温度65 ℃,料液比1:20 (g/mL),提取时间135 min。番石榴皮总黄酮提取最优工艺为:乙醇浓度60%,提取温度45 ℃,料液比1:7 (g/mL),提取时间105 min。在最优条件下番石榴叶、皮总黄酮的提取量分别为(188.66±0.23)、(48.03±0.16) mg/g。番石榴叶、皮、果肉总黄酮在ABTS自由基及羟基自由基清除实验、铁还原力及总抗氧化力测定分析中显示良好的抗氧化活性,其中番石榴叶总黄酮的体外抗氧化能力最强。由此说明番石榴黄酮有望成为一种良好的天然抗氧化剂。