转基因稻米加工食品的PCR检测技术研究

本文对转基因稻米及其加工食品进行了针对标记基因bar、CaMV35S启动子和Nos终止子DNA序列的PCR检测.结果表明,改良SDS法适于提取转基因稻米以及经过蒸煮、微波膨化加工后稻米食品中的DNA并能够满足PCR检测的需要.食品加工使稻米基因组DNA降解为较小的片段,但不影响PCR检测效果,PCR技术能够检测稻米加工食品中的转基因成分.     

玉米加工食品中转基因成分的PCR检测

通过分子生物学手段，以聚合酶链式反应（PCR）技术为基础，建立了从玉米加工食品中检测转基因成分的方法，实验分别采用CTAB法（十六烷基三乙基溴化铵）和试剂盒（Kit)方法对市场上选购的玉米片，玉米面，香脆玉米角，窝窝头，爆玉米等5种玉米食品中的DNA进行了提取，并用聚合酶链式反应（PCR）方法对玉米内标基因Inverase进行扩增，采用凝胶电泳对结果分析，比较两种DNA提取方法的优越性，再对通常转入的基因构建元件35S启动子，NOS终止子进行扩增对玉米转基因成分进行检验，结果表明：试剂盒法对玉米加工食品中的总DNA有更好的提取效果，并得到一个适宜的扩增条件参数；5种玉米食品的转基因检测结果均为阳性，即都含有转基因成分。     

PCR技术在转基因农产品检测中的应用

随着转基因农产品的迅速发展和普及，与其安全性相关的检测技术也日益受到人们的重视。本文介绍了PCR技术的原理，及其在转基因农产品检测中的应用情况。     

PCR方法对转基因食品定性检测的研究

转基因食品的检测一般基于聚合酶链式反应（PCR）方法，对35S启动子和NOS终止子进行筛选。本实验以转基因大豆、玉米（购自Fluka）为参照物，转基因含量为0％，1％，2％，5％的样品均获得正确识别。以上介绍的方法能对转基因原材料及加工成品实施高精度、高灵敏的检测。     

PCR技术在食品工程中的应用

简述了聚合酶链反应(PCR)技术的基本原理、特点及其在食品微生物检测、转基因食品检验等食品工程领域的应用情况。     

实时荧光定量PCR在食品检测领域中应用

实时荧光定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术;该技术不仅实现对DNA模板定量,且具有灵敏度高、特异性强、无污染性、及实时性和准确性等特点。该文主要介绍实时荧光定量PCR原理和在食品检测中应用,及其在食品领域发展前景。     

转基因食品的快速PCR鉴定

用十六烷基-二甲基-乙基-溴化铵(CTAB)法快速高效地从样品中提取了可供分析的基因组DNA,经PCR扩增,鉴定了含有35S启动子和NOS终止子的转基因样品.该方法的灵敏度可达0.1%,并且具有很好的稳定性.     

食品中转基因成分的检测

为了满足转基因食品标记的需要,首先必须检测鉴定食品中外缘基因或其基因产物的有无。本文简单介绍了外缘基因的结构和常见的检测方法,重点介绍了一种比较有效的检控技术－PCR。     

应用单管半巢式PCR技术筛查转基因食品

建立转基因作物中常见的两种外源调控元件的单管半巢式聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）测方法,为转基因食品的筛选检测提供一种快速、精确的方法。针对6 种转基因作物中CaMV35S启动子和NOS终止子的一致性核苷酸序列,分别设计巢式PCR的内、外引物,在测试不同引物组合的扩增效率基础上,建立CaMV35S启动子和NOS终止子的单管半巢式PCR方法。结果表明,上述方法对两种转基因成分具有良好的特异性,检测灵敏度分别为0.01%和0.05%,显著优于常规PCR方法。该方法具有便捷、准确、灵敏等特点,适合筛查食品中的转基因成分。     

食品检测工程中转基因食品检测技术的应用探究

目前的转基因技术已经被广泛的应用在人们的食品需要中了,这种转基因技术能够增强所培育的植物的产量、抗病能力、抗虫害能力等等,已能够提高农产品的稳定性,同时已能够是农产品使用各个季节。本文通过对转基因食品进行了简要的概述,分析了当前转基因食品的现状,重点探究了转基因食品检测技术的核酸水平的检测技术和转基因食品检测技术的转基因成分蛋白水平上的检测方法。     

耶拿荧光定量PCR在转基因饲料检测中的应用

目的优化耶拿荧光定量PCR在转基因饲料检测中的检测条件。方法采用已知转基因品系的玉米蛋白粉样品,通过选择常用的不同品牌的Premix溶液、8连管及不同的反应程序进行C_t值对比,得出最佳的检测方案。结果最佳的检测方案如下:Takara Premix溶液、Light Cycler 8-Tube Strips(white)八连管及95℃30s,95℃5 s-60℃30 s,40个循环的反应程序,在此条件下可检测出饲料产品中痕量的转基因成分。结论耶拿荧光定量PCR对饲料中痕量转基因成分的检测结果可靠,适用于饲料转基因成分的检测。     

植物源性转基因食品PCR衍生技术研究进展

转基因食品尤以植物源性转基因食品的安全性已成为公众关注的焦点。针对植物源性转基因食品甄别与安全性评估,已有多种检测手段得到广泛应用。PCR衍生技术因为具有高特异性、高敏感性等技术优势,为植物源性转基因食品的快速、准确检测提供了有效方法。PCR衍生技术包括多重PCR技术、实时荧光定量PCR技术、多重实时荧光定量PCR技术、多重巢式PCR技术以及多重PCR-DHPLC技术。本文就植物源性转基因食品检测的PCR衍生技术的研究进展作简要综述。      

利用多重PCR方法检测7种转基因卡诺拉油菜籽品种(系)研究

为对商业化进口7种转基因卡诺拉油菜籽品种(系)进行高通量、快速、准确检测,建立可用于鉴定7种转基因卡诺拉油菜籽品种(系)多重PCR检测方法。首先建立7种转基因油菜籽品种(系)稳定单重PCR检测体系,在此基础上再建立和优化7种转基因油菜籽品种(系)多重PCR检测体系;获得4组可用于鉴定7种转基因卡诺拉油菜籽品种(系)多重PCR检测体系,其中1组为四重PCR检测体系,3组为两重PCR检测体系。优化多重PCR体系具有较高稳定性和重复性,可作为检测该7种转基因油菜籽品种(系)有效方法。     

PCR法定性检测大豆食用油中转基因成分

针对大豆食用油中核酸含量低且被严重破坏、DNA难以提取的问题,对CTAB法进行优化,有效从食用油中提取到可用于PCR扩增反应的DNA模板。同时定性检测出大豆内源基因lectin,外源调控序列启动子CaMV35S、终止子Nos及目的基因CP4-EPSPS序列,成功建立了基于PCR技术在大豆食用油中快速检测转基因成分的方法。     

公共引物介导的多重定量PCR技术在转基因大豆检测中的应用研究

目的 建立公共引物介导的多重定量PCR法检测我国农业农村部允许进口的6种转基因大豆(包括:MON87701、DP356043、CV-127、MON87769、MON87705、MON87708)的方法.方法 设计并筛选出针对本研究涉及的6种转基因大豆对特异性引物,在每对特异性引物的5'端均加上一段公共引物,形成特异性嵌...     

食品中转基因成分的PCR快速检测研究

为建立食品中转基因成分的快速检测方法，针对转基因大豆、玉米、油菜的多个相对稳定的转基因元件，包括35S、NOS、EPSPS、Cry1A、NPTⅡ等基因，同时选定植物本身固有的基因：大豆Lectin、玉米IVR、油菜Napin基因作为内源参照指示基因，设计、筛选出9对引物分别组成多重PCR．结合高灵敏度的聚丙烯酰胺凝胶电泳组成快速检测体系对转基因食品进行检测，1～2d能完成整个检测过程。经测试：该检测体系稳定可靠、灵敏准确、特异性好，且操作简便、成本低廉，是一种进行转基因食品检测的良好技术模式。     

PCR技术在食品沙门氏菌检测中的应用

介绍了PCR技术的原理及其在食品沙门氏菌检测中的应用,同时提出了尚存在的问题,并对其应用前景作了展望。     

转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测 方法的建立

目的建立转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法。方法根据转基因苜蓿草品系J101 5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物,建立了转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J101检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为80 pg,相当于50拷贝转基因苜蓿草J101基因组DNA。结论本研究建立的转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确地对转基因苜蓿草J101进行检测分析。     

关于转基因食品安全性

随着生物技术的发展 ,生物技术已开始在食品领域中得到广泛运用 ,并以转基因食品的形式出现。所谓转基因食品即是 :利用分子生物学技术 ,将某些生物的基因转移到其他物种中去 ,改造生物的遗传物质使其在性状、营养品质、消费品质方面向人们所需要的目标转变 ,以转基因生物为食物或为原料加工生产的食品就是转基因食品。转基因食品的研究已有几十年的历史 ,但真正的商业化是近十年的事。 90年代初市场上第一个转基因食品出现在美国 ,此后 ,转基因食品越来越多 ,据统计 ,美国食品和药物管理局 FDA确定的转基因品种已有 4 3个。全世界转基因…     

Event-specific qualitative and quantitative PCR detection of genetically modified rapeseed Topas 19/2

The herbicide-tolerant transgenic rapeseed Topas 19/2 (synonym HCN92) has been approved for environmental release in Canada, Japan, Australia and the USA, and exported to a number of other countries as raw material. The purpose of this study was to establish event-specific qualitative and quantitative detection methods for Topas 19/2. The 3′-integration junction sequence spanning the host plant DNA and the integrated transgene of the Topas 19/2 event was isolated and identified. The event-specific qualitative detection method was established to produce an amplicon of 110 basepairs (bp) with an absolute detection limit of 10 initial template copies. The event-specific quantitative detection method was developed with the limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) being approximately 5 and 50 initial template copies, respectively. The developed real-time PCR systems were assessed using two mixed rapeseed samples with known Topas 19/2 contents. Expected results were obtained.