热处理对食物致敏性的影响及其体外细胞学评价

综述了热加工处理对典型食物过敏原致敏性的影响,重点介绍了体外细胞学评价方法在评价食物过敏原致敏性变化方面的一些研究进展。人们生活方式和环境的改变,以及日常食物丰富所致过敏诱发因素的增加,食物过敏发生比例大幅提高,食品过敏问题已成为目前国内外食品安全研究的热点之一。食品热加工可以改变食物过敏原的蛋白表位结构、聚合特性以及过敏原诱发淋巴细胞释放细胞因子的特性。由于食品基质、配料和处理过程的差异,加工过程中食品致敏性的变化尚无普遍规律可循。通过对典型食物过敏原的分离纯化、分子鉴定,可以追踪过敏原组分在食物加工过程中的改变规律。目前过敏效应分子IgE抗体的水平变化常常被作为致敏性评价的指标,酶联免疫分析和免疫印迹试验是常用的测定手段。然而,对于过敏反应阶段由IgE抗体与效应细胞上FcεR受体之间的结合引发系列炎症反应的部分,则无法通过这些方法进行判断。全面评价食物过敏原的致敏效应不但需要监测IgE抗体水平,也需要监测效应细胞致敏程度,以及释放的细胞因子水平。     

免疫耐受在牛乳过敏中的研究进展

食物过敏是机体对过敏原产生的一种不良免疫反应,而免疫耐受是指机体对摄入的食物抗原不产生此类免疫应答.近年来,牛乳过敏的发生率越来越高,大部分牛乳过敏的儿童3岁之后出现了免疫耐受.基于此,介绍了牛乳过敏及引发免疫耐受的相关免疫细胞包括树突状细胞、调节性B细胞、调节性T细胞在免疫耐受中的作用及3种诱导免疫耐受的方法.     

牛乳β-乳球蛋白过敏原表位及其潜在应用

过敏原表位是过敏原直接参与免疫反应的物质基础, 也是导致过敏反应的“元凶”。牛乳β-乳球蛋白是lipocalin家族的代表和常用模式蛋白, 它的表位信息比较完整, 拥有7个人血清IgE和6个IgG的线性表位、3个IgE结合的构象性表位以及7个T细胞表位。另外, 它的动物源血清IgE、IgG和T细胞表位也在不断被发现。牛乳β-乳球蛋白的表位信息为基于表位的应用提供了重要的支撑, 它们的应用主要涉及到预测食物过敏原的致敏性, 食物过敏的交叉反应, 食物过敏的诊断, 食物过敏的免疫治疗以及食物过敏原的检测等5个方面。     

乳酸菌降低过敏食物致敏性的研究进展

食物过敏的患病率在近几十年内急剧上升,越来越多的证据表明机体内微生物的生态失调是引起食物过敏的主要原因,因此乳酸菌等益生菌对过敏症状的潜在预防和治疗效果引起了人们的广泛关注。大量研究表明乳酸菌不仅能够通过发酵降低食物过敏原的致敏性,而且有可能通过调节肠道菌群的平衡在宿主免疫系统的发育和调节中发挥作用,从而改变过敏性疾病的发病风险。本文综述了乳酸菌的分类和生物特性,乳酸菌发酵在降低牛奶、大豆、花生、小麦等主要食物过敏原中发挥的作用,乳酸菌发挥免疫调节作用的主要机制,包括改变抗原递呈细胞的表型、调节Th1/Th2平衡、诱导调节性T细胞、增强肠道屏障功能。以期通过乳酸菌及其发酵作用达到预防和/或治疗食物过敏的效果,为乳酸菌的研究及应用提供参考。     

肠道黏膜免疫细胞在食物致敏中的作用研究进展

食物过敏是食品安全的重要问题之一,且大部分食物过敏是在胃肠道消化过程中引发的。食物过敏原蛋白 经胃肠道消化后形成肽段,其中部分消化肽在通过肠上皮组织屏障进入肠道黏膜系统后,被递呈给相关免疫细胞, 从而引发肠道黏膜系统中一系列免疫应答反应。本文阐述了消化肽进入肠道黏膜后,肠上皮细胞、树突状细胞、B 淋巴细胞及CD4＋ T淋巴细胞在黏膜免疫致敏过程中所起的作用,为探讨食物过敏引发胃肠道免疫的工作机制提供 了理论依据。     

美拉德反应调节食物过敏反应的研究进展

近年来食物过敏发生率急剧增加,已是全球关注的公共卫生问题。美拉德反应作为食品加工和储存过程中最重要的化学反应之一,过敏原蛋白被修饰后由于结构发生了变化,必然引起致敏性改变,进而可能引发机体对于不同处理条件的抗原免疫耐受不一致,导致过敏反应。本文首先介绍了美拉德反应修饰蛋白质的过程及机理,进而解析不同影响因素调节美拉德反应终产物对致敏性的影响,最后阐述影响肠道菌群及其免疫应答机制的相关研究进行综述,并对美拉德反应作为一种尚未被完全开发和应用的加工方式进行展望。     

虾过敏C57／BL6小鼠动物模型的建立

目的：建立C57／BL6小鼠虾过敏动物模型及其腹腔肥大细胞过敏模型。方法：运用虾蛋白粗提液免疫致敏C57／BL6小鼠,采用Western Blot鉴定致敏小鼠血清中特异性lgE和lgG1抗体;收集小鼠腹腔致敏肥大细胞（PMC）,运用虾不同的过敏原组分诱导PMC体外定向释放组胺,HPLC和荧光酶标仪法检测组胺释放水平。结果：Western Blot结果显示致敏小鼠血清IgE和IgGl与相对分子量为36ku的原肌球蛋白反应率分别为57．1％和74．1％,与80ku过敏原的反应率均为42．9％,与21ku过敏原的反应率分别为42．9％和28．6％。HPLC和荧光酶标仪法检测PMC定向释放组胺的结果无显著差异,36ku的原肌球蛋白定向诱导组胺的释放率最高,分别为18．52％和21．59％,80ku和21ku蛋白次之,表明36ku的原肌球蛋白是C57／BL6小鼠的主要虾过敏原,21ku和80ku蛋白是次要过敏原,这与人类虾过敏的状况相一致。结论：C57／BL6小鼠是一种有效的虾过敏动物模型,其腹腔肥大细胞是一种可行的检测和评价食物过敏原的细胞模型。     

对虾原肌球蛋白不同致敏途径对BALB/c小鼠致敏性的影响

随着食物过敏现象的日益普遍,其已成为工业化国家一个严重的公众健康问题。食物蛋白致敏机理的相关 研究大多借助于两大类小鼠模型,即口服致敏模型和局部或皮肤致敏模型。然而,不同模型之间的差异以及如何选 择合适的模型进行研究却鲜有人关注。鉴于此,本研究旨在通过比较对虾原肌球蛋白口服灌胃和腹腔注射两种给药 途径对BALB/c小鼠致敏性的影响,寻求最佳给药方式,以便建立有效的动物模型,并在分子及免疫水平研究其致 敏机理,从而为食物过敏原动物模型的构建提供一定的理论依据,也为研究食物过敏原致敏机制以及预防治疗食物 过敏提供重要的模型依据。结果表明,腹腔注射小鼠血清中特异性免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig）E、组胺以及 辅助性T细胞（helper T cells,Th）2型细胞因子含量均高于口服灌胃小鼠,其致敏性更好。此外,口服灌胃小鼠血 清特异性IgG2a、干扰素-γ、调节性T细胞水平增加,表明虽有黏膜佐剂作用,但口服给药仍可能使小鼠产生口服免 疫耐受,从而降低对虾原肌球蛋白对其的致敏性。本研究表明,腹腔注射原肌球蛋白比口服灌胃更易使小鼠致敏, 其Th1/Th2平衡被打破,Th2反应占据优势,更适合用于构建食物致敏动物模型。     

食物过敏发病机制及诊疗策略的研究进展

随着人们食物多样性日益增加,食物过敏的发病率逐年升高,已经成为全世界越来越关注的公共卫生问题。食物过敏可以由IgE（免疫球蛋白E）或非IgE介导,包括过敏性反应、花粉食品综合征、食物蛋白诱发肠炎综合征、嗜酸性粒细胞引起的胃肠疾病和特应性皮炎,其中IgE介导的速发型过敏反应在食物过敏中最常见。食物过敏原可分为主要过敏原与次要过敏原,一般为蛋白质或糖蛋白。许多复杂的人体自身因素（如免疫耐受、遗传因素和胃肠道因素）和食物过敏原的特性（如抗原表位和热变性）影响食物过敏的发生和发展,随着对这些因素如何相互作用以及发病机制的不断深入研究,新型的诊断和治疗方法正在不断的涌现和发展,对寻找有效的个体化和规范化诊疗策略具有重要的意义。     

食物过敏原致敏性评估方法研究进展

食物过敏是一个全球性公共卫生问题,检测和评价食物过敏原的致敏性也日益受到重视。食物过敏原致敏性的评估方法可分为体内法、体外法和生物信息学比对法。体内法主要包括双盲安慰剂对照的食物激发实验、皮肤实验和动物模型。体外法包括过敏原吸附抑制实验、免疫印迹法、酶联免疫吸附实验和组胺释放实验等。生物信息学比对法主要用于转基因食物中过敏原的致敏性评价。虽然评价食物过敏原致敏性的方法众多,但是目前还没有一种独立的方法能够完全有效地评价食物过敏原的致敏性。因此,应尽快建立快速、高效、精准的评价方法。     

十二烷醇对酵母细胞影响的研究

以残糖和细胞生长OD值为分析指标,探讨了十二烷醇对酵母游离细胞和固定化细胞的影响.结果表明:萃取剂对游离细胞毒害性比较大,发酵残糖含量高；固定化细胞采用外部随程萃取发酵则可以忽略其对细胞的毒害作用,发酵残糖几乎没有.     

Cell microarray for screening feeder cells for differentiation of embryonic stem cells

Microarrays are currently recognized as one of major tools in the assessment of gene expression via cDNA or RNA analysis and are now accepted as a powerful experimental tool for high-throughput screening of a large number of samples, such as cDNA and siRNAs. In this study, we examined the potential of the microarray methodology for high-throughput screening of candidate cells as feeder cells which effectively differentiate embryonic stem (ES) cells to the specific lineage. Cell arrays were prepared by applying three kinds of cells, PA6, human umbilical vein endothelial, and COS-1 cells, to circular spots, 2 mm in diameter, on a glass plate, followed by the application of mouse ES cells to the cell microarray. After 8 d in culture, TuJ1 (neuron-specific class III beta-tubulin) immunocytochemical staining clearly demonstrated that only PA6 cell spots had the capability to induce ES cells to neuronal differentiation. Although this is a model experiment, these findings clearly indicate that the cell microarray will become a powerful tool for high-throughput screening large numbers of candidate feeder cells for specific differentiation.     

亚硒酸钠在SGC-7901细胞生长中的抑制作用

目的：研究亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长的影响。方法：应用细胞培养和SRB实验探讨了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长曲线的影响：应用集落形成试验、分裂指数试验研究了亚硒酸钠对SGC-7901细胞集落形成和分裂指数的影响；应用流式细胞仪检测了亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长周期的影响；应用电镜、TUNEL染色及流式细胞仪观察了亚硒酸钠诱导SGC-7901细胞凋亡的作用。结果：亚硒酸钠溶液对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成、分裂指数有明显的抑制作用，其抑制作用与其作用浓度和作用时间呈正相关。流式细胞仪检测显示亚硒酸钠作用SGC-7901细胞24h后，细胞周期发生改变，G1期细胞百分率减少，S期细胞百分率增加，与对照组相比有显著性差异（p〈0．05）：电镜下，细胞核固缩，染色质凝集呈新月形紧贴于核膜周边，核膜扭曲；DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”；TUNEL染色法检测细胞凋亡指数在10．4％～33．4％。结论：亚硒酸钠溶液对SGC-7901细胞的生长具有抑制作用，其抑制作用程度与其作用浓度和时间呈正相关：亚硒酸钠通过阻滞细胞S期抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡可能是其抑制SGC-7901细胞生长的机理之一。     

菱灵颗粒有效成分的抗肿瘤作用研究

目的:研究菱灵颗粒有效成分-化合物Ⅰ在体外对Hela细胞的作用及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)还原法检测化合物Ⅰ对肿瘤生长抑制作用,应用光学显微镜、透射电子显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况。结果:化合物Ⅰ对人宫颈癌细胞生长具有明显的抑制作用及诱导细胞凋亡作用,且这种作用有剂量依赖关系,化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组30h抑瘤率为52.04%、34.44%、23.72%,100、50、25、12.5、6.25、3.125mg/L剂量组30h抑瘤率显著正相关,相关系数r=0.9860(p<0.01),IC50值为10.9mg/L。透射电子显微镜对化合物Ⅰ25、12.5、6.25mg/L剂量组受试细胞观察,均出现不同程度细胞凋亡现象,细胞核明显皱缩、染色质趋边凝聚、线粒体空化等特征。流式细胞仪检测发现凋亡峰。结论:化合物Ⅰ对Hela细胞增殖抑制作用明显并且有诱导细胞凋亡作用。     

参数化单胞计算三维编织预制件纤维体积含量

在Pro/E中建立了三维编织预制件的内部单胞、表面单胞和棱角单胞的3D实体模型,并对模型进行了参数化设计。当编织工艺参数改变时能自动生成新的单胞模型,单胞纤维体积由Pro/E的模型分析功能直接输出。提出了基于参数化单胞计算预制件纤维体积含量的公式。计算了长方体形预制件的纤维体积含量,并与实测值进行比较,理论计算与实验结果吻合良好。计算了扇环形预制件的纤维体积含量,为复杂外形预制件纤维体积含量的计算提供了新方法。     

Cell surface hydrophobicity and colony morphology of Trichosporon asahii clinical isolates

Trichosporon asahii is a pathogenic basidiomycetous yeast. Individual strains of T. asahii have different colony morphologies. However, it is not clear whether cell surface phenotypes differ among the colony morphologies. Here we characterized the cell surface hydrophobicity and analysed the carbohydrate contents of the cell surface polysaccharides in T. asahii clinical isolates with various colony morphologies. Among the three distinctive colony morphologies obtained from one clinical isolate, the white‐type morphology exhibited higher hydrophobicity. The hydrophobicity of heat‐killed T. asahii cells was greatly reduced after periodate oxidation of the cell surface carbohydrates. Furthermore, the cell wall and extracellular polysaccharide components differed among the morphologies. Our results suggest that T. asahii cell surface hydrophobicity is affected by cell surface carbohydrate composition. Copyright © 2016 John Wiley & Sons, Ltd.     

水凝胶封装细胞研究进展

近年来,活细胞广泛应用于组织工程、细胞治疗等领域。为了保证活细胞在应用过程中的活性与功能完整性,在细胞表面构建保护性外壳的细胞封装策略应运而生。细胞封装可以避免免疫细胞、抗体、酶等物质与细胞的直接接触,同时保证氧气、营养物质、代谢物等一些小尺寸物质的自由交换。水凝胶因其与细胞基质相似且可形成3D结构模拟细胞微环境而被广泛用于细胞封装。本文首先对细胞封装进行了简单介绍,随后在多细胞封装中重点介绍了木质纤维素基水凝胶在细胞封装中的应用;在单细胞封装中从层层（LbL）自组装、接枝到表面（grafting to）和从表面接枝（grafting from）的3种方法,分别阐述了水凝胶壳层对细胞活性与功能特性的影响。最后讨论了水凝胶封装细胞未来发展方向与前景,希望能为医药食品等领域活细胞的储存及应用提供参考。     

Selenomethionine increases proliferation and reduces apoptosis in bovine mammary epithelial cells under oxidative stress

The decline in mammary epithelial cell number as lactation progresses may be due, in part, to oxidative stress. Selenium is an integral component of several antioxidant enzymes. The present study was conducted to examine the effect of oxidative stress and selenomethionine (SeMet) on morphology, viability, apoptosis, and proliferation of bovine mammary epithelial cells (BMEC) in primary culture. Cells were isolated from mammary glands of lactating dairy cows and grown for 3 d in a low-serum gel system containing lactogenic hormones and 0 or 100 μM H₂O₂ with 0, 10, 20, or 50 nM SeMet. Hydrogen peroxide stress increased intracellular H₂O₂ to 3 times control concentrations and induced a loss of cuboidal morphology, cell-cell contact, and viability of BMEC by 25%. Apoptotic cell number more than doubled during oxidative stress, but proliferating cell number was not affected. Supplementation with SeMet increased glutathione peroxidase activity 2-fold and restored intracellular H₂O₂ to control levels with a concomitant return of morphology and viability to normal. Apoptotic BMEC number was decreased 76% below control levels by SeMet and proliferating cell number was increased 4.2-fold. These findings suggest that SeMet modulated apoptosis and proliferation independently of a selenoprotein-mediated reduction of H₂O₂. In conclusion, SeMet supplementation protects BMEC from H₂O₂-induced apoptosis and increased proliferation and cell viability under conditions of oxidative stress.     

芹菜素对甲状腺癌BCPAP细胞生长及细胞周期的影响

研究芹菜素对人乳头状甲状腺癌BCPAP细胞生长的抑制作用及对细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度芹菜素在24h对BCPAP细胞的抑制作用,以及12.5,25.0,50.0μmol/L芹菜素分别在24,48,72h对BCPAP细胞的抑制作用;通过明场细胞形态学照片分析,对比不同浓度芹菜素对BCPAP细胞形态的影响,评价其对细胞生长的抑制作用。利用流式细胞仪检测BCPAP细胞周期和凋亡。结果表明,不同浓度(12.5~100.0μmol/L)芹菜素对BCPAP细胞的毒性有明显剂量和时间依赖性,其24h的IC50值为40.65μmol/L。芹菜素对BCPAP细胞的形态学变化有显著影响,高浓度芹菜素强烈抑制BCPAP细胞数目的增长。芹菜素可使BCPAP细胞周期的构成发生明显的变化并诱导细胞凋亡。芹菜素对BCPAP细胞有较明显的细胞毒性和生长抑制作用,其抑制机制可能是使BCPAP细胞生长停滞在G2/M期并诱导细胞凋亡,使得细胞生存率下降,从而抑制细胞活性和数目增长。     

苦荞异槲皮苷对人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响

从苦荞中提取制备异槲皮苷,研究其对人胃癌细胞SGC-7901增殖、凋亡、迁移和细胞周期的影响。将异槲皮苷作用于人胃癌SGC-7901细胞和人肾上皮细胞系293T,通过噻唑蓝法检测异槲皮苷对其增殖的影响;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamino-2-phenyl indole,DAPI) 荧光染色法观察细胞核的形态学变化;划痕擦伤迁移实验检测异槲皮苷对SGC-7901细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测异槲皮苷对SGC-7901细胞凋亡及细胞周期的影响。结果表明：苦荞异槲皮苷可以抑制SGC-7901细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖性,当用100 μmol/L异槲皮苷作用细胞48 h后,对SGC-7901细胞的增殖抑制率达到35.92%, 而对人肾上皮细胞系293T的增殖抑制率仅为 3.15%;DAPI荧光染色法观察异槲皮苷处理细胞后,染色体凝聚,有凋亡小体产生;划痕擦伤实验显示,异槲皮苷能抑制SGC-7901细胞的迁移;流式细胞术检测结果表明,异槲皮苷可使G1和S期细胞减少,G2/M期细胞增多,且细胞凋亡率明显增加。综上所述,苦荞麦异槲皮苷能够诱导SGC-7901细胞发生凋亡,阻断细胞周期并抑制细胞增殖和迁移。