培养基成分对酸土脂环酸芽孢杆菌生长及芽孢形成的影响

本研究通过单因素和双因素交互实验,研究多种营养因子对酸土脂环酸芽孢杆菌生长和芽孢形成的影响。结果表明,葡萄糖、酵母浸粉、Mn²⁺、Mg²⁺对酸土脂环酸芽孢杆菌的菌体生长和芽孢形成影响显著(p<0.05)。其中高浓度的Mn²⁺对酸土脂环酸芽孢杆菌的菌体生长有抑制作用,但能促进其芽孢形成。而Ca²⁺、NH₄⁺和K⁺单一作用时,对其菌体生长和芽孢形成影响不显著(p>0.05),但Ca²⁺与K⁺或者NH₄⁺协同作用时,可以促进酸土脂环酸芽孢杆菌的菌体生长和芽孢形成。研究结果揭示了培养基中的营养成分对该菌菌体生长和芽孢形成的影响,为控制该菌芽孢污染及酸性果蔬产品保藏提供实验和理论依据。     

脂环酸芽孢杆菌对苹果汁品质的影响

为了考察分离自浓缩苹果汁生产线的脂环酸芽孢杆菌对苹果汁品质的影响,将已经分纯并作初步鉴定的18株脂环酸芽孢杆菌和DSM3922接入100%苹果汁中,37℃培养,定期取样观察其感官品质的变化,并测定其OD360nm和浊度。试验结果表明:所有试验菌株均能使苹果汁产生浑浊、沉淀和异味,并且使吸光值和浊度增大;随着培养时间的延长,苹果汁变质程度加剧;不同菌株使苹果汁变质的程度不同,其中编号为7-1、2-1、DSM3922、3-5的4株菌比其它菌株更易使苹果汁腐败变质。     

脂环酸芽孢杆菌对5种商业果汁饮料中异味物质含量的影响

将2株酸土脂环酸芽孢杆菌分别接入5种市销商业果汁饮料中,45℃培养30 d后,研究不同接种处理果汁饮料中嗜热耐酸菌的菌落总数以及2种异味物质愈创木酚和邻乙氧基苯酚的含量。试验结果表明,未接种的市售饮料高温培养30 d后均无嗜酸耐热菌检出。接种处理后5种果汁饮料高温培养30 d后均可检出嗜酸耐热菌,其中水蜜桃乳饮料的检出量最大,达106 cfu/m L,草莓复合果肉饮料和水果牛乳混合饮料的菌落数在103~106 cfu/m L之间,橙汁及苹果汁饮料中的菌落数最小,低于102 cfu/m L。水蜜桃乳饮料中愈创木酚和邻乙氧基苯酚的含量最高,平均值分别为2818、2036μg/L,水果牛乳混合饮料中愈创木酚和邻乙氧基苯酚的含量次之,其平均值分别为1126、161μg/L,其他果汁中愈创木酚和邻乙氧基苯酚均未检出。结合2种异味物质气味阈值进行分析,水蜜桃乳饮料和水果牛乳混合饮料中愈创木酚和邻乙氧基苯酚的气味活度(浓度与阈值的比值)均大于1。专业鉴评人员感官分析表明2种饮料具有强烈的臭袜子及浓郁的药水气味,严重影响果汁的品质。其他3种果汁饮料风味特征无明显变化。     

脂环酸芽孢杆菌的研究进展

概述了脂环酸芽孢杆菌的特性和分类,介绍和分析了脂环酸芽孢杆菌分离鉴定的方法及其对果汁工业的危害情况及控制方法的研究进展。     

肌苷对酸土脂环酸芽孢杆菌生长及生物膜形成的影响

由嗜酸耐热酸土脂环酸芽孢杆菌污染酸性果汁引起的营养损失、风味劣变、沉淀等质量问题是制约果蔬加工及出口贸易的瓶颈。本文通过光密度测定、生物被膜测定、扫描电子显微镜检测、平板菌落计数、果汁理化特性及感官品质鉴定等方法,研究肌苷对酸土脂环酸芽孢杆菌生长的抑制效果及对橙汁品质的影响。结果表明,不同浓度的肌苷在酸性条件下均能高效抑制该菌营养菌体的生长繁殖,且对鲜榨橙汁的酸度、糖度、色度及口感等理化特性和感官品质无显著影响。低至5 mmol/L的肌苷添加量即可降低该菌的生物被膜形成能力,损伤菌体的细胞壁和细胞膜,导致菌体裂解死亡。在初始污染菌含量高达105 CFU/mL时,仍能将菌体的数量降低1个数量级,控制营养菌体的数量,使之不能产生达到嗅觉阈值的愈创木酚量,肌苷有望成为酸性果汁生产中抑制酸土脂环酸芽孢杆菌污染的新型高效防腐剂。     

橙汁主要营养成分及温度处理对脂环酸芽胞杆菌生长的影响

本文研究了橙汁主要营养成分和加工中温度处理等因素对两种引起已灭菌果汁腐败的主要病原微生物酸土脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidoterrestris）和酸热脂环酸芽孢杆菌（Alicyclobacillus acidocaldarius）生长的影响。结果表明,柠檬酸、蔗糖、矿质元素（钙、镁和钾元素）等橙汁中的主要营养成分在一定浓度范围内均可以促进两种脂环酸芽孢杆菌的生长。酸热脂环酸芽孢杆菌和酸土脂环酸芽孢杆菌在蔗糖浓度分别高于25%和20%时,生长受到抑制。当环境中钾浓度高于1000mg/L时,酸土脂环酸芽孢杆菌生长的生长受到抑制。在不同橙汁含量的饮料中,橙汁原汁最适合两种脂环酸芽孢杆菌的生长,而浓缩果汁中两种菌的生长量最少。温度处理实验表明,两种脂环酸芽孢杆菌分别经（-20、4、30、50、70、90℃）处理30min后,仍能保持良好的生长状态。当菌体经121℃处理30min时,生长几乎完全受到抑制。因此,橙汁饮料及橙汁原汁更容易感染酸土脂环酸芽孢杆菌和酸热脂环酸芽孢杆菌;通过巴氏杀菌很难彻底杀灭橙汁中的脂环酸芽孢杆菌,有必要寻求新型非热杀菌方法来控制橙汁中脂环酸芽孢杆菌。      

酸土环脂芽孢杆菌检测与控制技术研究进展

酸土环脂芽孢杆菌是造成果汁变质的一种主要腐败菌。在生产实践中快速、准确的检测手段必不可少,同时对该菌进行控制是提高产品质量、减少污染的重要环节,特别是对其耐热芽孢的抑制。通过对酸土环脂芽孢杆菌生长、代谢特性的分析,重点阐述了该菌污染的检测技术和菌种的分离、鉴定方法;同时从果汁生产环节入手探讨了控制该菌的各种方法,并指出今后应该进行的研究方向。     

酸土脂环酸芽孢杆菌DnaK基因克隆及生物信息学分析

利用同源克隆和基因组步移技术克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌(DSM 3922T)DnaK基因全序列,其ORF全长1 854 bp,编码617个氨基酸,推测其氨基酸序列与来源于A.acidocaldarius LAA1的分子伴侣蛋白DnaK同源性最高,相似性达86%。利用同源建模对DnaK的二级结构和超二级结构的预测结果显示,该伴侣蛋白主要由α-螺旋和β-折叠组成,基本不含无规则卷曲,具有耐热蛋白质的特征。     

培养条件和果汁种类对脂环酸芽孢杆菌生长的影响

脂环酸芽孢杆菌是造成巴氏灭菌果汁腐败的重要细菌之一。鉴于目前脂环酸芽孢杆菌的培养方法尚未统一且污染特征不明确,本研究考察了pH、7种培养基和9种果汁对其生长的影响,同时采用固相微萃取(SPME)和气相色谱(GC)-质谱(MS)技术检测了该菌的主要代谢产物愈创木酚和2,6-二溴苯酚在果汁中的释放情况。结果表明,脂环酸芽孢杆菌在pH4.0时生长情况最好,pH2.5时生长较差,pH6.0~7.0时最差。AAM培养基和BAT培养基较其他5种培养基(YSG培养基、K氏培养基、SK培养基、PDB培养基和营养肉汤培养基)更适合用来培养脂环酸芽孢杆菌。脂环酸芽孢杆菌接种到9种果汁中后生长差异明显,在葡萄汁和橙汁中生长情况最好,细菌数量分别为1.5×10⁴ CFU/mL和8.5×10³ CFU/mL;在菠萝汁和西柚汁中生长缓慢,细菌数量分别为4.4×10² CFU/mL和1.9×10² CFU/mL。此外,9种果汁接种脂环酸芽孢杆菌后均未检测出2,6-二溴苯酚;但是,除葡萄汁外的8种果汁均检测出愈创木酚,浓度在8.6~23.9 μg/L之间。     

酸土脂环酸芽孢杆菌Fe-SOD基因克隆及生物信息学分析

酸土脂环酸芽孢杆菌具有嗜酸耐热的独特生理特性,从该属细菌中分离到的多种酶类都具有耐酸热稳定性,是筛选耐酸耐热酶的重要菌种资源。超氧化物歧化酶(SOD)由于具有重要的生理功能而广泛用于食品、药品及化妆品等行业。为了深入探讨酸土脂环酸芽孢杆菌SOD的分子生物学特性,本研究利用同源克隆、交错式热不对称PCR技术和生物信息学方法进行Fe-SOD基因克隆、测序及序列分析。结果表明,Fe-SOD基因(GenBank序列号:JN614998)ORF全长为606bp,编码202个氨基酸,其推测氨基酸序列与来源于酸热脂环酸芽孢杆菌DSM446的Fe-SOD(ACV58017.1)序列相似性最高,为78%。整个蛋白序列含有Fe/MnSODs家族的5个模体,SOD活性中心含有金属离子结合配基His27、His82、Asp164和His168,具有Fe/MnSODs家族典型的蛋白结构特征。酸土脂环酸芽孢杆菌Fe-SOD基因的克隆和生物信息学分析为进一步构建原核表达载体、获得生产耐酸热Fe-SOD的基因工程菌株奠定基础。     

酸、热胁迫条件下酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因的表达分析

本研究在克隆得到酸土脂环酸芽孢杆菌DSM 3922T SOD基因全序列的基础上,利用荧光实时定量PCR技术分别检测酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因在酸、热胁迫条件下的表达差异。结果表明:该基因在正常生长条件下组成性表达,在酸、热胁迫下表达量在短时间内迅速上调,酸胁迫0.5 h表达量为对照组的4.63倍,胁迫1 h表达量升至最高,为对照组的32.55倍,随后表达量迅速下调,胁迫5 h时表达量降至对照组的1.67倍。70℃热胁迫5 min时SOD基因相对表达量为对照组的2.81倍,胁迫25 min时表达量升至最高,为对照组的15.05倍,随后表达量下调,胁迫40 min时表达量降至对照组的4.93倍。酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因对酸、热环境胁迫具有快速反应的特点,表明酸土脂环酸芽孢杆菌SOD基因与该菌嗜热耐酸的独特生理适应机制密切相关。     

溶菌酶协同高压CO_2对酸土脂环酸杆菌芽孢的致死效果

以芽孢致死率为评价指标,通过单因素和正交试验考察溶菌酶添加量、压力、温度和时间在高压CO2处理过程中对酸土脂环酸杆菌芽孢致死效果的影响,并优化杀菌条件。结果显示:溶菌酶添加量、压力和温度对芽孢致死效果的影响均显著(P0.05),在溶菌酶添加量0.10g/kg、压力25MPa、温度55℃、时间60min的优化条件下芽孢致死率可达到5.47个数量级。另对此条件下处理后的样品进行高效液相色谱(HPLC)和扫描电子显微镜(SEM)检测,结果显示:芽孢核心物质2,6-吡啶二羧酸(DPA)发生大量泄露,且部分芽孢完全破裂,溶菌酶对高压CO2杀灭芽孢的协同效果显著(P0.05)。     

出口浓缩果汁中脂环酸芽孢杆菌的分离及相关生物学特性的研究

通过对甘肃省内浓缩苹果汁生产企业的浓缩苹果汁成品以及浓缩苹果汁生产中的主要生产工段进行无菌取样,共采集144个样品,经过分离、筛选和纯化,共得到59株分离菌株,并与标准菌株Alicyclobacillus acidoterrestris(ATCC49025)、Alicyclobacillus cycloheptanicus(ATCC 49029)进行对比分析。结果表明在耐热、耐酸性检验中,可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点;细胞、菌落形态观察、生长条件、生理生化特征和糖、醇利用等方面与标准菌株有较大的相似性。      

Modeling the combined effects of pH, temperature and ascorbic acid concentration on the heat resistance of Alicyclobacillus acidoterrestis

In this study, thermal inactivation parameters (D- and z-values) of Alicyclobacillus acidoterrestris spores in McIlvaine buffers at different pH, apple juice and apple nectar produced with and without ascorbic acid addition were determined. The effects of pH, temperature and ascorbic acid concentration on D-values of A. acidoterrestris spores were also investigated using response surface methodology. A second order polynomial equation was used to describe the relationship between pH, temperature, ascorbic acid concentration and the D-values of A. acidoterrestris spores. Temperature was the most important factor on D-values, and its effect was three times higher than those of pH. Although the statistically significant, heat resistance of A. acidoterrestris spores was not so influenced from the ascorbic acid within the concentration studied. D-values in apple juice and apple nectars were higher than those in buffers as heating medium at similar pH. The D-values ranged from 11.1 (90 °C) to 0.7 min (100 °C) in apple juice, 14.1 (90 °C) to 1.0 min (100 °C) in apple nectar produced with ascorbic acid addition, and 14.4 (90 °C) to 1.2 min (100 °C) in apple nectar produced without ascorbic acid addition. However, no significant difference in z-values was observed among spores in the juices and buffers at different pH, and it was between 8.2 and 9.2 °C. The results indicated that the spores of A. acidoterrestris may survive in fruit juices and nectars after pasteurization treatment commonly applied in the food industry.     

紫外线照射与柠檬酸处理对鲜切苹果的保鲜作用

目的研究柠檬酸、紫外线照射、柠檬酸和紫外线照射联合处理对鲜切苹果生理生化的影响。方法以富士苹果为实验材料,分成4组,分别是0.5%柠檬酸(CA)溶液中浸泡5 min、紫外照射(UV)5 min/面、0.5%柠檬酸溶液中浸泡5 min+紫外照射(CA+UV)5 min/面、不处理的对照组(KB)。分别于0、1、3、5、7、10、13、15 d测定鲜切苹果的色差、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性。结果富士苹果经过切分后,褐变严重。PPO、POD活性升高,PAL活性变化曲折,总体呈上升趋势。柠檬酸、紫外、柠檬酸和紫外联合处理的3三种处理方式都可以抑制鲜切苹果的褐变,降低PPO、POD、PAL的活性。在4种处理方法比较中,柠檬酸和紫外联合处理的效果比较好。结论柠檬酸和紫外联合处理是鲜切苹果的理想的保鲜方法。     

云南建水酸浆豆腐中乳酸菌的生长特性

为了筛选出优良的乳酸菌进行发酵制作酸浆,对分离自云南建水豆腐酸浆中的五株乳酸菌(SYG01、SYG02、SYG03、SYG04、SYG05)的生长曲线、产酸能力、耐酸能力和耐渗透压能力进行了比较。生长曲线实验表明在相同培养时间内,菌株SYG02繁殖能力最强,其次是菌株SYG03,而菌株SYG05、SYG04、SYG01的生长速率明显较慢;在产酸方面SYG02产酸能力最强,速度最快,SYG03、SYG05和SYG04次之,SYG01最弱。在耐酸方面,在pH4.0的环境下5株菌生长良好,在pH3.0的酸性环境下5株菌虽然能够存活,但活菌数的数量级仅在10²~10⁴ CFU/mL,其中菌株SYG02和SYG03比其它三株菌株表现出较好的耐酸能力。在耐渗透压方面,SYG02在8%(w/V)的NaCl中依然表现出较强的耐受性,活菌数的数量级达到10⁷ CFU/mL,其余4株菌在NaCl含量大于6%(w/V)时生长受到明显抑制。并以发酵黄浆水的pH及产酸量为指标对菌株的产酸能力进行比较,发现混合菌株的产酸能力高于单菌株,其中菌株SYG02和菌株SYG03组合发酵的效果最好,在发酵72 h后黄浆水的pH为3.52,产酸量达到6.46 g/L。从而得出菌株SYG02具有良好的生长、产酸和耐渗透压能力,具有良好的应用潜力,对酸浆豆腐的工业化生产有重要的意义。     

紫外线照射对农产品中真菌毒素的防控作用研究进展

真菌毒素是病原真菌代谢产生的次级代谢产物, 其引起人畜各种生理异常甚至癌变, 对人畜健康有很大威胁。紫外线照射是一种非电离辐射, 它不仅可以有效地抑制病原菌生长, 还可以抑制毒素的积累。因其设备简单、操作便捷、绿色安全, 所以被广泛应用于农产品贮藏保鲜及真菌毒素的降解。本文介绍了紫外线照射对病原真菌的抑制作用, 综述了紫外线照射对真菌毒素的降解作用以及对农产品病害的防控作用, 并展望了该技术的研究重点, 以期为该领域研究者提供参考。     

金针菇UV诱变育种研究

目前金针菇栽培所用母种长势相对较弱.培养时间较长.文中采用市售金针菇驯化后的菌种,用紫外光照射方法对所得的金针菇菌丝体进行诱变试验,通过菌种选育可以确定,紫外照射60min获得了比原菌丝体生长能力旺盛的菌种,诱变菌种的斜面培养时间为7d～9d.