高速逆流色谱法分离红葡萄皮中的花色苷

建立高速逆流色谱(HSCCC)法分离制备红葡萄皮中花色苷单体的方法。以乙腈-正丁醇-甲基叔丁基醚-水-三氟乙酸(1∶40∶1∶50∶0.01, V/V)为溶剂体系,上相（有机相）为固定相,下相（水相）为流动相,流速为2.0 mL/min,转速为950 r/min,进样量为200 mg,分离得到的组分利用紫外-可见（UV）光谱和液质联用（HPLC-MS）技术进行定性分析。结果表明,经过一次高速逆流分离即可得到3种花色苷单体,分别为飞燕草色素-3-O-葡萄糖苷、锦葵色素-3-O-葡萄糖苷和芍药色素-3-O-葡萄糖苷,高效液相色谱（HPLC）峰面积归一法计算其纯度分别为93.7%、95.2%、91.6%。采用高速逆流色谱法成功从红葡萄皮中一次性分离得到3种高纯度的花色苷单体,其中芍药色素-3-O-葡萄糖苷为首次分离得到。     

蓝莓果实中花色苷单体的色谱分离纯化

为充分开发蓝莓果实的潜在应用价值,主要采用柱色谱法及半制备高效液相色谱法系统研究蓝莓果实中花色苷(花青素的糖苷形式)单体的制备技术。蓝莓花色苷粗提液经超声辅助浸提、乙酸乙酯萃取2次,能够促进花色苷类物质的溶出,并有效去除溶液中的黄酮类杂质。经Amberlite XAD-7HP大孔树脂层析、Sep-Pak C18固相萃取,所得蓝莓花色苷粗品的纯度为62.49%。经Sephadex LH-20凝胶色谱柱分离,获得的3种花色苷纯化组分纯度在65%~75%之间。运用半制备型高效液相色谱技术从3种花色苷纯化组分中制备出两种蓝莓果实中含量较低的半乳糖苷化的花色苷单体,经分析型高效液相色谱鉴定为飞燕草素-3-O-半乳糖苷和锦葵色素-3-O-半乳糖苷,纯度分别为96.98%和95.63%。本研究为花色苷单体的规模化生产提供了技术参考,同时为实现蓝莓花青素高附加值产品的生产提供良好理论依据。     

基于组合色谱技术的蓝莓果实中花色苷元制备

首先采用液液萃取及大孔树脂层析技术研究花色苷的制备方法,萃取剂为乙酸乙脂,大孔树脂为Amberlite XAD-7HP,在此基础上制得花色苷粗提液。花色苷经酸水解、浓缩后,采用固相萃取技术（C18小柱）对花色苷元进行除酸、除糖处理,制得了纯度为70.2%的花色苷元混合物。最后采用半制备型高效液相色谱技术实现4 种主要花色苷元单体的分离,分别为飞燕草素（纯度98.2%）、矢车菊素（纯度96.3%）、牵牛花素（纯度92.6%）、锦葵色素（纯度90.5%）。本研究可为花色苷元的规模化制备及后期功能活性研究提供技术参考和依据。     

紫皮豇豆(Vigna unguiculata L.)花色苷的研究

首次应用高效液相色谱-二极管阵列检测器-质谱联用技术(HPLC-DAD-MS)鉴定出紫皮豇豆主要含有三种花色苷,分别为飞燕草色素、矢车菊色素、天竺葵色素的葡萄糖苷,其中矢车菊葡萄糖苷相对百分含量达到93.4%;应用pH示差法测定出其单体花色苷的含量为57.15mg/100g鲜重;应用DPPH法测定结果显示,花色苷粗提液有较强的抗氧化能力。     

杨梅中主要花色苷的组成与结构

采用V(甲醇)∶V(甲酸)=19∶1溶液提取杨梅中的花色苷,并用阳离子交换树脂初步纯化得到杨梅花色苷提取物,然后以水-正丁醇-甲基叔丁基醚(TBME)-乙腈-三氟乙酸(TFA)(体积比5∶2∶1.5∶1∶0.001)为溶剂系统,用高速逆流色谱对杨梅花色苷进行分离。再由C18柱色谱纯化后,得到2种主要的花色苷单体Ⅰ和Ⅱ。经ESI-MS和NMR鉴定为矢车菊色素-3-β-吡喃型葡萄糖苷(Ⅰ)和飞燕草色素-3-葡萄糖苷(Ⅱ)。另外,文中对3个杨梅品种的花色苷组成进行了分析,结果表明,矢车菊色素-3-β-吡喃型葡萄糖苷是杨梅花色苷的主要组成成分,占花色苷总量的90%以上。     

不同花色苷代表性成分的分离鉴定及体外抗氧化活性

本实验以紫甘薯、黑枸杞、黑加仑和桑葚花色苷提取物为原料,制备其单体花色苷组分并研究其体外抗氧化性质。选取每种花色苷中含量较高,分子量居中,具有代表性的单体化合物作为目标组分,采用高速逆流色谱制备分离四种来源的花色苷。选用甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水-三氟乙酸作为溶剂体系,流速设定为5 mL/min,转速为850 r/min,分离得到高纯度花色苷单体化合物。采用分光光度法、HPLC-MS法分析测定花色苷含量及主要组成,用DPPH自由基、羟自由基清除能力和总还原力的测定分析其体外抗氧化活性。结果表明,四种来源的花色苷中代表性的成分依次为芍药素-3-咖啡酰-阿魏酰槐糖苷-5-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-对香豆酰芸香糖苷-5-O-葡萄糖苷、矢车菊-3-芸香糖苷和矢车菊-3-O-葡萄糖苷,它们均具有良好的体外抗氧化活性。     

新疆药桑椹中花色苷的分离与鉴定

采用高速逆流色谱分离制备药桑花色苷。以甲基叔丁基醚-正丁醇-乙腈-水-三氟乙酸(2:2:1:5:0.01,V/V)为溶剂体系,进样量50mg,分离得到纯度分别为99.24%、88.5%、99.9%和96%的4个花色苷单体。通过高速逆流色谱(HSCCC)、紫外-可见光谱、质谱进行结构鉴定,初步确定馏分1为矢车菊-3-O-芸香糖苷,馏分2为天竺葵-3-O-芸香糖苷,馏分3为矢车菊-3-O-葡萄糖苷,馏分4为天竺葵-3-O-葡萄糖苷。此法高效、稳定、简捷易行。     

黑葵花籽壳中主要花色苷类物质的结构分析

为确定黑葵花籽壳中主要花色苷类物质的结构,采用高效液相色谱(HPLC)和高效液相色谱串联四极杆质谱研究黑葵花籽壳中的花色苷类物质,结果表明：纯化后的黑葵花籽壳花色苷主要有两种单体,之后采用纸层析对两种物质进行分离,再用红外光谱、紫外-可见光谱、Francis的研究结论等方法对两种单体结构初步推测。最后采用高效液相色谱串联四极杆质谱对两种花色苷结构确认为：花青素-3-O-单葡萄糖苷和甲基花青素-3-O-单葡萄糖苷两种单体。     

花色苷分离鉴定方法及其生物活性

系统介绍了花色苷类物质的薄层色谱、柱色谱、高效液相色谱、高速逆流色谱分离,色谱、光谱、质谱、核磁共振波谱鉴定及抗氧化、抗癌和抗癌变等生物活性。     

高速逆流色谱分离纯化紫甘蓝花色苷

优化出超声波溶剂辅助法提取紫甘蓝花色苷的最佳工艺条件,并用高速逆流色谱法对其进行分离纯化,建立HSC-CC分离制备紫甘蓝花色苷类化合物的方法。采用正交试验优化超声波溶剂辅助提取紫甘蓝花色苷的工艺条件,再高速逆流色谱对其进行分离纯化。结果表明,超声波溶剂辅助提取紫甘蓝花色苷的最佳工艺条件为超声时间8min,超声辅助提取温度40℃,乙醇体积分数65%;HSCCC制备紫甘蓝花色苷类化合物的方法:溶剂系统为正丁醇-甲基叔丁基醚-乙腈-水-三氟乙酸(2:2:1:5:0.01,V/V/V/V),流速为2mL/min,主机转速设定为800r/min,紫外检测波长为254nm,在该条件下分离制备得到3种化合物。经HPLC检测其纯度分别为76.28%,45.46%,91.46%。用超声波溶剂辅助和高速逆流色谱能分离得到了高纯度的紫甘蓝花色苷,该法具有简便、快速的优点,为紫甘蓝花色苷的分离纯化提供了高效、稳定、可靠的方法。     

紫甘薯花色苷与大肠杆菌在体外的相互作用

以紫甘薯花色苷提取物为原料,研究其对分离的大肠杆菌的抑菌作用。结果表明,紫甘薯花色苷对大肠杆菌生长具有一定的抑制作用,与其浓度呈正相关。采用高速逆流色谱法制备紫甘薯单体花色苷,研究大肠杆菌对芍药素-3-咖啡酰-阿魏酰槐糖苷-5-葡糖苷的作用,大肠杆菌对其具有显著的降解能力。通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)(520 nm和280 nm)法比较分析,初步探讨大肠杆菌对花色苷的降解机理。推测在该研究的时间范围内,大肠杆菌的作用没有使花色苷发生水解或者裂解等反应,即其没有被降解成更小的分子。分子中呈现紫外吸收的芳香环结构并没有被整体破坏,只是花色苷呈色基团发生了改变,形成没有颜色的降解产物。     

不同时期摘叶对马瑟兰花色苷的影响

以烟台蓬莱产区马瑟兰为试材,高效液相色谱（HPLC）法测定果皮花色苷含量,研究转色期前后摘叶处理对果皮花色苷种类和含量的影响。结果表明,转色期前摘叶能够显著增加花色苷的种类和含量（P＜0.05）,共检测到16种花色苷单体,其五类基本花色苷总量是对照的3.16倍;而转色后摘叶处理和对照组均检测出12种花色苷单体,五类基本花色苷总量只略高于对照组。     

花色苷纯化分离及鉴定研究进展

花色苷是高等植物中最重要的水溶性色素。因其种类繁多、来源广泛、安全无毒并有一定的营养和保健功效而引起国内外的广泛关注,具有十分重要的开发价值和广阔的应用前景。文中介绍了国内外花色苷分离纯化（层析法、高速逆流色谱、膜分离法、固相萃取）、以及花色苷鉴定（高效液相色谱-串联质谱法,核磁共振法）的研究方法,并对各种方法进行了分析评价。对全面认识和开发利用花色苷具有一定的参考价值。     

不同地区酿酒葡萄果实中酚类物质含量及抗氧化能力的分析

以源于我国4个地区(宁夏玉泉营、山西乡宁、河北昌黎和沙城地区)赤霞珠和梅鹿辄葡萄果实为研究对象,通过光谱和液相色谱-质谱联用技术对其理化指标、酚类物质含量、抗氧化能力及花色苷单体酚含量进行测定和分析。研究结果表明:宁夏玉泉营地区赤霞珠和梅鹿辄果实中的总酚、总类黄酮、总黄烷醇和总花色苷均最高,抗氧化能力也最强,河北沙城次之,其他2个地区互有高低;在2个品种中分别检测出22和23种花色苷单体酚物质,其中包括5种基本花色苷和18种花色苷衍生物;生态条件对赤霞珠和梅鹿辄果实花色苷组成的影响主要表现在其衍生物上,对其含量的影响与品种特性有关。产区生态条件对葡萄果实中酚类物质含量及花色苷单体酚的组成造成不同程度的影响。     

新旧橡木桶陈酿对干红葡萄酒花色苷和颜色的影响

本研究利用高效液相色谱-质谱联用（HPLC—MS）技术及CIELab法,比较了新橡木桶及使用过一年的旧橡木桶陈酿对赤霞珠干红葡萄酒花色苷含量及颜色变化的影响。结果显示：新橡木桶陈酿的红葡萄酒中单体花色苷、酰化花色苷及总花色苷的含量均低于旧橡木桶,其颜色比旧橡木桶深,红色色调较高,而黄色色调较低,但新旧橡木桶陈酿对葡萄酒花色苷及颜色的影响没有统计学上的显著性差异。研究结果为葡萄酒生产中橡木桶的合理应用提供了参考。     

利用中压制备液相色谱从桑葚中快速制备矢车菊素-3-葡萄糖苷单体

单体花色苷的快速大量制备长久以来是花色苷产业化中的难题,而中压制备液相色谱在产业应用中有着很大的开发空间。选取花色苷组分较单一的桑葚为实验原料,经提取分离总花色苷后使用填装有反相C18填料的耐压玻璃柱作为中压制备液相色谱柱,纯化制备矢车菊素-3-葡萄糖苷单体。结果显示：3 个色谱分离峰中目的峰（峰2）经高效液相色谱和质谱确证为由矢车菊素-3-葡萄糖苷（cyanidin-3-glucoside,C3G）和矢车菊素-3-芸香糖苷（cyanidin-3-rutinoside,C3R）组成,采用峰面积归一化法计算得到C3G纯度为73.56%;通过对峰2采用切割方式进行收集,C3G纯度达到98%以上,单次收集到C3G单体溶液650?mL。中压制备液相色谱法单次上样量大、步骤简洁、成本低廉,可为矢车菊素-3-葡萄糖苷单体的规模化生产提供一定的参考。     

新旧橡木桶陈酿对干红葡萄酒花色苷和颜色的影响

本研究利用高效液相色谱.质谱联用(HPLC-MS)技术及CIELab法,比较了新橡木桶及使用过一年的旧橡木桶陈酿对赤霞珠干红葡萄酒花色苷含量及颜色变化的影响.结果显示:新橡木桶陈酿的红葡萄酒中单体花色苷、酰化花色苷及总花色苷的含量均低于旧橡木桶,其颜色比旧橡木桶深,红色色调较高,而黄色色调较低,但新旧橡木桶陈酿对葡萄酒花色苷及颜色的影响没有统计学上的显著性差异.研究结果为葡萄酒生产中橡木桶的合理应用提供了参考.     

叶幕形和留穗量对赤霞珠葡萄酒单体酚类物质的影响

以山西晋中南地区赤霞珠为材料,采用高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS）,研究不同叶幕形和每株留穗量对所酿造的干红葡萄酒中单体酚类物质种类和浓度的影响。结果表明,相比于直立叶幕,V形叶幕可提高成熟葡萄果实的成熟度,V葡萄酒中酰化花色苷的含量（33.46 mg/L）和非花色苷单体酚类物质的总量（286.25 mg/L）分别是直立形叶幕的2.80倍和2.18倍。在直立叶幕下,适当的减少单株果穗数量,可增加葡萄酒中花色苷单体酚类物质的种类和含量,此外随着每株留穗量的减少,非花色苷单体酚类物质总量有逐渐增多的趋势。在山西晋中南地区,对于赤霞珠而言,适度减少每株留穗量或运用V形叶幕栽培管理可以提高葡萄酒中单体酚类物质含量。     

酿造工艺对蛇龙珠干红葡萄酒花色苷和色泽品质的影响

采用高效液相色谱(HPLC)和CIELab参数分析SO2添加量、p H、发酵温度及皮渣接触时间对甘肃河西产区蛇龙珠干红葡萄酒花色苷构成和色泽品质的影响,结果表明:实验样品间花色苷种类无差异,但其含量和构成比例随发酵参数变化而改变。被分离定性的9种花色苷中二甲花翠素类花色苷含量及比例最高,是实验蛇龙珠干红葡萄酒的主体花色苷类型,主要以二甲花翠素单葡萄糖苷和乙酰化单葡萄糖苷形态存在于样品中,分别占总花色苷的33%和9%以上。单体花色苷和总花色苷的含量随着SO2添加量增加而降低;葡萄醪p H和发酵温度升高,样品总花色苷含量增加,单体花色苷的变化则各不相同;皮渣接触5 d的酒样总花色苷和单体花色苷含量最高。SO2添加量70 mg/L、p H3.7、发酵温度30℃和皮渣接触5 d的各实验酒样与对照相比,a*值和饱和度Cab值最大,L*值和b*值最小,色度角Hab也更接近0度,酒样的红色和紫红色调突出,总色度较深。     

不同红色酿酒葡萄中多酚物质的差异性研究

利用高效液相色谱检测蓬莱产区赤霞珠、品丽珠、小味儿多3种葡萄果皮与籽中15种单体酚和5种花色苷的含量。结果表明,3个品种的白藜芦醇含量基本一致;果皮中花色苷含量以小味儿多最高,赤霞珠与品丽珠基本一致;15种单体酚总量以小味儿多最高,品丽珠的最低。