响应面法优化超声辅助酶解制备藏系羊胎盘肽工艺及抗氧化能力分析

以藏系羊胎盘为原料,选取水解度、肽得率和抗氧化能力为指标,在蛋白酶种类筛选、双酶组合方案确定的基础上,通过单因素试验和响应面试验优化超声波辅助复合酶解制备羊胎盘肽的工艺条件,并分析其氨基酸组成和分子质量分布。结果表明,木瓜蛋白酶和中性蛋白酶同步复合酶解效果优于其他蛋白酶组合,水解度和肽得率分别为37.24%和13.54%。响应面优化结果显示各因素对水解度影响的主次顺序为：超声时间＞超声温度＞酶解时间＞超声功率;优化后的最优工艺参数为超声时间16.5 min、超声温度25.5 ℃、超声功率438 W、酶解时间4.9 h,该最优条件下的水解度为55.22%,肽得率为18.52%,抗氧化能力（Trolox当量）为1.08 mmol/L。藏系羊胎盘肽中富含谷氨酸、甘氨酸和天冬氨酸等,分子质量低于2 000 Da的肽比例为95.02%,绝大多数为小分子低聚寡肽。可见,超声波辅助酶解制备羊胎盘肽的工艺不仅能有效改善酶解效果,还能制得具有良好抗氧化能力的小分子肽。     

超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽工艺优化

为进一步提高辣木籽蛋白资源的开发利用,采用盐提法提取辣木籽蛋白,再采用超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽。以水解度和ACE抑制率为评价指标,通过单因素实验探究超声波功率、超声酶解时间、超声酶解温度及料液比对制备ACE抑制肽的影响,采用响应面法对制备工艺条件进行优化。结果表明：超声波辅助酶法制备辣木籽ACE抑制肽的最佳酶解工艺条件为碱性蛋白酶添加量5.5 mg/mL、pH 9、超声波功率500 W、超声酶解时间1.7 h、超声酶解温度55℃、料液比1∶45,在此条件下制备的酶解物ACE抑制率达到78.32%,水解度为7.78%。以辣木籽为原料制备ACE抑制肽作为功能性蛋白肽产品,可有效提高辣木籽蛋白资源的开发利用。     

响应面法优化超声波辅助酶法制备燕麦ACE抑制肽的工艺研究

利用超声辅助酶法制备燕麦ACE 抑制肽,研究超声波处理时间、超声波频率、超声波功率、超声波水浴温度、酶解时间及加酶量对ACE 抑制率和水解度的影响。通过单因素试验得到最佳条件,即超声波处理时间30min、超声频率50kHz、超声功率176W、超声温度55℃、酶解时间2h、加酶量5%(Alcalase 酶);随后选择对ACE 抑制率有显著影响的四个因素：超声波处理时间(X1)、超声波功率(X2)、超声波水浴温度(X3)和酶解时间(X4),进行四因素三水平的响应面分析试验,经过优化得到最优条件为超声波处理时间28.40min、超声波功率190.08W、超声波水浴温度55.05℃、酶解时间2.25h,在此条件下燕麦ACE 抑制肽的抑制率87.50%,多肽质量浓度8mg/ml。     

裙带菜孢子叶仿生酶解工艺优化及酶解肽的抗氧化活性分析

以裙带菜孢子叶为原料,采用仿生酶解工艺制备生物活性肽。以多肽得率和水解度为主要指标,在单因素实验基础上采用响应面分析法优化酶解工艺条件,并评价了酶解肽对三种自由基（DPPH、ABTS、OH）的清除能力。结果表明:裙带菜仿生酶解工艺的最优条件为超声功率720 W、超声破壁时间40 min、料液比1:104 g/mL、胃蛋白酶加酶量为6.1%、酶解时间2.5 h、胰蛋白酶加酶量为5%、酶解时间3 h。在此条件下进行酶解,多肽得率为21.17%,水解度为43.07%。酶解肽对DPPH、ABTS、OH自由基具有较好的清除效果,其IC₅₀值分别为5.71、0.82、1.35 mg/mL。优化的裙带菜孢子叶仿生酶解工艺合理可行,酶解肽具有较好的自由基清除能力,说明其具有良好的抗氧化活性,可作为功能性食品开发的配料。     

超声波辅助复合酶法制备藏系绵羊胎盘肽的工艺优化

为实现羊胎盘深度开发利用,以肽得率和水解度为指标,筛选确定多种蛋白酶复合水解的最佳组合方案,并利用响应面法优化超声波辅助复合酶法水解制备羊胎盘肽的预处理参数。结果表明,响应面法优化后的超声预处理参数为超声时间18 min、温度28℃和功率420 W,超声波预处理后羊胎盘经木瓜蛋白酶和风味酶联合同步复合酶解制备羊胎盘肽的肽得率为39.89%,水解度为21.78%;该最优条件下平均肽链长度为4.59,分子量约500~600。结论:超声波辅助复合酶法制备藏系绵羊胎盘肽的工艺可行且有效。      

酸法脱酰胺结合酶解制备米蛋白肽及其与亚铁螯合工艺研究

采用米蛋白为原料,经酸法脱酰胺、蛋白酶酶解后,以FeCl_2作为铁源制备米蛋白肽亚铁螯合物。结果表明,碱性蛋白酶对米蛋白的水解效果最好,经4 h酶解后蛋白的水解度和蛋白肽得率分别达到23.4%和73.4%。酸法脱酰胺处理能有效提高米蛋白肽的得率。采用0.4 mol/L HCl在95℃处理3 h制备的脱酰胺米蛋白,其水解度和蛋白肽得率分别达到27.1%和92.6%;单因素试验表明反应温度、pH和质量比均对米蛋白肽亚铁螯合物的产品得率和螯合能力有显著影响;米蛋白肽与亚铁盐的最佳螯合工艺条件为:反应温度50℃、蛋白肽与亚铁盐的质量比2:1、pH 6.5;在此条件下其产品得率为65.2%,亚铁螯合能力最大为21.6 mg/g。     

采用木瓜蛋白酶制备乌鸡蛋白肽的研究

探讨了各单因子对木瓜蛋白酶酶解乌鸡蛋白质的影响及水解度与肽得率、总氮得率之间的关系。结果表明,pH变化对肽得率影响很小;随着时间延长,水解度和总氮得率不断升高,肽得率3h后达到平衡阶段;温度<70℃,随着温度的提高、酶用量的增加,水解度、肽得率和总氮得率均增加,但总氮得率增加明显;随着底物浓度的减少,水解度几乎不变,而肽得率和总氮得率均增加。综合考虑,最佳水解条件为温度70℃,酶用量E/S4000U/g,底物浓度7%。酶解3h后,酶解液中必需氨基酸37.41%,氨基酸总量61.01mg/mL,其中游离氨基酸9.89%,肽含量90.11%。     

超声波和微波技术在芝麻饼粕ACE抑制肽制备中的应用

为了探索超声波和微波技术在芝麻饼粕ACE抑制肽制备中的应用,分别以超声波和微波对芝麻饼粕预处理,超声波辅助酶解,研究了超声波功率、超声波时间、微波功率、微波时间和加酶量对ACE抑制率的影响。结果表明:超声波预处理功率为4 W/m L、预处理10 min、添加1 300 U/g碱性蛋白酶时得到的芝麻饼粕ACE抑制肽的IC50值为2.81 mg/m L。超声波辅助酶解过程中超声功率选择0.5 W/m L、添加1 700 U/g碱性蛋白酶、酶解15 min时得到的芝麻饼粕ACE抑制肽的IC50值为2.96 mg/m L。微波预处理功率为1.33W/m L、微波预处理5 min时得到的芝麻饼粕ACE抑制肽的IC50值为2.81 mg/m L。     

超声波辅助酶解豌豆分离蛋白的动力学及酶解物功能特性研究

利用超声波辅助酶解豌豆分离蛋白,研究酶种类、酶用量、超声波功率、超声处理时间参数对豌豆分离蛋白酶解动力学的影响及其酶解物的功能特性。结果表明,胰蛋白酶的水解效果较好,超声波处理可促进豌豆分离蛋白的酶解反应,最佳处理参数为:超声功率450 W,超声处理时间20 min,p H 8.0,此条件下的水解度为19.11%~38.06%(酶用量0.5~3.5 U/g)。动力学分析表明,豌豆分离蛋白酶解过程中酶用量与底物浓度的比值与水解度服从lg对数线性关系模型。酶解物功能特性分析表明,酶解处理后的溶解度最大增加300%,酶解前、后的起泡性分别为13%和120%(增加8.3倍),乳化性分别为32.1 m2/g和55.3 m2/g。上述分析表明,超声波辅助酶解法可作为一种改变豌豆分离蛋白功能特性及制备活性肽的有效技术。     

同步加酶超声提取核桃油和核桃蛋白肽

试验以核桃为原料,在水酶法提油试验研究基础上,确定核桃油和核桃蛋白肽同步加酶超声提取工艺介入超声的方式和超声条件,通过单因素试验和正交优化试验确定同步加酶超声提取最优工艺条件。试验通过分析核桃油的理化性质,评价同步加酶超声提取效果。结果表明,采用酶解超声同步方式效果优于酶解前和酶解后超声提取,最优同步加酶超声提取工艺为:纤维素酶0.5%,碱性蛋白酶0.1%,p H 5.5,超声时间5 min,超声功率360 W,超声温度55℃,液料比7∶1(m L/g),超声和酶解时间共2 h,核桃油提取得率达53.61%,核桃蛋白水解度达29.17%。超声处理提取得率高,且对核桃油品质无显著影响。     

酶法制备花椒籽蛋白铁结合肽的工艺优化

采用不同的蛋白酶水解花椒籽蛋白,以花椒籽蛋白质铁结合肽水解度和铁结合能力为指标,筛选出制备花椒籽蛋白铁结合肽的最佳蛋白酶,并利用最佳蛋白酶酶解花椒籽蛋白制备铁结合肽。在单因素试验的基础上,应用BoxBehnken方法进行四因素三水平的试验设计,考察底物浓度、酶添加量、pH值、酶解温度和酶解时间对铁结合能力的影响,优化花椒籽蛋白制备铁结合肽工艺。结果表明:最佳蛋白酶为碱性蛋白酶,最佳工艺条件为:底物浓度27.70 mg/mL、酶添加量0.09mg/mL、酶解pH 10.47、酶解温度65℃、酶解时间2.5h,该条件下酶解产生水解液的水解度为7.23%,铁结合能力为585.66mg EDTA/g·蛋白质。     

双酶制备花生肽及其对NO·的清除能力

为对花生免疫活性肽的制备提供基础,采用蛋白酶水解花生蛋白制备花生肽,以花生蛋白水解度和NO·清除率为指标,优化酶种类组合及水解条件。结果表明：先采用Alcalase 2.4L碱性蛋白酶在花生蛋白质量浓度5 g/100 mL、超声功率400 W、超声时间5 min、pH 8.0、加酶量7 400 U/g、水解温度55℃条件下水解3 h,再加入2 480 U/g的中性蛋白酶,在pH 7.0、水解温度40℃条件下继续水解30 min,花生蛋白水解度可达到24.73%,花生肽NO·清除率的IC₅₀为1.88 mg/mL(显著低于商品大豆肽的3.51 mg/mL和商品酪蛋白肽的11.71 mg/mL);水解度在7.8%～39.1%范围内与NO·清除率有极显著线性关系,水解度超过22.6%时,与NO·清除率无显著线性关系。较高的水解度是花生肽拥有良好NO·清除能力的必要条件,但并非水解度越高越好。     

霍山石斛多酚超声波辅助提取工艺优化及其抗氧化活性研究

为确定超声波辅助纤维素酶法提取霍山石斛多酚的最佳工艺,采用响应曲面设计方法对多酚提取工艺进行优化,同时分析霍山石斛多酚的抗氧化活性。结果表明:多酚提取的最佳工艺条件为超声功率180 W,超声时间20 min,酶质量浓度2.1 mg/m L,酶解温度57℃,酶解时间71 min,酶解p H 5,在该条件下,多酚平均得率为13.74 mg/g。体外抗氧化活性试验表明,霍山石斛多酚具有较强的抗氧化活性,其DPPH和ABTS自由基清除能力与多酚浓度呈现明显的量效关系。多酚对DPPH和ABTS自由基的半抑制浓度分别为0.057 mg/m L和0.027 mg/m L。     

双酶酶解制备黑小麦麸皮抗氧化肽

采用双酶法分步酶解黑小麦麸皮蛋白制备抗氧化肽,以水解度、肽得率及总抗氧化活性为指标,通过单因素试验及正交法优化其最佳工艺条件。第一步采用碱性蛋白酶酶解的最佳条件为pH 9,时间2 h,温度50℃,酶添加量18000 U/g;黑小麦麸皮蛋白水解度为11.46%,肽得率为38.33%,总抗氧化活性为6.65μmol/g。第二步采用风味酶酶解的最佳条件为pH 6,温度50℃,时间2 h,酶活添加量10000 U/g;此时水解度为22.74%,肽得率为52.36%,总抗氧化活性为8.47μmol/g。     

超声辅助处理高温淀粉酶水解玉米淀粉制备麦芽糊精的工艺研究

本文目的在于借助超声波预处理,提高玉米淀粉酶解制备麦芽糊精的反应效率。以麦芽糊精的DE值和液化得率为指标．研究了超声波预处理。高温淀粉酶水解玉米淀粉制备低DE值糊精的工艺。通过对超声辅助处理的正交试验和酶水解正交试验得到了最优工艺：超声频率为80kHz,超声功率为2kW,超声时间为40min,超声温度为90℃,加酶量为40U／g,水解时间为40min。在此条件下,糊精的DE值为18．3％,液化得率为80．2％。与未超声的对照组相比,经过超声辅助处理的结果在DE值和液化得率方面都有提高,这说明经过超声辅助处理提高了酶水解的能力,是一种具有开发和应用价值的技术。     

逆流超声辅助酶解法制备大米ACE抑制肽

研究逆流超声预处理大米蛋白对其碱性蛋白酶酶解制备血管紧张素转换酶(Angiotensin-I Converting Enzyme,ACE)抑制肽的影响。首先从米渣中提取大米蛋白,以ACE抑制率为主要指标,水解度为辅助指标,运用单因素逐级优化法对酶解反应的底物浓度、时间、温度、加酶量和pH进行参数优化,在此基础上筛选逆流超声模式的最佳超声参数。结果表明最佳酶解参数为底物浓度30 g/L、加酶量(E/S)7.5%、温度50 ℃、pH8.5和酶解时间60 min,此时酶解产物ACE抑制率为45.59%,水解度为21.49%。最佳超声参数为超声频率20 kHz、功率密度170 W/L、时间12.5 min。此时酶解液ACE抑制率达72.24%,水解度为21.64%,相较于未超声组ACE抑制率提高了57.42%,相较于传统超声组,ACE抑制率提高了11.36%。结果表明逆流超声波辅助酶解法能有效提高酶解效率、减少能耗、促进ACE抑制肽制备。     

超声波-复合酶耦合法制备花生粕抗氧化肽研究

以花生粕为原材料,花生粕抗氧化肽含量、DPPH自由基清除率为指标,研究不同酶解时间、超声处理时间、超声波功率、酶解温度等处理条件对花生粕抗氧化肽提取效果的影响。研究花生粕抗氧化肽对3种自由基的清除效果。试验结果表明:最佳提取条件为:底物浓度8%,超声波功率为150 W、超声处理时间5 min、酶解温度为45℃、酶解时间为1.5 h,此条件下花生粕抗氧化肽含量7.01 mg/mL,DPPH自由基清除率达到89.22%。超声波-复合酶耦合法制备的花生粕抗氧化肽对3种自由基均有较强的清除能力,且清除醇溶性自由基能力最强。     

超声波处理玉米芯制备低聚木糖的条件优化

考察了试验室规模下超声波处理玉米芯提取木聚糖经酶水解制备低聚木糖的影响因素,通过单因素试验和正交试验,优化了提取和水解条件。结果表明:以质量分数5%Na OH溶液为提取剂,超声功率为180 W,超声温度为60℃的条件下提取45 min,木聚糖产率可达到33.18%。所得提取液经脱色,调p H,调木聚糖底物浓度后酶水解制备低聚木糖。最佳酶解条件为:木聚糖底物质量浓度10 mg/m L,加酶量质量分数1.5%(相对于玉米芯干物料),酶水解时间为8 h的条件下,水解液中还原糖的质量浓度达到6.89 mg/m L。     

基于超声预处理的脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的制备

为了研究超声辅助酶解制备血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽的较优工艺,通过三种超声设备对脱脂玉米胚芽预处理,碱性蛋白酶酶解,酶解液体外模拟胃肠消化,以消化液ACE抑制率和酶解过程中玉米胚芽水解度(DH)为指标对超声预处理和酶解的参数进行单因素逐级优化。实验结果表明,最佳超声工作模式为20~40 kHz聚能式逆流双频交替超声模式;超声工作参数为功率密度120 W/L,超声预处理时间15 min,初始温度30℃,物料浓度5%;酶解条件为加酶量3000 U/g,酶解时间30 min,pH9.0,酶解温度50℃。在此条件下,酶解液的IC₅₀为4.166 mg/mL,比对照组降低了5.08%;胃肠消化液的IC₅₀为3.986 mg/mL,比对照降低了4.44%。制备的酶解产物,经模拟胃肠消化后具有较强的ACE抑制活性。优化获得的制备脱脂玉米胚芽ACE抑制肽的工艺是可行的。     

酶解制备高得率大豆肽工艺条件优化

用Alcalage碱性蛋白酶水解大豆分离蛋白制备大豆肽.通过单因素实验研究了底物质量分数、酶解pH、酶解温度、加酶量对蛋白水解度和大豆肽得率的影响,并通过响应面分析法对酶解条件进行了优化,得出最佳条件为:底物质量分数5%,酶解pH9.5,酶解温度55℃,加酶量5 400 U/g蛋白.在此条件下,大豆分离蛋白水解度为20.16%,大豆肽得率为92.30%.