仿刺参肠酶解条件的优化及其抗疲劳活性的研究

以水解度为主要指标,筛选了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶和水产蛋白酶对仿刺参肠的酶解效果,比较了p H、温度、时间、料液比和加酶量等单因素对水解度的影响,在单因素试验的基础上采用响应面试验设计对酶解条件进行了优化,并对最佳工艺下的水解产物高、中、低剂量对小鼠抗疲劳活性进行了研究。试验结果表明,水产蛋白酶对参肠蛋白的水解效果优于其它蛋白酶;响应面优化得到的最优水解条件为:温度50℃,酶的添加量2.3%,料液比1︰8.6(g/m L),p H 7.1,水解时间3.1 h,其水解度达到18.6%;参肠蛋白水解物的低中高剂量组均能显著延长小鼠的游泳时间,具有抗疲劳活性。     

响应面法优化蛋白酶酶解海带蛋白的工艺研究

运用响应面分析方法 (Response Surface Methodology, RSM)对海带蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,以水解度为指标,选择出最合适的蛋白酶。用最合适的蛋白酶对海带进行酶解,通过单因素试验,研究不同的酶解时间、酶解温度、酶解p H、料液比、酶添加量对酶解的影响。然后再用响应面分析法(CCD)对酶解条件进行优化。结果表明:复合蛋白酶为最佳的蛋白酶,最优酶解条件为酶解时间7.60 h、酶解温度53.0℃、p H 6.40、料液比1︰50 (g/mL)、加酶量0.3%,水解度为24.94%。     

水相酶法从冷榨橄榄果渣中提取蛋白的研究

采用中性蛋白酶对预处理过的脱脂橄榄果渣进行酶解从而提取橄榄蛋白,以酶解温度、p H、加酶量、反应时间为单因素进行单因素酶解研究,并在单因素基础上以水解度为响应值对酶解条件进行响应面分析,得到酶解最佳工艺条件为:反应温度42.5℃、p H 7.0、加酶量为0.6%、酶解时间3.1 h,水解度达8.58%。     

大豆蛋白酶解产物抗氧化活性与水解度相关性研究

利用碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解大豆分离蛋白,研究了底物浓度、加酶量、p H、温度因素对酶解液水解度和还原力的影响,并在此基础上用响应面分析法优化酶水解条件。以还原力为主要指标考察酶解产物的抗氧化活性,通过水解度与还原力的比较,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白产物的抗氧化活性与水解度之间没有直接线性关系。在实验得到的最佳条件下制备的大豆肽抗氧化活性良好,具有良好的应用前景。     

响应面法优化核桃降压肽的酶解工艺研究

本研究以低温脱脂核桃粕为原料,采用碱溶酸沉提蛋白后,分别用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备核桃多肽,以血管紧张素转化酶(Angiotensin-I-Converting Enzyme,ACE)抑制率和水解度为指标,选出酶解效果最好的酶,并且对其底物质量浓度、加酶量、酶解温度、酶解时间和p H进行单因素实验,在此基础上采用响应面实验优化其制备核桃降压肽的最佳水解工艺。结果表明:在底物质量浓度30g/L、加酶量8000U/g、酶解温度57℃和p H8.6的条件下水解3h,ACE抑制率可达64.32%,此时酶解液的水解度为21.57%。     

响应面法优化腊肉酶解工艺条件

为探究腊肉最佳酶解工艺,为其进一步深加工奠定理论基础。以川味腊肉为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味酶及动物蛋白酶对其进行酶解,以水解度(Degree of hydrolysis,DH)为测定指标,确定中性蛋白酶与风味酶的复配酶为最佳用酶;选取中性蛋白酶与风味酶的配比、料液比、加酶量、时间、p H及温度进行单因素实验,再在此基础上,以水解度为响应值,采用响应面法优化工艺条件,确定最佳酶解条件为中性蛋白酶与风味酶配比为1∶2、自然p H(5.9~6.0),加酶量0.35%、料液比1∶2(g/m L)、酶解温度47℃,酶解时间5 h。在此条件下,水解度实测值为8.77%,理论值为8.84%,实测值与理论值相差较小。     

响应面法优化酪蛋白酶法水解条件

采用胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶及中性蛋白酶对酪蛋白进行水解,以水解度(DH)为测定指标,确定胃蛋白酶为酪蛋白水解的最佳用酶;选定水解温度、p H、加酶量以及水解时间4个因素进行单因素实验,确定胃蛋白酶水解酪蛋白的较佳水解条件;在此基础上,采用响应面法先建立数学模型,然后回归分析、模型评价,确定最佳酶解条件为p H1.3、加酶量1.75mg/m L、温度57℃。此条件下酶解6h,水解度可达9.45%。     

双酶复合水解蜂蛹蛋白工艺研究

研究了脱脂蜂蛹蛋白的酶法水解工艺。以水解度和多肽得率为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、风味酶中选出中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行双酶复合水解。采用单因素与响应面优化设计,得出最佳酶解工艺条件为:复合酶比例1︰1(g/g)、加酶量4.67%、p H 8.27、料液比1︰12(g/m L)、酶解温度48.44℃、酶解时间4 h。此优化试验条件下,蜂蛹蛋白理论水解度46.05%,实际水解度为45.89%。此工艺可推广应用于蜂蛹蛋白多肽产业化生产的备选工艺。     

大米蛋白抗氧化肽的酶法制备工艺研究及其优化

以大米蛋白粉为反应底物,采用酶解法制备大米蛋白抗氧化肽。以酶解液的水解度与对DPPH自由基的清除率为指标,从中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶中筛选出木瓜蛋白酶为最佳用酶。通过BoxBehnken响应面设计法优化木瓜蛋白酶酶解大米蛋白抗氧化肽的工艺条件为p H值5.25、酶解温度61.4℃、加酶量5.6 U/m L、底物质量浓度5.3 g/100 m L。其酶解液稀释5倍后对DPPH自由基的清除率为94.8%。     

长白山松子降血压肽制备工艺优化

采用碱性蛋白酶对长白山松子分离蛋白进行酶解,以水解度和酶解物的ACE抑制率为考察指标,考察酶解p H、酶解温度、底物浓度、加酶量4个因素的影响,通过响应面(Box-Benhnken)组合优化试验,确定得到ACE抑制率最佳的条件为酶解p H8.9,酶解温度55℃,加酶量7 500 U/g(以底物计),底物浓度2.5%,此时ACE抑制率为70.1%,水解度为17.5%,与模型预测值基本相符。     

蛋白酶水解蟹腿残肉制备抗氧化肽的条件研究

以蟹腿残肉为底物,研究了不同预处理方式、蛋白酶种类、温度、pH、加酶量及料液比对酶解效果(酶解液水解度及DPPH自由基清除率)的影响,并采用响应面优化法对上述条件进行优化。结果表明:碱性蛋白酶水解脱脂烘干的蟹肉可得到DPPH自由基清除率较高的酶解液,酶解液的水解度及DPPH自由基清除率均受到温度、pH值、加酶量、料液比的显著影响;利用响应面优化得到的酶解条件为:温度55℃、料液比1:19.02 g/m L、加酶量3257.61 U/g、p H8.45、酶解时间3 h,所得水解液DPPH自由基清除率可达到86.36%。     

蚕蛹蛋白酶法水解工艺优化

以水解度和多肽得率为评价指标,研究了中性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解工艺。采用单因素与响应面优化设计,得出最佳酶解工艺条件为:酶解温度56℃、酶解液p H 7.7、加酶量3.9%(质量分数)、料液比1∶12(g/m L)、酶解时间2 h。在此优化试验条件下,蚕蛹蛋白水解度和多肽得率的预测值分别为24.94%和72.16%,实际值则分别为24.22%及70.61%,与模型预测值吻合。此工艺可推广应用于蚕蛹蛋白多肽产业化生产的备选工艺。     

酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的工艺研究

以鹰嘴豆为原料,以其酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率和水解度为指标,比较中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶对鹰嘴豆的酶解效果,并进一步对碱性蛋白酶的酶解工艺参数进行响应面法优化。结果表明碱性蛋白酶的酶解效果最好,响应面法优化得到碱性蛋白酶酶解鹰嘴豆制备α-葡萄糖苷酶抑制肽的最佳工艺条件为:酶解时间5.1 h,酶解温度57℃,底物浓度5.2%,p H 10.0,加酶量4 000 U/g。在该工艺条件下,鹰嘴豆蛋白水解度为14.51%,酶解产物对α-葡萄糖苷酶的抑制率可达32.79%。     

双孢蘑菇子实体蛋白酶解工艺条件优化

为探讨蛋白酶水解双孢蘑菇子实体的最佳工艺条件,本文选用中性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和复合蛋白酶对双孢蘑菇子实体进行酶解实验。通过单因素实验、响应面实验研究了酶解温度、酶解时间、p H、加酶量及料水比对双孢蘑菇子实体水解度的影响,优化了其工艺参数。结果表明,酶解温度60℃,酶解时间4h,p H10.5,加酶量2%,料水比1∶12为最优酶解参数组合,验证实验得到双孢蘑菇的水解度达到26.01%。酶解液中可溶性多糖含量及还原糖含量较子实体分别增加了3.95倍和1.91倍,蛋白质含量减少了5.02g/100g。本研究表明酶解双孢蘑菇子实体蛋白可以提高其总体功能性营养价值。     

复合蛋白酶水解棉粕制备多肽的工艺优化

为提高棉粕蛋白资源的利用率,考察了复合蛋白酶水解脱酚棉粕制备多肽的工艺。以多肽得率和水解度为评价指标,比较了不同蛋白酶对棉粕蛋白水解能力的差异,确定了以胰蛋白酶与米曲霉蛋白酶按照酶活比3∶1构建的复合蛋白酶作为水解棉粕蛋白的最佳蛋白酶。采用单因素试验及响应面试验对影响棉粕蛋白水解的因素底物蛋白质量浓度、加酶量、p H、酶解温度以及酶解时间进行了分析,并确定了棉粕蛋白水解的最佳工艺条件为:棉粕蛋白质量浓度25 g/L,加酶量5 000 U/g,p H 8. 91,酶解温度50～55℃,酶解时间5. 92 h。在最佳工艺条件下,水解棉粕蛋白的多肽得率可以达到71. 85%。多肽的氨基酸分析结果表明,酶水解制备的多肽能基本保持原棉粕蛋白的氨基酸组成,其氨基酸种类较齐全,8种必需氨基酸含量丰富,营养价值较高。     

Protamex蛋白酶水解大豆分离蛋白的研究

以大豆分离蛋白为底物,通过响应面分析,确定了用Protamex蛋白酶水解的最佳条件。最佳酶解条件为:大豆分离蛋白浓度6.0%,加酶量2.4%,酶解温度51℃,酶解时间4h,pH7.0。在最佳条件下,可得到水解度为12.94%的酶解液。     

响应面法优化南极磷虾蛋白酶解工艺条件

以水解度(DH)为考察指标,评价了中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及碱性蛋白酶酶解南极磷虾粉的效果,并选用水解效果最好的碱性蛋白酶作为试验用酶,探讨了碱性蛋白酶酶解温度、酶解时间、加酶量以及体系初始p H对水解度的影响。在单因素试验结果的基础上,采用响应面分析法优化了碱性蛋白酶酶解南极磷虾粉工艺。结果表明,最佳酶解工艺条件为酶解温度45.68℃、酶添加量1.67%、酶解时间5.47 h、pH为8.08,此条件下,南极磷虾蛋白粉水解度可达到15.27%。     

蚕蛹蛋白肽酶水解条件优化

为了降低蚕蛹过敏风险,提高蚕蛹优质蛋白利用价值并制备免疫活性肽,对蚕蛹蛋白进行了酶解优化。本文选用菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶这5种酶对脱脂蚕蛹蛋白进行酶解。通过对小鼠脾细胞增殖和水解度的检测,选取最佳蛋白酶。在此基础上对最佳蛋白酶的四个单因素(酶和底物量,初始p H,水解温度和底物浓度)进行优化,从而确定最佳的酶解条件。结果表明,5种蛋白酶中碱性蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白的酶解效果最好。对碱性蛋白酶进一步优化,通过Box-Behnken实验和回归分析获得碱性蛋白酶酶解脱脂蚕蛹蛋白的最佳条件为加酶量=6.0%,温度=55℃,酶解时间=2.00 h,p H=8.0,水∶底物=20∶1,测得的水解度为19.96%±1.02%,免疫活性OD490 nm为0.2512±0.0125。     

蛤蜊酶解条件的优化及其酶解物抗疲劳活性的研究

以水解度为评价指标,比较了复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、水产蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶和碱性蛋白酶对蛤蜊的酶解效果,结果表明,水产蛋白酶对蛤蜊的酶解效果优于其它蛋白酶;选用水产蛋白酶,利用单因素试验,比较了pH、温度、时间、料液比和加酶量对蛤蜊酶解效果的影响,并采用响应面试验设计对酶解条件进行了优化,结果表明,该酶的最优酶解条件为:酶的添加量2.0%,温度50.5℃,水解时间3 h,pH 6.0;利用小鼠负重游泳试验对蛤蜊酶解产物进行抗疲劳活性研究,结果表明,蛤蜊酶解物具有显著的抗疲劳活性。     

Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏制备抗氧化肽

通过Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏蛋白制备抗氧化肽,以酶解液的水解度(DH)、DPPH·和羟自由基清除率为指标,比较不同酶添加量、p H值、温度、料液比以及酶解时间对酶解效果的影响,并用响应面法优化Alcalase蛋白酶酶解反应的工艺条件。结果:Alcalase蛋白酶酶解大黄鱼内脏蛋白的最优工艺条件为:酶解p H9.0、底物质量浓度8 g/100 m L、温度62℃、加酶量4.26%、酶解时间3.7 h。在此条件下,蛋白质水解度为30.66%,DPPH自由基清除率为85.97%,羟自由基清除率为75.79%。对优化的酶解液进行氨基酸成分分析表明:大黄鱼内脏多肽含有丰富的组氨酸(His)、天冬氨酸(Asp)、酪氨酸(Tyr)、谷氨酸(Glu)、脯氨酸(Pro),具有较高的抗氧化活性。