羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究

目的:研究羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶活性的抑制作用和对结构的影响。方法:提取羊栖菜多糖并测定含量,以L-DOPA为底物,在475nm处测定吸光度,观察羊栖菜多糖提取物对酪氨酸酶二酚酶活力的影响;测定羊栖菜多糖作用下酪氨酸酶内源荧光和ANS结合的荧光的变化,以判断对酶结构的影响情况。结果:羊栖菜多糖提取物对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的二酚酶活力下降。羊栖菜多糖使二酚酶活力下降一半时的抑制剂浓度（IC50）为（2.16±0.37）mg/mL。羊栖菜多糖对酪氨酸酶的抑制作用是一个可逆过程,抑制类型为混合型抑制。通过动力学分析,测得羊栖菜多糖对酪氨酸酶的抑制常数（Ki）为（4.34±0.56）mg/mL。荧光测定结果表明,羊栖菜多糖的结合引起酪氨酸酶三级结构的明显改变。结论:羊栖菜多糖与酪氨酸酶的结合引起酶结构的变化,并以混合抑制的方式可逆抑制酪氨酸酶的二酚酶活性。本实验为进一步研究和设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定科学基础。      

山杏花总黄酮抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制作用的研究

利用闪式提取法提取山杏花总黄酮,并以X-5大孔树脂进行分离。通过测定分离前后山杏花总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力,总还原能力和总抗氧化能力,评价了其抗氧化活性;通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,以V_C和β-熊果苷为阳性对照,研究了分离前后山杏花总黄酮对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且分离后抗氧化活性得到明显提高;分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶的抑制能力均强于β-熊果苷弱于V_C,其IC₅₀值分别为2.24、3.08 mg/m L。综上所述,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且能有效抑制酪氨酸酶的活性。      

山杏花总黄酮抗氧化活性及其对酪氨酸酶抑制作用的研究

利用闪式提取法提取山杏花总黄酮,并以X-5大孔树脂进行分离。通过测定分离前后山杏花总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基的清除能力,总还原能力和总抗氧化能力,评价了其抗氧化活性;通过测定酪氨酸酶催化L-多巴氧化速率,以V_C和β-熊果苷为阳性对照,研究了分离前后山杏花总黄酮对体外酪氨酸酶活性的抑制作用。结果表明,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且分离后抗氧化活性得到明显提高;分离前后山杏花总黄酮对酪氨酸酶的抑制能力均强于β-熊果苷弱于V_C,其IC_(50)值分别为2.24、3.08 mg/m L。综上所述,分离前后山杏花总黄酮均具有一定的抗氧化活性,且能有效抑制酪氨酸酶的活性。     

沙棘黄酮对酪氨酸酶活力抑制作用的研究

研究沙棘黄酮对酪氨酸酶活性的抑制作用。实验测定了沙棘黄酮分别在温度、pH、时间、底物浓度、酶液加入量等因素条件下对酪氨酸酶活力的影响。结果显示,沙棘黄酮对酪氨酸酶活性的抑制率随着时间的延长,底物浓度的增加,酶量的增加而增强,而且在35℃及pH7.1时沙棘黄酮对酪氨酸酶活力的抑制作用最强可达到47.45%。说明沙棘黄酮对酪氨酸酶的活性具有较强的抑制作用。     

5种天然植物提取物抗氧化性和酪氨酸酶抑制作用的比较

本研究检测了5种天然植物提取物体外抗氧化及酪氨酸酶活性抑制作用,并分析其黄酮和总酚含量,探讨提取物美白与抗氧化之间的关联。研究表明通过ABTS+、DPPH+、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力测定得5种提取物的抗氧化能力强弱顺序虽有所差异,但四种抗氧化方法均表明提取物具有一定的抗氧化能力。同时酪氨酸酶活性抑制检测也表明它们均对酶活有一定抑制作用。5种植物提取物抗氧化及酪氨酸酶活性抑制能力均随样品浓度增加而增大,这些结果提示提取物抗氧化能力与其对酪氨酸酶活抑制作用相关联,可能是与提取物中黄酮和总酚物质有关。当采用ABTS+、DPPH+方法时,5种提取物的抗氧化性与酪氨酸酶抑制作用相关性更大,这可能与黄酮和酚类物质对酪氨酸酶活性抑制机理有关,研究结果可为天然美白植物原料的筛选和研发提供一定理论依据与借鉴。     

米曲霉发酵大米中抗氧化物质对酪氨酸酶的抑制作用

本实验采用两种不同米曲霉菌种(Aspergillus soji,A.orgzae)在35℃和湿度>90%的条件下对大米进行固态发酵6 d,比较发酵大米在发酵过程中活性物质的金属螯合、多酚氧化酶抑制、氧自由基吸收能力及总酚含量的变化。A.orgzae发酵的大米在金属螯合、多酚氧化酶抑制和氧自由基吸收能力上优于A.soji,两者在总酚含量上没有较大差别,且在发酵第4 d时大米的上述四项活性都趋于稳定,故选取A.orgzae发酵4 d的大米探讨其所含活性物质对酪氨酸酶的抑制作用。采用Lineweaver-Burk双倒数法探讨A.orgzae发酵大米中活性物质对蘑菇酪氨酸酶催化L-多巴氧化的抑制作用并推测其抑制机理。同时,虾血淋巴和虾黑变的抑制实验也证明了米曲霉发酵大米对酪氨酸酶的有效抑制作用。     

螺旋藻多糖研究进展

针对螺旋藻多糖制备、生物活性、结构、构效关系及其开发利用前景进行了阐述,为螺旋藻多糖的进一步研究开发提供参考。     

白及多糖脂质体的制备及对酪氨酸酶活性的影响

采用纳米脂质体法制备高含量白及多糖脂质体,并研究其与酪氨酸酶的相互作用机制。结果表明,制备的白及多糖脂质体平均粒径为5.72μm,粒径分布均匀;当浓度为12.8mg/mL时,白及多糖脂质体对酪氨酸酶活性抑制率为51%,半抑制浓度为11.56mg/mL。光谱分析表明,白及多糖脂质体与酪氨酸酶发生了相互作用,结合常数为6.58×10~5 L/mol;其荧光猝灭机制主要为静态猝灭,并且随着白及多糖浓度的增大,猝灭作用增强,结合位点数为1.071 1。     

螺旋藻多糖的研究及应用

螺旋藻水溶性多糖有显著的生理活性。人们对其化学结构和性质具有很大关注,期望找出多糖的化学结构、性质与生理功能之间的内在联系。本文综述了螺旋藻多糖的化学结构、性质与生理活性的研究状况,探讨了多糖的化学结构及螺旋藻在食品工业上的应用前景。     

香蕉皮总黄酮的提取及其抗氧化和抑制酪氨酸酶的活性

采用超声辅助提取香蕉皮中的总黄酮,对提取工艺进行优化,并对2种成熟度的香蕉皮总黄酮的抗氧化和抑制酪氨酸酶的活性进行研究。结果表明：香蕉皮总黄酮的最佳提取条件为料液比1∶20（g/mL）,乙醇浓度95%,温度60℃,超声时间50 min,在此条件下,总黄酮得率为1.82%。成熟度1级、成熟度6级香蕉皮总黄酮均具有较强的抗氧化能力,其对羟自由基、ABTS+自由基的清除能力及Fe3+还原能力均显著高于VC。成熟度1级、成熟度6级香蕉皮总黄酮以及VC清除羟自由基的IC50值分别为0.12、0.09、15.06 mg/mL,清除ABTS+自由基的IC50值分别为0.14、0.14、0.29 mg/mL。香蕉皮总黄酮具有抑制酪氨酸酶的活性,成熟度1级、成熟度6级香蕉皮总黄酮与曲酸抑制单酚酶活性的 IC50值分别为 0.10、0.03、0.01 mg/mL,抑制二酚酶活性的 IC50值分别为 0.15、0.14、0.11 mg/mL。     

雀嘴茶中三大酚类成分的抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性分析

为深入挖掘雀嘴茶的利用价值,本文以其中含量丰富的6’-O-咖啡酰熊果苷(CA)、β-熊果苷和绿原酸三大酚类成分为研究对象,对其抗氧化活性和酪氨酸酶抑制活性进行分析。结果表明,雀嘴茶三大酚类成分均表现出较好的抗氧化活性,6’-O-咖啡酰熊果苷(CA)、β-熊果苷和绿原酸清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为13.56±0.14、104.41±6.52和8.42±0.21μg/mL,清除ABTS⁺自由基的IC₅₀值分别为18.01±0.06、50.60±1.25和26.93±0.38μg/mL,清除OH自由基的IC₅₀值为2.64±0.06、>10.00和<1.00 mg/mL,对铁离子总还原能力的强度依次为绿原酸>CA>β-熊果苷;雀嘴茶三大酚类成分对酪氨酸酶的抑制活性差异较大,CA对酪氨酸酶兼具单酚酶和二酚酶抑制作用,其IC₅₀值分别为1.114±0.035和95.198±1.117μmol/L,β-熊果苷仅有单酚酶抑制作用,IC₅₀...     

高良姜精油和纯露的体外抗氧化活性及酪氨酸酶抑制活性研究

以超临界流体辅助提取的高良姜精油和纯露为研究对象,测定其总抗氧化能力、ABTS+自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力,并与水蒸气蒸馏法所得高良姜精油和纯露比较,结果表明,采用超临界法辅助提取的高良姜精油和纯露具有比采用传统的水蒸气蒸馏法所得的对应样品更佳的体外抗氧化活性;超临界辅助提取高良姜精油对L...     

珍珠贝肉抗氧化肽制备工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性

以马氏珠母贝肉为研究对象,采用ABTS自由基清除率为评价指标,通过单因素试验和响应面法优化制备抗氧化肽酶解物的工艺,并对酶解物冻干粉的抗氧化能力和酪氨酸抑制能力进行研究.结果表明,珍珠贝抗氧化肽的最优酶解工艺为温度50℃,pH 7.25,时间3 h,料液比1:1,酶底比0.4％,所得酶解液的ABTS自由基清除率为98....     

螺旋藻蛋白水解产物对ACE抑制活性的研究

采用胃蛋白酶和胰蛋白酶水解螺旋藻藻胆蛋白制备ACE 抑制肽,通过体外实验测定其ACE 抑制率,以ACE 抑制率为指标确定两种蛋白酶的水解条件。结果表明：胃蛋白酶水解条件为：水解温度37℃,酶与底物比1:50,pH3.0,底物质量分数5%,水解产物的ACE 抑制率为82.16%,其IC50 值为0.104mg/ml;胰蛋白酶水解条件为：水解温度42℃,酶与底物1:50,pH8.0,底物质量分数6%,水解产物的ACE 抑制率为93.54%,其IC50值为0.017mg/ml。此外,胃蛋白酶水解产物再用胰蛋白酶水解,其产物的IC50 值为0.087mg/ml。     

板栗多糖的提取及抗氧化活性研究

通过正交试验对板栗多糖的最佳提取条件进行了研究;从还原能力,抗脂质体氧化及对Fenton体系产生的羟自由基和NO2-.自由基的清除效果等方面对板栗多糖的抗氧化活性进行了研究和评价。结果表明:最佳提取工艺为提取温度65℃、料液比1∶15(g/mL)、提取时间1.5 h,在最佳工艺条件下板栗多糖浸提两次后的提取率达到9.88%;板栗多糖具有一定的还原能力,对脂质体氧化,Fenton反应产生的羟自由基和NO2-.自由基均具有一定的消除作用或抑制作用,并随多糖浓度增加板栗多糖的抗氧化活性呈现出增强的趋势。     

海带多糖及其纯化组分的胆酸盐吸附能力及抗氧化活性

采用pH 2的柠檬酸溶液提取海带中的多糖,将海带多糖（polysaccharide from Laminaria japonica,LPA-P）通过Sevag法除蛋白、透析除盐处理、离子交换柱处理,分离纯化得到3 种多糖组分LPA-P1、LPA-P2、LPA-P3,探讨了海带多糖的分子质量、硫酸基含量、单糖组成与其抗氧化能力和胆酸盐吸附能力的内在联系。结果表明：LPA-P及其纯化组分均含有硫酸基,且LPA-P3最多为5.36%,LPA-P1最少为1.22%;海带多糖及其纯化组分的单糖组成均以岩藻糖、半乳糖和甘露糖为主,其中LPA-P和LPA-P3主要的单糖为半乳糖,而LPA-P1和LPA-P2主要的单糖为甘露糖,海带多糖LPA-P3中岩藻糖含量最高;海带多糖LPA-P、LPA-P1、LPA-P2和LPA-P3的平均分子质量为20.13、17.55、28.71、17.14 kD。海带多糖的氧自由基吸收能力和2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐自由基（2,2’-azinobis (3-ethylbenzothi azoline-6-sulfonic acid) ammonium salt radical,ABTS＋·）清除能力从大到小依次为LPA-P3＞LPA-P＞LPA-P2＞LPA-P1;LPA-P3具有最强的胆酸盐吸附能力,LPA-P和LPA-P2次之且无显著性差异,LPA-P1基本不具有胆酸盐吸附能力。结合LPA-P及其纯化组分的结构特性,推测高硫酸基含量、主要单糖组成为岩藻糖和半乳糖的海带多糖具有更强的胆酸盐吸附能力及抗氧化活性。     

鱼鳞多肽对酪氨酸酶活性的抑制作用

酪氨酸酶抑制剂在化妆品、医疗和食品工业等领域中有着重要的应用,可以有效抑制黑色素的合成。该研究以来源自罗非鱼鱼鳞的多肽为原料,通过单因素试验得到超声预处理工艺参数：多肽浓度0.14 g/mL、超声功率600 W,超声温度55℃。随后,将多肽溶液与金属铜离子进行螯合。经柱层析、乙二胺四乙酸洗脱后,得到具有金属铜离子螯合能力的多肽组分。酪氨酸酶活性测定结果表明,当多肽样品浓度为5 mg/mL时,其对酪氨酸酶活性的抑制率达到60.0%,即该鱼鳞多肽组分可强烈抑制酪氨酸酶的活性。通过纳喷离子源高效液相色谱-串联质谱法鉴定分析,该组分中各多肽序列与酶活性中心金属铜离子的结合情况,推测该组分对酪氨酸酶活性的抑制作用机理是与酶自身配体竞争活性中心的金属铜离子,破坏酶活性中心结构,从而对酶活性产生抑制作用。综上,该具有金属铜离子螯合能力的鱼鳞多肽是一种有效的酪氨酸酶活性抑制剂。