酒精发酵中应用酸性蛋白酶的研究

对酸性蛋白酶在酒精发酵中的应用进行了研究。添加酸性蛋白酶有利于原料中蛋白质的水解，增加醪液中酵母可吸收性氮，促进酵母菌生长繁殖，提高酒精发酵速率。而且，a-氨基氮的增加，减轻了酵母菌细胞氨基酸合成代谢的负荷，使底物（葡萄糖）更多地转向发酵生成乙醇，提高原料出酒率。接种酵母后，在醪液中添加0．01％的酸性蛋白酶，发酵时间由原来的52h缩短到32h，发酵成熟醪酒精含量为10．2％（V）。着延长发酵时间至44h，则发酵成熟醪中酒精含量由原来的9．8％（V）增加到10．7％（V），并对添加酸性蛋白酶和（NH4）2SO4的发酵结果进行了比较，认为酸性蛋白酶是实现高效率酒精发酵的优选促进剂。     

自然发酵黄豆酱酱曲培养过程中蛋白酶的形成及蛋白质的分解

豆酱是中国传统发酵的豆制品,酱曲是发酵的前期阶段,该过程中蛋白质被水解酶分解为氨基酸和肽类。水分含量及pH值变化可以影响酱曲培养,试验结果表明水分含量呈下降趋势,pH值第1～20天下降,第20～45天升高。中性蛋白酶活力最高,碱性蛋白酶活力最低,在发酵第30天时酸性、中性蛋白酶活力达到高峰而后降低,碱性蛋白酶活力则持续升高,蛋白质分解产物NSI、多肽氮含量持续上升,最终平均NSI可达53.98%(干基),多肽氮均值为28.35%(干基),氨态氮均值为0.45%(干基)。     

高效酒精发酵剂的研制

介绍了在以淀粉为原料进行酒精发酵时,通过添加酸性蛋白酶使原料中蛋白质分解,并促使酵母生长,缩短发酵周期,从而为制造高效酒精发酵剂创造条件。选择宇佐美曲霉M90的突变株537为出发株,采用固体培养法实验,优化筛选出的M90—537—42酸性蛋白酶活力达15000～17000u／g(干物),并含有较高活性的木聚糖酶、纤维素酶、果胶酶和糖化酶等水解酶。通过酒精发酵试验,确定添加0．1％复合酸性蛋白酶麸曲可使酒精产量增加2％,加入等量的活性干酵母混合即构成高效酒精发酵剂,与对照相比,发酵醪酒浓度可提高约2％,原料出酒率可提高5％,经济效益十分明显。     

复合发酵棉籽粕营养价值及活性产物分析研究

旨在研究复合固态发酵(两株酵母和一株霉菌)对棉籽粕脱毒效果及营养价值的影响,同时分析测定发酵底物中的活性产物。结果表明:复合发酵可极显著降低棉籽粕底物游离棉酚含量(P0.01),降解率达71.90%;棉籽粕底物粗蛋白、总氨基酸和必需氨基酸含量分别提高28.96%、8.83%、7.58%;发酵54~60 h时底物中蛋白酶活力最高(酸性蛋白酶活力为931.58 U/g,中性蛋白酶活力为1 097.79 U/g,碱性蛋白酶活力为798.62 U/g),纤维素酶活力最高(滤纸酶活力为1 601.66 U/g,Cx酶活力为3 590.02 U/g,C1酶活力为1 685.35 U/g),淀粉酶活力最高为578.05 U/g;同时发酵过程产生了一定量的有机酸。     

响应面法优化贝莱斯芽孢杆菌YB19产中性蛋白酶发酵条件

为了提高贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)YB19产中性蛋白酶的活力,在单因素试验的基础上,运用响应面法对该菌株产中性蛋白酶活力的发酵条件进行优化,以达到提高该菌株产中性蛋白酶活力的目的.试验结果表明,最适发酵条件为发酵时间28 h、发酵温度32℃、接种量3.4％、水分含量18 mL、豆粕粉含量2...     

霉豆瓣中优势微生物蛋白酶活性测定

选择市售的2种霉豆瓣为研究对象,分离出其中的微生物,通过回接发酵实验,筛选出能发酵霉豆瓣的优势菌株M1、M2和M3。经鉴定M1为黑曲霉(Aspergillus niger)、M2为米曲霉(Aspergillus oryzae)、M3为雅致放射毛霉(Actinomucor elegant)。对优势菌株进行蛋白酶活力及氨基酸态氮含量测定。结果表明,米曲霉的中性蛋白酶和碱性蛋白酶活力最高,分别为632 U/g和416 U/g。黑曲霉产酸性蛋白酶活力及氨基酸态氮能力远高于米曲霉和毛霉,酸性蛋白酶高达872 U/g,氨基酸态氮含量高达0.997 5 g/100 g。而毛霉产的3种蛋白酶活力均在中间值,可起到一定的补充作用。     

氮源对酿酒酵母GJ2008不同糖浓度甘蔗汁酒精分批发酵的影响

研究了不同糖浓度下氮源对酿酒酵母GJ2008甘蔗汁酒精发酵的影响,旨在为高浓度甘蔗汁酒精发酵提供研究基础。将2 g/L尿素加入150 g/L、200 g/L、250 g/L、300 g/L和350 g/L总糖质量浓度甘蔗汁培养基中,以对应糖浓度未添加氮源组为对照组,通过分析细胞生长、糖代谢和乙醇生成来探究氮源如何影响甘蔗汁酒精发酵。结果表明：与未添加氮源相比,氮源加快了发酵速度,发酵周期最高缩短为18 h,糖消耗速率和乙醇生成速率最大分别提高了55%和96%;使酒精发酵更彻底,总糖含量最高减少了40.42 g/L;增加了目的产物,乙醇含量最高提升了28.4%。说明氮源有效地促进了甘蔗汁酒精发酵,加强了酵母的无氧呼吸途径。     

传统工艺山西老陈醋发酵及熏蒸过程中常规成分的变化分析

该研究分析了山西老陈醋在传统工艺发酵过程中淀粉酶、糖化酶、酸性和中性蛋白酶酶活变化,并对发酵及熏蒸过程中淀粉、总糖、酒精度、总酸、有机酸和氨基酸等常规成分的变化规律与形成机理进行了探讨。结果表明,酒精发酵阶段,4种酶活力变化不大,醋酸发酵阶段,4种酶活力均有所降低;发酵及熏蒸过程中淀粉含量由64.05%降至18.88%;酒精发酵阶段,总糖含量从11.88%降至1.12%,醋酸发酵阶段,总糖含量从2.28%增至7.35%,熏蒸阶段,总糖含量从7.13%降至5.89%;酒精含量在酒精发酵过程中从1.3%vol增至5.7%vol,到发酵22 d时几乎降为0;总酸含量在1～22 d内从1.17%增至10.23%;在发酵及熏蒸过程中醋酸含量从1.03 mg/g增至76.25 mg/g;酒精发酵阶段,乳酸含量从1.94 mg/g增至60.60 mg/g,随后含量变化较小。     

酶解蚕豆蛋白制备多肽酒及其抗氧化性研究

以蚕豆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶酶解、酒精发酵制备蚕豆多肽酒,并对其抗氧化性进行了研究.结果表明:蚕豆蛋白酶解优化工艺为底物浓度32 g/L,水解温度43.2℃,酶用量9 821.12 U/g,pH 9.50,在此条件下酶解2h,蚕豆蛋白的水解度达到19.64％.以蚕豆酶解液为原料制备多肽酒的发酵工艺为加糖量20％,酵母接种量0.22％,发酵温度28℃,发酵时间6d,在此条件下制得的蚕豆多肽酒的酒精含量为9.6％,呈透明的棕黄色,口感醇正、鲜爽、具有发酵酒的醇香.本试验条件下制备的蚕豆多肽酒具有较强的抗氧化性.     

地衣芽孢杆菌固体发酵培养基优化研究

研究了麦麸含量、加水量、碳源、氮源等对地衣芽孢杆菌固体发酵产碱性蛋白酶的影响。采用正交试验法优化发酵培养基配方,确定最佳发酵条件为:麦麸20 g,大豆分离蛋白30%,加水量160%,麦芽糖5%,MgSO40.6%,(NH4)2SO40.5%,K2HPO40.5%,吐温-80 0.05%,发酵时间72 h,在此发酵条件下,酶活力最高达到16 08 U/mL。     

SEMICONTINUOUS ETHANOL FERMENTATION WITH SHOCHU DISTILLERY WASTE*

An effective utilization system using distillery waste discharged from Japanese traditional shochu factory was developed. Mugi (barley) shochu distillery waste discharged from a novel vacuum distillation procedure (35–40°C) contained a large number of viable yeast (7 × 10⁶ cells/ml), glucoamylase activity (19.7 units/ml), acid protease activity (940 units/ml), and neutral protease activity (420 units/ml). Ethanol fermentation was achieved with a mash composed of glucose as the sola carbon source and mugi shochu distillery waste. After ethanol fermentation was completed the fermented broth was again distilled at 35–40°C in vacuo and the non volatile residue used in the next ethanol fermentation. In this way, semicontinuous ethanol fermentation system of more than 10 cycles was developed. Even in the distillate of the mash of the 8th fermentation cycle, 7.9% of ethanol, 33.0 ppm of ethyl acetate, 28.5 ppm of isobutyl alcohol, and other aromatic compounds were present. A semicontinuous ethanol fermentation system has been developed for shochu distillery waste which conventionally is treated as wastewater.     

地衣芽孢杆菌2709 蛋白酶分离纯化研究

对产自地衣芽孢杆菌(B. licheniformis)2709 的碱性蛋白酶通过乙醇沉淀、盐析、DEAE 阴离子交换层析、凝胶层析4 步纯化,最终获得电泳纯的酶。以去酰胺度及酶比活力为指标,对碱性蛋白酶分离纯化条件进行优化。结果发现：提纯酶的比活力达61069U/mg,纯化倍数为38.7,活性回收率为19.3%,去酰胺度为20.9%。并研究该酶的基本酶学特性,结果发现：该酶最适作用pH 值为10.0,最适反应温度为50℃。40℃保温2h 后该酶保持80% 以上的活力,在pH8～11 之间有较高的pH 值稳定性。     

米曲霉和乳酸菌混合制曲对小麦大曲制曲效果的影响

本文研究了米曲霉和乳酸菌混合制曲(KR)及米曲霉单独制曲(KP)条件下,小麦大曲中菌落总数、中性蛋白酶活力、酸性蛋白酶活力、总酸以及发酵液品质,探讨了多菌种制曲的可行性,以期为高品质小麦基调味料的生产提供理论指导。研究结果表明:KR工艺中小麦大曲的乳酸菌和霉菌均繁殖良好,12 h时乳酸菌达到了4.15×108 cfu/g,乳酸菌的繁殖对霉菌的生长有一定的抑制效果;米曲霉和乳酸菌混合制曲比米曲霉单独接种制曲效果好,制曲48 h时,KR工艺所得到的大曲中性和酸性蛋白酶与米曲霉纯种制曲相比,分别提高了22.79%和22.26%;KR大曲发酵液的全氮含量、氨基酸态氮含量均高于KP工艺,发酵60 d时KR发酵液的游离氨基酸含量高于KP,其中谷氨酸含量明显提高,对比KP工艺提高了24.21%,具有更明显的鲜味口感。     

米曲霉PRB-1蛋白酶系和淀粉酶系与高盐稀态酱油理化特性关系的研究

本文采用一株自行分离的米曲霉PRB-1菌株(AP)进行制曲和高盐稀态酱油发酵。结果表明:AP成曲的酸性和中性蛋白酶活力达到398.53 U/g干基和1539.98 U/g干基,较米曲霉3.042(AO)分别提高71.79%和59.93%。AP成曲淀粉酶活力比AO略低。AP成曲含有5个中性蛋白酶组分,2个酸性蛋白酶组分和4个淀粉酶组分。其中,蛋白酶Rf6号和淀粉酶Rf3号活力最大。随着发酵时间的延长,AP和AO酱醪总酸含量呈现上升趋势。p H值由中性持续下降至偏酸性。氨基态氮含量持续增加,还原糖含量均呈现先显著上升后缓慢降低的趋势。发酵55d AP头油的氨基态氮含量为0.86 g/100 m L,原料利用率为81.97%,氨基酸生成率为61.37%,较AO均有较高的优势。AP头油的还原糖含量为4.82 g/100 m L,低于AO。成曲的中性蛋白酶活力和发酵酱油的氨基酸生成率呈正相关(p0.05),对其他指标无显著影响(p0.05)。     

山羊乳酪蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

为了制备山羊乳酪蛋白活性肽,选用中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,采用对比和正交试验方法,研究了山羊乳酪蛋白单酶和复合酶的酶解工艺,测定了山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数,优选出了山羊乳酪蛋白的酶解工艺参数。结果表明：山羊乳酪蛋白的总肽键摩尔数为8.5379 mmol/g。单酶中胰蛋白酶和中性蛋白酶对山羊乳酪蛋白的水解度较大,木瓜蛋白酶较小。胰蛋白酶对山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺：加酶量2500 U/g,pH 7.5,50 ℃下酶解2 h。中性蛋白酶和胰蛋白酶复合以及中性蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶三种酶复合的水解度较大,其水解度、平均肽链长度和平均相对分子量分别为17.34%、21.16%,5.77、4.73和692、567 u。     

毛霉高产中性蛋白酶发酵培养基的优化

以雅致放射毛霉和五通桥毛霉为实验材料,采用单因素和正交优化实验对两种毛霉高产中性蛋白酶发酵培养基进行优化。结果表明:雅致放射毛霉产中性蛋白酶发酵培养基最佳成分为:蔗糖添加量为10%、黄豆粉添加量为2.5%、KH2PO4添加量为0.4%、CaCl2添加量为0.11%,此条件下中性蛋白酶酶活力达1310.56U/mL;五通桥毛霉产中性蛋白酶发酵培养基最佳成分为:蔗糖添加量为10%、黄豆粉添加量为3.0%、KH2PO4添加量为0.37%、CaCl2添加量为0.07%,此条件下中性蛋白酶酶活力达1306.38U/mL。两种毛霉酶活力提高的百分比分别为60.1%和46.7%,此研究成果为缩短腐乳后酵周期及直装腐乳发酵工艺的后续研究奠定了基础。      

蛋白酶在乙醇溶液中的性质及构象

对碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶在乙醇溶液中的性质和构象进行了研究。研究结果表明,在乙醇溶液中,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶催化反应的最适温度有不同程度下降,下降幅度为5～10℃;它们的最适pH与在缓冲液体系中相差不大。2种蛋白酶在醇溶液中的稳定性随着乙醇浓度的升高而下降,特别是当乙醇浓度上升至60%,2种蛋白酶的稳定性均迅速下降。在相同的乙醇浓度下,木瓜蛋白酶的稳定性比碱性蛋白酶高。当乙醇浓度为60%时,木瓜蛋白酶的半衰期是碱性蛋白酶的21倍。圆二色谱研究表明,在乙醇溶液中碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶的二级结构均发生了明显变化,荧光光谱表明,在乙醇溶液中2种蛋白酶的荧光强度均有明显减弱,表明它们的三级结构均发生明显变化。     

Fermentation of Chortan (heated strained yoghurt) by Lactobacillus helveticus: sonication treatment and biological activities

In the present study, the effects of continuous and pulsed ultrasound (100 W, 30 kHz, 25–75% amplitudes for 30 min) and fermentation process (37°C for 24 h) by Lactobacillus helveticus PTCC 1332 on biological activities of Chortan were investigated. The obtained results showed that fermentation enhanced protease content (36.27% (neutral), 37.57% (acid), 39.28% (alkaline) protease), peptide concentration (45.27%) and antioxidant activity (33.69% (DPPH), 132.85% (ABTS)) of samples compared to unfermented ones. Additionally, an increase in ultrasound amplitude (except for continuous at 75%) promoted the protease enzymes, peptides and radical scavenging activity of the fermented and unfermented samples. Our results indicated that the ultrasound and fermentation treatments complemented each other. Depending on the experimental conditions, the effect of continuous ultrasound on samples was sometimes lower, sometimes similar and sometimes higher than that of pulsed treatment. Therefore, selection of an appropriate ultrasound mode and amplitude can improve the biological activity of Chortan.     

Study of compatibility between enzyme and textile auxiliaries with wool北大核心

The article studied the compatibility between alkaline proteinase, neutral protease and textile auxiliaries with the wool finished. We analyzed the nonionic-organic textile auxiliaries, ionic-organic textile auxiliaries and dyes by reduction and relative activity combination method. The results showed that the salt of Na+ , K+ , NH4+ , Mg 2+ , Ca2+ promoted the catalytic of enzyme when the concentration of the salt was lower, the nonionic-surfactants could promot the catalytic of enzyme. The salt of Cu2+ ,Fe3+, Mn0 4- , ionic-surfactants and dyes could evidently restraint the catalytic of alkaline proteinase, neutral protease. The salt of Na + , K+ , NH4+ , Mg 2+ , Ca2+ promoted more evidently the catalytic of neutral protease than alkaline proteinase. The ionic-surfactants and dyes restrainted more evidently the catalytic of alkaline proteinase than neutral protease. The studies might guide the application of protease for the wool textle industry on the theory.     

不同生化因子对米曲霉蛋白酶系活力的影响

研究不同生化因子（金属离子、乙二胺四乙酸（EDTA）和十二烷基磺酸钠（SDS））对米曲霉蛋白酶系（包括酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、氨肽酶和羧肽酶等5种）活力的影响,结果显示：生化因子都对羧肽酶活力有促进作用,影响最强的是Ca2+,其相对酶活达到310%;对酸性蛋白酶活力促进作用最强的是的Mn2+,相对酶活达到317%;而SDS完全抑制其活性。生化因子对中性蛋白酶、碱性蛋白酶和氨肽酶活力主要起抑制作用,抑制能力最强的分别是Ge2+,Fe3+和SDS。Ag+对氨肽酶活力促进显著,相对酶活力达到483%。