鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及PI3K/Akt信号通路的影响

目的：探讨鱼油对KKAy糖尿病小鼠糖代谢及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K）/蛋 白激酶B（protein kinase B,Akt）信号通路的影响。方法：40 只KKAy小鼠,分为模型组和鱼油低、中、高剂 量组,每组10 只。另设10 只C57BL/6小鼠为正常对照组。灌胃12 周后,测定血糖、胰岛素、脂联素、瘦素及 PI3K/Akt信号通路中相关基因的表达水平。结果：与模型组相比,鱼油低剂量组血糖水平极显著降低（P＜0.01）, 鱼油低、中剂量组胰岛素水平显著提高（P＜0.05）,鱼油各剂量组的脂联素水平显著提高（P＜0.05）。此外,鱼油 各剂量组可上调胰岛素受体底物-1、PI3K、Akt、葡萄糖转运蛋白-4基因的表达,其中低剂量鱼油对Akt和葡萄糖转 运蛋白-4基因的调控效果更显著。结论：低剂量鱼油可能通过调节PI3K/Akt信号通路改善糖代谢。     

人参皂苷F2通过PI3K/Akt途径改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗

该研究探讨了人参皂苷F2对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及其机制。将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成熟后,用1 μmol/L地塞米松处理48 h,建立胰岛素抵抗模型。用10 μmol/L的罗格列酮（阳性对照）和25、50、100 μmol/L人参皂苷F2处理胰岛素抵抗细胞12 h,检测细胞对2-NBDG的摄取。实验结束后用RT-qPCR检测各组细胞中葡萄糖转运蛋白4（GLUT-4）和胰岛素底物受体1（IRS-1）mRNA相对表达量,并利用Western blot检测PI3K/Akt信号通路中蛋白表达及其磷酸化水平。结果表明：与模型组相比,25、50、100 μmol/L人参皂苷F2均能促进胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞对2-NBDG的摄取,分别增加了12.58%、29.07%和34.62%（p<0.05）;人参皂苷F2作用12 h后,GLUT-4和IRS-1 mRNA相对表达量以及PI3K、Akt的磷酸化水平显著提高（p<0.01）。该研究表明人参皂苷F2可通过促进胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中GLUT-4和IRS-1mRNA相对表达,增加PI3K和Akt蛋白磷酸化,从而激活PI3K/Akt信号通路,改善其糖代谢和胰岛素抵抗。     

基于PI3K/Akt信号通路研究积雪草中微量皂苷（CA-1）的神经保护作用

利用6-羟基多巴胺（6-Hydroxydopamine,6-OHDA）诱导分化型PC12细胞构建的帕金森病（Parkinson’s Disease,PD）体外细胞模型,研究了从积雪草中提取的微量皂苷（Centella Asiatica Saponins-1,CA-1）的神经保护作用。通过高分辨二级质谱鉴定化学结构、分析了积雪草中常用皂苷和CA-1对PC12细胞存活率的影响,进一步通过半定量和实时定量聚合酶链式反应、蛋白印迹等技术检测PC12细胞中相关基因和蛋白表达。结果表明在该模型中100 μmol/L CA-1、积雪草苷（Asiaticoside,AS）、羟基积雪草苷（Madecassoside,MA）分别将细胞存活率提高了28.63%、16.69%、17.54%,CA-1的神经保护作用强于AS和MA（p<0.05）。与模型组相比,CA-1剂量依赖性地提高了6-OHDA诱导PC12细胞的存活率且在CA-1浓度为25 μmol/L与模型组有显著差异（p<0.05）,降低了细胞内活性氧（Reactive Oxygen Species,ROS）的水平,上调了Sod1、Cat、Bcl2基因表达。蛋白印迹法（Western Blot,WB）显示,CA-1提高了p85、PDK1、Akt的蛋白表达水平。在该研究中明确了CA-1的神经保护作用揭示了其作用可能通过PI3K/Akt信号通路。     

牦牛血低聚肽对缺氧介导的H9c2心肌细胞损伤的保护及其作用机制

体外培养H9c2心肌细胞建立缺氧损伤模型,随机分为5组(n=6):正常对照组、缺氧组、牦牛血低聚肽低、中、高剂量组。结果表明,缺氧组的细胞存活率显著降低(P0.01)、细胞凋亡率显著升高(P0.01)、LDH释放水平显著升高(P0.01),线粒体膜电位极显著降低(P0.01),表明缺氧对H9c2心肌细胞产生了损伤。与缺氧组相比,牦牛血低聚肽干预组的细胞存活率增加,细胞凋亡减少以及细胞中LDH的释放水平下降,并呈良好的剂量依赖关系。同时,牦牛血低聚肽能够抑制线粒体膜电位下降,提高细胞T-AOC水平,降低TNF-α水平,抑制缺氧介导的细胞色素C的释放,上调抗凋亡蛋白(Survivin、p-Akt、Akt)的表达,降低促凋亡蛋白(Caspase-3/9)的活性,且牦牛血低聚肽也影响编码上述蛋白的m RNA水平。以上结果表明;牦牛血低聚肽对H9c2心肌细胞的保护与抑制PI3K-Akt信号转导通路、保护细胞线粒体结构功能完整性有密切关系。     

刺参低聚肽对糖尿病小鼠降血糖作用的研究

研究刺参低聚肽对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。腹腔注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型,连续6周灌胃不同剂量的刺参低聚肽(0.1、0.2、0.5 g/kg),记录灌胃0、2、4、6周后的小鼠体重及空腹血糖值,并测定灌胃结束后的小鼠胸腺、脾脏、肝脏和肾脏指数,以及血清丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量与血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。刺参低聚肽中、高剂量能减缓糖尿病小鼠消瘦的症状(p0.01),降低糖尿病小鼠的血糖值(p0.05),且作用浓度与时间成正相关。高剂量的刺参低聚肽能显著提高小鼠各脏器指数(p0.05),降低糖尿病小鼠血清MDA含量(p0.05),提高血清SOD活性(p0.01)。刺参低聚肽对糖尿病小鼠具有降血糖、增强免疫力、保护肝肾及抗氧化的作用,推测可能通过抗氧化和增强免疫力起到降低血糖及防治糖尿病并发症的作用。     

浓缩山西老陈醋对高脂血症小鼠血脂及血糖的调节作用

目的：基于PI3K/AKT1通路探究山西老陈醋对高脂饮食诱导大鼠抗氧化作用机制。方法：30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为5组：正常组（C,常规饲料）、高脂模型组（M,高脂乳剂）、低（LV）、中（MV）、高（HV）剂量山西老陈醋干预组（1.35、2.7、5.4 g/（kg·bw））。造模（5周）同时给予陈醋干预后,山西老陈醋继续干预5周。检测血清血脂含量、肝损伤指标及抗氧化酶活性;HE染色观察肝组织病理学状态;qRT-PCR和Western blotting检测大鼠肝脏中PIK3CA、AKT1 mRNA及蛋白水平表达,免疫组织化学技术进行定位分析。结果：与C组相比,M组肝脂肪变性严重,血清中脂质含量和肝损伤程度极显著升高（P<0.01）,抗氧化酶活性极显著下降（P<0.01）,肝组织中PIK3CA和AKT1 mRNA及蛋白水平表达极显著升高（P<0.01）,高脂血症大鼠造模成功,同时PI3K/AKT1通路被激活。血清学检测结果显示,山西老陈醋可显著下调血清中脂质含量、改善肝损伤、增加抗氧化酶活性（P<0.05）,使其肝组织病理损伤减轻,且HV和MV组改善效果优于LV组。qRT-PCR、Western blotting及免疫组织化学技术检测结果显示,PIK3CA、AKT1主要定位于肝细胞质及细胞核中,山西老陈醋可极显著下调PI3K/AKT1通路中PIK3CA、AKT1 mRNA及蛋白水平表达（P<0.01）,HV和MV组干预效果优于LV组。结论：不同剂量山西老陈醋可不同程度改善高脂饮食大鼠脂质、抗氧化及肝功能指标,最佳剂量可能在2.7~5.4 g/（kg·bw）之间,山西老陈醋可能通过调控PI3K/AKT1通路发挥抗氧化应激损伤作用,进而改善高脂饮食诱发的大鼠高脂血症。     

刺五加多糖调控PI3K/Akt/mTOR通路改善大鼠抑郁行为的作用

为研究刺五加多糖对抑郁行为的改善作用及机制,将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、盐酸氟西汀组（2.1 mg/kg）及刺五加多糖低、高剂量组（60、120 mg/kg）,每组10只。采用单笼孤养及慢性轻度不可知应激刺激28 d建立抑郁模型,并从建模第1 d开始灌胃给药。通过敞箱实验、糖水偏好实验及强迫游泳实验评价抑郁行为,苏木精-伊红染色及尼氏染色检测海马组织病理,并比较各组白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF-α）、过氧化氢酶（catalase,CAT）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、磷酸化磷脂酰肌醇激酶（phosphorylated phosphatidylinositol 3 kinases,p-PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B,p-Akt）及磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR）等指标变化情况。结果发现,与正常对照组比较,模型对照组大鼠的水平活动次数、糖水偏好度极显著降低（P<0.01）,游泳不动时间极显著升高（P<0.01）,且海马组织出现明显病理变化;与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠水平活动次数、糖水偏好度极显著增加（P<0.01）,游泳不动时间显著降低（P<0.05、P<0.01）,且海马组织结构病理变化得到缓解。同时,与正常对照组比较,模型对照组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平极显著增加（P<0.01）,CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达极显著降低（P<0.01）;与模型对照组比较,刺五加多糖低、高剂量组大鼠IL-1β、IL-6、TNF-α及MDA水平显著降低（P<0.05、P<0.01）,CAT、SOD活性及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达显著增加（P<0.05、P<0.01）。上述结果表明,刺五加多糖具有改善抑郁模型大鼠抑郁行为作用,其机制与调控PI3K/Akt/mTOR通路及抗炎、抗氧化应激作用有关。     

D-松醇对二型糖尿病大鼠PI3K及下游糖原合成基因的调控

主要探究D-松醇对2型糖尿病大鼠PI3K及下游糖原合成基因的调控作用,选用雄性SD大鼠进行实验。高脂高糖饲料喂养配合注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立2型糖尿病模型。将实验动物分为正常对照组(N)、模型对照组(C)、D-松醇低剂量组(L,30mg/(kg BW·d))、D-松醇高剂量组(H,60mg/(kg BW·d))和正常高剂量组(NH,60mg/(kg BW·d))。N组和NH组饲喂正常饲料,其余3组饲喂高脂高糖饲料,灌胃治疗期间定期进行体重和空腹血糖(FBG)测定,5周后大鼠处死并对其糖化血清蛋白(GSP)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及肝糖原等生化指标进行测定,并从肝脏中提取m RNA,利用PCR技术对大鼠肝脏中的PI3K、Akt、GSK-3β和GS的表达进行检测。结果表明:经灌胃治疗5周后,H组与C组相比FBG、GSP、AST和ALT水平均极显著性降低(p0.01),肝糖原含量极显著性增加(p0.01),L组和H组PI3K、Akt和GS的表达上调,GSK-3β表达下调,说明D-松醇可以通过调控大鼠肝脏PI3K及下游糖原合成基因来调节患糖尿病大鼠的血糖,起到降血糖的作用。     

微晶丁酸酯豌豆淀粉对糖尿病小鼠的影响

以豌豆淀粉为原料制备微晶丁酸酯豌豆淀粉(MBPS),通过链脲佐菌素(STZ)和高脂饲喂结合的方法,建立2型糖尿病小鼠模型,研究不同取代度的MBPS对糖尿病小鼠的空腹血糖、口服葡萄糖耐受量、血清生化水平以及肝、肾病理切片指标的影响。结果表明：喂食MBPS 21 d,可以使糖尿病小鼠的空腹血糖值得到改善;喂食MBPS 28 d可以使糖尿病小鼠的血清生化水平、口服葡萄糖耐受量以及肝、肾损伤得到改善。随着淀粉取代度的增加,其对糖尿病小鼠的调节作用也随之增强。研究证明MBPS对糖尿病有改善作用。     

基于JAK2/STAT3信号通路的乌鸡肽营养素配方治疗贫血功效研究

乌鸡是我国特有的鸡种,具有很好的补血功能,利用乌鸡开发新的补血产品具有很大优势。该研究通过对贫血小鼠灌喂添加营养素(EDTAFeNa和维生素)的乌鸡肽配方样品,测试对其造血能力的恢复功效并通过探究信号通路研究造血作用机制。实验通过使用环磷酰胺和乙酰苯肼制造小鼠贫血模型,并检测外周血象、骨髓病理学观察、间接胆红素含量、ATP酶活力、造血因子水平以及JAK2/STAT3信号通路。结果表明乌鸡肽营养素配方可以显著恢复外周血细胞和骨髓造血干细胞数量;减少间接胆红素含量,提高ATP酶活力从而保护红细胞免受破裂损伤;通过分泌促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)、重组巨噬细胞粒细胞集落刺激因子(human granulocyte-macrophage colony stimulating factor, GM-CSF)和白细胞介素-3(interleukin-3, IL-3)造血因子促进造血细胞恢复,并通过JAK2/STAT3信号通路调控造血细胞增殖分化。该研究为乌鸡肽的开发和利用提供了指导。     

植物多酚通过PI3K/Akt信号通路抗肿瘤作用研究进展

磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸/苏氨酸激酶B（phosphatidylinositol 3-kinase/serine/threonine kinase B,PI3K/Akt）信号通路是一条经典的抑制细胞凋亡、促进细胞增殖的信号转导通路,在肿瘤、心血管疾病、神经系统疾病和糖尿病等的防治中发挥重要作用,特别是肿瘤。PI3K/Akt信号通路的异常活化与肿瘤的发生、侵袭和转移等过程密切相关,对该通路的研究已成为当今国内外治疗肿瘤的焦点。植物多酚因具有抗肿瘤作用而成为预防肿瘤的天然药物。本文综述了PI3K/Akt信号通路的结构、活化机制以及与肿瘤的关系,总结植物多酚通过该信号通路对肿瘤细胞的作用机制,以期为研发植物多酚作为预防肿瘤的保健食品或药品提供一定的科学依据。     

Collagen peptides from Acaudina molpadioides prevent CCl4-induced liver injury via Keap1/Nrf2-ARE,PI3K/AKT,and MAPKs pathways

Collagen peptide from Acaudina molpadioides (AMP) showed antioxidative activity in H₂O₂-induced RAW264.7 cells in our pervious study. In this study, it was observed that AMP could effectively improve the morphology and function of liver in CCl₄-induced mice. After 200 mg/kg AMP treatment, the content of MDA in liver decreased by 62.3%, and the level of antioxidant enzymes (SOD, GSH-Px, and CAT) increased by more than 65%. Western blot results disclosed that AMP (200 mg/kg) upregulated the Nrf2 level by 73.8% and downregulated Keap1 by 41.0% in CCl₄-induced mice liver. The levels of p-ERK, p-JNK, and p-p38 in 200 mg/kg AMP treatment groups decreased by 57.3%, 40.9%, and 40.6%, but the levels of p-PI3K and p-AKT increased by 162.6% and 60.3%, respectively. Furthermore, the trends of Nrf2, Keap1, p-ERK, p-JNK, p-p38, p-PI3K, and p-AKT levels in H₂O₂-induced RAW264.7 cells after AMP treatment were similar to the results in CCl₄-induced mice liver. These findings provided evidence that AMP exerted antioxidant activity via Keap1/Nrf2-ARE, PI3K/AKT, and MAPKs pathways in vivo and in vitro. Therefore, the collagen peptide from A. molpadioides might represent a novel functional food to prevent acute liver injury via attenuation of oxidative stress.     

Regulation of lipid and glucose homeostasis by mango tree leaf extract is mediated by AMPK and PI3K/AKT signaling pathways

Ethanolic extract of Mangifera indica (mango) dose-dependently decreased serum glucose and triglyceride in KK-A^y mice. Our in vitro and in vivo investigations revealed that the effect of mango leave extract (ME) on glucose and lipid homeostasis is mediated, at least in part, through the PI3 K/AKT and AMPK signaling pathway. ME up-regulated the expression of PI3 K, AKT and GYS genes by 2.0-fold, 3.2-fold, and 2.7-fold, respectively, leading to a decrease in glucose level. On the other hand, ME up-regulated AMPK and altered lipid metabolism. ME also down-regulated ACC (2.8-fold), HSL (1.6-fold), FAS (1.8-fold) and PPAR-γ (4.0-fold). Finally, we determined that active metabolites of benzophenone C-glucosides, Iriflophenone 3-C-β-glucoside and Foliamangiferoside A from ME, may play a dominant role in this integrated regulation of sugar and lipid homeostasis.