卵运铁蛋白消化稳定性及消化产物致敏性分析

为了评价卵运铁蛋白消化稳定性及消化产物的致敏性,采用体外静态模拟婴幼儿消化模型对卵运铁蛋白进行消化,利用SDS-PAGE、RP-HPLC和质谱对卵运铁蛋白消化稳定性进行表征,通过ELISA检测消化产物的特异性IgE结合能力,利用KU812细胞脱颗粒模型评估消化产物的致敏性。结果显示,鸡蛋卵运铁蛋白经过模拟胃液消化后,大部分被消化,产生的肽段分子质量主要在3～12 ku,经过模拟小肠液进一步被消化,再经过BBM酶的作用,卵运铁蛋白全部降解成小片段;卵运铁蛋白及其经胃液、胃-小肠、胃-小肠-BBM酶的消化产物与IgE特异性结合的OD值、细胞释放的β-氨基己糖苷酶、组胺、TNF-α、IL-4含量分别为1.032、0.679、0.389、0.328,19.90%、14.04%、10.95%、8.31%,665.13、446.62、374.24、359.67ng/mL,15.07、8.96、2.90、2.07 pg/mL,5.97、2.04、0.95、0.82 pg/mL。卵运铁蛋白可以被模拟婴幼儿消化液所消化,具有一定稳定性和抗消化能力,但仍保留较强的致敏性。     

重组人乳铁蛋白致敏性的初步研究

目的 初步评价牛乳腺生物反应器表达的重组人乳铁蛋白(rhLf)的致敏性.方法 通过生物信息学分析和消化稳定性试验了解rhLf致敏的可能性.结果 生物信息学分析显示rhLf与已知致敏原乳转铁蛋白和卵转铁蛋白有序列同源性,与Asp f2、Ole e 10和Ole e9存在结构相似性.消化稳定性试验显示rhLf在胃液中易被消化成小片段,在肠液中不易被消化.结论 rhLf具有一定的潜在致敏可能性.     

大豆胚轴提取物体外对小肠黏膜蔗糖酶、麦芽糖酶及葡萄糖转运活性的影响

在体外比色法观察大豆胚轴提取物对大鼠小肠黏膜蔗糖酶和麦芽糖酶活性的影响,并用快速过滤法观察其对兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运活性的影响。结果表明,大豆胚轴提取物明显降低大鼠小肠蔗糖酶、麦芽糖酶活性和兔小肠刷状缘囊泡葡萄糖转运能力。提示,大豆胚轴提取物可延缓小肠对糖的消化和吸收,经常食用可能有助于延缓餐后血糖的持续升高。     

罗非鱼鱼鳞肽钙复合物的稳定性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料制备肽-钙复合物,以钙的结合量为指标,研究了体外胃肠道模拟消化、小肠刷状缘膜酶、共存食物成分、pH、热处理等因素对罗非鱼鱼鳞肽钙复合物稳定性的影响。结果表明,罗非鱼鱼鳞肽钙复合物对消化酶、小肠刷状缘膜酶的降解具有较高的耐受性,对NaCl、乳糖具有较好的稳定性(p0.05);但对50℃以上的热处理较为敏感,钙结合量显著下降(p0.05)。鱼鳞肽钙复合物在pH2.0的酸性条件下易于解离,但在弱碱性条件比较稳定,pH9.0时钙结合率可达89.65%。推测肽钙复合物在小肠内主要以结合物的形式存在以阻止钙在碱性条件下的沉淀。     

罗非鱼鱼鳞肽钙复合物的稳定性研究

以罗非鱼鱼鳞为原料制备肽-钙复合物,以钙的结合量为指标,研究了体外胃肠道模拟消化、小肠刷状缘膜酶、共存食物成分、pH、热处理等因素对罗非鱼鱼鳞肽钙复合物稳定性的影响。结果表明,罗非鱼鱼鳞肽钙复合物对消化酶、小肠刷状缘膜酶的降解具有较高的耐受性,对NaCl、乳糖具有较好的稳定性（p>0.05）;但对50℃以上的热处理较为敏感,钙结合量显著下降（p<0.05）。鱼鳞肽钙复合物在pH2.0的酸性条件下易于解离,但在弱碱性条件比较稳定,pH9.0时钙结合率可达89.65%。推测肽钙复合物在小肠内主要以结合物的形式存在以阻止钙在碱性条件下的沉淀。      

三氯生在体外模拟胃肠液中的降解动力学

研究不同初始质量浓度的三氯生在模拟胃液和肠液中的消化动力学。结果表明,三氯生在模拟胃液和肠液中反应3 h后均不能被完全消化,低、中、高初始质量浓度的三氯生在胃液中的最终残留率分别为17.40%、32.02%和39.54%,在肠液中的最终残留率分别为33.32%、43.10%和51.26%。三氯生在模拟胃液中的消化率高于肠液,且消化过程与进入人体的初始质量浓度相关,低初始质量浓度组的消化率最高,高质量浓度组的最低。一级反应动力学模型可以较好地描述三氯生在模拟胃肠液中的降解过程和降解速率,模型的线性相关系数R大于0.9。三氯生在胃肠液中的消化特征呈现先快后慢,后期趋于稳定的状态。总体上,三氯生在模拟胃液和肠液中较难被完全消化。     

体外模拟消化多维锌软糖的研究

采用体外模拟消化法对多维锌软糖的功效成分释放进行研究,模拟研究多维锌软糖功效成分在模拟胃液和肠液中的消化释放特性,并考察了多维锌软糖的微观结构。研究结果显示,多维锌软糖崩解时限为141min,3种功效成分在模拟胃液中的消化释放特性差别较大,与片剂和胶囊剂相比,释放均较缓慢,释放终点的累积释放率略低,具有一定的缓释效果。软糖经过模拟胃液的消化,未释放的功效成分在模拟肠液中快速释出,3种功效成分在模拟肠液中的消化特性略有不同。软糖在消化时,胶体微观结构呈多孔网状结构。结果表明:多维锌软糖不仅具有缓释功效成分的作用,其功效成分在模拟胃液和肠液中具有良好的稳定性和释出特性。     

转谷氨酰胺酶诱导复合蛋白冷致凝胶性能及对茶碱的控释研究

利用转谷氨酰胺酶(MTG酶)诱导大豆分离蛋白-明胶形成复合蛋白冷致凝胶并将其用作茶碱的控释载体,同时对其在模拟胃液和肠液中的控释特性进行研究。结合动态流变测试盒扫描电镜技术研究了复合冷致凝胶性质和表面形态。结果表明:大豆分离蛋白-明胶复合蛋白冷致凝胶呈现致密的网络结构,制备的冷致凝胶在模拟胃液中均呈现溶胀状态,在模拟肠液中逐渐被消化,且其在模拟胃液中溶胀率较低。凝胶在模拟胃液(pH1.2)中的释药率相对模拟肠液(pH7.4)要快,水凝胶对于茶碱的保护能保持至少5h,因此,MTG酶诱导的复合蛋白冷致凝胶对于功能食品的开发将有深远影响。     

转谷氨酰胺酶诱导复合蛋白冷致凝胶性能及对茶碱的控释研究

利用转谷氨酰胺酶（MTG酶）诱导大豆分离蛋白-明胶形成复合蛋白冷致凝胶并将其用作茶碱的控释载体,同时对其在模拟胃液和肠液中的控释特性进行研究。结合动态流变测试盒扫描电镜技术研究了复合冷致凝胶性质和表面形态。结果表明:大豆分离蛋白-明胶复合蛋白冷致凝胶呈现致密的网络结构,制备的冷致凝胶在模拟胃液中均呈现溶胀状态,在模拟肠液中逐渐被消化,且其在模拟胃液中溶胀率较低。凝胶在模拟胃液（pH1.2）中的释药率相对模拟肠液（pH7.4）要快,水凝胶对于茶碱的保护能保持至少5h,因此,MTG酶诱导的复合蛋白冷致凝胶对于功能食品的开发将有深远影响。      

抗性淀粉体外消化模拟的研究

采用体外消化模拟方法,研究了抗性淀粉在人工胃肠液和大肠液中的消化吸收情况,并用原淀粉作为对照组。结果表明,抗性淀粉和原淀粉在生理盐水中均没有被分解,生理盐水对抗性淀粉的消化毫无影响。与对照组原淀粉相比,抗性淀粉在人工胃液(pH3、pH4、pH5)和人工肠液(pH6.8)中变化很小,人工胃液和人工肠液对抗性淀粉不起消化作用。抗性淀粉在大肠液中有明显的失重,说明大肠液对抗性淀粉有影响,抗性淀粉能够被大肠中的微生物发酵或部分发酵。从而说明抗性淀粉不能在胃和小肠中消化吸收。     

牛乳酪蛋白体外模拟消化液的ACE抑制活性及其肠道吸收

本文对牛乳酪蛋白进行体外模拟消化,以ACE抑制活性为指征,LC-MS/MS确定水解物肽谱,并采用大鼠肠道模型对其吸收进行初步研究。结果为人工胃液消化、人工肠液消化、胃肠联合消化三种消化方式的水解度均随时间的延长而增大,单胃和单肠消化的ACE抑制率均随水解时间的延长先快速增加,随后逐渐降低,而胃肠联合的ACE抑制率则是先降低再增加,胃肠联合消化产生水解度最高为25.51%,其ACE抑制率在2 h时达到最高值为68.03%;LC-MS/MS测定消化液的肽谱,分析得出模拟消化后可能产生的ACE抑制肽有IPP、RYLGY、LHLPLP、AYFYPEL、RPKHPIKHQ及WQVLPNAVPAK;使用FITC标记酪蛋白进行体外模拟消化,SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE都表明FITC-酪蛋白经过胃肠消化后荧光标记稳定存在,且水解物的分子量在5 ku以下;大鼠肠道吸收模型发现标记后的牛乳酪蛋白经模拟消化后在肠道吸收率大小依次为十二指肠吸收空肠吸收回肠吸收结肠吸收,主要在十二指肠吸收。     

葛仙米藻胆蛋白的体外消化特性

研究葛仙米藻胆蛋白在体外模拟胃液和肠液的消化产物性质,重点测定不同消化时间产物的可溶性蛋白质、游离氨基含量变化及其抗氧化作用,并利用HPLC法测定消化产物分子质量变化情况。结果表明：在胃液和肠液消化作用下蛋白质含量均呈现下降趋势,而游离氨基含量呈现上升趋势,消化产物较初始产物对ABTS+·和脂质过氧化具有更强的抑制作用,但对·OH的清除能力却有所下降;偏相关分析结果表明,与葛仙米藻胆蛋白消化产物的抗氧化作用紧密相关的是消化产物中的分子质量为6ku和0.2ku的肽类。     

热处理对生鲜乳及复原乳蛋白质体外消化特性的影响

通过体外模拟消化的方法对不同热处理的牛乳样品进行检测,研究热处理对鲜牛乳及复原乳营养价值的影响。通过聚丙烯酰氨凝胶电泳、尺寸排阻高效液相色谱、扫描电镜及质谱分析等多种方法进行检测。结果表明:经过胃液消化后,牛乳中的部分蛋白被消化,其中酪蛋白消化最为明显,鲜牛乳中酪蛋白在胃液中的消化水平高于其他热处理样品;而经过肠液消化后,牛乳中蛋白消化完全,生成游离氨基酸及小肽。乳中蛋白质经消化主要生成分子质量低于1 500 Da的肽段,易于人体消化吸收。通过扫描电镜可以看出,热处理程度越大,乳蛋白变性,发生聚集现象,粒径增大,其中加热复原乳的粒径较其他乳制品大;通过质谱检测及高效液相色谱分析,热处理程度越大,蛋白质美拉德反应程度升高。     

体外模拟胃肠消化对缢蛏抗氧化活性的影响

目的 基于体外模拟消化系统探究胃肠模拟消化对缢蛏的抗氧化活性的影响以及氨基酸含量的变化。方法 以新鲜缢蛏为原料,向体外模拟消化系统加入胃蛋白酶和胰蛋白酶,模拟在胃液和肠液下的胃消化、十二指肠消化和小肠消化过程,研究缢蛏在消化过程中的羟基自由基(·OH)清除率、二苯代苦味酰基自由基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radical, DPPH·)清除率、还原力、水解度、游离氨基态氮及游离氨基酸含量的变化。结果 整个胃肠消化阶段,加酶组的·OH清除率、DPPH·清除率、还原力均高于对照组。肠消化产物的·OH清除率、DPPH·清除率、还原能力及水解度均高于胃消化产物,并且肠消化产物中的总游离氨基酸含量及具有抗氧化特征的氨基酸含量均显著高于胃消化产物(P<0.05)。在十二指肠消化阶段,·OH清除率、DPPH·清除率、还原力值达到最高。结论 体外模拟消化处理能够提高缢蛏的抗氧化活性,其中十二指肠消化阶段产物抗氧化活性最高。     

Influence of gastric digestive reaction on subsequent in vitro intestinal digestion of sodium caseinate-stabilized emulsions

In this study, in vitro intestinal lipid digestion and the physicochemical and microstructural changes of sodium caseinate-stabilized emulsions were examined after the emulsions had been digested in a model simulated gastric fluid containing pepsin for different times. The average size, size distribution, microstructure, proteolysis of interfacial proteins and lipolysis of the emulsion droplets were monitored as a function of digestion time. The emulsion droplets underwent extensive droplet flocculation, with some coalescence together with proteolysis of interfacial proteins, in simulated gastric fluid, resulting in changes in the droplet size and the microstructure of the emulsions. In general, digestion in simulated gastric fluid containing pepsin accelerated coalescence of the emulsion droplets during subsequent digestion in simulated intestinal fluid containing pancreatic lipase. However, the changes in the size, the microstructure and the proteolysis of the interfacial proteins of the emulsions under gastric conditions did not influence the rate and the extent of lipid digestion in the subsequent intestinal environment.     

常见大豆制品中蛋白质的体外消化特性

本研究以常见大豆制品（大豆分离蛋白（soy protein isolate,SPI）、微波大豆、水煮大豆、豆浆、氯化钙豆腐和氯化镁豆腐）为研究对象,采用标准的静态体外消化模型——INFOGEST 2.0,测定不同时间点胃肠消化产物的完整蛋白、分子质量分布、游离氨基浓度和粒径大小,以探究大豆蛋白的消化特性。结果表明,不同加工方式均能促进大豆蛋白的消化。经过胃消化阶段后,几种大豆制品中部分蛋白被消化。而肠消化后,大豆蛋白均被彻底消化为短肽。相较于SPI,大豆经微波和水煮处理后,大豆蛋白的游离氨基浓度明显增加,但微波加热后大豆蛋白消化得更彻底;豆浆中大豆蛋白的消化程度低于氯化钙豆腐和氯化镁豆腐,两种豆腐中大豆蛋白的消化程度没有明显差异。总之,不同加工方式处理大豆均能不同程度地促进大豆蛋白的消化。本研究有助于更好地了解不同加工方式得到的大豆制品中大豆蛋白的消化特性,为人们摄取植物蛋白提供参考。     

甲鱼蛋α-葡萄糖苷酶抑制肽及其纳米运载体的体外胃肠消化特性

以甲鱼蛋α-葡萄糖苷酶抑制肽SGTLLHK为研究对象,评价胃肠消化对SGTLLHK抑制α-葡萄糖苷酶活性的影响;采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱分析SGTLLHK的消化特性及其产物;最后通过制备牛乳外泌体和固体脂质纳米颗粒（solid lipid nanoparticles,SLN）包埋SGTLLHK,测定颗粒特征（微观结构、Zeta电位、粒径、多分散性指数（polymer dispersity index,PDI））,并利用高效液相色谱考察包埋率及在胃肠道环境下的稳定性。结果表明：经胃消化后原肽SGTLLHK完全被降解,从消化产物中共鉴定到2 条肽段（SGTLL、GTLL）;进一步经肠消化后GTLL被完全降解,仅剩产物SGTLL。SGTLLHK的α-葡萄糖苷酶抑制活性在胃消化后显著上升,而在肠消化后显著下降,且低于原肽的抑制能力。SGTLLHK被成功包埋于外泌体、SLN中,其中外泌体包埋体系具有高度稳定性（粒径（125.87±2.66）nm,PDI 0.17±0.01）,经胃肠消化后,SGTLLHK-外泌体颗粒体系保留率为72.52%,SGTLLHK-SLN保留率为48.43%,表明两者均能保护大部分原肽不被胃肠消化酶降解,且外泌体的保护作用优于SLN。