High performance liquid chromatographic determination of organic acids, sugars, glycerin and alcohol in wine on a cation exchange resin

The main constituents of wine (ethanol, glycerol, glucose, fructose, tartrate, malate, lactate, succinate, acetate and citrate) were separated by HPLC in one run and determined quantitatively in a time of 25 min. The stationary phase was the cation exchange resin HPX 87H and the mobile phase was dilute sulfuric acid. The results of the HPLC analysis of several wines are presented. Good agreement is observed with the results obtained by conventional methods.     

Measurement of ascorbic acid and erythorbic acid in processed meat by HPLC

Summary A simple and efficient HPLC method is described to measure both ascorbic and erythorbic acid separately in processed meat products. The system used consisted of a reversed-phase column, a mobile phase containing an ion-pairing agent and ultraviolet detection. The procedure, which was checked on a variety of samples, was found to give reproducible and reliable results.

---

HPLC-Methode zur Bestimmung der Ascorbinsäure und der Erythorbinsäure in Fleischwaren

Zusammenfassung Eine einfache und effiziente HPLC-Methode wird beschrieben, welche die separate Bestimmung der Ascorbinsäure neben der Erythorbinsäure in Fleischwaren ermöglicht. Das System besteht aus einer Umkehrphasensäule, einer mit einem Ionenpaarbildner modulierten mobilen Phase und UV-Detektion. Das Verfahren wurde an einer Reihe verschiedener Proben getestet und erwies sich als zuverlässig und reproduzierbar.

     

HPLC using diol-bonded silica, an alternative to silical gel in the prefractionation of aroma extracts

Summary A strawberry jam dichloromethane aroma extract was pre-fractionated by normal phase HPLC on diol. This was preceded by neutralization with aqueous sodium bicarbonate, and removal of fatty acids by gel filtration on Sephadex LH-20. Elution of the diol column with a gradient of diethyl ether in pentane resulted in the separation of two main fractions. One contained hydrocarbons and carbonyl compounds, whereas lactones and polar compounds such as hydroxylated carbonyl compounds or alcohols were present in the second fraction. HPLC on diol is highly recommended as the first prefractionation step since, in contrast to silica gel, it allows easy recovery of all aroma constituents.

---

HPLC an Diol-Phasen — eine Alternative zu Kieselgel beim Vorfraktionieren von Aroma-Extrakten

Zusammenfassung Ein Dichlormethan-Extrakt einer Erdbeerkonfitüre wurde mittels HPLC an einer Diol-Phase vorfraktioniert. Zuvor wurde mit einer wäßrigen Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert und die Fettsäuren durch Gelfiltration an Sephadex LH-20 entfernt. Durch Elution der Diol-Säule mit Pentan-Ether konnten zwei Hauptfraktionen abgetrennt werden. Die erste Fraktion enthielt Kohlenwasserstoffe und Carbonylverbindungen, während in der zweiten Fraktion Lactone und polare Verbindungen wie z. B. hydroxylierte Carbonylverbindungen und Alkohole vorhanden waren. HPLC an Diol-phasen ist als erster Vorfraktionierungsschritt bestens geeignet, da im Gegensatz zu Kieselgel alle Aromakomponenten leicht wieder eluiert werden können.

     

Nachweis der Herkunft von Ethanol und der Zuckerung von Wein durch positionelle Wasserstoff- und Kohlenstoff-Isotopenverh?ltnis-Messung

Zusammenfassung Zur positionellen massenspektrometrischen Isotopenanalyse wird Ethanol zu Essigsäure oxidiert; aus dieser werden durch Pyrolyse bzw. Verbrennung die Gase für die Isotopenverhältnis-messung erhalten. Untersuchungen an Ethanol verschiedenen Ursprungs zeigen, daß der ²H-Wert der CH₃-Gruppe mit dem ²H-Wert des nicht-austauschbaren Wasserstoffs im Ausgangskohlenhydrat zusammenhängt und daß sogar die Zuordnung von Ethanol zu Kohlenhydraten aus verschiedenen C₃-Pflanzen und die Unterscheidung von Synthesealkoholen mög-lich ist. Für Gärungsalkohol erweist sich außerdem eine relative Anreicherung von¹³C in Position 1, für Synthesealkohol in Position 2 als typisch. Aus den Ergebnissen werden Kriterien für den Nachweis der Herkunft eines Ethanols and den Beweis der Zuordnung von Wein abgeleitet. Nach dem gleichen Verfahren ist eine Herkunftsbestimmung von Essigsäure möglich.

---

Assignment of ethanol origin and proof of sugar addition to wine through positional²H and¹³C isotope ratio measurement

Summary For a positional mass spectrometric isotopic analysis, ethanol has been oxidized to acetic acid from which gases for isotope ratio analysis of different molecular parts can be obtained by pyrolysis or combustion. Investigations of ethanol from different origins demonstrated a correlation between the ²H value of the ethanol methyl group (C-2) and of the non-exchangeable hydrogen atoms of the fermented carbohydrate. In addition, an assignment of ethanol produced from the fermentation of carbohydrates of different C3 plant species and a discrimination between natural versus synthetic ethanol was possible. A significant enrichment of 13C was observed in position 1 for fermented ethanol and in position 2 for synthetic ethanol. From the results, criteria for the assignment of the origin of ethanol and for the proof of sugar addition to wine are proposed. With the same method, a determination of the origin of acetic acid is also possible.

     

Stability of sulphadimidine during raw fermented sausage preparation

The transformation of sulphadimidine (SDM) during raw fermented suasage preparation was studied to elucidate the SDM decrease found in an earlier study. The raw fermented sausages were prepared from batters containing 1 and 10 mg [¹⁴C]-SCM kg^–1. The sausages and the brines were analysed using methods based on solid-phase extraction followed by HPLC combined with liquid scintillation counting. It can be concluded that the decrease in SDM level is mainly caused by (i) leaching into the brine (approx. 25%), (ii) transformation of SDM, possibly by reactions with components in the sausage or the brine, as the presence of five reaction products from SDM could be demonstrated, and (iii) formation of bound residues (approx. 20%).

---

Stabilität von Sulfadimidin während der Rohwurstherstellung

Zusammenfassung Die Transformation von Sulfadimidin (SDM) während der Rohwurstherstellung wurde untersucht um die bei vorhergehenden Untersuchungen gefundene SDM-Abnahme zu klären. Die Rohwurst wurde mit 1 und 10 mg¹⁴C-SDM pro kg bereitet. Die Analyse der Wurst und Pökellake erfolgte Fest-Flüssig-Extraktion und HPLC, kombiniert mit Flüssigkeits-Szintillation-Zählung. Die Abnahme des SDM-Gehaltes in der Wurst wurde hauptsächlich verursacht durch: Auslaugen (ungefähr 25%), Reaktionen von SDM mit Komponenten in der Wurst und in der Lake (fünf Reaktionsprodukte wurden gefunden), und Bildung von gebundenen Rückständen (ungefähr 20%).

     

The authentication of sherry wines using pattern recognition: an inter laboratory study

Summary Sherry wine has been compared with Italian base wine and Huelva and Montilla wine, which are possible substrates for adulteration. Three different laboratories used their own chemical methods of analysis and applied linear discriminant functions to discriminate between these types of wines. The differentiation could be performed using either organic constituents such as volatiles and organic acids or trace metals. Special attention must be paid to samples strongly deviating in only one variable, since such a deviating value does not belong to the statistical population. Such a deviation may be caused by processing or agricultural treatment of the vines.

---

Nachweis der Echtheit von Sherrywein durch Multivariant-Analyse. Ein Interlaboratoriumsversuch

Zusammenfassung Sherry wurde mit italienischen Basisweinen, Huelva and Montilla verglichen, da diese Weine für eine Verfälschung von Sherry gebraucht werden könnten. Drei verschiedene Laboratorien benutzten ihre eigenen chemischen Analysemethoden und wendeten die Methode der Linear-Discriminant-Analyse an, um einen Unterschied zwischen diesen Weintypen zu erhalten. Unterschiede konnten mit Hilfe organischer Verbindungen, sowie flüchtigen Verbindungen und organische Säuren, oder mit Hilfe von Spurenelementen festgestellt werden. Spezielle Aufmerksamkeit mußte Proben gewidmet werden, die bei nur einer Variante stark abweichen, weil ein so stark abweichender Wert nicht zur statistischen Population gehört. Solche Abweichungen könnten durch Umstände während der Produktion oder durch landbauwirtschaftliche Behandlungen verursacht werden.

     

Reversed-phase HPLC analysis of peptides in standard and dairy samples using on-line absorbance and post-column OPA-fluorescence detection

Absorbance and post-columno-phthalaldehyde (OPA)-fluorescent detection were used to analyse standard and dairy peptides following reversed-phase HPLC. Using both detection systems on-line provides additional information on the presence of peptides in dairy products. The detection response depends on the amino acid composition of the peptide involved. Among the peptides used, glutathione, lysine-containing peptides and peptides with glycine as the N-terminal residue give the highest fluorescence after the OPA post-column reaction. Absorbance is more sensitive than fluorescence for peptides with aromatic amino acids. Different parameters, such as the flow rate of OPA, the amount of mercaptoethanol in the OPA reagent and the temperature of reaction, substantially influence the fluorescent response of peptides. The interest of using on-line absorbance and fluorescence detection is highlighted by analysing peptides from skim milk and from a tryptic hydrolysate.

---

Analyse der Peptide in Standardproben und Milchprodukten (mittels Hochleistungs-Flüssigchromatographie in reverser Phase (HPLC) unter Einsatz von on-line Absorptions- und Fluoreszenznachweis mit OPA

Zusammenfassung Der Postkolonnen-Absorptions- und Fluoreszenznachweis mit orthophthaldialdehyd (OPA) wird bei der Standard- und Milchpeptidanalyse nach der Trennung durch Hochleistungs-Flüssigchromatographie (HPLC) eingesetzt. Der Einsatz beider Nachweissysteme vermittelt zusätzliche Information über das Auftreten von Peptiden in Milchprodukten. Das Ergebnis des Nachweisverfahrens ist von der chemischen Bindung der Aminosäuren im Peptid abhängig. Unter den untersuchten Peptiden weisen Glutathion, Peptide mit Lysin und Peptide mit Glykokoll im endständigen N nach der Postkolonnen-Reaktion mit OPA die größte Fluoreszenz auf. Bei Peptiden mit aromatischen Aminosäuren spricht die Absorption stärker als die Fluoreszenz an. Verschiedene Parameter wie die OPA-Strömung, der Anteil an Mercaptoethanol im Reagens OPA und die Reaktionstemperatur beeinflussen die Fluoreszenzcharakteristik des Peptids. Der Einsatz der on-line-Absorption und Fluoreszenz ist nützlich bei der Analyse von Peptiden in entrahmter Milch und eines tryptischen Hydrolysats.

     

Anwendung der Festphasenextraktion zur raschen Probenvorbereitung bei der Bestimmung von Lebensmittelinhaltsstoffen I. Chinin in Getr?nken

Zusammenfassung Zur Bestimmung von Chinin in Trinkbranntweinen und alkoholfreien Erfrischungsgetränken wurde eine Methode für die Routineanalytik erarbeitet. Chinin wurde dabei durch HPLC unter Verwendung der Ionenpaarchromatographie an RP 18 als stationäre Phase von interferierenden Stoffen abgetrennt und mit Hilfe von UV- bzw. Fluorescenzdetektion nachgewiesen. Eine zusätzliche Absicherung der Ergebnisse erfolgte durch Einsatz eines Photodiodenarray-Detektors. Im Gegensatz zur Analyse von alkoholfreien Erfrischungsgetränken war für Trinkbranntweine eine Probenvorbereitung nötig. Hierzu eignete sich die Festphasenextraktion an Phenylsorbens als schnelle, spezifische und einfache Methode.

---

Use of solid-phase extraction for rapid sample preparation in the determination of food constituents. I. Quinine in beverages

Summary A routine method was developed for the determination of quinine in spirits and alcohol-free beverages. Using ion pair chromatography quinine was separated from interfering substances by high-performance liquid chromatography on a RP 18 phase and analysed by UV and fluorescence detection. In contrast to the analysis of alcohol-free beverages, sample preparation was necessary in the study of alcoholic beverages. Solid-phase extraction on phenyl sorbens was found to be a rapid, specific and simple technique.

     

Analysis of purine compounds and creatinine by ion-pair high-performance liquid chromatography (HPLC) as a method for the detection of yeast extracts in commercial meat flavourings

The purine patterns of five industrially produced yeast extracts and nine yeast-extract-based commercial meat flavourings were analysed by ion-pair HPLC after acid hydrolysis of the purine-containing compounds and a clean-up step via cation exchange. The results indicate that there is a good correlation between the adenine contents of the flavourings and the yeast extract percentages used for their manufacture. The possible addition of authentic meat constituents (e.g. meat extract) would contribute likewise to the adenine contents of commercial meat flavourings. To recognize those products the characteristic meat constituent creatinine was analysed simultanously.

---

Nachweis von Hefeextrakt in handelsüblichen Fleischessenzen durch Bestimmung der Purinverbindungen und des Kreatininsmittels der Ionenpaar-Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC)

Zusammenfassung Mittels Ionenpaar-HPLC wurden die Purinmuster von 5 industriell hergestellten Hefeextrakten sowie von 9 handelsüblichen, auf Basis von Hefeextrakt hergestellten Fleischessenzen untersucht. Die Probenaufarbeitung umfaßte eine Hydrolyse der purinhaltigen Verbindungen und einen Aufreinigungsschritt mittels Kationenaustausch. Die Ergebnisse zeigen, daß eine gute Korrelation zwischen den Adeningehalten handelsüblicher Fleischessenzen und den zu deren Herstellung verwendeten Hefeextraktanteilen besteht. Der mögliche Zusatz von authentischen Fleischauszügen (z.B. Fleischextrakt) würde ebenfalls zum Adeningehalt handelsüblicher Fleischessenzen beitragen. Um derartige Produkte zu erkennen, wurde die vorgestellte Methode so konzipiert, daß der charakteristische Fleischinhaltsstoff Kreatinin simultan miterfaßt wird.