不同产地仙鹤草内生真菌分布及活性菌株筛选

药用植物内生菌是影响宿主活性成分积累的一大因素,不同产地药用植物内生菌的种类与分布值得探讨.对江西、内蒙古产仙鹤草内生真菌进行分离培养,分别获得20株与17株内生真菌,并与浙江产30株仙鹤草内生真菌进行比较,发现不同产地仙鹤草内生真菌种类与分布均有差异,浙江产仙鹤草内生真菌种类最多.通过将内生真菌接种至含仙鹤草多酚粗提物的培养基中,研究各菌株培养基中多酚类物质含量变化,结果表明:8株内生真菌能显著提高培养基中多酚类物质的质量浓度,其中江西产仙鹤草内生菌株R3-1为106.37μg/mL,是对照组(8.70μg/mL)的12.23倍,提高幅度最大.采用分子生物学技术,鉴定R3-1菌株为黄曲霉(Aspergillus flavus).     

乌拉尔甘草悬浮单细胞的筛选及培养

乌拉尔甘草种子在消毒后培养无菌苗,截取无菌苗子叶、上胚轴和下胚轴等作为外植体,诱导和继代培养成松散型愈伤组织,然后在振荡培养后过筛获得悬浮单细胞;再对悬浮液进行多级稀释、培养制备小细胞团．结果表明,在合1．0mg／L2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）、1．0mg／Lα-萘乙酸（NAA）、1．0mg／L 6-苄基氨基嘌呤（6-BA）、0．3mg／L激动素（KT）的MS培养基中,上胚轴能在3～5次继代培养后获得松散型愈伤组织,过80目筛可以获得悬浮单细胞和小细胞团;同样的培养基,悬浮单细胞在琼脂表面、珍珠岩表面和看护培养中培养,看护培养的细胞生长最快、小细胞团形态最佳．     

5株无花果叶内生真菌的分离鉴定和抗菌活性的研究

采用平板粘插法从无花果的叶中分离到5株产广谱、高活性抑菌物质的内生真菌, 经测定,其对细菌、植物病原真菌和酵母菌共10种病原微生物有明显的抑制作用.根据其形态特征,这些高活性菌株初步鉴定为青霉属(Penicillium sp.)、瓶梗青霉属(Paecilomyces sp.)、链格孢属(Alternaria sp.).     

一株具抗菌活性的恒山黄芪内生真菌的分离与鉴定

从药用植物恒山黄芪的根、茎、叶中分离出49株内生真菌,经抗菌活性检测,筛选出1株具有高活性广谱抗菌的菌株AR08,经形态特征和ITS序列鉴定菌株AR08为烟曲霉(As-pergillus fumigatus).其抗菌谱表明,它对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌及测试的植物病原真菌均具有很强的抗性.     

半夏软腐病内生拮抗放线菌的分离与鉴定

针对半夏生产过程中软腐病废水普遍和危害严重的现状,从7个半夏主产区的半夏植株上分离到47个内生放线菌,通过平板和组培苗拮抗活性筛选获得两个具有较强活性的菌株07JX3-2和07JX3-7,经形态、培养特征和生理生化实验鉴定,初步确定两个分离物均属于链霉菌属(streptomyces),至于其所在种有待进一步鉴定。两个拮抗菌株的获得为半夏软腐病的生物防治研究和应用奠定了基础。     

仙鹤草内生真菌的分离鉴定与抗菌活性

植物内生真菌代谢产物丰富, 作为一种寻找开发药物的重要资源已受到人们的日益关注.本 实验对中药仙鹤草内生真菌进行分离, 获得30 株内生真菌, 其中由根中分离得到17 株, 茎中分离 得到7 株, 叶中分离得到6 株.并采用形态学观察方法, 对分离得到的内生真菌菌株进行初步鉴定, 其分别归属于青霉属, 顶孢霉属, 镰孢霉属, 根霉属, 酵母属, 珠网霉属, 毛霉属和核盘菌属等8 个真 菌属.采用平板对峙法, 研究各菌株对金黄色葡萄球菌的抗菌作用, 通过初步筛选, 共计9 株表现抑 菌活性.再进一步用内生真菌发酵萃取液做抑菌活性, 发现仅3 株菌株有抗菌活性, 都属于镰孢霉 属.为后续的活性物质分离奠定了基础.     

南方山荷叶内生真菌与根际真菌的多样性及相关性探讨

对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定，得到25株内生真菌和19株根际真菌，其中内生真菌分属于5个科、8个属，根际真菌分属于5个科、6个属。对这两组真菌作比较分析，显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性，并对植物内生真菌的起源作了初步探讨。     

蛇足石杉内生真菌的研究进展

蛇足石杉由于其治疗老年痴呆等疾病,具有特殊的药用价值和潜在的巨大经济价值,正日益受到国内外的关注。本文综述了近年来国内外对蛇足石杉内生真菌的生物学性状、分离纯化、菌种鉴定、发酵产物及活性筛选等方面的研究现状,并提出一些建议,对未来蛇足石杉内生真菌的研究进行了展望。     

高抑菌活性的金银花内生真菌的ITS序列分析法鉴定

采用分子生物学方法,对金银花中分离的2株具有高抑菌活性的内生真菌JY2和JY9的rDNA中的ITS序列进行了测序和分析.结果表明:JY2与镰刀菌属的同源性达到99%以上,判定为镰刀菌属;JY9与现有相似序列的同源性都不高,只能推测其可能为子囊菌门,与原形态学鉴定的赤霉属有差别.     

秦岭药用植物防风内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

采用组织分离法分离新鲜防风中根、茎、叶内的内生真菌,用形态学方法对其进行初步鉴定并使用滤纸片法来测定其次生代谢产物的抑菌活性。从防风中分离得到32株内生真菌,它们分属于7目9科14属,并且具有不同程度的抑菌活性,其中菌种DR12、DL02、DS07和DS09具有较强的抑菌活性。防风内生真菌种类繁多,其次生代谢产物具有广泛的抑菌活性,从防风植物中分离内生真菌尚属首次报道。     

一株产类胡萝卜素菌株的鉴定和培养条件优化及抗氧化特性分析

为拓宽产类胡萝卜素的微生物资源,以郫县豆瓣为分离源,筛选产类胡萝卜素菌株GH-1,并利用形态学、生理生化和16S rRNA序列分析鉴定该菌株;在单因素试验基础之上采用响应面法优化产类胡萝卜素菌株培养条件;借助自由基清除法分析该菌株产类胡萝卜素的抗氧化能力。结果表明:菌株GH-1为暗红戈登氏菌（Gordonia rubripertincta）,菌株最佳培养条件为培养时间145 h、接种量8%、初始pH 7.0、装液量60 mL/250 mL;该菌株在产类胡萝卜素方面具有较好的性能（最佳培养条件下产量为7.24 mg/L）,可作为优质的类胡萝卜素菌种资源;菌株GH-1产类胡萝卜素具有良好的自由基清除能力,该色素可作为潜在的抗氧化剂。     

丁酸菌的分离、鉴定及筛选

从32位健康人的粪便中分离到4株丁酸梭状芽孢杆菌，其中丁酸酸状芽孢杆菌Z－10产酸和细胞生长速度最快，对其安全性评价为基本无毒，并进行了鉴定。     

凡口铅锌矿废弃地植物促生长内生真菌的筛选

以粤北凡口铅锌矿废弃地优势植物香蒲(Typhaorientalis presl)、苦楝(Melia azedarach)、苎麻(Boehmeria nivea)和蓖麻(Ricinus communis)中分离筛选出的具有抗重金属铅、锌能力的45株内生真菌为研究材料,利用CAS检测液显色反应、钼锑抗比色法和Salkowski法,分别筛选出具有促进植物生长的产铁载体菌株30株、溶磷菌株3株和产吲哚乙酸(IAA)菌株18株。并选取具有产铁载体、溶磷或产IAA能力较强的菌株作为代表菌株进行形态学鉴定和ITS序列分析,鉴定结果显示：WB-21为曲霉属(Aspergillus)、BM3为旋孢腔菌属(Cochliobolus)、BM5为链格孢属(Alternaria)、菌株XP3.21为刺盘孢属(Colletotrichum)、ZMP5-3为篮状菌属(Talaromyces)。     

甘草提取物抗氧化性能的研究

本文研究了两种不同甘草提取物在猪油中的抗氧化作用,结果表明乙醇提取物抗氧化性高于乙酸乙酯提取物。乙醇提取物添加量达０．０３％时,可与人工合成抗氧化剂ＢＨＴ添加０．０２％相媲美,其添加量越高抗氧化效果越好。同时还研究了二种提取物与其他抗氧化剂ＰＧ、增效剂类如磷脂、Ｌ－抗坏血酸、柠檬酸的混合作用,结果表明两种甘草提取物均与Ｌ－抗坏血酸有较好的协同效应。     

产表面活性剂石油降解菌株的筛选及鉴定

从长期受油污的土壤中分离得到了7株降解石油类菌株,其编号分别为菌2-1、菌7-1、菌1-2、菌5-2、菌7-2、菌油3及菌油5.经形态观察、Biolog鉴定和16SrDNA基因序列分析,可鉴定菌2-1和菌7-1为粘质沙雷氏菌,菌1-2为居植物柔武氏菌,菌5-2、菌油3和菌油5都为克雷伯氏菌属,菌7-2为蜡状芽孢杆菌.其中,菌1-2、菌5-2和菌7-2能使发酵液的表面张力从36.10mN/m降低至20.20mN/m、20.74mN/m、21.78mN/m,表明这些菌所产生的表面活性剂能具有较强的乳化原油的能力,展现了较大的应用前景.     

抗肿瘤海洋真菌的筛选及菌株HGQ6的初步研究

筛选抗肿瘤活性海洋真菌,鉴定活性菌株并初步研究其活性代谢产物的理化性质。从连云港近岸海域沉积物中共分离得到真菌31株,发现它们的培养物普遍具有抗肿瘤活性,其中4株真菌的培养物具有显著的细胞毒活性（抑制率〉80%）。对活性菌株HGQ6的研究表明,其发酵液对多种肿瘤细胞呈现显著的细胞毒活性,活性产物为极性中等、热稳定性较好和耐酸不耐碱的物质。根据菌株的形态学特征和ITS序列分析结果,将菌株HGQ6鉴定为产黄青霉（Penicillium chryso-genum）。     

高效降解OTA的发酵工业用菌株筛选及鉴定

赭曲霉毒素A(OTA)是粮食类食品中常见的一种真菌毒素,生物方式降解OTA是目前最具前景的研究方向,而高效降解OTA的菌种筛选仍是生物降解的重要研究内容.研究用缺陷型培养基从土壤中采用TLC法、HPLC法经初筛和复筛获得高效降解OTA的菌株.最终得到4株菌M00120、M30011、M10012及M40011,其降解率分别为99%、81%、76%及71%.随后对其进行鉴定,并根据降解效率及应用安全性,发掘得到具有较大应用价值的黑曲霉M00120及米曲霉M30011,为其进一步在发酵上的应用提供研究依据.     

甘草提取物抗氧化性能的研究

本文研究了两种不同甘草提取物在猪油中的抗氧化作用,结果表明乙醇提取物抗氧化性高于乙酸乙酯提取物。乙醇提取物添加量达０．０３％时,可与人工合成抗氧化剂ＢＨＴ添加０．０２％相媲美,其添加量越高抗氧化效果越好。同时还研究了二种提取物与其他抗氧化剂ＰＧ、增效剂类如脑磷脂、Ｌ－抗坏血酸、柠檬酸的混合作用,结果表明两种甘草提取物均与Ｌ－抗坏血酸有较好的协同效应。     

果胶酶高产菌株AspT7的分离及筛选鉴定

用3种分离培养基培养供试菌株黑曲霉Ja,分别观察菌落生长情况,通过测量透明圈大小定性比较聚半乳糖醛酸酶活力大小,确定溴酚蓝平板培养基为较好的分离培养基。从土壤样本中通过富集培养、驯化、溴酚蓝平板初筛和摇瓶复筛,筛选出1株高产聚半乳糖醛酸酶的菌株AspT7,产聚半乳糖醛酸酶活力达到了6．5万U／mL,经初步鉴定为黑曲霉,将其命名为Aspergillus niger AspT7。