酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。     

降解豆粕菌株的筛选及发酵工艺优化

利用产蛋白酶能力较强的菌株将脱脂豆粕原料中的大豆蛋白降解为大豆多肽.以蛋白酶活力及水解度为指标筛选出降解豆粕能力较强菌株W-13,并以水解度为指标对菌株发酵降解豆粕的条件进行了优化,得到最适发酵条件为:11%豆粕、2%玉米粉、3%接种量、发酵时间48 h,在最适培养基上蛋白水解度为65%.     

酶解豆粕制备鲜味肽内切酶筛选与工艺优化

以高温豆粕为原料,以水解度和滋味稀释因子为指标,比较了内切酶(木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶、胰蛋白酶)的酶解效果,筛选出最佳内切酶,为中性蛋白酶。通过单因素试验考察其添加量、酶解pH和酶解时间3个因素对豆粕蛋白水解度和滋味稀释因子的影响;在此基础上,通过L_9(3~4)正交试验优化了中性蛋白酶酶解高温豆粕的酶解工艺,即添加量7 500 U/g、pH 5.8、酶解时间5 h,在此条件下水解度为31.16%。此次试验为高温豆粕高值化利用奠定理论基础。     

复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺优化

为充分利用黑豆粕中的蛋白质资源,研究了复合蛋白酶水解黑豆粕制备多肽的工艺路线。从蛋白酶的筛选入手,考察了不同蛋白酶对黑豆粕水解效果的差异,并通过复配比例优化了最佳复合蛋白酶的组成。采用单因素试验及响应面试验确定了复合蛋白酶水解黑豆粕的最佳工艺条件。结果表明:最佳复合蛋白酶为胰蛋白酶、碱性蛋白酶与桔青霉蛋白酶按酶活比1∶3∶2复配;最佳工艺条件为加酶量5 670 U/g,底物蛋白质量浓度40 g/L,pH 9.55,水解温度50℃,水解时间6 h。在优化的工艺条件下水解黑豆粕,多肽得率可以达到82.44%。水解液中多肽的相对分子质量均在7.8 kDa以下,大部分多肽的相对分子质量小于3.3 kDa;多肽基本上保持了黑豆粕蛋白的氨基酸组成,具有较高的营养价值。     

微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定

建立了一种适于蛋白质水解液水解度测定的新方法。以脱脂豆粕粉为原料，具产蛋白酶能力的微生物为生产菌种进行发酵。微生物所产蛋白酶作用于豆粕粉中的大豆蛋白将其水解成大豆多肽。通过新建立的方法测定了不同发酵时间发酵液的水解度，并与文献所报道的常规测定方法进行比较。结果表明，新建立的水解度直接测定法快速简便，灵敏度高，可重复性强，不仅适于微生物发酵法产大豆多肽液水解度的测定，还普遍适用于其它蛋白水解液水解度的测定。     

复合蛋白酶水解高温变性豆粕的研究

以高温变性豆粕为原料,采用单因素和正交实验方法,对高温变性豆粕在复合蛋白酶作用下的水解特性进行深入研究.考查高温变性豆粕中蛋白质水解度随酶添加量、酶解温度、酶解时间、pH及底物浓度的变化规律,得到了水解高温变性豆粕的最佳水解条件.结果表明,复合蛋白酶水解高温变性豆粕的最佳条件为:酶添加量18000U/g,温度55℃,水解时间4h,pH为7.0,底物浓度9%.此条件下高温变性豆粕中蛋白质水解度可达到36.8%.     

微波预处理对脱脂豆粕蛋白水解度的影响

为得到高水解度的脱脂豆粕蛋白酶解液,在相同酶解条件下,研究微波预处理对脱脂豆粕蛋白水解度的影响,并运用响应面法对微波预处理的功率、温度和持续时间进行优化。结果表明：微波预处理的最佳工艺条件为底物质量分数2%、功率414W、温度79.6℃、持续时间111s;而后经碱性蛋白酶Alcalase酶解水解度能达到30.46%,比未经预处理的样品水解度提高了18.45%,这说明微波处理是一种非常有效的酶解预处理手段。     

蛋白酶水解低温豆粕制备大豆寡肽的研究

以低温豆粕为原料,利用复合酶法水解蛋白质制备大豆寡肽.通过测定不同蛋白酶对蛋白质水解后的蛋白质转化率和水解度,并综合生产成本、实验条件等因素,确定最优蛋白酶种类以及最优水解条件.得到蛋白酶Ⅰ的最优水解条件为:[S]=7%,E/S=4%(w/w),在pH=8.5,T=65℃条件下,水解3h;蛋白酶Ⅱ的最优水解条件为:pH=6.0,T=50℃,加入0.2%(m/v)EDTA,蛋白酶Ⅱ用量为8000u/g蛋白,水解2h.而后对水解物的水解度(DH)进行测定,并计算大豆肽平均肽链长度(PCL),得出PCL在2～7间,水解物为大豆蛋白寡肽混合物.     

复合酶法水解脱脂豆粕的研究

利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和纤维素酶组合的复合酶水解脱脂豆粕粉,通过单因子和正交试验确定复合酶水解最佳条件为：复合酶（碱性蛋白酶∶中性蛋白酶=5∶4）用量9%,纤维素酶用量4%,底物浓度5%,初始pH值、水解温度分别为8.5和50℃。复合酶在最佳条件下水解豆粕4h,水解度可达22.78%,相比优化前提高了28%。     

复合蛋白酶水解豆粕制备呈味基料的研究

采用碱性蛋白酶和风味蛋白酶水解豆粕蛋白制备呈味基料,并分析了豆粕酶解液的呈味成分.结果表明,添加风味蛋白酶1200 U/g和碱性蛋白酶1000 U/g(以豆粕蛋白计),55 ℃水解45 h后酶解液中总氮和氨态氮分别达到0.34 g/100g和0.68 g/100g,游离氨基酸占总氮的50 %,酶解液中大部分肽的分子量小于1000 Da.     

中性蛋白酶提取变性脱脂豆粕中蛋白质的研究

变性豆粕是由大豆浸油后，经高温脱溶所得。本文以高温变性脱脂大豆粕为原料，用正交实验法对变性豆粕在蛋白酶作用下的水解特性进行了深入研究。选用国产1398中性蛋白酶为水解酶对变性豆粕进行水解，研究了变性豆粕中蛋白质溶出率随温度、pH值、时间、底物浓度及用酶量的变化规律，找到了水解变性豆粕的最佳实验条件，为生产实践提供了基础数据。该研究结果对其它蛋白原料的水解特性研究也具有参考价值。研究结果表明：1398中性蛋白酶水解高温变性豆粕的最佳条件为：温度45℃，时间3h，底物浓度1.0%,用酶量1600u/g，pH值7．0，在此条件下，变性豆粕中蛋白质可有90．71％水解溶出。     

双酶酶法制备大豆肽及其性质研究

为探讨脱脂豆粕在双酶作用下的水解效果及其酶解物的性质,选用碱I生蛋白酶和风味蛋白酶为水解酶,采用单因素实验确定双酶水解豆粕的最佳条件,并对脱脂豆粕酶解物的性质进行了初步研究。结果表明碱性蛋白酶和风味蛋白酶水解豆粕的最佳条件为：底物质量分数5％,先加入嘲陛蛋白酶用量为10000U／g底物,在55℃、pH8．0下酶解0．5h,调节pH至7．5,再加入风味蛋白酶5％,双酶同时酶解3h。脱脂豆粕蛋白酶解物的溶解度和吸水性比大豆分离蛋白有很大提高,粘度明显降低水解物中肽的分子量主要集中在500～1200之间。     

脱脂豆粕的ASI.398中性蛋白酶水解

高度变性豆粕的氮萃取率在pH7~12范围内均呈上升趋热。当用AS1．398中性蛋白酶进行水解处理时,低酶浓度,长时间水解的效果明显比高酶量,短时间的水解效果好,在酶浓度低时,随酶浓度的增加．氮萃取率、酸溶性肽得率、蛋白得率均呈上升趋势,延长水解时间效果更为明显,但以3h为宜;酶浓度进一步增加时,3者变化情况反而呈下降趋势。实验结果表明。AS1．398中性蛋白酶对大豆蛋白的最大水解度为34%,比166中性蛋白酶的最大水解度小,且水解速度也较缓慢。     

响应面法优化豆粕酶解工艺条件

以水解度和感官评价为指标,主要研究了豆粕的预处理方法,并通过单因素和响应面法优化了豆粕酶解的最优工艺。分别采用高压蒸煮处理、超声波处理、微波处理、加热处理对豆粕进行预处理,确定豆粕酶解的较佳预处理方式和条件是80℃加热10min;根据水解度和感官评定的结果,确定了中性蛋白酶与复合蛋白酶的较佳配比为2:3;在复配酶单因素试验的基础上,通过响应面试验确定豆粕酶解的最佳条件为pH7.5、酶解温度50℃、酶解豆粕6h,在该条件下,豆粕的水解度达到19.25%,游离氨基酸总量增加至酶解前的660%。     

酶水解法提高大豆蛋白水解度的研究

用蛋白酶水解方法提高大豆分离蛋白水解度.通过对多种蛋白酶的对比分析可知,风味蛋白酶的水解效果好于其它蛋白酶,但正交试验结果表明,即使在优化条件下水解,单一的风味蛋白酶水解所得大豆分离蛋白水解度最高只达到43.12%.若先用胃蛋白酶水解再用风味蛋白酶水解则水解度最高可达68.81%,而风味蛋白酶与其它酶的联合应用效果略差;若先使用风味蛋白酶后使用胃酶则水解度只有47.89%.表明不同酶对大豆蛋白分子具有不同的水解特点.     

复合酶法水解豆粕制备ACE 抑制肽

碱性蛋白酶分别与中性蛋白酶、复合蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶组合,采用分步法进行水解豆粕实验,以提高豆粕水解液的ACE抑制率。结果表明：当碱性蛋白酶和胰蛋白酶两种酶分步加入进行水解时,水解度最高,达到46.83%。进一步通过响应面分析法,优化碱性蛋白酶和胰蛋白酶组合分步水解条件,发现先加入5100U/g碱性蛋白酶,在pH9的条件下水解2h,之后再加入950U/g胰蛋白酶,在pH8的条件下继续水解2h,最终水解产物的ACE抑制率可达到72.21%。     

酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽的研究

采用碱性蛋白酶水解高温豆粕制备高水解度大豆肽,通过单因素和响应面实验确定酶解高温豆粕的优化条件。以水解度为指标,考察温度、时间、pH、加酶量、底物浓度等因素对水解度的影响。优化的酶解条件为:温度50℃、时间5h、pH8.60、加酶量17700U/g底物、底物浓度10.25%,该条件下得到大豆肽的水解度为37.20%。     

菜籽蛋白酶解预处理条件研究

以脱脂菜籽粕制备的菜籽蛋白为主要原料,水解度为考察指标,探讨了蛋白酶的选择及湿热处理条件对蛋白质水解的影响。结果表明,碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶4种酶在其最适条件下水解菜籽蛋白能力顺序为碱性蛋白酶中性蛋白酶酸性蛋白酶木瓜蛋白酶。选择碱性蛋白酶进行菜籽蛋白水解,通过完全试验得出菜籽蛋白的湿热处理最佳工艺条件为:温度100℃,时间30min,此条件下,水解度可达到18.51%。     

大豆蛋白酶解产物抗氧化活性与水解度相关性研究

利用碱性蛋白酶Alcalase 2.4L水解大豆分离蛋白,研究了底物浓度、加酶量、p H、温度因素对酶解液水解度和还原力的影响,并在此基础上用响应面分析法优化酶水解条件。以还原力为主要指标考察酶解产物的抗氧化活性,通过水解度与还原力的比较,得到Alcalase 2.4L碱性蛋白酶酶解大豆分离蛋白产物的抗氧化活性与水解度之间没有直接线性关系。在实验得到的最佳条件下制备的大豆肽抗氧化活性良好,具有良好的应用前景。     

酶法制取罗非鱼动物蛋白水解液的研究

利用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和菠萝蛋白酶对罗非鱼肉进行水解制备水解动物 蛋白,以水解度(DH)为指标对水解过程进行分析,选取中性蛋白酶作为适宜的单酶并研究其酶法水解最适宜的工 艺条件。为进一步提高水解度,进行了中性蛋白酶与酸性蛋白酶复合酶解的研究。