机体脂质过氧化及抗脂质过氧化剂的研究

采用改良TBA法测定了不同情况下动物和人的血清与组织中LPO含量,观察了三种制剂对机体受照射所致脂质过氧化作用的影响。其内容包括:(1)大鼠及成人血清LPO正常值;(2)大鼠某些组织中LPO正常值;(3)某些精神病患者及某些恶性肿瘤患者接受放疗前后血清LPO含量的变化;(4)γ射线整体照射后大鼠某些组织中LPO含量的变化;(5)Th(NO_3)_4内照射后小鼠某些组织中LPO含量的变化;(6)知母宁、单宁酸和鲨烯等几种制剂对机体受照射所致脂质过氧化作用的影响。结果表明:(1)某些精神病患者血清LPO含量显著增高;(2)某些恶性肿瘤患者接受放疗前后其血清LPO含量差别十分显著;(3)内照射后小鼠某些组织中LPO含量显著升高,其变化与组织中蛋白含量的变化呈负相关;(4)小鼠在接受γ射线整体照射后其某些组织中LPO含量与辐射剂量在0～4Gy范围内呈现良好的线性关系;(5)知母宁、单宁酸和鲨烯等三种制剂皆有降低照射小鼠肝、脾和肾中LPO含量的作用,其中知母宁的作用明显优于单宁酸和鲨烯。     

辐射对小鼠组织中脂质过氧化物和蛋白质的影响及单宁酸与鲨烯的抗脂质过氧化作用

采用改良的TBA比色法测定组织中的脂质过氧化物(LPO)。结果表明:(1)Th(NO_3)_4内照射后第15d时,小鼠肝、脾、肾和骨髓中的LPO含量明显升高,而组织中的蛋白质却明显降低,两者呈负相关;(2)γ线整体照射(2—4Gy)后72h,小鼠肝、脾和肾中的LPO含量随着剂量的增加而升高。辐射剂量与LPO含量之间呈现显著线性关系;(3)单宁酸与鲨烯有抗脂质过氧化作用。     

抗氧化剂减轻辐射脂质过氧化损伤的实验研究

自由基在辐射损伤中起着重要作用。应用抗氧化剂可在一定程度上清除自由基,从而减轻辐射损伤。该研究应用荧光分光光度法测定了照后小鼠组织和血清中脂质过氧化代谢产物MDA的含量变化,以此来研究其剂量效应关系,以及抗氧化剂Vit E和DMSO对照后小鼠的保护作用,探讨抗氧化剂在临床方面的应用。结果表明:(1)3.0Gy照后12～24小时,MDA含量最高,然后逐渐下降;(2)MDA随照射剂量的增大而增高,即MDA可很好地反映机体损伤情况;(3)Vit E和DMSO都能明显地降低照后小鼠体内MDA的水平,DMSO的作用大于Vit E,两者的最佳用量分别为:10mg/g体重和0.25mg/g体重;(4)DMSO和Vit E联合应用,其防护效果优于单独使用的效果。     

组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点

为了探讨不同组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点,测定了不同剂量(500、1000和2000rad)照射和照后不同时间小鼠红细胞(RBC),血浆、小肠等的SeGSH-Px活性。实验结果说明,各组织的反应类型各不相同,可以归纳为四类:(1)不能合成SeGSHPx的组织,如成熟RBC。它的变化特点是,照后酶活性降低,降低的程度随着照射剂量的增加而增加,大剂量(2000 rad)照射还随着照后时间的延长而增加;(2)能合成SeGSHPx的非辐射敏感组织如肝,它能对脂质过氧化损伤产生反应,但当剂量大到足以损伤肝细胞时,SeGSHPx活性的增加程度就小,严重损伤时(2000 rad照射)酶活力相反地降低;(3)辐射敏感组织如脾,由于照射脾细胞的大量坏死,它的SeGSHPx活性变化似乎受网状细胞相对含量的影响,反映的不完全是淋巴细胞SeGSHPx活性。辐射敏感组织小肠在2000 rad照射时,由于肠粘膜的广泛脱落表现为酶活性的降低。但当受损的敏感组织新生时(1000 rad照射)可以显示酶活性增加,(4)血浆SeGSHPx活性的变化主要是照后降低,一个时期的升高主要是由于大量脾细胞破坏而致的酶的释放。     

分次γ照射对成年前小鼠肝、肾组织SOD活性及脂质过氧化物含量的影响

报道了低剂量率~(60)Coγ线1 Gy分25次照射仔鼠,以及1 Gy一次性照射出生后五周的成鼠发现前者肝、肾组织LPO含量反而高于后者。说明仔鼠放射敏感性明显高于成年鼠。试验还发现,LPO含量变化与SOD活性变化之间有一定程度的负相关性。     

低水平电离辐射对雄性大鼠 LRH-LH-睾丸酮系统功能影响的研究

本文报道了小剂量 X 射线分次全身照射和低剂量率~(60)Coγ射线持续全身照射对雄性大鼠下丘脑组织中 LRH 含量,血清及尿中 LH 和睾丸酮含量影响的实验结果。接受 X 射线照射的大鼠,全身累积吸收剂量为1.5Gy 和3.0Gy,下丘脑组织中 LRH 含量均于停照后1周显著高于对照组;血清 LH含量在3.0Gy 组于停照后4周高于对照组;尿中睾丸酮含量1.5Gy 组在停照后2和4周及3.0Gy 组在停照后2周均显著高于对照组。接受~(60)Coγ射线照射的大鼠,于照射结束后24小时血清 LH 含量在全身累积吸收剂量为1.76Gy 组显著低于对照组;血清中睾丸酮含量在1.37和1。76Gy 组、尿中睾丸酮含量在0.98Gy 组均显著高于相应对照组。     

~(60)Coγ射线局部外照射对组织胶原代谢的影响

采用~(60)Co源γ射线外照射新西兰兔后臀部皮肤后,观察局部组织胶原代谢指标及全身和局部与胶原代谢相关的生化指标,并研究了不同年龄性别组Wistar大鼠皮肤胶原含量及型别分布差异,以阐明γ射线所致放射性皮肤损伤中胶原代谢变化的分子机制。实验结果显示:(1)γ射线外照射可引起局部组织Ⅲ、Ⅰ型胶原含量下降,伴胶原酶活性升高,组织蛋白分解加强;(2)γ射线可引起全血或血浆5-HT、SOD、LPO量改变,但对它们局部组织含量影响不大;(3)动物皮肤胶原含量存在年龄和性别差异。由此可知:γ射线引起的放射性皮肤损伤机制中胶原代谢变化可能起主导作用,而放射性皮肤溃疡植皮治疗中两性皮片效果差异的主要原因为两性胶原含量的差别。     

电离辐射对小鼠血清淀粉酶活力和血清脱氧胞苷含量的影响

本文报道了经~(137)Csγ射线不同剂量照射的小鼠血清淀粉酶活力和血清脱氧胞苷含量的变化规律。结果表明各照射剂量组在照后2h血清淀粉酶活力都显著低于正常值(P<0.001),而后15 Gy和30Gy剂量组持续升高,5Gy和7.5Gy剂量组照后1d恢复正常后再降低。血清脱氧胞苷含量的变化为5Gy和7.5Gy剂量组照后2h稍高于正常值,第9d降低;15Gy和30Gy剂量组照后2h低于正常值,而后持续升高。     

应用鲁米诺化学发光法测定脂质过氧化

建立了一个测定脂质过氧化（Lipid peroxidation,LPO）的化学发光体系，测试某些抗氧化剂清除脂自由基的活性。取含有不饱和脂肪酸的脂质加入到测量管中，再加入鲁米诺及双重蒸馏水，放入预恒温箱中37℃预温育0.5h，取出并加入启动剂AAPH｛2,2'-axobis(2-amidinopropane)dihydrochloride｝，立即放入预先温度设至38－39℃的生化发光测量仪中，用T－2程序测定每6s钏的脉冲数（CP6s），连续测定，观察化学发光（chemiluminescence,CL）的动力学变化和是否产生脂质过氧化，随后加入各类抗氧化剂，根据实际需要，选其某一次的CL强度作为评判指标。建立了一个应用鲁米诺化学发光法测定脂质过氧化的体系并对比了多种抗氧化剂的活性。结果发现，Vit.C、茶多酚（EGCG）、还原型谷胱甘肽（GSH）皆有抑制L，即抗脂质过氧化的作用。该方法是一种快速、灵敏、简便的测定脂质过氧化及筛选抗氧化剂的新方法。     

12C6+照射对小鼠睾丸组织脂质过氧化、SOD活性及细胞周期的影响

为评估重离子照射的生殖毒性,探讨其损伤的可能机制,用0、0.5、1、2或3Gy剂量12C6 离子对性成熟昆明雄鼠下腹部进行局部照射,6h后处死小鼠,取睾丸组织,用流式细胞术检测睾丸细胞凋亡率和细胞周期,用化学试剂盒检测组织中超氧化物岐化酶(SOD)的活性以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平.结果表明,与对照组(0Gy)相比,低剂量照射(0.5Gy)组中睾丸组织SOD活性增加(P>0.05),但SOD活力随剂量增加而下降,在2Gy和3Gy照射组中呈显著抑制作用(P<0.05);睾丸组织中MDA含量随剂量增加,2Gy和3Gy照射组呈显著性差异(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,1～3Gy 12C6 照射可导致睾丸组织中单倍体、二倍体及四倍体细胞数量显著减少(p<0.01),凋亡率明显增加(p<0.01)以及G2/M期阻滞(p<0.01).提示12C6 照射可能通过自由基损伤途径,诱发细胞凋亡和细胞周期异常,从而造成睾丸组织损伤,生殖能力下降.本实验结果为抗氧化剂和自由基清除剂用于临床重离子治疗中对性腺的防护提供了理论依据.     

WR-2721对辐射所致脂类过氧化的影响Ⅰ——全身照射小鼠组织中脂类过氧化值

500～2000rad照射后第3天,小鼠的肝、脑、肾、心与骨髓细胞的脂类过氧化物(LPO)水平随照射剂量增加而增加,但腹腔注射WR-2721可使LPO显著降低。850rad照射后10天内,小鼠的肝、脑、肾、睾丸与骨髓细胞的LPO增加量随照射后时间不同而有所差异,但WR-2721均可抑制LPO的生成,其抑制作用在一定时间范围内,随照射后时间的延长而递增。     

X线照射弓状核损伤雄性大鼠头部对神经内分泌的影响

已知初生期大鼠注射谷氨酸钠(MSG)可引起下丘脑弓状核严重损毁。本研究表明,雄性大鼠出生后2d及4d,腹腔注射MSG(4mg/g体重),成年后神经内分泌系统功能发生明显改变。用MSG处理雄性大鼠经10Gy X线头部照射后48h,与非照射MSG处理组比较,血清LH、FSH、TSH和GH水平以及血清和尿睾丸酮含量趋于降低;而血清PRL水平趋于增高,垂体和睾丸cAMP含量变化不明显。提示,MSG损毁弓状核雄性大鼠神经内分泌系统调节功能失常,经10 GyX线头部照射后48h,不能出现正常大鼠头部照射后下丘脑-垂体系统功能增强的效应。     

TGF-β1在照射后肺损伤早期重建中的作用研究

探讨TGF-β1在放射性肺损伤早期肺组织重建中的作用.用酶标记免疫吸附测定法(Enzyme-labeled immunosorbent assay,ELISA)检测照射后不同时期(1、2和4周)大鼠血清中TGF-β1的水平变化;用甲基噻唑基四唑比色法(Methyl thiazolyl tetrazolium colourimetry,MTT)检测照射后4周大鼠血清对人肺成纤维细胞(Human lung fibroblast,HLF)的促增殖作用;用ELISA检测HLF经大鼠血清刺激后合成分泌MMP-9(Matrix metalloproteinases-9,MMP-9)和Ⅳ型胶原的作用.照射后不同时间提取的大鼠血清中TGF-β1水平从2至4周逐渐增加;照射后大鼠血清能促进HLF增殖,10%血清浓度的培养液促细胞增殖的作用最强;受照后大鼠血清不但能促进Fb增生,而且能显著促进HLF合成释放Ⅳ型胶原和MMP-9.放射性肺损伤早期肺组织TGF-β1表达增加,进而促进肺成纤维细胞增生、合成和释放Ⅳ型胶原和MMP-9,参与早期肺损伤的组织重建过程.     

SOD对肿瘤细胞凋亡影响和抗氧化损伤的研究:Ⅲ.SOD对受分次照射的荷瘤小鼠肿瘤细胞脂质过氧化影响及分子机制

以荷瘤小鼠为动物模型,研究了全身照射下注射超氧化物歧化酶(SOD)对肿瘤细胞脂质过氧化、肿瘤组织端粒酶活性、肿瘤原癌基因c-Jun蛋白表达的影响。研究发现,SOD能增加S180肉瘤及Lewis肺癌组氧化产物丙二醛(MDA)含量,降低S180肉瘤谷胱甘肽(GSH)含量及血清超氧化物歧化酶总活力(T-SOD)、匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX-Px)活力;降低Lewis肺癌组GPX-Px及T-SOD活力,不影响GSH含量;降低H22肝癌组GPX-Px的活力,不影响MDA、GSH含量及T-SOD活力。SOD明显降低接受电离辐射的S180肉瘤及H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织中端粒酶的阳性表达率,减少原癌基因c-Jun蛋白在S180肉瘤、Lewis肺癌荷瘤鼠中的表达。这一辐射增敏作用因肿瘤的种类而不同,可能与SOD在不同肿瘤中对癌基因c-Jun蛋白表达和端粒酶活性影响及药物在不同器官的代谢差异有关。     

林蛙油复方冲剂对超重环境下微波照射大鼠抗氧化效应的研究

采用林蛙油复方冲剂,分别于超重环境下微波照射前、超重环境下微波照射后、超重环境下微波照射中对Wistar大鼠进行干预,检测各组大鼠血清总抗氧化能力、抑制羟自由基能力和微量丙二醛含量,以探讨林蛙油复方冲剂对超重环境和微波辐射大鼠抗氧化的效应。结果表明,超重环境和微波辐射协同作用,可导致大鼠血清总抗氧化能力降低、抑制羟自由基能力增强、微量丙二醛含量增高。林蛙油于微波照射后干预可提高总抗氧化能力及抑制羟自由基能力,照射中干预可降低微量丙二醛含量。说明林蛙油复方冲剂的干预方式不同,对超重环境下微波辐射大鼠的抗氧化作用也不同。     

人参三醇组甙对X射线照射雄性大鼠下丘脑—垂体—睾丸系统功能的影响

本研究采用5 Gy X 射线全身照射雄性大鼠,观察人参三醇组甙对下丘脑-垂体-睾丸系统功能的影响。动物于照前24 h 及照后每天经腹腔给予三醇组甙5 mg,共14次。实验结果表明,单纯照射组与正常对照组比较,睾丸组织受到明显损伤,血清睾丸酮水平和睾丸环磷酸腺苷(cAMP)及下丘脑亮氨酸脑啡肽(L-Enk)含量明显降低,血清滤泡刺激素(FSH)水平明显增加;但在照射加人参组中,上述指标都接近正常对照组水平。提示人参三醇组甙可减轻受照大鼠生殖内分泌轴的损伤,具有保护下丘脑-垂体-性腺系统功能的作用,并促进其辐射损伤的恢复过程。     

大剂量睾丸照射对大鼠神经内分泌功能的影响

本研究应用 Wistar 雄性大鼠,接受10Gy X 射线睾丸局部照射,分别于照射后1、23、63及97天处死,观察下丘脑内源性阿片肽、垂体和睾丸内分泌功能的变化,试图阐明电离辐射神经内分泌效应及其作用机理。实验结果表明,照射后1天,下丘脑β-内啡肽(B-EP)含量明显增加,而血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾丸酮(TS)及睾丸环磷酸腺苷(cAMP)含量有不同程度的降低;照射后23天,β-EP 下降,并低于对照组,而 LH、FSH、TS 及 cAMP 明显高于对照组;照射后63天,β-EP 仍维持照射后23天的水平,亮氨酸脑啡肽(L-Enk)明显降低,LH 和 FSH 仍持续增高,而 TS 和 cAMP 明显低于对照组;照射后97天,LH 和 FSH 回降,但仍明显高于对照组,TS 和cAMP 仍持续降低,睾丸组织发生严重损伤。     

蜂花粉对急性放射病治疗作用的研究

通过观察受照大鼠口服蜂花粉后外周血白细胞(PWBC)总数,血清超氧化物歧化酶(SOD)总活性及脂质过氧化物(LPO)水平的变化来评价蜂花粉对中度骨髓型急性放射病的疗效程度。实验结果表明,蜂花粉具有显著促进受照大鼠辐射损伤的恢复作用:(1)刺激机体PWBC的增殖。口服蜂花粉的大鼠30d后,与正常对照组相比无显著差异(P>0.05);(2)增强机体消除活性自由基的抗氧化效应。服用蜂花粉的大鼠30d后,血清SOD总活性增高率为6.48％,血清LPO(MDA/POV)的水平降低率为54.73％/21.60％。提示在急性放射     

二甲亚砜和维生素E对照剂小鼠脂质过氧化的影响

二甲亚砜（ＤＭＳＯ）和维生素Ｅ（Ｖｉｔ Ｅ）都是自由基清除剂，可抑制或阻断由自由基引发的脂质过氧化反应，减轻组织损伤和细胞的破坏。本研究应用荧光分光光度法，通过测定小鼠血清中脂质过氧化代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量来研究不同浓度的ＤＭＳＯ和维生素Ｅ对γ射线照射后小鼠的保护作用，以及两者联合应用的效果。结果表明：ＤＭＳＯ的保护作用优于Ｖｉｔ Ｅ，最大脂质过氧化抑制率（４．０Ｇｙ）分别为５５．１％和５     

蜂花粉对急性放射病治疗作用的研究

通过观察受照大鼠口服蜂花粉后外周血白细胞(PWBC)总数,血清超氧化物歧化酶(SOD)总活性及脂质过氧化物(LPO)水平的变化来评价蜂花粉对中度骨髓型急性放射病的疗效程度。实验结果表明,蜂花粉具有显著促进受照大鼠辐射损伤的恢复作用:(1)刺激机体PWBC的增殖。口服蜂花粉的大鼠30d后,与正常对照组相比无显著差异(P>0.05);(2)增强机体消除活性自由基的抗氧化效应。服用蜂花粉的大鼠30d后,血清SOD总活性增高率为6.48％,血清LPO(MDA/POV)的水平降低率为54.73％/21.60％。提示在急性放射病及其放疗肿瘤病人的临床治疗中,将蜂花粉作为抗放保健剂使用可能具有一定的实用价值。