乌饭树叶提取物的化学成分与抗氧化活性研究

目的:研究不同提取方式制备得到的乌饭树鲜、干叶的提取物的化学成分和抗氧化活性。方法:对乌饭树鲜叶与干叶,分别采取水或乙醇,冷浸或回流制备提取物;DPPH、ABTS方法测定各提取物的抗氧化活性,紫外分光光度法测定其总黄酮含量,超高液相-质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)技术结合主成分分析方法对不同提取物的化学成分进行分析。结果:鲜叶乙醇回流提取物的总黄酮含量最高(19.48%);鲜叶水回流提取物的抗氧化活性最强;鲜叶与干叶提取物的化学成分有明显差异,鲜叶的水冷提物与乙醇冷提物的化学成分相近;干叶的水冷提物与乙醇冷提物的化学成分相近;干叶的乙醇回流提取物中化学成分最复杂,并从中鉴定出18个化合物,主要是黄酮、三萜及多酚类化合物。结论:不同提取方式所获得乌饭树叶干品、鲜品的提取物的化学成分与抗氧化活性均差异较大。     

簕菜提取物及其化学成分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用

试验采用以对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物的酶抑制剂筛选模型测定了簕菜提取物及其化学成分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用,为簕菜降血糖作用提供试验证据。试验结果表明,不同部位的簕菜中的抑制α-葡萄糖苷酶的活性物质都可以通过有机溶剂萃取步骤进行浓缩;簕菜叶、茎和根的乙酸乙酯层都表现出最高的抑制活性;簕菜乙酸乙酯层的9个萜类和6个多酚类化学成分中,二萜化合物ent-kaur-15-en-17-al-19-oic acid和多酚化合物异绿原酸C具有最好的抑制α-葡萄糖苷酶的活性,均高于对照品阿卡波糖,它们可能是簕菜提取物具有抑制α-葡萄糖苷酶活性的作用成分。     

裂叶荨麻体外降糖活性化学成分

目的:研究裂叶荨麻体外降糖活性及化学成分。方法:利用活性追踪法,通过α-葡萄糖苷酶抑制作用比较裂叶荨麻根、茎、叶体外降糖活性,比较根不同极性溶剂萃取相的体外活性。通过硅胶色谱、重结晶进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物结构,再评价其体外活性成分。结果:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相体外降糖活性最强,IC₅₀值为8.499 mg/mL,从中分离出6个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇、对羟基肉桂酸甲酯、正十六烷酸、对甲氧基苯甲醛、反式-对羟基肉桂酸、胡萝卜苷。化合物反式-对羟基肉桂酸和胡萝卜苷对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较强,其IC₅₀值分别为5.234、1.693 mg/mL。结论:裂叶荨麻根乙醇提取物的乙酸乙酯相中的化学成分体外降糖活性较为明显。     

气相色谱-质谱联用结合化学计量学分析棕榈油煎炸过程中化学成分的变化

为了探究棕榈油在煎炸过程中化学成分的变化与极性组分之间的相关性,采用气相色谱-质谱联用技术获取了不同煎炸时间煎炸油的化学成分信息,结合化学计量学软件进行数据筛选、主成分分析与聚类分析。结果表明：经过筛选后的数据,不同煎炸时间煎炸油在主成分得分图上区分明显;聚类分析可将煎炸不同时间的煎炸油分成三类,每类之间化学成分差异明显,其中过度煎炸组极性组分含量基本大于27%;初步鉴别出9种煎炸过程中产生的差异性化合物,这些化合物的含量变化均与极性组分含量呈明显的线性关系（R2＞0.95）。研究表明,煎炸油在煎炸过程中化学成分会发生变化,部分变化与极性组分含量呈线性相关,极性组分含量可以作为评判煎炸油劣变程度的有效依据。     

红曲霉奶酪的生物活性研究及ACE抑制肽的筛选

研究红曲霉对奶酪成熟过程中生物活性肽,尤其血管紧张素转换酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制肽的影响。以不接种红曲霉的奶酪为对照组,研究奶酪成熟过程中的可溶性氮含量、α-葡萄糖苷酶抑制活性和ACE抑制活性,对红曲霉奶酪肽谱进行鉴定,利用生物信息学和分子对接等方法对潜在的活性肽进行筛选,并对筛选肽进行合成和评价。结果表明,相比于对照组,在pH 4.6和三氯乙酸条件下,奶酪成熟结束时的可溶性氮相对含量分别提高57.98%和38.34%,α-葡萄糖苷酶抑制活性和ACE抑制活性分别提高32.21%和73.98%。在红曲霉奶酪提取物中共鉴定到1 796种肽,其中51条ACE抑制肽、28条抗氧化肽、7条降血糖肽等。筛选到两种ACE抑制肽YPFPGPI和FPEVFGK,半抑制浓度分别为207.31μmol/L和410.61μmol/L,酶抑制类型均是非竞争性抑制。该研究提供了一种快速筛选ACE抑制肽的方法,证明奶酪中添加红曲霉能够有效提高ACE抑制活性,为挖掘红曲霉奶酪的功能特性潜力提供了参考。     

毛蚶抗菌活性筛选及低极性组分GCMS分析

目的:研究毛蚶的抗菌活性部位及有效成分。方法:毛蚶软组织经乙醇提取后,采用液液萃取法将提取物分为石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相和水相4个不同的极性部位;采用抑菌圈法和最小杀菌浓度测定法,对毛蚶乙醇提取物和各极性部位进行了抗菌活性测定,并用正相硅胶柱对抗菌活性较好的石油醚相进行了分离纯化,得到甾体组分;采用GC-MS技术对石油醚相和甾体组分进行了化学成分分析。结果:毛蚶石油醚相的抑菌效果最好;从毛蚶石油醚相中鉴定出了30个化合物,主要为脂肪类和甾醇类化合物;从甾体组分中鉴定出8个化合物,其中7个为首次从毛蚶中分离鉴定。结论:毛蚶的石油醚相具有明显的抗菌活性,石油醚相以甾醇类化合物为主。      

小分子糖及其类似物与α-葡萄糖苷酶的分子对接

以AutoDock 4.2分子对接软件对20种小分子单糖及其类似物与α-葡萄糖苷酶进行分子模拟对接研究,分析对接结合自由能与实验所得IC50的关系,并根据受体与配体的相互作用进一步优化改造抑制剂分子结构。结果显示:α-葡萄糖苷酶分子中氨基酸残基Asp542、Asp443、His600、Asp327和Arg526是化合物与酶形成氢键作用的重要位点。分别将糖环上的O原子替换为N和C原子后,前者的对接结合自由能变得更小,配体与受体结合得更好。对井冈霉胺的分子结构改造后的对接结果显示,六元环上的N原子和环上存在—NH2取代基在分子与α-葡萄糖苷酶对接中起非常重要的作用。本研究可为今后高效α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选和优化设计提供新思路。     

方格星虫提取物的抗氧化活性及成分分析

目的:对方格星虫的抗氧化活性进行研究。方法:方格星虫匀浆后于室温下用乙醇提取,然后用乙酸乙酯和水萃取,得到不同极性的提取物,分别对提取物进行抗氧化检测,同时与合成的抗氧化剂抗坏血酸(V_C)进行对照,并对有抗氧化活性的提取物进行化学成分分析。结果:实验结果表明水层提取物具有较好的抗氧化活性,乙酸乙酯层和乙醇提取物的抗氧化活性较弱;从乙酸乙酯层中分离鉴定出59个化合物,不饱和脂肪酸和甾体为主要成分;方格星虫水层具有多种成分,包括蛋白质、总糖、牛磺酸和SOD等。结论:不饱和脂肪酸、甾体、多肽、牛磺酸和SOD对方格星虫的抗氧化活性可能有一定的贡献。      

齐墩果酸-1-脱氧野尻霉素衍生物的合成及其对α-葡萄糖苷酶活性的抑制

根据拼合原理,以齐墩果酸(OA)为先导物,对C-28号位的羧基进行修饰,通过溴代、氮代,引入1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)设计合成了不同碳链长度的齐墩果酸-1-DNJ衍生物(OADs),其中5个目标化合物其结构均以高分辨质谱、核磁共振谱进行结构表征。利用微量α-葡萄糖苷酶-PNPG检测模型对这一系列化合物的活性进行了筛选,并通过分子对接初步分析了其构效关系。结果表明:所合成的系列化合物的抑制活性较齐墩果酸有较大提高,且当碳链长度为3时(化合物2b)抑制活性最好,其IC₅₀=0.786 mmol/L(OA的IC₅₀=2.387 mmol/L);酶抑制动力学分析表明其为α-葡萄糖甘酶混合型抑制剂;分子对接和热力学参数结果显示,化合物与酶的结合主要是通过氢键和范德华力,形成的氢键个数越多,抑制活性越强;2b与酶之间形成了7个氢键,结合自由能为-17.19 kJ/mol,接近于阳性对照阿卡波糖。因此,所合成的齐墩果酸-1-DNJ衍生物(2b)对α-葡萄糖苷酶具有较好的抑制活性。     

不同溶剂的蒲公英根提取物的抗氧化活性及降糖能力比较分析

研究溶剂极性对蒲公英根提取物活性功能的影响。以蒲公英根为原料,分别采用不同极性的6种溶剂(水、甲醇、无水乙醇、乙酸乙酯、氯仿和正己烷)进行提取,比较不同溶剂提取物的抗氧化能力和对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的影响,并对提取物中的活性成分进行分析。结果表明提取溶剂的极性对蒲公英根的提取效率和提取物抗氧化活性的影响差异显著,随着溶剂极性的降低,提取率和抗氧化活性也随之下降,水的提取率最高可达24.87%,且水提物清除DPPH自由基、对羟基自由基和ABTS+·能力最高,具有较强的还原能力。随着浓度的增加6种提取物对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制率不断增大,当浓度达到5 mg/m L时,水提物对两种酶的抑制能力最强,达到71.56%和74.9%。且6种提取物中水提取物多糖含量最高为63.92 mg/g,乙醇提取物总黄酮和总酚含量最高,分别为10.03 mg/g和12.26 mg/g,甲醇提取物皂苷含量最高为0.88 mg/g。通过体外验证不同极性溶剂提取物的抗氧化以及降糖能力,对蒲公英根活性功能的评估及开发应用提供理论依据和技术参考。     

覆盆子不同多酚组成及抗氧化、抗糖尿病活性

为阐明覆盆子不同形态多酚抗氧化和抗糖尿病活性差异,采用不同溶剂和方法提取覆盆子中的水溶、醇溶、游离和结合多酚,比较不同提取物的总酚、总黄酮和可水解单宁含量差异,测定其自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶抑制和抗糖基化能力,并采用质谱技术测定活性最佳样品的主要化学成分。结果表明：覆盆子醇溶性多酚提取物的总酚和可水解单宁含量最高,分别为414.95、182.47 μg/mg（以每毫克提取物中所含没食子酸当量表示）,同时具有最高的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力、2,2’-联氮-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)阳离子自由基清除能力、α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,半抑制浓度分别为40.68、23.90 μg/mL和1.65 μg/mL。结合多酚提取物的总黄酮含量和抗糖基化能力最强。共从醇溶性多酚中初步鉴定出31 个化合物,单宁类和黄酮类化合物为其主要活性成分。因此,提取游离多酚和水溶性成分后的覆盆子残渣具有进一步利用、开发高活性抗氧化和抗糖尿病活性成分的应用价值。     

植物源提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用

金黄色葡萄球菌是一种重要的食源性致病菌,天然化合物对多种细菌具有抗菌活性。该文综述了国外的一些植物源提取物对金黄色葡萄球菌的抗菌作用。这些植物主要包括红葱、马黛茶、牛至、蔓越莓、葡萄籽、绿茶、茴香、薄荷、蓝桉、夏季香薄荷、冬季香薄荷、橄榄、大蒜、银斑百里香、铺地百里香等,它们的提取物都是金黄色葡萄球菌的强力的抗菌剂。一些植物源提取物的主要化学成分和抗菌机制已被确定和揭示。已有研究结果表明,食品相容的和安全的植物源提取物能够被用于减少食品中的金黄色葡萄球菌及其产的毒素,是一种新颖的有潜力的天然防腐剂或杀菌剂。     

Evaluation of free radical-scavenging properties of commercial grape phenol extracts by a fast colorimetric method

Three commercial extracts of grape phenols (seeds, skin, whole) were used in this study. Each extract was divided by HPLC into five fractions of different polarities, and their free radical-scavenging activities were measured using the DPD (N,N-diethyl-p-phenylenediamine) colorimetric method. Total phenol contents were determined using the Folin-Ciocalteu method to assess their contribution to the antiradical activity. The results showed that there was good correlation between total phenolic compound contents and free radical-scavenging activities of the different grape extracts. Moreover, the seed extract presented the most important free radical-scavenging properties (138 USP/mg extract), whereas the whole extract presented the lowest free radical-scavenging capacity (80.5 USP/mg extract). However, the free radical-scavenging properties, reported on the basis of content of phenolic compounds in each extract, showed that the free radical-scavenging activities of seed and whole extracts were not significantly different (171 versus 162 USP/mg phenol). In addition, free radical-scavenging activities of fractions from seed and skin extracts decreased as their polarities decreased.     

豆粕血管紧张素转化酶抑制肽的结构鉴定及作用机制解析

以大豆粕为原材料,利用超声辅助酶解技术、超滤-?KTA层析相结合的方法分离纯化获取豆粕酶解产物中血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）抑制肽,对其分子质量分布进行研究,后通过质谱分析与分子对接技术鉴定并筛选出ACE抑制活性肽的氨基酸序列,经固相合成肽序列,检测其ACE抑制肽的活性并基于分子对接技术探索其抑制机制。结果表明：经超声辅助酶解提取获得的豆粕肽分子质量主要分布在6 000 Da以下;根据分子对接的最低预测自由能筛选出的GVRP（－8.44 kcal/mol）和IIVTP（－9.04 kcal/mol）可以抑制ACE活性,半抑制浓度（50% inhibitory concentration,IC50）分别为（84±0.06）、（77±0.08）μmol/L;分子对接结果表明：GVRP、IIVTP能够与ACE的活性口袋S1、S1′、S2形成氢键相互作用,共有的过近接触（3.5 ?范围内）ACE氨基酸残基为His513、Ala354和Glu384。本研究基于串联质谱与分子对接技术,建立从混合多肽中快速鉴定、筛选活性多肽的方法,探究活性多肽与ACE稳定结合并体现其ACE活性的抑制机制,为后续的深入研究提供一定参考。     

基于液质联用和分子对接技术对薄蒴草抗炎活性成分的筛选

目的:基于液质联用及分子对接技术筛选薄蒴草中的抗炎活性成分。方法:通过研究薄蒴草不同极性萃取部位对脂多糖（LPS）诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7产生一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）的影响,筛选薄蒴草抗炎活性部位。通过高效液相色谱-质谱联用技术（high performance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MS）分析抗炎活性部位的化学成分。选择5个重要的炎症因子TNF-α、IL-6、白细胞介素-1β（IL-1β）、前列腺素E₂（PGE₂）、核转录因子-κB（NF-κB）分别与活性部位中的有效成分通过Autodock Vina软件进行分子对接。结果:体外抗炎实验结果显示薄蒴草的乙酸乙酯萃取部位具有一定的抗炎活性,与模型组相比在最高实验浓度75 μg/mL下对NO、TNF-α、IL-6的产生均有极显著抑制作用（P<0.01）,抑制率分别为63.53%、34.23%、34.58%;液质联用鉴定出11个化学成分,包括8个黄酮类成分芦丁、牡荆素、山奈酚、鼠李秦素、槲皮素、芹菜素、芹菜素-6-C-葡萄糖-8-C-木糖苷、槲皮苷和3个香豆素类成分伞形花内酯、7-甲氧基香豆素、5,7-二羟基香豆素;分子对接结果显示,与TNF-α、IL-6、IL-1β、PGE₂、NF-κB结合最好的成分分别是槲皮苷、山奈酚、芦丁、槲皮苷、牡荆素,结合能为?8.5、?7.8、?8.0、?7.2和?10.0 kcal/mol,均优于阳性对照地塞米松,说明这些成分与5个靶点具有较好的亲和力。结论:薄蒴草的乙酸乙酯萃取部位为抗炎活性部位,通过液质联用结合分子对接技术能快速、便捷地筛选出薄蒴草的抗炎活性成分。     

复合保护剂对透明质酸酶的稳定性研究

以球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)A152发酵生产的透明质酸酶(HAase)的酶活力为衡量指标,通过研究糖类、醇类、生物大分子和金属离子等保护剂对提高透明质酸酶热稳定性的作用,考察添加复合保护剂对透明质酸酶热稳定性和储存稳定性的影响。结果表明,山梨糖醇、蔗糖和可溶性淀粉作为保护剂,可提高HAase酶的热稳定性。通过单因素和正交实验优化后得到了效果最佳的复合保护剂配方,即山梨醇7.5%、蔗糖10%、可溶性淀粉0.2%。优化后添加保护剂的HAase在42℃保温2 h后,其酶活保留率为88.68%,较对照提高了64.18%,在37℃,通过添加复合保护剂,其半衰期提高了48%。在4℃储藏90 d,添加复合保护剂和防腐剂(0.1%的山梨酸钾和0.05%的苯甲酸钠)的HAase酶活保留率高达85.52%。     

Regulating inhibitory activity of potato I-type proteinase inhibitor from buckwheat by rutin and quercetin

This study aims to investigate the effects of two flavonoids, rutin and quercetin, on inhibitory activity of recombinant buckwheat trypsin inhibitor (rBTI). We found that rutin and quercetin could quench the florescence of rBTI through the static quenching process. We also observed that upon binding to rutin or quercetin, rBTI underwent conformational changes. The results also suggested that rutin and quercetin bind to two different sites on rBTI through different interactions: rutin binds to rBTI through van der Waals forces and hydrogen bonds, whereas quercetin binds through hydrophobic interactions. Rutin and quercetin also markedly deactivated the trypsin inhibitory activity (TIA) of rBTI, while quercetin exhibited higher inactivation effect on rBTI than rutin due to its structure. Finally, the molecular docking revealed the molecular binding between the flavonoids and rBTI. These findings can be useful for the understanding of how flavonoid affects the inhibitory of rBTI.     

Evaluation of the Ability of Eleutherine americana Crude Extract as Natural Food Additive in Cooked Pork

ABSTRACT:  The scavenging activities of crude ethanolic extract from  Eleutherine americana , on 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and hydroxyl free radicals were investigated. The results revealed that the extract produced IC₅₀ values of 8.4 μg/mL and 0.78 mg/mL on DPPH and hydroxyl free radicals, respectively. The total phenolic content of the extract was determined using the Folin–Ciocalteu reagent and the crude extract yielded high phenolic content of 4.56 μmol gallic acid equivalent per milligram dried extract. The extract, at different concentrations, was incorporated into pork, cooked in the microwave, and stored at 4 °C for 9 d. The crude extract demonstrated antioxidant activity, which increases with increased extract concentrations and retarded lipid oxidation in the cooked pork. Antibacterial activity of the extract against  Staphylococcus aureus  in the cooked pork revealed that at a concentration of 10.8 mg/100 g, the extract reduced the bacterial population by 0.57 log compared to control at 9 d of storage. The sensory results revealed that the pork samples treated with the extract and the control sample were not significantly different from day 0 to 6; however, on day 9 the treatments were significantly scored higher than the control. Furthermore, addition of the extract led to an increase in the redness values of the pork and this was acceptable from the sensory point of view.  E. americana  crude extract could be a promising novel antioxidant to prevent lipid oxidation and a potential natural color enhancer of red meat and meat products.     

油茶籽乙醇提取物代谢物组成及其抗炎活性

为探究油茶籽油抗炎机制,采用超高效液相色谱-串联质谱技术检测分析了15?个批次油茶籽乙醇提取物中所有小分子代谢物,并通过“蓝精灵”实验评估油茶籽乙醇提取物对果蝇肠炎的抑制活性,将油茶籽乙醇提取物中小分子代谢物与抗炎活性进行相关性分析并与脂氧合酶进行分子对接,筛选鉴定其关键代谢产物,最后通过“蓝精灵”实验进行验证。结果表明：油茶籽乙醇提取物具有良好的果蝇肠炎抑制活性,抑制率为15.06%～61.71%,其代谢物主要包括多酚类、氨基酸类、有机酸类、核苷酸类、糖类、脂类等,发现7?种多酚类化合物以前未在油茶籽中报道过。初步筛选出具有良好抗肠炎活性的代谢物为：鸦胆子素B、丹参新酮、8-香叶草氧基补骨脂素、异芒果苷、5,7,4’-三羟基-6-异戊烯基异黄酮、山柰苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷。5,7,4’-三羟基-6-异戊烯基异黄酮是首次被证实具有抗炎活性,0.1 mg/mL给药量时,果蝇肠炎抑制率为64%,远大于阳性对照柳氮磺胺吡啶（27.99%）。本研究为进一步探究油茶籽提取物内外抗肠炎活性及其机制奠定了基础。