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以金黄色葡萄球菌为宿主菌,采用富集法从污水、粪便样品中分离筛选噬菌体,纯化后观察噬菌斑特征,电镜形态,并测定其效价、RTD(RoutineTest Dilution,常规实验稀释度)值,初步分析该噬菌体的宿主谱.结果获得一株对金黄色葡萄球菌敏感的噬菌体,该噬菌体在宿主菌平板上能形成直径1~2mm、边界清晰、圆形透明的噬菌斑,效价是3.2×1010PFU/mL,RTD值为10-3,电镜观察显示此噬菌体由直径约为30nm的多面体头部和约50nm的尾部组成,可以裂解宿主菌及其它2株金黄色葡萄球菌,不能裂解大肠杆菌,鼠伤寒沙门氏菌及痢疾志贺氏菌.本文为深入研究金黄色葡萄球菌噬菌体的生物学特性及其功能提供了依据,为进一步利用噬菌体检测食源性金黄色葡萄球菌、防治由金黄色葡萄球菌引起的疾病提供了理论基础. 相似文献
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《食品与药品》2017,(6)
目的建立一种能快速准确检测牛奶中金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、鼠伤寒沙门菌(Salmonella typhimurium)和大肠杆菌O517:H7(Escherichia coli O517:H7)的环介导恒温扩增方法(loop mediated isothermal amplification,LAMP)。方法以牛奶为研究对象,分别利用金黄色葡萄球菌nuc,鼠伤寒沙门菌invA和大肠杆菌O517:H7的rfbE保守基因设计LAMP特异引物,通过优化反应温度、时间等条件,建立检测牛奶中金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌O517:H7的LAMP反应体系。并验证了本方法的特异性和灵敏度。结果 LAMP法对牛奶中金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌O517:H7的灵敏度均为1.0×10~2拷贝/μL,比常规PCR灵敏度提高了10倍。金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O517:H7的LAMP反应条件为60℃、30 min,鼠伤寒沙门菌为60℃、60 min。利用SYBR Green I染料在紫外光下可直接观察检测结果,金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌O517:H7阳性样品均呈绿色;进一步利用荧光定量PCR仪可检测到对应的扩增曲线。通过牛奶样品模拟掺杂实验,验证了方法的实用性和可靠性。结论本研究建立的检测牛奶中金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和大肠杆菌O517:H7的LAMP方法具有特异性强、灵敏度高、操作简便等特点,可用于牛奶中相关致病菌的检测,对预防和控制3种致病菌的传染有重要意义。 相似文献
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采用超快速气相电子鼻对超高温灭菌(ultra high temperature,UHT)全脂、低脂和脱脂牛奶共36 种样品的挥发性风味成分进行定性、定量分析,并结合主成分分析和多层感知器神经网络,对UHT牛奶的香气特征进行分类预测。结果表明,UHT牛奶中含有29 种共同的挥发性风味成分,主要为丙酮、正丁醇和δ-癸内酯等,其中丙酮含量最高,癸醛含量最低。异丁醇、乙偶姻、1-戊醇、E-3-己烯醛和癸醛只在UHT全脂牛奶中存在;3-甲基庚烷、2,6-二甲基吡嗪、E-2-壬烯-1-醇是UHT低脂牛奶的特有成分;α-蒎烯、5-甲基糠醛、癸酸仅在UHT脱脂牛奶中被检出。UHT牛奶主要香气特征体现为蔬菜味、奶油味、草香味、水果味及麦芽味。其中蔬菜味、奶油味、麦芽味在UHT全脂牛奶中分布最广泛;水果味在UHT低脂牛奶中分布最广泛;青草味在UHT脱脂牛奶中分布最广泛。主成分分析显示不同品牌UHT牛奶之间存在显著差异;多层感知器神经网络对UHT牛奶种类的预测准确率高达98.6%。 相似文献
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《中国食品学报》2017,(3)
研究牛奶颗粒大小与复原脂肪干酪质构的关系。新鲜脱脂牛奶与无水奶油复原成脂肪含量为3.3%的全脂牛奶,将牛奶在65℃分别进行1 MPa和20 MPa均质,检测均质后的牛奶颗粒体积。将牛奶使用直接酸化法与发酵法相结合制成奶酪,分析不同颗粒体积的牛奶制成的奶酪的理化成分和质构。结果表明:均质压强从1MPa上升到20 MPa,牛奶颗粒直径平均降幅达84.4%。颗粒体积减小可以显著提高干酪的持水性、硬度和胶黏性(P0.05),提高幅度分别为2.5%,14.9%和14.5%;降低蛋白质、脂肪含量和干物质中脂肪含量,降幅分别为8.8%,7.1%和7.1%。减小牛奶颗粒直径可以提高复原脂肪干酪的得率及质构特性。 相似文献
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以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)为宿主菌从奶牛养殖场污水中分离到1 株烈性噬菌体P65。透射电镜表明,噬菌体P65头部呈多面体结构,属于有尾噬菌体目长尾噬菌体科。噬菌体P65最佳感染复数为0.01,一步生长曲线显示,噬菌体P65潜伏期为10 min,裂解周期为90 min,裂解量为35.46 PFU/cell。在pH 4~10和温度30~45 ℃条件下具有稳定的裂解活性。紫外线照射70 min后,噬菌体P65效价由1.91×108 PFU/mL降至2.65×104 PFU/mL。经噬菌体处理48 h后,菌株MRSA 2和MRSA 24的生物被膜清除率分别为91.3%和92.2%。在25 ℃条件下,噬菌体P65在牛奶和牛肉细菌污染模型中有一定的抑菌效果。本研究表明噬菌体P65具有较宽的宿主谱和稳定的裂解杀菌能力,在清除生物被膜和食品抗菌方面有一定的运用潜能。 相似文献
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研究茶多酚在不同条件下对金黄色葡萄球菌生物膜产生的影响。首先测定茶多酚对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC);再测定茶多酚对金黄色葡萄球菌生物膜产生的抑制作用;又测定不同NaCl浓度、不同pH、不同加入时间、不同培养温度,茶多酚对金黄色葡萄球菌生物膜产生的影响。结果表明,茶多酚对金黄色葡萄球菌的MIC为8 mg/mL;当茶多酚浓度分别为0.5,1和2MIC时,其对生物膜产生具有明显的抑制作用;20 mg/mL和30 mg/mL NaCl以及酸性条件可增强茶多酚的抑制效果;越早加入茶多酚,其对生物膜抑制效果越好;28℃与37℃培养,茶多酚对金黄色葡萄球菌生物膜的抑制作用基本无影响。 相似文献
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目的:研究葡萄柚籽提取物(grapefruitseedextract,GSE)及其纳米乳(grapefruitseedextract nanoemulsion,GNE)对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌生物菌膜的抑制作用。方法:分析菌膜黏附菌数变化、胞外聚合物(extracellular polymeric substances,EPS)含量并进行微观结构观察,比较GSE和GNE对两菌菌膜(单种菌膜和混合菌膜)形成的抑制作用和已形成菌膜的清除效果。结果:与对照组相比,1/2最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)GSE和GNE可以抑制两菌单种菌膜形成时黏附菌和EPS产生,且对金黄色葡萄球菌的抑制作用更强。扫描电子显微镜(scanning electron microcopy,SEM)和共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)所观察到的微观结构变化也显示出GSE和GNE对两菌菌膜形成具有抑制作用。GSE和GNE对已形成菌膜也有良好清除效果,且对金黄色葡萄球菌菌膜的清除作用更强,但混合菌膜... 相似文献
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以常见食源性致病菌金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为研究对象,采用微孔板法对混合生物被膜形成过程中的不同影响因素进行了研究。结果表明:在25 ℃或30 ℃条件下,采用质量分数0.8%的胰酶大豆肉汤(TSB)或0.8%的脑心浸出液(BHI)培养基培养时,生物被膜形成量较高;添加适量的葡萄糖、乳糖、麦芽糖和蔗糖可提高混合生物被膜形成能力;培养基中NaCl质量分数>8%时,混合生物被膜的生长明显受到抑制。 相似文献
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Development of a multiplex polymerase chain reaction assay for detection and differentiation of Staphylococcus aureus in dairy products 总被引:6,自引:0,他引:6
A multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed for the detection and differentiation of enterotoxigenic Staphylococcus aureus in dairy products. A solvent extraction procedure was successfully modified for extraction of S. aureus DNA from 10 ml of artificially contaminated skim milk or 20 g cheddar cheese. Primers targeting the enterotoxin C gene (entC) and thermostable nuclease gene (nuc) were used in the multiplex PCR. PCR products were confirmed using restriction fragment length polymorphism analysis. DNA was consistently quantified and amplified by uniplex PCR from 10 CFU/ml of S. aureus in skim milk or 10 CFU/20 g cheddar cheese. The sensitivity of the multiplex PCR was 100 CFU/ml of skim milk or 100 CFU/20 g cheddar cheese. The developed methodology allows presumptive identification and differentiation of enterotoxigenic S. aureus in less than 6 h. 相似文献
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The ability of peracetic acid and peroctanoic acid sanitizers to inactivate mixed-culture biofilms of a Pseudomonas sp. and Listeria monocytogenes on stainless steel was investigated. Types of biofilms tested included a 4-h attachment of the mixed-cell suspension and a 48-h biofilm of mixed culture formed in skim milk or tryptic soy broth. Biofilm-containing coupons were immersed in solutions of hypochlorite, peracetic acid, and peroctanoic acid either with or without organic challenge. Organic challenge consisted of either coating the biofilms with milk that were then allowed to dry, or adding milk to the sanitizing solution to achieve a 5% concentration. Surviving cells were enumerated by pouring differential agar directly on the treated surfaces. The peracid sanitizers were more effective than chlorine for inactivating biofilm in the presence of organic challenge. The 48-h mixed-culture biofilm grown in milk was reduced to less than 3 CFU/cm2 by 160 ppm of peracid sanitizer after 1 min of exposure. Peroctanoic acid was more effective than peracetic acid against biofilm cells under conditions of organic challenge. Pseudomonas and L. monocytogenes were inactivated to similar levels by the sanitizer treatments, even though Pseudomonas predominated in the initial biofilm population. 相似文献
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将分离自西藏灵菇的益生性植物乳杆菌1-2通过在杀菌乳中添加活菌数8.0、9.0(lg(CFU/mL))和在排乳清后添加于凝乳块8.0(lg(CFU/g))的方式分别加入到切达干酪中,考察植物乳杆菌活菌数量、添加方式和成熟时间对干酪挥发性风味物质组成的影响。利用固相微萃取和气相色谱-质谱联用技术检测出对照组干酪的风味物质26种,益生菌干酪组风味物质30种,添加植物乳杆菌1-2可产生乙苯、十二烷、己醇和丙酮4种挥发性风味物质。成熟时间对干酪风味的影响最大,随成熟时间的延长,益生菌干酪组中苯含量显著增加,而对照组干酪在成熟12周时才检测到苯。益生菌添加量和添加方式对干酪挥发性风味的影响相似,丁酸受益生菌活菌数和添加方式的影响最大,益生菌干酪组成熟12周时,丁酸含量最高达对照组的3.96倍(P<0.05)。在杀菌乳中添加益生菌活菌数8.0(lg(CFU/mL))组和9.0(lg(CFU/mL))组干酪中挥发性风味物质含量有显著差异,但在杀菌乳中添加高活菌数9.0(lg(CFU/mL))和在排乳清后添加低活菌数8.0(lg(CFU/g))于凝乳块中对干酪挥发性风味的形成具有相似的影响。本研究结果为改进益生菌干酪的加工工艺和风味品质提供了实验依据。 相似文献
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在自然界中,细菌常以细菌生物膜的形式存在,其形成给公共卫生、食品安全、环境等诸多领域带来了不利影响。复杂的细菌生物膜结构为生理多样化的细菌细胞提供了保护屏障,细菌生物膜的形成是细菌感染及细菌抗药耐药性问题出现的主要驱动因素。噬菌体是细菌的天敌,细菌与噬菌体之间的共同进化迫使噬菌体开发特定的策略来克服生物膜防御屏障并杀死细菌。本文总结了细菌生物膜的组成、结构、形成过程及噬菌体对细菌生物膜的感染机制;综述了基于噬菌体及其衍生物对抗生物膜和耐药细菌感染的最新研究进展;最后,针对目前噬菌体疗法存在的问题进行了讨论,以期发现和更好地利用噬菌体的天然抗菌潜力,促进新型、高效的细菌生物膜检测及控制技术进一步发展。 相似文献
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为探讨姜黄素对荧光假单胞菌的光动力灭活(photodynamic inactivation,PDI)作用,提高光动力杀菌效果,本研究以乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid,EDTA)为协同剂,对PDI的应用条件进行优化,探讨姜黄素联合EDTA对荧光假单胞菌生物膜的PDI作用,并进一步将姜黄素联合EDTA应用于新鲜猪肉的保鲜。结果表明,与空白组相比,0.5%(质量分数,下同)EDTA与75 μmol/L 姜黄素经光照(功率密度200 mW/cm2、波长460 nm、光照时间20 min),荧光假单胞菌的菌落数对数值减小了6.40(lg(CFU/mL)),玻璃及丙烯腈二乙烯丁二烯树脂(acrylonitrile-butadiene-styrene,ABS)板表面生物膜中荧光假单胞菌菌落数对数值分别减小4.57、6.60(lg(CFU/mL)),均显著高于单独使用姜黄素组的灭活效果(P<0.05)。新鲜猪肉经75 μmol/L姜黄素和0.5% EDTA处理并光照后(功率密度100 mW/cm2、波长460 nm、光照时间20 min),与空白组相比,保存到第10天其表面荧光假单胞菌菌落数对数值减小3.05(lg(CFU/mL)),质量损失率为2.14%,色差ΔE随姜黄素浓度增加而增大;且处理后的猪肉随贮藏时间的延长pH值变化缓慢。说明PDI处理对猪肉的感官品质影响较小,能较好地维持猪肉pH值,对猪肉表面荧光假单胞菌有显著抑制作用。结论:姜黄素联合EDTA的PDI处理显著延长了猪肉的保鲜期,本研究可为光动力技术在食品杀菌及贮藏保鲜中的应用提供新的理论参考和技术支持。 相似文献