硅胶柱层析法分离大豆异黄酮苷元的研究

利用硅胶柱层析分离大豆异黄酮苷元.通过丙酮萃取大豆异黄酮后,经硅胶柱层析可以分离得到染料木素、大豆素、黄豆黄素3种大豆异黄酮苷元异构体.经HPLC检测3种物质的纯度均超过90%.     

染料木苷和黄豆苷的纯化和分离

为了深入研究大豆提取物中主要成分染料木苷和黄豆苷单体的性质,本实验进行了二者的分离.首先用丙酮萃取和无水乙醇重结晶等方法纯化大豆异黄酮提取物,得到纯度较高的染料木苷和黄豆苷混合物.然后,利用Sephadex LH-20柱层析实现了染料木苷和黄豆苷的分离.     

大豆异黄酮提取工艺的研究

试验采用80％的乙醇溶液萃取脱脂豆粕，将浸取液蒸发浓缩后，用正己烷萃取脂溶性物质，用盐酸除去蛋白，经分离后用大孔树脂进行纯化，最后用丙酮萃取提纯，大豆异黄酮纯度可达到70．56％，其中大豆甙元占44．66％，染料木黄酮糖甙为55．34％。     

高效液相色谱法快速测定大豆异黄酮制品中有效成分的研究

采用高效液相色谱法测定大豆异黄酮制品中染料木苷、黄豆苷、染料木黄酮和黄豆苷元含量.固定相为Agilent-1100 C18柱(3.9 x 150mm);以甲醇:水=35%～45%为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0～2.0mL/min;柱温为室温;检测波长为260nm.实验结果表明,市售30%大豆异黄酮制品中,含大豆异黄酮糖苷近28%,其中染料木苷为4%、黄豆苷为8%,苷元形式异黄酮未检出;采用酶水解法制备的大豆异黄酮水解物中含染料木黄酮14.3%、黄豆苷元9.8%,其大豆异黄酮苷元占大豆异黄酮总含量的96%.     

大豆异黄酮提取工艺的研究

试验采用80%的乙醇溶液萃取脱脂豆粕，将萃取液蒸发浓缩后，用正已烷萃取脂溶性的物质，用盐酸酸除去蛋白经分离后，用大孔树脂进行提纯，最后用丙酮萃取提纯，使其成品得率达到75.0%，含量为70.56%其中大豆苷元占44.66%，染科木黄酮糖苷为55.34%。     

吸附树脂分离大豆异黄酮染料木苷和乙酰基染料木苷的研究

利用Sepabeads SP207大孔吸附树脂分离提纯大豆异黄酮。用乙醇从脱脂大豆中提取的大豆异黄酮主要含有染料木苷,还含有大豆苷、黄豆苷和乙酰基染料木苷等;经Sepabeads SP207大孔吸附树脂的乙醇梯度洗脱,可分离得到染料木苷和乙酰基染料木苷;经HPLC检测其纯度均为90%以上。     

淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量比较

为探讨淡豆豉、黄大豆及黑大豆中异黄酮苷元的提取与含量,本研究采用超声提取,用β-葡萄糖苷酶酶解大豆异黄酮中的糖苷键.以聚酰胺薄膜层析定性、HPLC定量检测不同原料中异黄酮苷元含量.实验结果表明,HPLC最佳流动相为甲醇-乙酸-水(12:1:10),染料木苷、大豆苷元和染料木素在20min内分离良好.大豆异黄酮苷元含量依次为:淡豆豉>黄大豆>黑大豆.精密度实验RSD分别为1.45%和1.6%,平均加样回收率100.93%,证明实验所建立的检测方法准确、可靠.     

固相萃取-反相高效液相色谱测定食品中大豆异黄酮含量的方法研究

该研究建立了一种固相萃取-反相高效液相色谱同时测定大豆和大豆制品中黄豆黄素、黄豆黄苷、大豆苷、大豆苷元、染料木 素、染料木苷、鸢尾黄酮苷和鹰嘴豆芽素A共8种异黄酮含量的方法。 采用体积分数为90%甲醇水溶液提取异黄酮,提取液用C18固相 萃取柱净化,采用C18色谱柱分离,柱温40 ℃,以乙腈和磷酸水溶液为流动相,流速1.0 mL/min,紫外检测器254 nm进行检测,其重复测 定结果的相对标准偏差（RSD）均＜5%,加标回收率为79.3%～102.5%。所建立的反相高效液相色谱法是一种高灵敏度、高准确度的 测定方法,适用范围广,对食品中大豆异黄酮的质量控制和合理有效利用提供了参考依据,具有一定的理论意义和应用价值。     

UPLC法测定大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量

目的：建立同时测定大豆制品及相关制剂中4种大豆异黄酮类化合物大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素含量的超高效液相色谱法。方法：色谱柱：Acquity UPLC BEH C18柱(50mm×2.1mm,1.7μm),流动相：A为体积分数0.2%甲酸溶液,B为乙腈,梯度洗脱;流速：0.4mL/min;检测波长：254nm,柱温：30℃。结果：线性范围：大豆苷0.625～40.0mg/L(r=1.000),染料木苷0.625～40.0mg/L(r=0.9999),大豆苷元0.04～2.56mg/L(r=0.9997),染料木素0.04～2.56mg/L(r=0.9996)。大豆和Natrol? soy isoflavones中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素平均回收率为98.5%～99.8%。结论：本方法简便、快速、灵敏、准确,适用于大豆制品及相关制剂中大豆异黄酮含量测定。     

蛋黄和肌肉等样品中大豆黄酮和染料木素的反相高效液相色谱(RP-HPLC)法的检测

建立了RP-HPLC法分离检测大豆黄酮和染料木素的方法。采用的色谱条件为:WatersSpherisorb?ODS2柱(4.6mmi.d.×150mm,5μm),以甲醇-水(体积比为60:40)为流动相,流速为0.7ml/min,检测波长为254nm。大豆黄酮和染料木素日间拟合工作曲线的线性范围分别为0.05～20μg/ml和0.05～10μg/ml,相关系数分别为0.9984(p<0.01)和0.9978(p<0.01)。大豆黄酮和染料木素的加标回收率分别为91.72%～98.56%和96.80%～98.60%,日内、日间精密度分别为1.30%、5.30%和1.17%、3.84%。样品实测值的重复性范围分别为2.15%～5.99%和2.47%～7.17%。探讨了不同生物样品(蛋黄、肌肉、饲料、血清和肝脏)的预处理方法,比较了超声波法、有机溶剂热回流法和冷浸法,结果发现以超声波法提取样品中大豆黄酮和染料木素的提取率最高,操作亦较简易。