樟树籽仁油合成癸/月桂酰基谷氨酸钠工艺研究

以樟树籽仁油为原料,通过皂化、酰氯化,碱性条件下与谷氨酸钠反应生成癸/月桂酰基谷氨酸钠盐.研究反应温度、pH、反应时间、丙酮与水体积比以及谷氨酸钠与癸/月桂脂肪酰氯摩尔比对癸/月桂酰基谷氨酸钠合成率的影响.得出最佳合成条件为:反应温度45℃,反应时间3h,pH10～11,丙酮与水体积比2∶1,谷氨酸钠与癸/月桂脂肪酰氯摩尔比2∶1.在此条件下,癸/月桂酰基谷氨酸钠的合成率为89.2％.经质谱及红外光谱分析,确定产物为癸/月桂酰基谷氨酸钠.     

月桂酰基谷氨酸钠辅助微波萃取杜仲叶总多酚及提取物活性研究

摘要： 目的 优化氨基酸表面活性剂月桂酰基谷氨酸钠(lauroyl glutamate sodium, LGS)辅助微波萃取杜仲叶总多酚的提取工艺,并比较不同提取工艺得到的提取物(水提物、LGS水提物、醇提物)的体外抗氧化能力及对酪氨酸酶的作用。方法 采用单因素试验结合响应面法,以总多酚得率为评价指标,对杜仲叶LGS辅助微波萃取总多酚进行工艺优化;采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)对不同工艺得到的提取物进行活性成分对比分析,并对不同提取物的抗氧化活性及对酪氨酸酶的作用进行比较。结果 杜仲叶LGS辅助微波萃取的最佳工艺为：LGS浓度2.4×10-2 mol/L,料液比1:27(g/mL),静置时间78 min,微波功率 200 W,微波时间2.6 min,提取2次,得到的LGS提取液总多酚得率为(60.20±0.65 mg/g),显著优于水提液(45.75±0.38 mg/g,P<0.05),更接近醇提液(76.62±0.52 mg/g)。杜仲叶多酚特征成分绿原酸在提取物中的含量为醇提液13.18±0.33 mg/g) > LGS水提液(12.40±0.24 mg/g) > 水提液11.18±0.27 mg/g),与总多酚提取得率一致。三种提取物对DPPH?、ABTS?、?OH、PTIO?的清除率无显著差异（P > 0.05）,均随其质量浓度升高而增强。三种提取物对酪氨酸酶的促进作用表现为醇提物> LGS水提物>水提物,与总多酚/绿原酸提取得率保持一致。分子对接结果显示绿原酸能增强酪氨酸酶与左旋多巴的结合力,改变左旋多巴与酪氨酸酶的结合位点,从而推动左旋多巴氧化进程。结论 所选取的提取工艺合理、可行,LGS辅助微波提取可提高杜仲叶总多酚得率,得到的提取物具有良好的体外抗氧化能力,并可提高酪氨酸酶活性。     

HPLC法检测椰油酰丙氨酸钠中的月桂酰丙氨酸含量

建立高效液相色谱法(HPLC)测定椰油酰丙氨酸钠中月桂酰丙氨酸含量的分析方法。采用Agilent公司型号为AORBAX Eclipse XDB-C18(4.6150 mm 5 micron)反向色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,流速为1.0 m L/min,梯度洗脱,用DAD检测器在210 nm处检测,柱温35℃。该方法在0.050～2.0 mg/mL范围内线性关系良好,检出限(S/N≥3)为0.010 mg/mL,平均回收率为101.21±1.21%。该方法精密度高、重现性好、回收率高,可适用于椰油酰丙氨酸钠中月桂酰丙氨酸含量的测定。     

蒸发光散射检测器在番茄红素反相HPLC定量分析中的应用

在本项研究中,应用反相C18高压液相色谱柱对番茄果实中的番茄红素(Lycopene)进行了分离。色谱条件为:C18固定相:DIAMONSILTM柱;流动相A:乙腈:水=9:1;流动相B:乙酸乙酯;线性梯度洗脱:在前15min内,B由0增为100%,随后,B保持100%;流速为1.0ml/min,紫外-可见光检测器波长范围:260～600nm;监测波长:475nm;进样量为20μl;柱温:室温。经过对漂移管温度,载气压力及喷嘴温度三参数的摸索,确定蒸发光散射检测器(ELSD)在检测样品中番茄红素含量时的条件为:漂移管温度:45℃;载气压力:30psi;喷嘴温度:40℃;增益:1。以番茄红素纯品为参比样品,比较了ELSD与经常使用的紫外-可见光(UV-VIS)检测器在对番茄红素定量检测时的结果。结果表明:虽然ELSD的灵敏度不及UV-VIS检测器,但完全可以在番茄红素的定量检测中应用。同时,ELSD可以检测出样品中不带发光基团的其它组分,从而在检测萃取物及产品纯度时有良好的应用前景。     

HPLC法串联FLD-VWD检测器测定食品中糖精钠的方法研究

利用高效液相色谱法(HPLC)将荧光检测器与紫外检测器串联检测食品中的糖精钠含量。该方法与常规的高效液相色谱法比较,增加了荧光检测器。两个检测器相互验证,能够避免单纯用紫外检测器由于食品中成分复杂常出现定性假阳性或定量偏高的情况。试验表明,相同条件下,荧光检测器的检出限比紫外检测器的检出限低4倍。串联后荧光检测器的回收率为99.71%,紫外检测器的回收率为99.62%。     

测定维生素B1含量的HPLC法

以C18为分离柱，以100mmol/L磷酸钠缓冲溶液（pH2.1）/0.8mol/L辛基磺酸和乙腈=9：1（v/v）混合液为流动相，检测波长为270nm的液相色谱检测VB1含量，在0.005μg～2.5μg范围内进样与主峰面积线性关系良好（r=0.9997），最小检测量0.0050μg，检出限0.0002μg。     

蒸发光散射-亲水作用色谱法测定味精和鸡精中的谷氨酸钠

目的建立了蒸发光散射-亲水作用色谱法测定味精和鸡精中的谷氨酸钠。方法色谱柱为Venusil HILIC(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温30℃;流动相为0.02 mol/L醋酸铵(冰醋酸调p H=3.5)-乙腈(80∶20,V/V);流速1.5 ml/min;检测器为蒸发光散射检测器(ELSD);样品经水超声提取,提取液过滤后供仪器分析。结果谷氨酸钠在6.0~20 g/L浓度范围内线性良好,味精和鸡精的平均回收率分别为98.5%和94.7%,RSD分别为1.07%和2.14%(n=5)。结论该方法适用于味精和鸡精中的谷氨酸钠的测定。     

高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定葡萄糖酸钠的研究

采用反相高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定葡萄糖酸钠的含量。色谱柱为C18(250mm×4.6mm),流动相采用甲醇∶水(40∶60),流速为0.6mL/min,柱温为25℃;ELSD的漂移管温度为98℃,氮气为载气,气流为2.6L/min,定量方法简单、准确,精密度和重现性良好,回收率为96.6%,RSD为1.39%。     

HPLC法检测海藻糖的研究

建立了一种利用高效液相色谱法检测葡萄糖、麦芽糖和海藻糖混合溶液中海藻糖的方法。采用Xbridge-NH2色谱柱,流动相为乙腈/水=4∶1加0.1%的氨水,流速1.0 mL/min,柱温35℃,该条件下葡萄糖、麦芽糖、海藻糖能完全分开,葡萄糖、麦芽糖、海藻糖的质量浓度在0.1-4.0g/100mL范围与峰面积呈良好线性关系,相关系数R2为0.9998-0.9999,相对标准偏差为1.60%,回收率为98.2%-99.4%。     

HPLC法测定微乳中DHA的含量

建立了HPLC法测定微乳中DHA含量的方法。采用无水硫酸铵对微乳进行破乳处理,对DHA藻油进行皂化等处理,采用优化的DHA测定条件为:以C18色谱柱,流动相为乙腈:四氢呋喃:水(含0.4%HAC)=77:3:20,柱温30℃,流速1.0 mL/min,紫外检测器检测,波长215 nm。结果显示,DHA在14.06～449.92μg/mL内呈良好的线性关系(R2=0.9997),平均回收率为101.56%,RSD=2.11%(n=6)。实验结果表明该方法可靠、简便、重现性好,可用于微乳中DHA含量测定。     

高效液相色谱法测定高酰基结冷胶中乙酰基和甘油酰基含量

建立高效液相色谱分别测定结冷胶中乙酰基和甘油酰基含量的方法。通过水解方法将酰基从结冷胶分子中游离出来,酸化为乙酸和甘油酸（或酸根离子）,醇沉将结冷胶除去,高效液相色谱检测有机酸的含量,再根据有机酸与相应酰基的分子质量关系,用内标法,并以丙酸作为内标物,计算得到2 种酰基的含量。使用HPX-87H色谱柱,以5 mmol/L硫酸溶液作为流动相,在柱温35 ℃,流速0.6 mL/min条件下,利用紫外检测器进行检测,检测波长210 nm。结果表明,此方法可同时定量2 种目的物,20 min内可完成测定,且灵敏度高,重复性和稳定性良好。实验测得本实验室生产的结冷胶中甘油酰基和乙酰基的质量分数分别为9.94%、3.29%,甘油酰基加标回收率为97.76%,相对标准偏差为0.59%,乙酰基加标回收率为93.49%,相对标准偏差为1.29%。     

HPLC-ELSD法检测食品中的β-环状糊精

目的：建立一种高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定食品中β-环状糊精含量。方法：样品用水提取后经蛋白沉淀剂沉淀蛋白,使用C₁₈柱分离,以甲醇∶水(10∶90)为流动相等度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,ELSD检测器检测,外标法定量。结果：方法的检出限为1.0 g·kg^-1,精密度为0.22%～1.01%,回收率为87.0%～99.4%,且线性关系良好,r=0.999 69。结论：该方法准确、可靠,适用于食品中β-环状糊精含量的测定。     

高效液相-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)测定食品中三氯蔗糖的方法研究

建立用高效液相-蒸发光散射检测器（HPLC—ELSD）快速准确测定酱油、配制酒等食品中三氯蔗糖的方法。样品经前处理后,用HPLC—ELSD进行检测。仪器条件为流动相乙腈／水为20／80,流速为1．0mL／min,雾化气流量为2．9L／min,漂移管温度为106℃。结果表明,该方法在0-100wedmL范围内曲线方程的相关系数R2为0．9996,方法检出限为0．5mg／kg,样品回收率大于90％,RSD小于5％。该方法操作简便、稳定可靠,适用于配制酒等食品中三氯蔗糖的检测。     

HPLC法同时检测食醋中川芎嗪和阿魏酸的含量

本文建立了一种高效液相色谱法同时检测食醋中川芎嗪和阿魏酸的方法,其检测条件为:采用Sepax GP-C18柱,流动相:甲醇∶水（含0.2%冰乙酸）=23∶77（v/v）,检测波长310nm,柱温35℃,进样量10μL,1.0m L/min等梯度洗脱。结果表明:川芎嗪在1.00⁶0.00μg/m L的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R2=0.990,保留时间为14.71min;而阿魏酸在1.00¹5.00μg/m L的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数为R2=0.997,保留时间为19.45min;该方法检测川芎嗪和阿魏酸的检出限分别为0.115、0.041μg/m L,测定限分别为0.383、0.135μg/m L;加标回收实验的结果得出川芎嗪的平均回收率为100.01%,阿魏酸的平均回收率为99.85%。该方法快速、灵敏、准确,样品前处理简便,可应用于食醋产品中川芎嗪和阿魏酸检测。      

鸡蛋中三聚氰胺含量HPLC检测方法研究

利用HPLC对不同区域鸡蛋中三聚氰胺的含量进行分析,探索建立HPLC法快速测定鸡蛋中三聚氰胺含量的方法。样品通过饱和醋酸铅沉淀蛋白,三氯乙酸提取,Oasis-MCX混合型阳离子交换柱净化后,使用Agilent-C18柱(4.6mm×300mm,5μm),流动相为乙腈+0.05mol/L磷酸二氢钾(pH值为3.0)=25:75(体积比),检测波长240nm,流速为1.2mL/min,柱温35℃,进样量为20μL,三聚氰胺浓度在1～20μg/mL时,浓度与峰面积呈线性关系,最低检出浓度为0.24μg/mL,定量限为0.8μg/mL,加标回收率为93.50～106.22%,相对标准偏差为2.77%～7.78。%     

HPLC法蒸发光散射检测器测定UHT灭菌奶中乳果糖方法的研究

采用液相色谱法分离、蒸发光散射检测器检测,外标法定量测定牛乳中乳果糖的含量。此法是将样品通过乙醇沉淀蛋白后滤液上机测定,较酶法具有快速、准确、操作简单、易于掌握等特点。其色谱条件为:色谱柱HPX-87P,300 mm×7.8 mm;流动相(乙腈∶水)为257∶5;流速1.00 mL/min;柱温60℃。此方法的回收率为97.92%;CV为2.22%。     

高效液相色谱—蒸发光散射法测定植物油中9种脂肪酸含量

目的：探索一种无需衍生就能准确得到植物油中脂肪酸的绝对含量的脂肪酸测定方法。方法：通过高效液相色谱与蒸发光散射检测器联用方法对植物油中主要脂肪酸含量进行更准确的分析测定,采用CNW^ C₁₈-WP 色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相A为0.1%甲酸水溶液,流动相B为0.1%甲酸甲醇溶液,采用梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温箱温度设为25 ℃,进样量为30 μL;蒸发光检测器漂移管温度为75 ℃;无油空气泵提供载气,流速为2.0 L/min;增益设为4。结果：在该条件下,十四酸、软脂酸、亚麻酸、亚油酸、油酸、硬脂酸、花生酸、芥酸和山嵛酸都有较好的线性关系,且稳定性高（RSD均在3%之内）、精密度好（RSD均在3%之内）;芥酸最低检测限达到10^-3 mmol/L,其余脂肪酸的最低检测限达到10^-2 mmol/L;各类脂肪酸的平均回收率为90%～110%,符合试验要求。结论：该方法线性关系良好、稳定性高、精密度好,适用于测定植物油中9种脂肪酸的含量。     

HPLC-ELSD测定茶梗中茶氨酸的含量

采用蒸发光散射检测器(ELSD)测定茶叶下脚料茶梗中茶氨酸的含量。以AE.LichromC18(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,含0.1%三氟乙酸的乙腈-含0.1%三氟乙酸的水(体积比为2:98)为流动相,流速0.5mL/min,漂移管的温度54℃,载气(N2)1.46×105Pa。茶氨酸在2.55～20.43μg范围内有良好线性关系,平均回收率为98.5%,RSD=2.30%,茶梗中茶氨酸的含量为6.59～17.04mg/g。该方法简单,快速,分离度好,下脚料茶梗仍具有较大的开发利用价值。     

HPLC 法检测HDBRS-1 菌株发酵液中2- 羟基联苯含量

采用高效液相色谱法测定脱硫菌发酵液中2- 羟基联苯(2-HBP)的含量。以Delta-PakTM C18 (300A,3.9mm× 150mm,5μm)为色谱柱,甲醇:水(7:3,V/V)为流动相,流速1ml/min,用紫外检测器在260nm 处检测2-HBP。结果显示2-HBP 标准品的保留时间为2.6min,线性范围为0～80mg/L,利用该方法测得HDBRS-1 菌株发酵液中,2-HBP 的生成量为6.11mg/L。     

番茄红素的HPLC检测方法的研究

本实验采用HPLC法探讨了番茄红素的测定方法,结果表明最佳的色谱条件为流动相采用V（乙腈）：V（四氢呋喃）：V（二氯甲烷）=85：3．4：1．6的体系、检测波长472nm,在此条件下可很好的分离番茄红素,回收率96％-102％之间．结果表明：应用高效液相色谱法测定番茄红素操作简单准确,适用性强,分离效率高．