三种L-苏氨酸的测定方法比较

目的:比较3种测定L-苏氨酸含量的方法。方法:对三种L-苏氨酸的测定方法:纸层析法、薄层层析法、高效液相PITC柱前衍生法进行了比较和优化。并用以上三种方法测定10份发酵液样品中的L-苏氨酸含量及加标回收率。结果:纸层析法、薄层层析法和高效液相PITC柱前衍生法三种方法的决定系数分别为0.9938、0.9971和0.9992,检出限分别为:5、7和1.2 μg/L。在每组样品的方差方面,高效液相PITC柱前衍生法方差最小,纸层析法和薄层层析法相近。三种方法平均样品加标回收率分别为95.60%、95.10%和99.30%。三种方法用来检测样品中的L-苏氨酸含量均效果良好。在准确性方面,高效液相PITC柱前衍生法的准确性最好,纸层析法和薄层层析法次之。结论:纸层析法和薄层层析法成本低,适合部分对精确度要求不高的含量测定。高效液相PITC柱前衍生法测定精确,成本较高,速度快,适合精确测定。     

液相色谱法自制净化柱测定饲料中5种黄曲霉毒素

通过用自制净化柱净化,利用高效液相色谱仪对饲料中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1同时进行检测,样品经体积分数为84%的乙腈溶液提取,提取液通过自制净化柱净化、浓缩,三氟乙酸(TFA)柱前衍生,C18色谱柱分离,荧光检测器检测,外标法定量。5种黄曲霉毒素经过衍生后线性良好,对添加黄曲霉饲料样品进行加标回收,回收率在85%~102%,效果良好。     

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定栾果及黄山栾果中的氨基酸含量

为了解郑州地区栾果和黄山栾果中氨基酸的种类及含量,利用异硫氰酸苯酯（PITC）作为柱前衍生剂,采用二元梯度洗脱,在柱温30℃、紫外检测器254nm条件下用柱前衍生-反相高效液相色谱进行测定。结果表明,栾果和黄山栾果中含有17种氨基酸,总氨基酸质量分数分别为15.57%和17.53%。加标回收率在80.5%～115.7%,平均回收率为93.86%;两种样品含有7种人体必需氨基酸,所含氨基酸中谷氨酸含量最高,栾果中组氨酸含量最低,黄山栾果中异亮氨酸含量最低。该法简便、准确,测定结果令人满意,为野生资源栾果的开发利用提供科学参考。      

高效液相色谱法测定乳与乳制品中 L-羟脯氨酸的含量

目的建立高效液相色谱法测定乳与乳制品中L-羟脯氨酸的含量。方法样品水解衍生后采用C18色谱柱,以乙腈和10 mmol/L乙酸钠(p H=5.0)为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温35℃,荧光检测器进行检测。结果 L-羟脯氨酸检出限为0.5 mg/kg,线性范围为1.0~100.0μg/m L,加标回收率在95.3%~102.7%之间,相对标准偏差在1.46%~7.56%之间。结论该方法操作简便、准确、快速,提高了样品检出灵敏度,适用于测定乳与乳制品中L-羟脯氨酸的含量。     

气相色谱法同时检测食品中9种常见食品添加剂

通过对样品前处理、色谱条件的优化,建立一种气相色谱仪同时检测9种食品添加剂的高效检测方法。结果表明：硫酸浓度为200 g/L,用量5.0mL;亚硝酸钠浓度为50 g/L,用量5.0 mL;衍生温度为25℃;冰浴衍生时间30 min为最优。气相色谱仪条件：氢火焰光度检测器（FID）;色谱柱：HP-5柱（30 m×0.35 mm×0.25 μm）;进样口温度：220℃;检测器温度：260℃;柱温：程序升温70℃（3 min）→30℃/min→190 ℃（2 min）→30℃/min→250℃（10 min）。9种食品添加剂在15min内有限分离,各组分线性范围在10 μg/mL~500 μg/mL（r=0.9998）,平均加标回收率在85.9 %~108.3 %之间,相对标准偏差（RSD,n=6）在2.32 %~8.54 %之间。在此条件下检测回收率高、精密度较好、效率高,节约人力物力,可满足各类食品的检测要求。     

高效液相色谱荧光-衍生法测定保健食品中叶酸方法的研究

目的建立保健食品中叶酸的高效液相色谱荧光-衍生检测方法。方法采用0.5%氨水提取,高锰酸钾氧化叶酸衍生生成喋呤-6-羧酸强荧光物质,通过ODS C185μm反相色谱柱分离,荧光检测器检测,Ex=290nm,Em=440 nm,流动相为0.05 mol/L乙酸钠 甲醇=65 35,流速1.0 ml/min。结果方法线性范围为0.05~2.0μg/ml,方法检出限为0.04μg/ml,加标回收率为84.8%~103%,RSD<5.5%。结论实验方法灵敏度高,操作简便,数据可靠,适合于保健食品中叶酸含量的测定。     

HPLC柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1质量控制图的应用

研究高效液相色谱柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1的质量控制图的应用。通过加标样品的测试,用数理统计的方法求出相关技术指标,作出黄曲霉毒素B1质量控制图,得出AFB1的控制限为73.78%~90.24%,警戒线为76.52%~87.50%。试验结果表明,质量控制图能直观有效地控制高效液相色谱柱后衍生法测定黄曲霉毒素B1的分析质量,确保检测结果准确可靠。     

高效液相色谱法测定油茶饼粕多糖组成

提出并对比了3种分析油茶饼粕多糖组成的高效液相色谱方法——氨基柱-折光示差检测器法、氨基柱-串级质谱法、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生-C18柱-紫外检测器法（柱前衍生法）。综合考虑分离效果、灵敏度、仪器成本等因素,最终选定柱前衍生法。柱前衍生法可同时测定油茶饼粕多糖中的鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸,线性关系良好（线性系数>0.99）,检出限为0.02~0.29 mg/L,定量限为0.06~0.96 mg/L;单糖及糖醛酸的加标回收率分别为77.2%~111.9%、60.1%~87.0%;峰面积日内精密度为0.08%~3.77%,日间精密度为0.39%~17.15%。利用柱前衍生法检测油茶饼粕多糖样品,结果显示所检的4个样品中均含有5种或6种单糖及2种糖醛酸,且含量最高的组分均为葡萄糖。     

水产品中生物胺的两种衍生测定方法比较

分别采用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱(HPLC)荧光检测法(简称OPA法)和丹磺酰氯柱前衍生HPLC紫外检测法(简称DNS-Cl法)测定水产品中生物胺含量,比较这两种方法对水产品中多种生物胺检测的差异。结果表明,两种方法对生物胺的检测质量浓度范围在1~100 mg/L,OPA法的检出限(0.03~0.35 mg/kg)略优于DNS-Cl法(0.15~0.90 mg/kg)。方法的精确度试验表明:OPA法的加标回收率(76.2%~107%)略优于DNSCl法(62.2-118%),然而两种方法的测量精密度均小于10%(OPA法1.3%~6.7%,DNS-Cl法2.6%~9.9%,n=6)。OPA法操作简便、快速,然而其衍生产物不太稳定,对亚精胺和精胺的检测灵敏度低;而DNS-Cl法操作相对繁琐,其衍生产物稳定,可同时测定包括亚精胺和精胺在内的多种生物胺。用这两种衍生方法检测水产品中组胺、腐胺、酪胺和色胺存在显著性差异(P0.05)。     

响应面试验优化动物源性食品中呋喃西林代谢物ELISA检测的衍生条件

利用响应面法优化酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测呋喃西林代谢物前处理的衍生条件。根据Box-Behnken试验设计原理,在单因素试验基础上,以呋喃西林代谢物回收率为响应值,应用响应面分析法研究衍生剂体积、衍生剂浓度、衍生温度和衍生时间各因素间的交互作用及对呋喃西林代谢物回收率的影响。最终确定ELISA方法线性检测范围为0.13~10.51 ng/m L,IC50为1.17 ng/m L;在选取样品质量为2 g时,最佳衍生条件为衍生剂体积415μL、衍生剂浓度15 mmol/L、衍生温度57℃、衍生时间50 min,实际回收率为98.57%~103.76%;衍生产物与呋喃西林原药交叉反应率为7.63%,与其他结构类似物、功能类似物及衍生剂交叉反应率均小于0.17%;加标回收率为93.45%~103.21%,批内变异系数为1.86%~6.15%,批间变异系数为3.88%~8.84%。该衍生条件高效,检测方法准确可靠,适用于动物源性食品中呋喃西林代谢物的快速筛查。