中性乳糖酶高产菌的选育

本文对产中性乳糖的乳酸酵母２１２７菌（９．３２ｕ／ｍｌ）采用紫外线、亚硝基胍等诱变因子进行诱变处理，从突变菌株中筛选获得一株高产菌２１２７－ＵＮ，其活力为１７．１２ｕ／ｍｌ．比２１２７菌活力提高了１．８倍。对２１２７－ＵＮ的发酵培养基及发酵工艺条件进行了试验，确定了优化发酵培养基中的碳源、有机及无机氮源、微量元素的组成及波度。优化后的培养条件为：ｐＨ７．０，２５０ｍｌ三角瓶中装液量为３０ｍｌ，温度３０℃，时间７２ｈ。优后２１２７－ＵＮ菌株活力为２４．６３ｕ／ｍｌ，比未优化前提高了４０％。     

利用酒精糟液生产糖化酶发酵工艺条件的研究

对用玉米酒精液生产糖化酶可行性及摇瓶培养产酶工艺条件进行了研究。试验结果表明，当添加７０％酒精糟液替代７０％用水和２０％原料，消前ｐＨ为４．５，发酵时间为９６ｈ，遥瓶培养生产糖化酶酶活力可达７０２０ｕ／ｍｌ，与原配方产酶活力相当。该研究是减轻酒精废糟液处理负荷及其对环境的污染，节约糖化酶生产原料及用水，降低生产成本的一条有效途径，具有较高工业推广价值。     

液体深层发酵生产红曲红色素的研究

诱变、筛选出高产菌株ＦＷ９０６，对液体深层发酵生产高色价红曲红色素的发酵和提取工艺进行了详细的研究。研究结果表明：摇瓶试验产总色素平均达到５６１ｕ／ｍｌ，最高达到６１１ｕ／ｍｌ（其中红色素４１０ｕ／ｍｌ，黄色素２０１ｕ／ｍｌ）。在５０升发酵罐发酵产红色素平均色价２０７ｕ／ｍｌ，５００升发酵罐产红色素平均色价２０５ｕ／ｍｌ，发酵后提取得到红曲红色素固体产品色价在１２００ｕ／ｇ以上。     

植酸酶产生菌的选育研究

以无花果曲霉２１２３－１５＾＃为出发菌株，用ＣＯ＾６０照射诱变，获得Ｃ２１２３－１５－７＾＃和Ｃ２１２３－１５－６４＾＃两株产酶活力较高菌株，在最适发酵条件下，酶活最高可达１１．２８ｕ／ｍｌ，比原菌株提高１６８．５％，发酵时间也从９天缩短为５天。     

高活力糖化酶菌种选育及发酵研究

对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌａｎｉｇｅｒ）ＡＮ－１４９菌进行自然分离、紫外线和ＮＴＧ的复合诱变处理，得到了一株高产糖化酶的菌株ＷＧ－９３，经３０ｍ３罐发酵试验，发酵总浓度３０％，发酵周期为１３５ｈ条件下，酶活力达２９ｋｕ／ｍｌ，应用于生产证明ＷＧ－９３菌是一株优良的糖化酶生产菌。     

β-葡萄糖苷酶产生菌的诱变育种

以无花果曲霉Y2为出发菌株，经过紫外、亚硝基胍和Co^60等诱变处理，获得一株产β-葡萄糖苷酶相对较高的菌株N-9；再通过对培养基组成条件和培养发酵条件进行优化，以优化后的条件进行液态发酵，产酶活力稳定在8．5U／mL左右，是原出发菌株的2．1倍。     

高产柚苷酶菌株米曲霉的诱变育种及发酵条件优化

以土样中筛选的1株产胞外柚苷酶菌株米曲霉11250为出发菌株,采用紫外诱变、亚硝酸钠化学诱变及紫外-亚硝酸钠复合诱变3种方法进行诱变育种,通过透明圈初筛以及液体摇瓶发酵复筛,最终选育出1株胞外柚苷酶产酶活力较高的突变菌株UN2,该菌株产胞外柚苷酶活力达147U/mL,为原始菌株的2.3倍,经5代传代,其产酶能力稳定在(147±0.8)U/mL。采用单因素试验和响应面设计Box-Behnken design试验相结合的方法进行产柚苷酶的摇瓶发酵培养基配方优化,对影响菌株UN2发酵产酶的碳源、氮源、培养基初始pH、温度等条件做单因素试验和响应面法试验。结果表明:该菌株的最佳产酶条件:麦芽糖2.0 g/100 mL,牛肉蛋白胨3.0g/100 mL,初始pH 5.7,培养温度30℃。在此条件下,柚苷酶活力达到251 U/mL,是未优化前的1.7倍。结论 :通过培养基优化,大幅度提高了米曲霉11250液体发酵产柚苷酶的酶活力。     

酸性蛋白酶高产菌株选育

以黑曲霉ＪＷ３０３９为出发菌株，通过ＥＭＳ多次诱变处理及最适培养和发酵条件的摸索，使其酸性蛋白酶产量从１８００～２０００ｕ／ｍｌ提高到３３００ｕ／ｍｌ。     

β-葡萄糖苷酶产生菌的选育

对β－葡萄糖苷酶活力为０．４９７μｍｏｌ／（ｓ·ｇ）的无花果曲霉１０１菌株进行Ｃｏ６０及ＵＶ和ＮＴＧ诱变，得到一株产酶提高１．７２倍的Ｌ２菌株；再经发酵培养基及培养条件，包括碳源、氮源、有机酸、表面活性剂、金属离子、产酶诱导剂、培养温度、水分、初始ｐＨ值、通风量、接种形式及接种量等的优化，以优化得到的最佳条件固态发酵６ｄ，产酶稳定在４．１７～４．６７μｍｏｌ／（ｓ·ｇ）．     

黑曲霉固态发酵产糖化酶的研究

以糖化酶活力为评价指标,对1株黑曲霉变异株固态发酵产糖化酶的培养基组成和发酵条件进行了研究,分别考察了碳源、氮源、原料粉碎度、培养基含水量、温度、起始pH值、发酵时间、接种量等对该菌株固态发酵产糖化酶的影响.结果表明,该菌株产糖化酶的最佳发酵培养基组成为:麦麸:豆饼粉=3:1,(NH4)2SO4含量为3%,K2HPO40.1%.原料粉碎度为过60目筛,起始pR5.0,培养基含水量为120%,培养温度为32℃,接种量为每瓶培养基接108/mL的孢子悬液2.5mL,培养时间为72h,最高产酶活力达17800U/g.     

优良黄酒糖化菌株的选育

对黑曲霉出发菌株AS-3进行了紫外诱变、紫外-氯化锂复合诱变处理,将诱变所得菌株进行耐酸和耐酒精能力测定,筛选得到一株高产糖化酶活力的正向突变株UL-6,发酵培养56h后,产酶活力为15800u/ml,较同批发酵的AS-3提高了73.63%,且该菌株的耐酸、耐酒精性能良好。     

产糖化酶根霉菌的分离及其酶学性质研究

从五粮液酒厂周边采集土样中分离出6株产糖化酶且酶活较高的菌株,选取酶活最高的1株K-1为出发菌,进行发酵实验和酶学性质研究,结果表明,糖化酶酶活在50～55℃较高,最适作用温度为55℃;糖化酶在pH5.5～6之间酶活力较高。酶对玉米粉、小麦粉、木薯粉、苦荞粉、黄豆粉有较强的液化能力,其中对玉米粉的糖化能力最强。在酶的动力学实验中测得Km=1.446 mg/mL,Vm=0.269 mg/mL.min。     

同步糖化淀粉质原料高产L-苹果酸菌株的选育

本研究选育了一株高糖化酶活性且传代稳定的突变株,在不添加商品糖化酶的情况下,可以通过对脱胚玉米粉的糖化发酵生产苹果酸。以Aspergillus oryzae(米曲霉)ME303为出发菌株,经ARTP诱变,2-脱氧葡萄糖(2-DG)筛选压力诱变处理,并通过比较原始菌株和诱变菌株的糖化酶活力和代谢特征,获得一株性能稳定的糖化酶活力较高的L-苹果酸生产菌株A. oryzae SS3,当粗淀粉质原料——脱胚玉米粉作为单一碳源时,30 ℃、150 r/min摇瓶发酵96 h后,糖化酶表现出较高的活力,为320.0 U/mL,与原始菌株相比(220.0 U/mL),酶活增加了45.45%,发酵后191 h,A. oryzae SS3菌株同步糖化发酵产苹果酸达到41.39 g/L,与原始菌株相比(33.98 g/L)提高了21.80%,为目前报道的利用淀粉质原料生产苹果酸且酶活性较高的米曲霉突变菌株,可进一步降低生产成本。     

以水解液为原料的α-淀粉酶发酵工艺条件的研究

本文以枯草杆菌BF-7658诱变菌株Ning为试验菌株,以玉米粉酶水解液为碳源,以豆饼粉碱水解液为氮源,在摇瓶条件下和1.5L发酵罐上进行发酵工艺条件的研究。研究结果表明,该菌株在碳氮比为1:2,pH为6.5～7.5的培养基中可获得较高的α-淀粉酶活性,在1.5L发酵罐中试验α-淀粉酶活性平均可达447.2u/ml,最高能达183.7u/ml(比原菌粗粮发酵提高约150u/m1)。因此,本文试验的清液发酵工艺具有较高的工业推广价值。     

无酵母生淀粉酒精发酵的研究

利用根霉—3(Rhizopus—3)麸曲进行无酵母生淀粉酒精发酵研究。以生玉米淀粉为原料,无酵母酒精发酵醪液酒度8.5％(v/v,20℃),淀粉利用率84.87％。研究了该工艺过程中的一些条件。发现发酵终产物乙醇对生淀粉糖化酶的活性有抑制作用。生淀粉的糖化是该过程的限速步骤。15gRhizopus—3鲜曲的酒化力与10ml酒母相当。发酵时添加一定量的α-淀粉酶、纤维素酶或果胶酶有协同作用,可提高淀粉利用率。同时探讨了无酵母生淀粉酒精发酵的机制,认为选育具有高活性生淀粉糖化酶和酒化酶等复合酶系的菌种是关键问题。     

岩藻多糖酶产生菌的筛选、鉴定及发酵条件初探

从我国厦门海域采集的样品中分离得到129株真菌,以岩藻多糖为唯一的碳源,经过初筛和复筛得到28株岩藻多糖酶产生菌,其中PZ322号菌株岩藻多糖酶产量最高为3.83IU/ml,且发酵性能较稳定,被确定为下一步研究的出发菌株。我们对该菌株进行了形态学鉴定及ITS序列分析,表明该菌为温特曲霉(Aspergillus wentii)。发酵实验结果表明,PZ322产岩藻多糖酶的较优培养基为(%):麸皮5,海带粉2,(NH4)2SO40.4,此时酶活力最高可达6.90IU/ml。     

陈醋生高梁糖化菌株的筛选

选择产生淀粉糖化酶较多的3种黑曲霉菌株H303-4-3、AS.3324和CICC2137,对3株菌株产酶条件进行优化使菌株的产糖化酶能力得到提高,经优化后H303-4-3菌株的糖化酶活力最高.在麸皮与豆粕的比例为4:1,麸皮与水分的比例为15:10,pH值5,装瓶量为15g的条件下,接种培养4d的菌株,30℃培养4d,H303-4-3的糖化酶活力达2783.63U/g.     

α—淀粉酶K211菌种的发酵工艺

对所选育出的枯草杆菌BF—7658变异株K211菌种,在摇瓶条件下进行了发酵条件的研究。研究结果表明菌种的发酵培养料浓度在15—19％之间,碳氮比以2/1为宜。在此浓度范围内,摇瓶发酵酶活力达527U/ml。经23M~3发酵罐放大试验证实,该配方是适宜的。在23M~3罐上发酵12罐,α—淀粉酶活力平均在460u/ml。用K211菌种生产α—淀粉酶具有生产性能稳定,均35小时)可提高设备利用率等优点。 提高α—淀粉酶生产菌种的产酶活力,是我国目前酶制剂行业中关注的问题之一。为达到提高α—淀粉酶活力的目的,我们对菌种和工艺条件进行了研究。有关枯草杆菌BF—7658变异株K211菌株的选育过程,在1986年第6期《食品与发酵工业》中已作报道。本文主要进行K211菌发酵工艺条件的研究。     

产生淀粉糖化酶菌株的诱变选育

以黑曲霉vin-1为研究对象,通过紫外诱变（UV）和硫酸二乙酯（DES）两次诱变,获得产酶较高的菌株vin-1-24-72,酶活达到527u／g,比原始菌株提高154％,RDA％值为40％。菌株经过7次传代,酶活较稳定。     

异淀粉酶产生菌的筛选

从淀粉厂附近的土壤中分离产脱枝酶的菌株,通过筛选得到了多株菌株。对其中一类产脱枝酶的菌落为黄色的菌株进行了研究,从中筛选到了一株产异淀粉酶酶活相对较高的菌株D15,依据菌株特性初步鉴定该菌株属于黄杆菌属。对菌株D15的液体发酵条件进行了初步优化,其发酵64 h时产酶活力最大,达到1.62 U/mL。