细菌原生质体融合育种技术及其应用进展

原生质体融合技术是细菌遗传育种的有效方法之一,发展迅速,应用广泛。文中综述了亲本菌株选择性遗传标记方法、影响原生质体制备与再生因素、原生质体融合方法和条件。介绍了细菌原生质体融合技术在遗传育种中的应用,并展望了细菌原生质体融合技术的发展前景。     

果酒酵母选育研究进展

综述了果酒生产中酵母的种类及其作用和我国在果酒酵母分离筛选、驯化和品质改良方面的进展。     

原生质体融合技术及其在酿酒酵母菌株选育中的应用

酵母是发酵工业的灵魂，优质酵母对于其产品的产量、质量、生产效率等方面都有决定性的作用。论述了这些年新兴的酵母育种技术－原生质体融合技术在酿酒酵母菌种选育中的原理、应用和发展方向。     

利用原生质体融合技术构建梨酒酵母工程菌

以菌株酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae YDJ05及产香酵母Issatchenkia orientalis YS03为融合亲本X和Y,通过原生质体融合技术构建适合梨酒酿造的酵母工程菌,研究结果表明:利用EMS诱变亲本菌株Y,得到了一株精氨酸营养缺陷型菌株,亲本菌株X和Y采用蜗牛酶液在35℃下处理100min,得到菌株X、Y的原生质体融合率分别为93.6％、94.2％,再生率分别为27.8％、31.6％.以加热的方式灭活亲本菌株X,灭活时间为14min.在以PEG为促融剂的条件下对两株菌进行原生质体融合,经过优选得到融合子D J02,其产酒精率、产香率等指标最优,分别达到了9.87％、0.37g/L.     

利用原生质体融合技术构建梨酒酵母工程菌

以菌株酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae YDJ05及产香酵母Issatchenkia orientalis YS03为融合亲本X和Y,通过原生质体融合技术构建适合梨酒酿造的酵母工程菌,研究结果表明:利用EMS诱变亲本菌株Y,得到了一株精氨酸营养缺陷型菌株,亲本菌株X和Y采用蜗牛酶液在35℃下处理100min,得到菌株X、Y的原生质体融合率分别为93.6%、94.2%,再生率分别为27.8%、31.6%。以加热的方式灭活亲本菌株X,灭活时间为14min。在以PEG为促融剂的条件下对两株菌进行原生质体融合,经过优选得到融合子DJ02,其产酒精率、产香率等指标最优,分别达到了9.87%、0.37g/L。      

采用原生质体融合法选育优良啤酒酵母

采用原生质体融合法改造啤酒酵母，使其不改变啤酒发酵特性的同时具糖化大分子糊精的能力，提高了啤酒发酵度，生产出高发酵度，淡爽型普通啤酒。     

自选菠萝果酒酵母菌的诱变育种

以1株自行分离的菠萝果酒酵母菌H10为出发菌株,制备原生质体后进行紫外诱变选育优良突变菌株。优化了酶法制备菠萝果酒酵母原生质体的工艺条件和紫外照射时间,并对诱变菌株进行初筛和复筛。结果表明:菌龄10 h、在酶解温度32℃、酶解液pH6.2、酶解时间90 min为原生质体制备的最佳工艺条件;最优紫外灯照射时间为150 s;诱变菌株经过初筛和复筛后,得到1株对菠萝汁发酵能力强,产香能力好,耐乙醇和SO2,遗传稳定性好,适合热带地区菠萝酒生产的的优良酵母菌株H10-15。     

微生物原生质体融合育种技术及其在发酵食品生产中的应用

微生物原生质体融合育种技术不仅为跨界融合理论提供了现实依据, 而且为实际生产提供了理论依据, 在理论研究和实际生产中都具有重要意义。微生物原生质体融合育种技术因其具有克服远缘杂交、提升优良性状和应用范围广等优点, 近年来, 在发酵食品生产中的作用日益凸显并取得了显著的成效。本文主要综述了细菌、放线菌、霉菌、酵母菌和食用菌原生质体的制备及再生, 原生质体融合方法, 原生质体融合子筛选方法以及酵母、乳酸菌和曲霉原生质体融合育种技术在发酵食品生产中的应用, 并对该技术的前景进行了探讨, 旨在为开展食品微生物优良菌株选育研究提供参考。     

运用紫外线灭活原生质体融合技术选育高产酯酒精酵母的研究

本文运用紫外线灭活原生质体融合技术，在对酒精酵母（Ｋ酵母）和产酯酵母（Ｆ２）的原生质体形成率及紫外线灭活条件进行研究的同时，通过筛选不影响亲株代谢性能的天然耐药性为遗传标记，简化融合子检出步骤，成功地对酒精酵母和产酯酵母进行了属间细胞融合，获是６株遗传性状稳定的融合子。经发酵实验，最终获得既具有酒精酵母的高产酒特性，又具有产酯酵母的高产酯特民生的发酵性能稳定的融合子ＦＫ３－２７。     

原生质体融合技术在微生物菌种选育中的应用

对原生质体融合技术的关键步骤、影响原生质体融合和分离的因素进行了综述.就原生质体融合技术在微生物育种技术上的应用前景进行了分析.     

利用单灭活原生质体融合技术选育降酸能力强的葡萄酒酵母

目的:选育既有较好的发酵性能,又有较强的降酸能力的葡萄酒酵母菌种用于葡萄酒的生产。方法:通过发酵性能好的长城葡萄酒酵母单倍体L13(Lys-)(赖氨酸缺陷型)的原生质体与灭活的降酸能力强的粟酒裂殖酵母1685(Ino-)(肌醇缺陷型)的原生质体进行融合实验,然后通过传代稳定性、降酸鉴定及发酵实验,选育既有较好的发酵性能,又有较强的降酸能力的葡萄酒酵母菌种。结果:得到28株融合子,融合率为6.8×10-7,最终获得了1株传代稳定的融合子G8,降酸率为30.4%。结论:利用单灭活原生质体融合技术,选育出1株发酵力强、降酸性能好葡萄酒酵母菌株。     

耐受性黄酒酵母YS6.2.5的选育及初步应用

黄酒酵母的耐受性对黄酒酿造至关重要。对原始菌株YS 分别采用乙醇- 热冲击法、细胞紫外诱变法和原生质体紫外诱变法,结合高温驯育进行选育,筛选到一株在38℃能正常生长发酵的黄酒酵母突变株YS6.2.5。YS6.2.5体积小,近似圆形,产香好,产酸少,30℃时产酒精能力、酒精耐性、高糖耐性分别为9.0%、19%、30°Bx,38℃时相应指标分别为6.5%、20%、28°Bx。酿酒实验表明,其生理耐性强,酿酒性能好,遗传性状稳定,具有较好的工业应用前景。     

桑椹果酒酿造酵母的诱变选育研究

将筛选到的一株桑椹果酒酵母酒J,对其原生质体进行紫外线(UV)与亚硝基胍(NTG)复合诱变,利用三级筛选模式,,筛选出一株具有酿造桑椹果酒的优良酵母A2菌株。该菌株在7d的发酵周期内酒精体积分数为10.3%(v/v),比出发菌株提高了9%以上,且该菌株在起酵时间及果酒品质方面都有提高。     

耐酸酒精酵母的诱变选育研究

以耐酸性酒精酵母A3为出发菌株,对其原生质体进行紫外线（UV）与亚硝基胍（NTG）复合诱变,利用三级筛选模式,筛选出一株高产突变菌株UN1-81。该菌株在发酵结束后,酒精度达到11.17%vol,比出发菌株提高了16.47%以上,且经过20次传代培养,酒精产量稳定。     

原生质体融合构建耐高温酵母菌株

通过原生质体融合选育耐高温的酵母 ,以解决在纤维素类物质同步发酵过程中酵母发酵温度同纤维素酶酶解温度不一致的问题。利用电场诱导原生质体融合技术对产酒率高的菌株Sb1和产酒率低但耐高温的菌株No 30进行融合。经过融合条件的选择 ,分别对 2亲株进行遗传标记 ,3 5 %蜗牛酶处理原生质体 ,在脉冲强度为 11kV、宽度 10 μS、次数为 2次时进行融合 ,得到数株融合子。鉴定得知 ,融合子 2是所需要的融合子 ,其在固态发酵 45℃时产酒精能力达到体积分数 7 2 8%。     

桑椹果酒专用酵母的诱变选育研究

将筛选到的一株桑椹果酒专用酵母Y11进行单倍体细胞的制取,分别先后进行紫外辐照和微波处理诱变,利用三级筛选模式,从大量的平板中筛选出一株具有酿造桑椹果酒的优良酵母ME44菌株。筛选结果表明,紫外辐照20-40s内可获得较好的诱变结果（正变率31．1％～41．2％）,微波处理15s可获得理想的诱变结果（正变率22．1％）,增大剂量可增加正变率。ME44菌株在7d的发酵周期内酒精体积分数为11．7％Vol,比出发菌株提高了7％以上,且菌株起酵快,可提高果酒品质。     

原生质体融合葡萄酒酵母用于葡萄酒降酸

利用发酵力强的葡萄酒酵母与降酸能力强,发酵性能好的杰酒裂母融合,进行生物基因交换和重组,获得融合子,再进行筛得降酸能力,发酵性能好的葡萄酵母,该酵母具有：（1）安全性能好,稳定性强,（2）单菌株发酵,易管理,操作简单稳定;（3）生产产品口味好,口感稳定,用原生质体融合技术的培养选育出的优良菌株降酸率可达30．4％,比葡萄酒酵母的降酸性提高20％。（孙悟）     

葡萄酒中酵母多糖的研究和应用

系统阐述了葡萄酒中多糖的来源和作用,对酵母多糖的研究与应用现状做了详细介绍,并对葡萄酒行业如何健康、安全、有效地使用酵母多糖产品做了阐述。