一种苗期鉴定烟草赤星病抗性的新方法

烟草赤星病抗性的高通量鉴定是快速筛选和培育烟草抗赤星病品种的前提条件。以15份对赤星病表现不同抗性水平的烟草种质为材料,采用链格孢菌菌饼接种苗期离体叶片,以发病叶片病斑面积作为抗性评价指标,对15份烟草种质的抗性进行评价,并与其田间成株期赤星病抗性进行比较分析。结果表明,采用苗期菌饼接种,供试15份烟草种质的病斑面积差异显著,感病品种病斑平均面积明显大于抗病品种;各品种苗期赤星病鉴定结果与成株期抗性鉴定结果基本一致,且苗期病斑面积大小与3个不同年份、同一地点的成株期平均病级指数间相关性均达到显著水平,分别为0.78、0.74和0.66。表明本研究探讨的苗期离体叶片菌饼鉴定法可以用于烟草赤星病早期鉴定,病斑面积可以作为评价指标准确反映不同烟草品种间赤星病的抗性差异。     

几种激发子处理对苹果梨采后青霉病的控制

研究了β-氨基丁酸(BABA)、水杨酸(SA)、Na2SiO3和NO供体硝普钠(SNP)处理对苹果梨抗青霉病诱导的时效性及其作用机理。结果表明,各激发子处理后不同时间损伤接种均能不同程度地抑制扩展青霉(Penicillium expansum)的侵染和扩展,处理后18h接种各处理的病斑直径明显低于对照,其中BABA处理效果最为明显,病斑直径比对照降低了14.59%,SNP次之。进一步研究表明,各激发子处理对果实组织抗性相关酶过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)均有一定的影响,其中SNP能明显提高POD活性,PAL活性能显著地被SNP和BABA诱导,而对于PPO活性,SNP和Na2SiO3处理的诱导作用高于BABA和SA。     

采前水杨酸处理对红地球葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的防控效果

为明确采前水杨酸处理对葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的影响,本研究首先分离并鉴定红地球葡萄生长过程中的主要潜伏侵染真菌,并研究水杨酸（salicylic acid,SA）对灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）的抑菌效果及对果实抗性基因的诱导作用。本文以新疆红地球葡萄为试材,选取0（对照）、0.5、1.0、2.0 mmol/L水杨酸（SA）在膨大期、转色期和采收前2 d （预收期）喷施处理葡萄果穗,采用组织分离法分离不同时期潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,明确主要潜伏侵染真菌的种类,统计果实采后损伤接种Botrytis cinerea后病斑直径和发病率的变化,并分析果实相关抗性基因的表达情况。结果表明:采前SA处理可以显著降低果实生长期间潜伏真菌率,对葡萄果实不同部位的潜伏侵染控制效果显著,1.0 mmol/L SA处理组优于其它组,其中对果实底部和果蒂潜伏侵染的控制效果优于顶部和果梗。此外,生长期果实共鉴定出4种主要潜伏病原真菌,分别为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、互隔交链孢霉（Alternaria alternate）、变色青霉（Penicillium discolor）和黑曲霉（Aspergillus niger）。1.0 mmol/L SA处理能显著抑制B.cinerea侵染造成灰霉病发病率上升和病斑直径的扩大,SA处理可在贮藏前期诱导采后葡萄果实VvPAL1、VvChi4D和VvGlu1基因的表达,中期后期诱导VvPAL2、VvPAL7和VvPAL15的基因表达,起到提高果实抗病性。因此,SA采前处理能提高红地球葡萄对潜伏侵染病害的抗性,对采后灰霉病也有较显著的抑制效果。     

根皮苷对苹果采后灰霉病的影响

为探究苹果特有酚类物质根皮苷对灰霉病的影响,以培养基体外接种灰霉菌确定抑菌效果,预实验筛选得 到活体实验的最佳质量浓度。以此质量浓度根皮苷溶液浸泡处理‘粉红女士’苹果20 min,诱导12 h,损伤接种灰 霉孢,定期统计发病情况并取样测定抗性相关指标,以清水浸泡为对照。结果表明：根皮苷可直接抑制灰霉菌的体 外生长,1.0 g/L的根皮苷处理可显著降低采后果实的发病率和抑制病斑直径的扩展（P＜0.05）,并诱导果肉苯丙 氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活力的升高,促进总酚、类黄酮和木质素的积累,同时降低了H2O2的含量, 果实抗性提高。结果可为根皮苷对采后病害抗性的机理研究提供理论依据。     

寡糖诱导向日葵抗锈病的信号转导途径

为了解寡糖诱导向日葵抗锈病过程中的信号转导途径,利用寡糖、水杨酸（SA）、茉莉酸（JA）预先喷雾处理向日葵叶片,1d后接种锈菌,通过对植株体内脂氧合酶（LOX）活性及SA含量的测定,并通过RT-PCR对SA、JA信号途径的标记基因PR5和PDF1.2等表达水平进行测定,初步确定诱导抗性表达的信号转导途径。结果表明：经寡糖诱导后,向日葵叶片内LOX活性降低,SA含量上升,且诱导水杨酸途径标记基因PR5表达量增加。结果说明寡糖诱导向日葵抵抗锈病主要与SA介导的信号途径有关。     

向日葵品种资源对菌核病抗性室内鉴定

利用两种不同的培养基培养核盘菌,用离体叶片接种方法对40个不同向日葵品种进行室内抗性鉴定,结果表明：在Minimal medium培养基上生长的核盘菌和PDA培养基相比,菌丝的生长速度大大降低。菌株经PDA培养基培养接种向日葵叶片后,不同向日葵品种之间抗性水平没有显著差异;而用Minimal medium培养基培养的菌株接种供试的向日葵不同品种叶片后,品种间表现出一定的抗性水平差异。依据接种后不同品种抗性水平的差异将供试向日葵品种划分为三组,即：抗病品种如食葵765、油葵KS7等,共3份;耐病品种如3146、新葵杂5号等,共9份;感病品种如LD1093、新葵杂6号等,共28份。     

蝇蛆低聚几丁糖诱导烟株抗黑胫病研究

对蝇蛆低聚几丁糖防治烟草黑胫病的作用机制进行了初步研究.烟苗经过蝇蛆低聚几丁糖处理后,再接种烟草黑胫病菌,测试结果表明,处理烟草植株对黑胫病产生抗性.在0.1～1.5 mg/mL浓度范围内,随着浓度增高诱导抗性效果增强,当浓度达1.0 ms/mL时,诱导抗.性相对防效为92.21%,与浓度1.5 mg/mL的处理间差异不显著.同时可导致烟草叶片苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活性不同程度地升高,分别在第8天、第5天和第3天达到高峰,比对照分别提高了94.62%、160.44%和89.76%.     

采后硅酸钠处理对杏果黑斑病的控制及品质的影响

研究了采后硅酸钠处理对杏果黑斑病的控制及品质的影响。结果表明:体外条件下不同浓度硅酸钠对黑斑病病原物Alternaria alternata的生长具有显著的抑制作用,其中以25mmol/L处理效果最好,抑菌率可达72.73%。50mmol/L硅酸钠浸泡可明显降低杏果损伤接种A.alternata的病斑直径,处理组病斑直径低于对照22%,且抑制效果可持续96h。50mmol/L硅酸钠处理还有效延缓了常温贮藏初期果实硬度的下降,维持了较高的可滴定酸和VC的含量,但对可溶性固形物含量无明显影响。由此表明,采后硅酸钠处理可通过直接抑菌和诱导果实抗性来控制杏果黑斑病,并在一定程度上维持果实的品质。     

采后热水处理对苹果梨青霉病的抗性诱导

由扩展青霉(Penicillium expansum)引起的青霉病是梨果实采后的主要病害.研究了采后45℃热水浸泡15min处理对苹果梨果实损伤接种P.expansum的诱抗效果及部分机理.结果表明:热水处理后不同时间间隔(0、24、48h)接种病原物对果实病斑直径的扩展抑制存在差异,其中以间隔48h的抑制效果最为明显,接种后第4d的病斑直径仅为间隔0h接种的33.2%,同样,热水处理后48h接种处理的病斑直径也显著低于同期的室温水处理,其中以接种后第8d的差异最为明显,为同期对照的68.7%.热水处理可明显提高损伤接种果实的PAL、POD和PPO活性,PAL活性在楼种后第6d高出对照2.76倍.PPO活性在接种后第4d是对照的1.96倍,热水处理还可有效增加损伤接种果实的总酚、类黄酮和木质素含量.上述结果表明,热水处理可通过诱导果实的抗性来抑制苹果梨损伤接种果实病斑直径的扩展.     

烟草赤星病抗性因素遗传的双列分析

对烟草赤星病两个抗性因素遗传的1／2＊7(7+1)双列杂交分析表明,病斑数量和病斑大小的遗传都符合加性-显性模型。病斑数量的遗传属部分显性类型,显性基因主要表现为减效;病斑大小的遗传属完全显性类型,显性基因为增效基因。1996、1997两年的田间试验结果和苗期离体叶片接种的结果基本一致。烟草对赤星病病菌侵入的抗性较抗病斑扩展的能力更容易通过品种间杂交传递给后代。配合力分析表明,一些组合具有较好的抗侵入特殊配合力,另一些组合具有良好的抗扩展特殊配合力。抗×感组合Beinhart1000-1×NC82两个抗性因素特殊配合力均较好,在抗病育种中有较高的利用价值。     

花生中UDP-葡萄糖基转移酶基因的克隆及在非生物胁迫下的表达研究

通过RACE技术从花生叶片cDNA中克隆到了UDP-葡萄糖基转移酶的基因,命名为AhUGT83A1-like（GenBank注册号为KF411463）。该基因全长为1 530bp,ORF为1 380bp,编码460个氨基酸。序列比对与进化分析结果表明,该序列有保守的UDPGT结构域,并且与其它植物的UGT蛋白同源性较高。荧光定量PCR结果表明,AhUGT83A1-like基因在高盐和低温处理的花生根和叶片中均上调表达;在干旱处理时,根中表达也受到显著上调,但叶片中表达量则有明显下降。以上结果表明AhUGT83A1-like可能参与了花生对干旱、低温和高盐的抗性调控。ABA处理结果表明,AhUGT83A1-like在花生根中对ABA响应明显,但在叶片中对ABA没有明显响应,表明该基因在花生根中对非生物胁迫的调控可能是以依赖ABA的方式发挥作用的。     

不同土壤类型旱地花生的生理特性和农艺性状

在大田条件下,研究砂姜黑土和砂壤土两种类型土壤对旱地花生植株的生理特性及农艺性状的影响,结果表明：生育期内两类土壤上花生叶片的叶绿素含量、抗衰老酶活性（SOD、POD、CAT）、可溶性蛋白含量及叶面积系数均呈单峰曲线,峰值出现在出苗后60～75d。砂姜黑土花生叶绿素和可溶性蛋白含量及叶面积系数高于砂壤土,而抗衰老酶活性和丙二醛（MDA）含量低于砂壤土。砂姜黑土花生叶面积系数和干物质积累速率的峰值持续时间明显高于砂壤土。砂姜黑土花生的主茎高、侧枝长及单株结果数等主要农艺性状明显优于砂壤土（p〈0.05）,总生物产量和荚果产量分别高30%和42.9%。     

旱涝急转对不同花生品种生理生化指标的影响

为探讨旱涝急转对花生生理生化的影响,以不同旱涝耐性的3个花生品种中花8号（抗旱）、豫花15（耐涝）和湘花2008（旱涝兼耐）为材料,进行不同梯度的先旱、后涝连续处理,比较不同花生品种的叶片相对含水量,过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽还原酶（GR）活性,以及丙二醛（MDA）含量的变化情况。结果表明,在旱、涝急转的胁迫过程中,干旱对叶片相对含水量的影响甚于湿涝。一定强度的旱或涝胁迫总体上均可使花生叶片的4种抗氧化酶POD、SOD、CAT、GR活性提高,随着胁迫的加深活性降低,复水后活性回落至对照水平,且旱甚于涝。MDA含量总体变化趋势是干旱胁迫下各品种花生叶片中MDA含量有所升高,并于复水解除干旱胁迫后恢复至对照水平;而湿涝处理阶段,MDA含量呈直线上升趋势,在胁迫解除后有所降低。中花8号、豫花15、湘花2008等3个花生品种具有显著不同的水分适应性,中花8号抗旱性更强而耐涝性较弱,豫花15抗旱性较弱而耐涝性强,湘花2008抗旱性中等而耐涝性更强,为水分广适性品种。     

流式细胞仪检测铝胁迫诱导的花生悬浮细胞程序性死亡

以耐铝品种99-1507和铝敏感品种中花2号为材料,应用荧光显微镜和流式细胞仪研究铝对悬浮细胞活性及其线粒体生理的影响,并检测悬浮细胞程序性死亡率。结果表明：铝处理12h后,随着铝浓度增加,悬浮细胞FDA（Fluorescein diacetate）荧光信号逐渐减弱,PI（Propidium Iodide）荧光信号增强,细胞活性下降;线粒体超氧阴离子含量和H202含量随着铝浓度的增加逐渐上升;线粒体膜电位（△ψm）随着铝浓度增加逐渐下降,中花2号下降幅度大于99-1507。501μmol／L及其以上浓度的铝可以显著诱导花生悬浮细胞程序性死亡,铝浓度越高死亡细胞数量越多,同等浓度铝处理下中花2号细胞死亡率高于99-1507,差异达到显著水平。应用流式细胞仪能够准确地检测悬浮细胞程序性死亡的发生情况,细胞程序性死亡率与花生品种的耐铝性呈负相关关系。     

花生根系分泌物自毒作用研究

采用连续收集法提取花生植株的根系分泌物,就其对花生种子发芽、幼苗生长、细胞膜的过氧化、抗氧化酶系统的影响等进行了研究,旨在探讨花生是否存在自毒作用。结果表明,花生根系分泌物的中性、酸性和碱性组分显著抑制了胚根的生长（P〈0.01）,随添加浓度的增加抑制作用逐渐增强,其中,中性组分的抑制作用最强。经过20d的处理,3种组分对花生幼苗的生长均表现出显著的化感抑制作用（P〈0.05）,作用规律与对胚根的抑制作用相似,在中性组分最高添加浓度30 mg/L处理下,株高、地上部鲜重、根系鲜重分别为对照的80%、73%和66%。叶片中SOD和POD的活性显著提高（P〈0.01）,MDA的含量也显著增加（P〈0.001）。3种组分中中性组分的化感促进作用最强,其次是酸性组分,碱性组分的作用相对最弱。研究结果证明了花生根系分泌物自毒作用的存在,是导致花生连作障碍的原因之一。     

甜菜种质抗（耐）除草剂筛选研究

选用甜菜不同种质41份材料进行抗（耐）除草剂初步筛选,试验方法采用不同浓度阿特拉津的茎叶处理和播后苗前封闭处理,结果表明：茎叶处理较播后苗前封闭处理效果明显,且阿特拉津茎叶处理用量为25mL/亩时筛选效果较好.根据地上部叶片和地下部根系的生长势和药害鉴定结果从中初步筛选出8份较抗（耐）除草剂材料.     

水杨酸对采后番茄抗逆性及病程相关蛋白的影响

为探索水杨酸（SA）处理对采后番茄生理机制的影响,用0.1 g/L的水杨酸溶液浸泡番茄5 min,空白（CK）用蒸馏水浸泡番茄15 min,分两组分别置于常温（25℃）和低温（2±1℃）条件下,每天取样,用比色法测定蛋白含量及与抗逆性相关的酶（PPO和POD）活性,结果表明：SA处理的番茄蛋白含量以及与其抗逆性有关的酶（PPO和POD）活性较对照（CK）有明显的增强,且聚丙烯酰胺凝胶电泳结果可知：SA处理后出现了小分子诱导蛋白。研究表明：水杨酸处理可诱导番茄病程相关蛋白的表达。     

甜菜幼苗抗氧化系统对锰胁迫的生物学响应

采用砂培方法,对锰胁迫下甜菜幼苗的膜脂过氧化作用及保护系统的反应进行了研究。结果表明,随着锰浓度和处理时间的增加,甜菜幼苗叶片O2^-·生成速率和H2O2含量呈上升趋势。高剂量（0．8mmol·L^-1）长时间（20d）锰处理,O2^-及H2O2含量下降,具有明显的时间和剂量累加效应。锰胁迫增加了膜脂过氧化产物MDA的含量,高锰（0．8mmol·L^-1）处理（15d）,MDA含量达峰值,显示叶肉细胞氧化速率加快,自我修复能力减弱。锰处理对甜菜叶片SOD活性显现明显的激活效应,随锰浓度加大和处理时间延长,根部SOD活性呈抑制效应。叶和根APX活性均呈先升后降的趋势;CAT活性为锰胁迫初期激活、中后期迅速下降的抑制作用。随锰处理剂量的增加和时间延长,叶片的APX和CAT降幅均大于根部。中度（0．5mmol·L^-1）锰污染,甜菜叶片AsA和GSH含量大幅增加,说明此时非酶抗氧化剂AsA、GSH对H2O2的清除能力提高,发挥了重要的抗氧化作用。     

花生重组近交系黄曲霉产毒抗性的变异与相关分析

以不同遗传背景的亲本远杂9102与中花5号杂交构建重组近交系（RIL）群体,进行人工接种和黄曲霉毒素含量测定。结果表明,RIL群体对黄曲霉的产毒抗性存在较大变异,产毒抗性为受亲本加性基因控制的数量性状,而且存在超亲优势,因此利用微效加性基因的累加和互补提高产毒抗性的潜力较大。相关性分析表明,RIL群体中黄曲霉产毒抗性与百果重、含油量、青枯病抗性之间相关性不显著,不存在紧密连锁关系。初步筛选到大果、高油、兼抗青枯病与黄曲霉产毒的优异材料,可以作为进一步育种研究的核心亲本。