~(99)Tc~m直接标记洛美沙星方法研究

采用Na99TcmO4对洛美沙星进行了直接标记,并对标记条件进行了优化,确定99Tcm标记洛美沙星的最佳条件,并测定了标记物的体外稳定性和脂水分配系数。结果表明,最佳标记条件为洛美沙星3 mg,SnCl2.2H2O 150μg,pH=6,温度为60℃,标记时间为10 min,所得标记物的标记率95%,放化纯度可达96.98%;标记物体外稳定性良好,可在0.01 mol/L pH7.4的PBS中室温放置6 h,其放化纯度仍95%;99Tcm-洛美沙星为脂溶性化合物。以上结果表明,99Tcm直接标记洛美沙星的方法操作简单,标记率较高。标记物不需分离纯化,体外稳定性好。     

Iodogen法~(125)I标记单克隆抗体10D9

采用Iodogen法,选择最佳标记条件进行12525I标记单克隆抗体10D9.标记产物用Sephadex G-50分离纯化,三氯醋酸(TCA)法测定标记率和放化纯,并对标记物的免疫活性及稳定性进行分析.结果显示,125I标记10D9的最佳条件为Iodogen用量10μg、10D9用量20μg、加入Na125I22.2MBq、室温反应8min,125I-10D9的标记率为(84.10±3.18)%,放化纯为(98.49±1.14)%,比活度为933.51 MBq/mg;125I-10D9与Daudi细胞的特异性结合率为(23.21±1.14)%;标记物加到含1%BSA的PBS中放置3W后放化纯度仍>90%.结果表明:Iodogen法125I标记10D9标记率和放化纯高,方法简便,标记物的稳定性好且能较好地保持其免疫活性.     

4-甲基咪唑双膦酸的合成及其~(99)Tc~m标记

以4-甲基咪唑为原料,通过N-烷基化、酯水解和磷酸酰化三步反应,合成1-羟基-2-(4-甲基-1H-咪唑基)-乙烷-1,1-双膦酸(M4IDP),目标产物和重要中间体通过IR、MS及1H NMR进行结构鉴定;采用Na99TcmO4标记M4IDP,得到标记物99Tcm-M4IDP,并测定其体外稳定性。结果显示,标记物的最佳标记条件为:反应时间30 min,反应体系pH为6,SnCl2.2H2O用量100μg,配体用量5 mg。在此条件下,标记率95%,室温下存放6 h,放化纯度95%,说明99Tcm-M4IDP具有较好的体外稳定性。     

123I的制备及其标记新型小分子融合肽的初步研究

本工作利用天然锑靶,通过121Sb(α,2n)123I核反应,在控制锑靶厚度为62.2～64.3mg/cm2和α粒子能量为26.5MeV的情况下,可以得到11.1TBq/(A.h)以上且核纯度高达98.6%的123I。利用制备的123I进行了小分子融合肽拟似物VHCDR1-VHFR2-VLCDR3的123I标记,并对标记物的体外稳定性及在正常小鼠体内的分布进行了初步研究。结果表明,123I标记VHCDR1-VHFR2-VLCDR3的标记率可达90%以上,123I标记物在体内不易脱碘且具有较高的体外稳定性。     

188Re-DTPA-DG的制备及其在荷瘤裸鼠体内的分布

制备了188Re-DTPA-DG,并观察了其在荷MCF-7乳腺癌裸鼠体内的分布。188Re-DTPA-DG制备时采用正交实验设计,结果表明,10mgDTPA-DG、100μL0.5mol/L葡萄糖酸钠溶液、100~200μL370MBq/mL新鲜淋洗的高铼酸盐、400μLpH5.0磷酸缓冲溶液、4mgSnCl2·2H2O,37℃恒温箱中反应3h为最佳标记条件。在此条件下,放化纯度为95%。标记物体外稳定性较好,室温放置6h,其放化纯度仍>92%。188Re-DTPA-DG在荷瘤裸鼠体内的分布结果显示,其在肿瘤中的摄取较高,静脉注射188Re-DTPA-DG后12h,肿瘤与周围肌肉的摄取比值(T/NT)高达12.76,显示出良好的肿瘤靶向性。     

Annexin V的~(125)I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况。标记结果显示,125I-Annexin V标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好。生物分布结果显示,125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降。表明125I-Annexin V适合用作核医学诊断试剂。     

Annexin V的125I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了^125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况.标记结果显示,^125I-Annexin V 标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好.生物分布结果显示,^125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收^125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降.表明^125I-Annexin V 适合用作核医学诊断试剂.     

~(123)I-3H11在荷瘤裸鼠体内的SPECT显像

研究了123I标记单克隆抗体3H11在荷瘤裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。体内生物学分布显示,肿瘤摄取24 h时达最大值(11.06±1.86)%ID/g,注射123I-3H11 24 h T/NT比值分别为:肿瘤/血,2.90±0.06;肿瘤/甲状腺,1.51±0.42;肿瘤/胃,9.96±0.56。注射7.4 MBq123I-3H11于2、24 h行SPECT显像,显像结果表明,24 h后能清晰显像。标记抗体的裸鼠体内生物学分布结果与显像结果基本一致。生物分布和显像表明,123I-3H11可能成为一种新的胃癌SPECT显像剂。     

^125I标记氧化低密度脂蛋白抗体

采用Iodogen法对氧化低密度脂蛋白抗体（OxLDL—Ab）进行了^125I标记,并对标记条件进行了优化;采用PD-10柱对标记抗体进行分离纯化,并对^125I-OxLDL—Ab的体外稳定性和活性进行评价。结果表明,^125I-OxLDL-Ab标记率〉80％,放化纯度〉95％,比活度达73．3TBq／g;^125I-OxLDL-Ab分别在生理盐水、含2％BSA的生理盐水和人血清中4℃放置96h,放化纯度降低均小于5％;^125I-OxLDL—Ab在体外与OxLDL结合的Ka为10．6±1．3GL／mol。以上结果提示^125I-OxLDL-Ab体外稳定性好,与OxLDL结合活性高,^125I标记对其活性影响小,可以用于体外放免诊断试剂盒的研究。     

血管抑素的131I标记及其对小鼠A549移植瘤治疗作用的观察

目的：从人血浆中分离血管抑素（ Angiostatin, AS），并用131I标记，观察131I- AS对荷A549移植瘤小鼠的治疗效果。方法：采用一步法从人血浆中分离AS，并用L-Lysine Sepharose 4B亲和层析柱作亲和层析纯化，将提纯的AS用Iodogen固相法进行131I标记，分析131I-AS 的标记率、比活度，并对其体外稳定性进行评价。32只荷A549肺癌移植瘤的裸鼠随机分为4组，腹腔注射131I- AS（含131I 11.1MBq，AS12.5mg/Kg）、131I（11.1MBq）、AS（12.5mg/Kg）和生理盐水0.3mL，1次/周，治疗四周，观察28天内肿瘤体积的变化。结果：131I- AS标记率为77.8~86.7 %，比活度为1.28~3.96MBq/ug。标记产物体外-20℃存放7天，放化纯度降至原来的72%。治疗28天后，131I- AS组、131I组、AS组和生理盐水组小鼠肿瘤的体积分别是（1956±98mm3）、（5284±123mm3）、（3948±115mm3）、（7350±153mm3）。结论： Iodogen法标记获得的131I-AG 标记率、比活度和稳定性较高。131I- AS能较强地抑制小鼠体内移植肿瘤的生长，其抑制作用优于单纯应用等浓度的AS及131I，131I- AS在治疗肿瘤中有潜在的应用前景。     

新型肺癌小分子多肽的~(131)I标记及其在小鼠体内的生物分布

建立肺癌特异性靶向小分子多肽cNGQGEQc的~(131)I标记方法,研究~(131)I-cNGQGEQc在正常小鼠体内的生物学分布特性。采用氯胺-T法对N端连接有酪氨酸的cNGQGEQc进行~(131)I标记,测定~(131)IcNGQGEQc的标记率、放化纯度、脂水分配系数及在生理盐水(NS)和正常人血清中的体外稳定性,并对标记物在正常小鼠体内的分布进行了初步研究。结果表明,~(131)I-cNGQGEQc的标记率大于90%,比活度为0.4TBq/g;~(131)I-cNGQGEQc在正常人血清和NS中较稳定;~(131)I-cNGQGEQc的脂水分配系数lgP为—1.68,体内生物分布结果表明,肾脏的放射性摄取率在1 h和12 h分别为(10.59±4.66)%ID/g和(1.79±0.89)%ID/g,肾脏的放射性摄取明显高于其他脏器,表明~(131)I-cNGQGEQc主要经肾脏代谢。以上结果表明,~(131)IcNGQGEQc的标记率较高,在体外具有良好的稳定性。~(131)I-cNGQGEQc为水溶性,可用于进一步的靶向诊断与治疗的研究。     

^99Tc^m标记硫酸软骨素及其在小鼠体内的生物分布

采用亚锡还原法对硫酸软骨素（CS）进行了^99Tc^m标记,优化了标记条件,并观察标记物在小鼠体内的生物分布,为骨关节软骨显像提供依据。采用薄层层析分析标记产物的标记率为81．6％±1．7％;用直径为0．2p．m的无菌滤膜对标记液纯化,纯化后放化纯度为90．1％±1．2％^99Tc^m—CS在小鼠体内的生物分布结果显示,其在血液中清除较快,肾脏是主要排泄器官;有较高的亲软骨组织特性,4h时软骨与血液的放射性摄取比（T／NT）为8．31,软骨与骨的T／NT为2．03。以上结果提示,^99Tc^m-CS的标记方法简便,有一定的亲软骨组织性,有待进一步研究。     

新型多肽示踪剂131I-RRL肿瘤分子显像研究

研究能与肿瘤血管内皮细胞特异结合的小分子多肽显像剂精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）对黑色素瘤小鼠模型的肿瘤分子显像应用价值。采用氯胺-T法对小分子多肽RRL进行¹³¹I标记,并对标记条件进行了优化;最佳标记条件为：RRL用量50 μg,Na¹³¹I用量10 μL（74 MBq）,氯胺-T用量90 μg,反应总体积100 μL,振荡反应 3 min。标记率＞69%。用Sephadex G25柱对标记产物进行纯化,纯化后放化纯度＞95%。采用绿色荧光素（FITC）标记RRL,并进行体外细胞结合实验,通过荧光信号的强弱观察RRL在不同细胞中的结合能力。体外细胞结合实验结果显示,RRL不仅能够特异性结合于肿瘤来源的血管内皮细胞,而且能够与肿瘤实质细胞结合;¹³¹I-RRL对黑色素瘤动物模型进行SPECT显像结果显示,¹³¹I-RRL能够特异性浓聚于肿瘤组织,24 h后放射性浓聚灶清晰可见。以上结果表明,小分子多肽RRL是一种很有潜力的肿瘤放射性核素分子显像与治疗的载体。     

^131I标记肿瘤血管靶向多肽的实验研究

设计合成含精氨酸-精氨酸-亮氨酸（RRL）序列的多肽,并用氯胺-T法对其进行^131I标记,标记率约60％,放化纯度〉99％。体外放置24h放化纯度仍≥90％。肿瘤对^131I标记多肽的摄取在注射后明显高于其他器官,注药后24h,肿瘤对^131I-多肽的摄取约为0．65％ID／g,肿瘤与肌肉的放射性摄取比（T／NT）达9．08。以上结果表明：通过氯胺-T法对该多肽进行^131I标记是可行的,标记物可在体外稳定存放24h;^131I-多肽可以靶向肿瘤血管,有进一步研究的价值。     

含RGD序列多肽的~(188)Re标记及其生物分布

以fac-[188Re(CO)3(H2O)3]+为前体标记了含RGD的环状多肽H-c(RGDyK)(Pc1):75℃下反应30 min即可得到标记率和放化产率大于90%的目标产物188Re(CO)3-Pc1。此标记物在小牛血清及磷酸缓冲液(pH=7.4)中稳定性良好,Pc1对U87 MG细胞有良好的亲和力,半抑制常数(IC50)为84.9 nmol/L。生物分布数据显示,188Re-Pc1在血液内清除较快,且通过肝胆和肾代谢排出体外;在肿瘤内有一定的摄取。     

99Tcm标记NGR及其在荷人HePG2肝癌裸鼠体内的生物分布及SPECT显像

用⁹⁹Tc^m标记了含有天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸（Asn-Gly-Arg）序列的血管靶向性短肽NGR,评价了标记物⁹⁹Tc^m-NGR的放化性质以及在荷HePG2肝癌模型裸鼠体内的生物分布和SPECT显像。标记结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR的标记率>90%,放化纯度>95%。荷瘤裸鼠体内生物分布结果显示,⁹⁹Tc^m-NGR在肾脏和肝脏的摄取率较高,注射后1 h肿瘤摄取达（2.52±0.62）%ID/g,最高达（7.26±2.71）%ID/g,12 h仍然达（3.93±1.93）%ID/g,但在竞争性抑制组中摄取率为（1.29±0.85）%ID/g。荷瘤裸鼠的SPECT显像结果显示,除肿瘤外,其他组织器官的放射性摄取随时间延长逐渐降低,肿瘤与肌肉组织的放射性攝取比（T/NT）4 h时最高,可达3.25。注射后1 h肿瘤可见,12 h时最为清晰。以上结果提示,⁹⁹Tc^m-NGR易于制备,具有良好的靶向性, 在肿瘤的诊疗中具有良好的研究前景。     

~(11)C-CH_3-Triflate甲基化法合成~(11)C-PK11195

利用11C-CH3-Triflate作为甲基化试剂,与去甲基前体1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰(nor-PK11195)进行甲基化反应合成N-[11C]甲基-N-(1-甲基丙基)-1-(2-氯苯基)异喹啉-3-氨甲酰(11C-PK11195),并建立了11C-PK11195的自动化合成方法。结果显示,以11C-CH3-Triflate为甲基化试剂合成11C-PK11195,在nor-PK11195用量为0.5~1.0 mg、反应温度90℃、反应时间5 min时,其标记率为51.7%±5.6%,11C-PK11195注射液的化学纯度和放化纯度均98%,比活度0.21 TBq/g。以上结果表明,11C-CH3-Triflate甲基化法可提高11C-PK11195标记率,缩短反应时间,降低前体用量;所制备的11C-PK11195注射液能够满足PET临床要求。     

Experimental study of triplex-forming oligonucleotide targeted to the initiator of S gene of HBV labeled with 125^I

1Introduction Antigen radiotherapy(AR)is based on targeting localized radiodamage to specific sites in the genome using sequence-specific triplex-forming oligonucleo-tides(TFO)to carry Auger-electron-emitters(A-Ettr)such as iodine-125(125I)to the target gene sequence[1].The decay of125I that releases a shower of low energy electrons that produce DNA strand breaks mostly within10bp from the decay site[2,3]with an efficiency close to1break/decay[4].125I,delivered by a TFO,should produce do…