酶法水解珠蛋白制备血管紧张素Ⅰ转换酶抑制肽

分别用3种不同的蛋白酶对珠蛋白进行水解,测定不同水解时间所得产物对血管紧张素I转换酶(ACE)的抑制活性,并对抑制活性最高的水解液进行分离.结果表明:胃蛋白酶水解珠蛋白所得的水解液对ACE的抑制率最高,其半抑制浓度(IC50)为1.19 mg/mL,用SephadexLH20对其进行分离,所得的第5组分的IC50为0.10 mg/mL,活性比水解液提高了12倍.     

花生蛋白制备ACE抑制肽的初步分离纯化研究

采用30 ku、10 ku、5 ku三级超滤将酶解液进行分离和浓缩。三级超滤的结果表明:10 ku的透过液的半抑制浓度(IC50)最低为1.32 mg/m L。采用葡聚糖G-15对酶解液10 ku的透过液进行脱盐和分组,结果表明:脱盐率达到了94.50%,花生多肽的回收率为78.23%。分离的4个峰中峰4的IC50最小为0.634 mg/m L,说明峰4的ACE抑制活性效果最好。将峰4的组分进行LCMS检测,得到ACE抑制肽主要的相对分子质量为1 193.5、1 512.6、1 530、1 608.9、1 777.6。     

酶法水解珠蛋白制备血管紧张素I转换酶抑制肽

分别用3种不同的蛋白酶对珠蛋白进行水解，测定不同水解时间所得产物对血管紧张素I转换酶（ACE）的抑制活性，并对抑制活性最高的水解液进行分离．结果表明：胃蛋白酶水解珠蛋白所得的水解液对ACE的抑制率最高，其半抑制浓度（IC50）为1．19mg／mL，用Sephadex—LH20对其进行分离，所得的第5组分的IC50为0．10mg／mL，活性比水解液提高了12倍．     

大豆生理活性肽的研究（Ⅱ）——抗氧化性和ACE抑制活性的初步研究

采用ASl．398和Alcalase两种蛋白酶，制备了水解度为10％～24%的大豆多肽，对其抗氧化性、ACE抑制活性和相对分子质量的分布进行了研究，结果表明：采用ASl．398酶水解的DH为12％的产品抗氧化活性最高，添加量为6mg／mL时使亚油酸的氧化诱导期延长2．92倍，其相对分子质量分布在1000以上的组分较多；采用Alcalase酶水解的DH为14％的大豆多肽产品，ACE抑制活性最高，IC50为0．144mg／mL，其相对分子质量分布大多在200～600之间。     

4种茶的多酚含量、抗氧化性及抑制α-淀粉酶活性的比较

将新会柑普茶与普洱茶、毛尖、滇红几种常见的茶叶品种进行成分和功效比较,为这一茶叶家族新成员的健康功效提供科学依据,为其产业发展提供科学指导。以没食子酸为标准品,运用福林酚比色法比较柑普、普洱、滇红和毛尖的多酚含量;采用分光光度法测试4种茶的DPPH和ABTS自由基清除能力,从而评价4种茶的体外抗氧化活性;以阿卡波糖为阳性对照,采用分光光度法测试了茶乙醇粗提物对α-淀粉酶的抑制效果,初步评价4种茶的降糖活性。结果表明:4种茶提取物的多酚含量从高到低依次为毛尖(369.5 mg/g)、滇红(237.0 mg/g)、普洱(200.5mg/g)、柑普(194.8 mg/g);4种茶提取物清除DPPH自由基的能力从强到弱依次是毛尖(IC50=4μg/mL)、滇红(IC50=6μg/mL)、普洱(IC50=15μg/mL)和柑普(IC50=18μg/mL);4种茶提取物清除ABTS自由基的能力从强到弱依次为毛尖(IC50=2μg/mL)、滇红(IC50=3μg/mL)、柑普茶和普洱茶(IC50=7μg/mL);以阿卡波糖为阳性对照,4种茶对α-淀粉酶的抑制作用从强到弱依次为毛尖(IC50=12.9 mg/mL)、滇红(IC50=19.0 mg/mL)、普洱(IC50=21.0 mg/mL)和柑普(IC50=24.9 mg/mL),α-淀粉酶抑制能力均优于阿卡波糖(IC50=26.7 mg/mL)。4种茶均具有较好的抗氧化和α-淀粉酶抑制活性,且这两种生理活性与多酚含量呈正相关,在保健食品开发方面具有较大的潜力。     

34种中药对α-葡萄糖苷酶活性的抑制作用

测定34种中药水提物的α 葡萄糖苷酶抑制活性。结果显示,药液浓度为50mg/mL时,巴戟天、牛膝、黄精、白芍、何首乌、五味子、川芎、虎杖、穿山龙对α 葡萄糖苷酶活性的抑制率达50%以上。进一步研究发现五味子、川芎和虎杖对α 葡萄糖苷酶的抑制活性较强。虎杖抑制α 葡萄糖苷酶活性的IC50约为27.5mg/mL,属非竞争性抑制。     

沙蜇蛋白酶解物类蛋白反应修饰及其生物活性

为提高沙蜇肽的降血压和抗氧化活性,通过plastein反应修饰沙蜇蛋白酶解物。根据单因素试验优化得出plastein反应最佳条件:温度20℃、底物质量分数35%、加酶量2.5kU/g。在此条件下反应6h,游离氨基减少量为83.09μmol/g,plastein反应产物的体外ACE抑制率为83.15%(产物质量浓度为15mg/mL),比沙蜇蛋白酶解物的ACE抑制率提高了10.45%;反应4h,游离氨基减少量为107.52μmol/g,plastein反应产物的体外DPPH的IC50为24.68 mg/mL,比沙蜇蛋白酶解物的DPPH清除力提高了39.63%。plastein反应可提高沙蜇肽的ACE抑制活性和DPPH清除能力。     

液体发酵桦褐孔菌三萜类成分抑制肿瘤细胞活性研究

探究桦褐孔菌液体深层发酵所得菌丝体中三萜类成分的抗肿瘤活性。采用高效液相色谱法鉴定桦褐孔菌液体深层发酵产物中含有5种已知具有肿瘤细胞生长抑制活性的三萜类成分,采用MTT比色法分析三萜类成分对卵巢癌细胞ES2、SKOV3和肺癌细胞A549和PC9的生长活性的影响,通过细胞周期和细胞凋亡实验研究三萜类成分对卵巢癌细胞和肺癌细胞增殖的影响。结果表明:经过三萜类成分处理3d和6d的肿瘤细胞生长活性均被明显抑制,对卵巢癌细胞ES2抑制的IC50分别为21.1μg/mL和17.6μg/mL,对SKOV3抑制的IC50值分别为33.8μg/mL和10.9μg/mL;对肺癌细胞PC9抑制的IC50分别为21.4μg/mL和19.7μg/mL、对A549抑制的IC50值分别为28.5μg/mL和23.5μg/mL。细胞周期实验结果表明三萜类成分对ES2、A549、PC9、SKOV3的阻滞可能发生在G0/G1期,在16.0μg/mL的三萜类成分处理下,PC9、A549、ES2、SKOV3处在G1期的细胞比例与对照组中各细胞G1期的占比分别提高32.3%、45.7%、10.9%、6.2%,S期的细胞数降低19.1%、57.3%、23.1%、17.5%。细胞凋亡结果表明,经过药物处理2d后,三萜类成分能够有效的诱导卵巢癌细胞ES2、SKOV3和肺癌细胞A549和PC9的细胞凋亡,进一步验证桦褐孔菌三萜类成分具有肿瘤抑制活性。     

碱性蛋白酶酶解鸡蛋清抗氧化肽的分离纯化

用碱性蛋白酶水解蛋清制备酶解液,通过超滤、离子交换、凝胶层析等手段对鸡蛋清酶解液抗氧化肽进行分离纯化并用薄层层析检验其纯度。研究表明,鸡蛋清酶解液经超滤除去杂蛋白,经DEAE-52离子层析分离出5个组分,其中组分2的抗氧化活性最强,超氧阴离子半抑制(IC50)质量浓度为13.32mg/mL,纯化倍数为2.51,蛋白回收率为25.04%。组分2经Sephadex G-25葡聚糖凝胶进一步分离得3个组分,其中组分3超氧阴离子的清除活性最强,其IC50为5.63mg/mL,纯化倍数达到5.93,蛋白回收率为13.42%,经薄层层析检测为单点,说明蛋清抗氧化肽得到纯化。     

蜜柚落果黄酮提取物的抑菌及抗氧化作用研究

从琯溪蜜柚落果中提取黄酮,经重结晶获得总黄酮含量为64.5%的黄酮提取物。以芦丁为对照,采用比浊法研究黄酮提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的抑制作用,同时研究黄酮提取物对羟自由基(·OH)、二苯代苦味肼基自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的体外清除能力,鉴定其抗氧化性能。结果表明,黄酮提取物对4种受试菌均具有一定抑制作用,抑菌率大小表现为:枯草芽孢杆菌大肠杆菌白色念珠菌金黄色葡萄球菌,并随提取物浓度的增大,抑菌率不断增加;黄酮提取物对4种受试菌的半数抑制浓度(IC50)分别为2.18 mg/mL、1.7 mg/mL、4.6 mg/mL、10.4 mg/mL,分别是芦丁IC50的100、10、10、15倍;黄酮提取物能有效地清除O2-·、DPPH·和·OH,清除能力大小表现为O2-·DPPH··OH,其IC50分别为1.23 mg/mL、4.73 mg/mL、11.46 mg/mL,分别是芦丁IC50的4、400、100倍。