地衣芽孢杆菌LNPU-1发酵条件研究及培养基优化

采用单因素实验法对地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)LNPU-1液体发酵的主要影响因子温度、转速、初始pH值等进行了考察,确定了最佳培养条件:温度为35℃、转速为180r/min、初始pH值为7.0;并通过正交实验对其发酵培养基在摇瓶中进行了优化,优化后的培养基为:葡萄糖5g、酵母浸膏2g、尿素3g、NaCl10g、水1000mL。在优化条件下,发酵液中活菌数达到4.90×1010cfu/mL,明显高于原发酵培养基结果5.10×109cfu/mL。     

动物肠道益生菌地衣芽孢杆菌的筛选及培养基的优化

为了研制新型微生态制剂,以常用益生菌株———地衣芽孢杆菌(bacillus licheniformis)为试验菌株,在测定了初发菌株的极限耐受性后,运用紫外诱变技术筛选到了一株耐酸性较强、耐胆汁、耐高温的地衣芽孢杆菌D-11。其极限耐受条件为:pH4·18,胆盐浓度0·4g/L,温度58℃。并通过试验对该菌株进行了形态和生理生化特征的鉴定。最后通过单因素和正交试验对地衣芽孢杆菌D-11的发酵培养基成分配比进行了选择和优化,为以后的工业化生产提供依据。结果显示当培养基的配比浓度为:玉米淀粉15g/L、豆粕粉90g/L、玉米浆6g/L时菌体的培养效果最好。     

地衣芽孢杆菌固体发酵培养基优化研究

研究了麦麸含量、加水量、碳源、氮源等对地衣芽孢杆菌固体发酵产碱性蛋白酶的影响。采用正交试验法优化发酵培养基配方,确定最佳发酵条件为:麦麸20 g,大豆分离蛋白30%,加水量160%,麦芽糖5%,MgSO40.6%,(NH4)2SO40.5%,K2HPO40.5%,吐温-80 0.05%,发酵时间72 h,在此发酵条件下,酶活力最高达到16 08 U/mL。     

一株枯草芽孢杆菌的分离及培养基的优化

从土壤中分离出1株芽孢杆菌。经培养特征、形态观察、生理生化试验,确定该菌株为枯草芽孢杆菌,并采用单因素及正交实验法对枯草芽孢杆菌的培养基进行优化,优化后的培养基为葡萄糖0.5%、玉米淀粉过程污水1.5%、玉米浆1.5%和Mg SO40.5%。     

一株产抗菌肽芽孢杆菌的鉴定及发酵培养基的优化

对一株产抗菌肽菌株GWM 2.1043进行菌落形态特征观察、生理生化分析及16SrDNA序列比对与系统进化分析等鉴定,确定其种属分类地位,并使用正交设计优化其发酵培养基。结果表明,菌株GWM 2.1043与已知枯草芽孢杆菌形成一个类群,同源性高达99.6%,故将其鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),通过正交设计优化后的培养基为:葡萄糖2%,牛肉浸膏1.5%,酵母粉0.5%,NaCl 0.5%,在此最优条件下,该菌种发酵液杀菌效价为12268IU/mL,比优化前提高了60.2%。     

高产纳豆激酶地衣芽孢杆菌工程菌全合成培养基优化

以产纳豆激酶的地衣芽孢杆菌基因工程菌BL10（pP43SNT-SsacC）为出发菌株,开展其全合成培养基的发酵优化研究。通过单因素试验和正交试验优化了全合成培养基成分,获得了最优的培养基组成（g/L）：葡萄糖30、NaNO3 30、谷氨酸钠20、柠檬酸钠15、MgSO4·7H2O 0.5、K2HPO4·3H2O 1.5、CaCl2 0.5,pH 7.2。在优化的全合成培养基中,纳豆激酶最高酶活力达到25.59 FU/mL,相比于初始培养基发酵活性（4.27 FU/mL）,提高了5 倍。对比分析了全合成培养基和半合成培养基的发酵产物,结果表明,全合成培养基可显著提高纳豆激酶的纯度,与半合成培养基相比,纳豆激酶比活力提高了2 倍。本研究获得了纳豆激酶的全合成培养基成分,显著提高了纳豆激酶发酵活性,并进一步提高了纳豆激酶发酵纯度。     

海洋芽孢杆菌发酵培养基的优化

对实验室前期分离筛选出的一株对肺炎克雷伯氏菌具有较强抑制效果的海洋芽孢杆菌NO.26的发酵培养基进行优化,并研究其抑菌效果。通过单因素实验,确定了该菌株的最适培养基为甘露醇、酵母浸粉、氯化钠。又通过响应面法,使用Design expert 8.0.6软件进行进一步的优化。实验结果表明,海洋芽孢杆菌NO.26抑制肺炎克雷伯氏菌生长的最佳培养基为：甘露醇11.69 g/L,酵母浸粉3.55 g/L,氯化钠1.25 g/L。经优化后,抑菌圈直径由初始的12.85 mm达到17.89 mm。该优化结果对进一步研究其抑菌活性及代谢产物奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌生长培养基的优化

为获得生长活力较好,可以满足菌种水解玉米蛋白粉生产玉米肽的需要,以OD600为评价指标,采用单因素试验确定菌种生长适宜的培养基成分,即:葡萄糖2%(碳源)、大豆蛋白胨4%(氮源)、MgSO4 O.15%、K2HPO4 0.2%、KH2PO4 0.2%.以单因素试验菌种生长适宜的培养基成分作为二次旋转正交试验的零水平.以菌种生长14 h的(OD600为指标,确定培养基成分的最优组合为葡萄糖2%、大豆蛋白胨3.6%、MgSO.O.16%、K2HPO40.28%、KH2P04 0.28%.在此条件下菌种培养14h,其OD600由0.900上升到1.869,菌株生长量提高了1倍.     

枯草芽孢杆菌发酵条件的优化及微生态制剂的研制

以从海参肠道中筛选的枯草芽孢杆菌为发酵菌株,通过单因素实验和正交实验确定了发酵培养基的最佳成分,即葡萄糖1.0%、牛肉膏1.5%、K2HPO40.5%;最适发酵条件为发酵温度30℃,初始pH7.2,接种量4%,发酵时间38~40h。经过优化后发酵液的活菌浓度可达到3.98×109cfu/mL。再以1%海藻酸钠为壁材,4%氯化钙作为固化剂,将发酵后收集的菌体通过乳化法和挤压法制成微胶囊制剂,采用活菌计数法进行该微胶囊制剂的稳定性实验。结果显示,分别采用乳化法和挤压法包埋制备的微胶囊制剂的活菌存活率均高于未经微胶囊化的样品,但乳化法制备工艺相对较为简单且微胶囊形成速度较快,因此预计乳化法将更适合于该菌株微生态制剂的大规模工业化生产。      

响应面分析法优化凝结芽孢杆菌发酵培养基

根据响应面法优化培养基配方,向基础培养基中添加廉价碳源和氮源,得到最优配方,即:蛋白胨7.5 g/L,牛肉膏5.0 g/L,葡萄糖(C_6H_(12)O_6·H_2O)15.0 g/L,淀粉8.78 g/L,玉米秸秆水解液0.83 L/L,氯化铵11.12 g/L和豆粕粉11.81 g/L,乙酸钠(CH_3COONa·3H_2O)3.0 g/L,磷酸氢二钾(K_2HPO_4·3H_2O)2.0 g/L,硫酸镁(Mg SO_4·7H_2O)0.58 g/L,硫酸锰(Mn SO_4·H_2O)0.25 g/L。在最优培养基下,可得到凝结芽孢杆菌菌数(21.1±0.27)×10~8CFU/m L,高于基础培养基的14.8±0.31×10~8CFU/m L,增幅达到42.6%;芽孢率51.2%,高于基础培养基的43.2%,增幅达到18.5%。本实验数据为今后凝结芽孢杆菌工业化培养提供了参考依据。     

胶质芽孢杆菌液体发酵产孢培养基的优化

以提高胶质芽孢杆菌液体发酵芽孢产量为目的,以血球计数板观察计数芽孢量,对胶质芽孢杆菌液体发酵培养基组成进行优化研究。首先进行单因素试验,筛选最优的碳源、氮源、碳源浓度、氮源浓度、无机盐及其浓度,得到单因素最佳值;然后以二次回归正交旋转组合设计对得到的单因素最佳值进行优化,并进行验证试验。结果表明:最优产孢发酵培养基配方为每1000 mL培养基:乳糖21.57 g;复合氮源2.6 g,其中含蛋白胨与硫酸铵,二者质量比例为1∶3;硫酸锰0.21 g;磷酸氢二钾1.5 g;七水硫酸镁1.2 g;经二次回归正交旋转组合设计优化建立了回归模型,通过验证试验,血球计数板计数结果显示胶质芽孢杆菌芽孢产量可达3.44×109cfu/mL,实际芽孢量与回归模型预测值比为0.977,说明所得模型可靠。此优化培养基可以为工业生产胶质芽孢杆菌提供数据参考。     

纳豆芽孢杆菌发酵条件的优化

采用单因素及正交实验法对纳豆芽孢杆菌的摇瓶发酵培养基进行了优化,优化后的培养基为蔗糖15g/L、酵母浸出物2.5 g/L、胰蛋白胨2.5 g/L、氯化钠5 g/L,并通过单因素实验法确定了最佳培养条件为温度35 ℃、初始pH值8.接种量 3%、装液量20 mL/250 mL、发酵时间14 h.     

枯草芽孢杆菌液态发酵豆粕的种子培养基和发酵培养基优化研究

为提高枯草芽孢杆菌液态发酵豆粕的效率,对发酵所用种子培养基和发酵培养基进行优化。通过单因素实验研究种子培养基氮源、碳源、无机盐种类及温度对生物量的影响,确定种子培养基组成为1%酵母膏、1%玉米黄粉、1%KH2PO4,培养温度36℃,其生物量、中性和碱性蛋白酶酶活较常规蛋白胨培养基分别提高210.10%、459.20%和67.50%。在此基础上运用正交实验对发酵培养基碳源量、接种量及温度进行优化,得到最优发酵工艺条件为20%豆粕、2%玉米黄粉、1%KH2PO4、接种量10%,培养温度36℃,其生物量、可溶性蛋白及多肽含量较仅含22%豆粕的培养基分别提高40.90%、28.60%和36.40%。结果表明采用优化后的种子培养基和发酵培养基能够显著提高枯草芽孢杆菌液态发酵豆粕的效率。      

地衣芽孢杆菌发酵降解脱铬皮屑的条件优化研究

对地衣芽孢杆菌发酵降解脱铬皮屑的条件进行系统研究及优化,结果表明,优化后的菌株发酵条件为：种子液菌龄24 h,固液比1∶15,接种量0.5%,温度37℃,pH 9.0和发酵时间48 h。SDS-PAGE凝胶电泳法测定不同发酵时间点下蛋白质相对分子质量的分布结果显示,发酵12 h后蛋白质条带呈清晰的连续状分布,且相对分子质量较大,基本都在20.0 kda及以上,发酵48 h后基本都在14.4 kda以下,说明脱铬皮屑已基本降解为易于植物吸收的游离氨基酸和小分子肽类物质。发酵液成分的测定结果显示,发酵液中游离氨基酸主要有脯氨酸,半胱氨酸、丙氨酸和组氨酸,总游离氨基酸含量达到了1 g/L,总肽含量为13.21 g/L;脱铬皮屑发酵液中未检测到汞、砷、镉和铅元素,铬含量为2.91mg/kg,重金属含量达到了农业部国家标准,有望作为促进植物生长的生物有机缓释肥。     

地衣芽孢杆菌BL-5芽孢生成条件优化

地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）作为微生态制剂在食品或饲料工业中具有广泛的应用前景。通过温度对地衣芽孢杆菌BL-5致死率的影响研究得出无芽孢菌体的致死温度为75 ℃。以芽孢率和芽孢数为评价指标,得到地衣芽孢杆菌BL-5芽孢生成的最佳培养基配方为：蔗糖29.85 g/L、硫酸铵10.00 g/L、酵母膏3.00 g/L、磷酸氢二钾3.42 g/L、硫酸镁1.5 g/L、pH 8.0。最佳培养条件为：接种量5%、发酵时间48 h,发酵温度30 ℃、转速150 r/min。     

枯草芽孢杆菌C3产抗菌物质发酵培养基的优化

该文利用对黑曲霉孢子萌发有抑制作用的枯草芽孢杆菌C3,研究优化产抗菌物质的发酵培养基组分.在碳源、氮源、C/N单因素多水平试验结果的基础上,设计Na+、Mg2+、K+度3因素3水平L9(33)正交试验,研究无机盐离子对枯草芽孢杆菌产抗菌物质的影响.结果表明,碳源为1％葡萄糖,氮源为蛋白胨和酵母浸粉各1.5％,碳氮比为1∶3,NaCl为0.5％,KH2PO4为0.1％,MgSO4·7H2O为0.15％时,枯草芽孢杆菌产抗菌物质的抑菌效果明显,对霉菌孢子萌发的抑制率提高了118.64％.     

地衣芽孢杆菌发酵淀粉产乳酸条件的优化

主要研究地衣芽孢杆菌转化淀粉生产乳酸的发酵条件。从北京郊区土壤中筛选到一株可发酵淀粉等糖质原料生产乳酸的地衣芽孢杆菌WX51,通过单因素及正交试验,确定了其最佳培养基组成为可溶性淀粉40 g/L,硫酸铵0.5 g/L,KH2PO4 1.36 g/L,MgSO4.7H2O 0.2g/L,FeSO4.7H2O 0.01g/L,NaCl 2g/L,玉米浆0.5g/L,CaCO3 20g/L;最佳培养条件为:250mL摇瓶装液10%,50℃、200 r/min培养40h、接种量2%。经优化后,该菌乳酸产量由28.4g/L提高为36.5g/L,淀粉的转化率由71.0%提高为91.2%,产酸速率由0.6g/(L.h)提高为0.9g/(L.h)。     

地衣芽孢杆菌 BL-5 产孢发酵条件优化

地衣芽孢杆菌作为一个益生菌在食品或饲料工业中都具有广泛的应用前景。本实验以芽孢数和芽孢率为指标,经Plackett-Burman设计实验、最陡爬坡实验和响应面实验,得到最佳发酵条件为:K⁺浓度为0.002 mol/L、Mg²⁺浓度为1 g/L、接种量5%、种子菌龄12 h,发酵温度30℃、发酵时间为36 h。对确定的最佳发酵条件进行验证实验,结果得到地衣芽孢杆菌BL-5的产芽孢率为94.67%,芽孢数为3.32×10⁹CFU/mL。      

枯草芽孢杆菌K-6-9发酵条件优化及放大

研究了枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）K-6-9的发酵培养基、发酵条件。本实验通过单因素实验及正交实验得到的发酵培养基为:蔗糖1.0%,胰蛋白胨0.25%,牛肉膏0.5%,MgSO40.2%,KH2PO40.3%,CaCl20.1%。对摇瓶条件下K-6-9液体发酵的温度、转速、初始pH等主要影响因子进行实验探讨,确定了最佳培养条件为:初始pH7.0,装液量50mL/250mL,接种量2%,发酵温度37℃,转速180r/min,发酵时间18h。在摇瓶实验的基础上进行了5L发酵罐通气放大培养,K-6-9菌株14h达到生长高峰期,生长周期18h,此时所获得的芽孢量为1.40×109CFU/mL。相对于初始发酵培养基的芽孢量5.5×105CFU/mL提高了2.55×103倍。      

一株芽孢杆菌的分离鉴定及其在发酵酱渣研究中的应用

从酱渣中筛选分离出一株芽孢菌株,通过生理生化实验以及16SrDNA鉴定其为地衣芽孢杆菌,将该菌种应用于发酵酱渣研究,表明用液态发酵方式较好,当酱渣与玉米淀粉比例为1∶1时,获得的活菌数较多。对添加辅料元素进行正交实验优化结果表明,当培养基中MgSO₄为3g/L,MnSO₄为2g/L,CaCO₃为3g/L时,培养基中的活菌数最多,为6.55×10⁹cfu/mL。