荔枝果肉多酚氧化酶提取与初步纯化

酶促褐变是影响荔枝果肉加工和贮藏的重要问题,多酚氧化酶（PPO）是引起酶促褐变的重要酶类。用磷酸缓冲液匀浆提取荔枝果肉中的多酚氧化酶,提取液最佳离子浓度为0·1mol/L、最适pH为7·5、最佳提取时间为2h,最适料液比为1∶3。并通过硫酸铵沉淀和Phenyl Sepharose CL-4B（苯基琼脂糖CL-4B）疏水柱层析进行初步纯化,该酶被纯化了9·4倍,得率为48%。      

荔枝果肉多酚氧化酶提取与初步纯化

酶促褐变是影响荔枝果肉加工和贮藏的重要问题,多酚氧化酶(PPO)是引起酶促褐变的重要酶类.用磷酸缓冲液匀浆提取荔枝果肉中的多酚氧化酶,提取液最佳离子浓度为0.1mol/L、最适pH为7.5、最佳提取时间为2h,最适料液比为1:3.并通过硫酸铵沉淀和Phenyl Sepharowe CL-4B(苯基琼脂糖CL-4B)疏水柱层析进行初步纯化,该酶被纯化了9.4倍,得率为48%.     

荔枝果肉多酚提取条件优化研究

以水及不同浓度的丙酮、甲醇、乙醇为提取溶剂对荔枝果肉进行提取,研究其多酚提取的优化条件。结果表明,最佳提取条件为90%的丙酮提取3次,荔枝果肉中多酚量可达104.6mg(没食子酸)/100g(鲜果)。     

超高压加工对荔枝果肉中两种品质酶的影响

研究了超高压处理对荔枝果肉中可溶性蛋白质和过氧化物酶、果胶甲基酯酶的特性影响,同时研究了柠檬酸、L-抗坏血酸以及氯化钙与超高压共同处理对荔枝果肉中过氧化物酶（POD）和果胶甲基酯酶（PME）活性的影响。      

速冻荔枝果肉生产工艺

速冻荔枝果肉生产工艺农绍庄，韩君大连轻工业学院１１６００１农秀绥南宁市糖果二厂荔枝是我国南方地区的特产名果之一，果肉清香，汁多、味香甜，深受人们的喜爱。其收获季节短而集中，采摘后的鲜荔枝在常温下会很快发生严重的褐变现象，容易出现软、烂果，收获后较难长...     

影响荔枝果肉酶促褐变主要酶性质的比较研究

比较研究了在荔枝果肉酶促褐变过程中,多酚氧化酶和过氧化物两种酶的性质。在荔枝果肉中过氧化物酶的活性远远大于多酚氧化酶的活性。但是PPO的热稳定性高于POD的热稳定性,应以多酚氧化酶作为灭酶的指标;并且有化学抑制剂可以完全抑制过氧化物酶活性,但对多酚氧化酶却具有抑制暂时性。p H对多酚氧化酶和过氧化物酶的稳定性影响基本一致,在p H小于5的酸性条件下活性和稳定性下降,因而在酸性条件下,可有效抑制酶促褐变。     

龙眼果肉中多酚氧化酶和过氧化物酶性质研究

测定了10个不同品种龙眼果肉中的多酚氧化酶活性.结果表明:华路广眼的多酚氧化酶活力最强,为25440U/(g·min),而罗伞木最弱,为9120U/(g·min).以石硖为试材,对其多酚氧化酶的性质进行研究时发现:龙眼多酚氧化酶酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0.64mol/L,Vmax=0.12U/min;且底物过量时,多酚氧化酶活性随其加入量的增大而迅速增大,但底物逐渐饱和时其活性增加减缓直至饱和值.在灭酶条件研究中发现:多酚氧化酶粗酶液在100℃水浴中处理1min即完全失活;而果浆中的多酚氧化酶在100℃水浴中处理5min才能完全失活.实验还测得石硖中过氧化物酶活力为4440 U/(g·min),且其果浆中过氧化物酶在100℃水浴中处理7min完全失活.     

龙眼果肉中多酚氧化酶和过氧化物酶性质研究

测定了10个不同品种龙眼果肉中的多酚氧化酶活性。结果表明:华路广眼的多酚氧化酶活力最强,为25440U/(g.min),而罗伞木最弱,为9120U/(g.min)。以石硖为试材,对其多酚氧化酶的性质进行研究时发现:龙眼多酚氧化酶酶促褐变反应动力学符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数Km=0.64mol/L,Vmax=0.12U/min;且底物过量时,多酚氧化酶活性随其加入量的增大而迅速增大,但底物逐渐饱和时其活性增加减缓直至饱和值。在灭酶条件研究中发现:多酚氧化酶粗酶液在100℃水浴中处理1min即完全失活;而果浆中的多酚氧化酶在100℃水浴中处理5min才能完全失活。实验还测得石硖中过氧化物酶活力为4440U/(g.min),且其果浆中过氧化物酶在100℃水浴中处理7min完全失活。      

豆壳中过氧化物酶的提纯

建立一种从农作物废弃物--大豆豆壳中提纯过氧化物酶的方法,并检测其纯度和分子量.以大豆豆壳为原料,以酶活力和酶比活力为考察指标,经过粉碎,超声波提取,硫酸铵分级沉淀,透析,DEAE-Sepharose Flast Flow离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析等工艺过程,提纯豆壳过氧化物酶(soybean shell peroxidase,SSP),并通过SDS-PAGE电泳检测其纯度和分子量.提取酶原液的最佳工艺条件为:温度35℃,pH值5.2,液料比20 g/mL;硫酸铵分级沉淀浓度为50%～90%时,含蛋白质较多,酶活性最高;经过提纯后的豆壳过氧化物酶经SDS-PAGE电泳显示其分子量约为3.5×104 u～4.5×104 u范围内,Rz值为2.4.     

大豆过氧化物酶纯化及酶学特性研究

大豆过氧化物酶与辣根过氧化物酶类似,是一种含有血红素的Ⅲ类过氧化物酶.我们从大豆加工副产物大豆皮中,采用精简的三步法提取和纯化大豆过氧化物酶,得到Rz值大于2.0的纯酶.三个纯化步骤分别是硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和DEAE Sepharose离子交换层析.同时分析了温度、pH和常见化合物对酶促反应的影响,考查了酶的热稳定性、酸碱稳定性.结果表明,大豆过氧化物酶的温度和pH适用范围很宽,热稳定性、酸碱稳定性很高,并且在含有较高浓度有机溶剂的反应体系中的保持很好的酶活力.有这么优越的酶学特性,又有廉价的大豆皮来源,所以大豆过氧化物酶的产业化和应用前景将非常乐观.     

荔枝果肉多酚的提取与分离

以荔枝果肉为试验材料,以多酚含量为评定参数,提取分离其中的多酚物质。以乙醇溶液为提取溶剂,通过单因素试验和正交试验,考察了浓度、提取时间、料液比、提取温度、浸提次数等影响提取率的几个重要因素,得出影响果肉中多酚提取的因素由大到小依次为,提取时间料液比乙醇浓度提取温度,最佳工艺条件为,乙醇浓度70%,料液比1∶11,浸提时间6 h,浸提温度40℃,浸提2次,而且荔枝果肉多酚主要以多酚的多聚体为主,其次是低聚体和单体。     

荔枝皮原花青素提取、纯化及抗氧化活性研究

本实验对荔枝果皮内的原花青素提取、纯化和抗氧化活性进行了研究。通过单因素试验和正交试验得出荔枝皮原花青素提取的最佳工艺条件为：乙醇浓度80%、料液比1:20(W/V)、提取温度50℃、提取时间120min、pH6.0提取3次得到样品提取率95.9%。提取物浓缩后,采用AB-8填充柱对荔枝皮提取物中原花青素进行纯化,得率为1.3%,样品纯度为87.45%。通过对纯化后荔枝皮原花青素的抗氧化性能进行测定, 结果显示荔枝皮原花青素有较好的清除DPPH自由基的能力。     

热水抽提纯化纤维素纸浆

在直流式反应器中对纸浆进行热水抽提是一种纯化造纸用纸浆的方法,采用这种方法可将未漂硫酸盐桦木浆中约50%～80%的聚木糖和50%的木素抽提出来,纤维素得率未受影响;若用于溶解浆生产,抽提后纸浆中残余聚木糖含量依然过高,但某些聚木糖含量在5%~7%的纸浆仍可用于生产人造丝级溶解浆。提高抽提温度可降低聚木糖含量,但会导致纤维素得率降低。在给定聚木糖含量的条件下,提高抽提温度会使纤维素聚合度升高。此外,还可以定量回收以低聚木糖形式存在的聚木糖。     

荔枝生理落果中A型原花青素提取纯化鉴定及抗氧化活性研究

本文以荔枝生理落果为原料,采用乙醇提取、AB-8大孔树脂纯化和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶分离得到多酚组分,采用DPPH·、ABTS+·清除法及FRAP法测定各多酚组分体外抗氧化活性后,使用电喷雾液质联用四级杆飞行时间质谱(LC-ESI-Q-TOF)对多酚进行鉴定.结果表明,荔枝生理落果总酚及总原花青素含量分...     

荔枝皮花色苷体外抗氧化能力研究

为研究荔枝皮色素提取液中花色苷的抗氧化能力,分别测定花色苷的总抗氧化能力(TAC),清除羟自由基、DPPH 自由基、超氧阴离子自由基的能力。结果表明：花色苷具有极佳的抗氧化能力,其对羟自由基、DPPH 自由基、超氧阴离子自由基的半抑制能力IC50 分别为0.69、1.31、1.78mg/L。     

荔枝果皮抗氧化物的提取效果及工艺条件研究

为进一步开发利用荔枝果皮，研究比较了不同溶剂提取荔枝果皮抗氧化物纳提取效果及工艺条件。结果表明，提取效果顺序为：甲醇＞95％乙醇＞丙酮＞乙酸乙酯＞氯仿＞正己烷。通过单因素实验和正交实验，获得最佳提取工艺条件：按料液比1：30(g／gL)加入荔枝果皮和95％乙醇(pH＝3)，在60℃回流2h，提取2次。对提取效果影响较大约因素是料液比和提取时间。     

荔枝果皮花色苷的提取纯化及其酶促降解研究

本文从荔枝果皮中提取纯化得到了高活性多酚氧化酶和高纯度花色苷,在此基础上,研究了花色苷-PPO-表儿茶素之间的相互作用以及花色苷降解速率受各反应物浓度的影响.结果表明,PPO先与表儿茶素发生氧化还原反应,随着大量表儿茶素氧化产物生成,其氧化产物再与花色苷作用,使花色苷降解.花色苷降解速率受各反应物浓度的影响较大.     

黄瓜过氧化物酶的分离纯化及酶学性质

新鲜的黄瓜经匀浆、抽提、硫酸铵沉淀、CM-Sepharose 离子交换层析、Superdex-200凝胶过滤层析后获得电泳纯的过氧化物酶。该酶的比活力、回收率及纯化倍数分别为64 177.67 U/mg、9.58%、61.93。该酶的分子质量为41.15 kD,亚基分子质量为40.21 kD。该酶的最适温度和最适pH值分别为60 ℃和6。在25～45 ℃及pH 5～9的范围内非常的稳定。在测定条件下测得该酶的Km值为53.79 mmol/L。硫氰化钾对该酶活力基本无影响。尿素、K+、Mn2+、Ca2+、Mg2+、Ba2+、Cu2+对该酶都具有激活作用且浓度至50 mmol/L时酶活力分别被激活至112%、127%、113%、128%、139%、199%、348%,然而十二烷基磺酸钠、抗坏血酸和草酸对该酶有强烈的抑制作用;Zn2+、甲醇、乙醇和异丙醇对该酶有一定的抑制作用。     

不同品种荔枝果肉细胞抗氧化及抗增殖活性评价

为明确荔枝果肉的生物抗氧化和抗肿瘤保健功能,采用HepG2人肝癌细胞模型对我国南方地区主要种植的10种代表性荔枝品种果肉的细胞抗氧化活性(CAA值)和抗肿瘤细胞增殖活性进行了评价。结果表明,10种荔枝品种中,妃子笑荔枝果肉具有最大的CAA值,淮枝则最小;妃子笑抗HepG2肿瘤细胞增殖活性最强,糯米糍则最弱。荔枝果肉的CAA值与总多酚含量、总黄酮含量、多酚化学抗氧化能力指数(ORAC值)之间都有极显著的正相关性(p0.01),且与黄酮含量之间正相关性最大,说明荔枝果肉中起生物抗氧化作用的主要成分是黄酮类化合物;但荔枝果肉对HepG2肿瘤细胞的抗增殖活性与总多酚含量、总黄酮含量、ORAC和CAA值之间均呈现较弱的负相关性(p0.05),提示某些特殊酚类单体或其协同作用在抗肿瘤细胞增殖过程中发挥主要作用。