^99Tc^m标记中枢神经系统受体显像剂的研究进展

概述了中枢神经系统（ＣＮＳ）受体显像剂的应用及其基本特性，并着重介绍了近年来关于＾９９Ｔｃ＾ｍ标记ＣＮＳ受体显像剂的研究方法与进展情况。     

Gd—DTPA—Dimeglumine的^99Tc^m标记及其生物学特性

以氯化亚锡为还原剂,^99Tc^m一步法标记了顺磁对比剂Gd—DTPA-Dimeglumine（钆喷酸二甲葡胺）,得到^99Tc^mGd-DTPA-Dimeglumine。薄层色谱法（TLC）分析标记物的标记率〉95％,可在室温稳定存放6h,放化纯度〉90％;三氯乙酸沉淀法测定^99Tc^m-Gd—DTPA-Dimeglumine的体外血浆蛋白结合率为2．25％±0．21％。小鼠体内生物分布结果显示,^99Tc^m-G＆DTPA—Dimeglumine主要经肾脏排泄,脑和肌肉组织摄取最少,所有脏器在注射后1min摄取达高峰,注射后5min滞留率下降大于50％,注射后30～60min标记药物在主要脏器内滞留很少,家兔肾动态显像结果显示,^99Tc^m-Gd—DTPA-Dimeglumine主要经肾脏排泄,达高峰时间约5min 半排时间约7min。^99Tc^m标记Gd-DTPA—Dimeglumine方法简单,标记效率高,Gd-DTPA—Dimeglumine经^99Tc^m怀记后其生物学性质基本未改变。本实验表明可以通过双功能螯合剂DTPA同时链接放射性核素^99Tc^m和顺磁性金属元素Gd,并有望在此基础上合成一种具有较好靶向性又可同时进行核医学SPECT和MRI增强扫描的显像剂。     

^99Tc^m标记的肿瘤血管化特异性多肽的实验研究

本文旨在寻找一种的99Tcm标记的抗肿瘤血管化的显像剂.将具抗肿瘤血管化的多肽适当修饰后,用99Tcm标记,并在肿瘤荷鼠体内筛选比较.选择在肿瘤部位放射性浓聚明显的多肽,进行肿瘤荷鼠的体内分布和竞争试验.GPRPAA(D)A(D)-HYNIC-99Tcm标记率高、产物稳定,放化纯度>98%,室温下6 h后>93%.能在荷鼠肿瘤组织较快浓聚,0.5h时肿瘤%ID/g为13.5973±1.3642,清除较慢,6h肿瘤%ID/g仍有4.0399±0.5876;血及其它血供丰富的组织清除较快,1 h时血ID/g为1.7035±0.2742,心%ID/g为3.2578±1.3121,肿瘤在2 h显像清晰.GPRPAA(D)A(D)-HYNIC-99Tc有希望成为一种肿瘤血管化显像剂.     

^99Tc^m-EC-guanine在小鼠体内分布的研究

本文研究99Tcm-EC-guanine在小鼠体内的生物分布规律,用薄层色谱仪和纸层析法测定其标记率及放化纯.正常健康昆明小鼠48只,随机分为8组,尾静脉注射99Tcmr-EC-guanine 3.7 MBq,不同时间点放血处死.取血、心、肝、脾、肺、肾、胃、小肠、脑、骨骼、肌肉,测量其每克组织注射百分剂量率(%ID/g).同时,正常小鼠及荷LOVO大肠癌小鼠各3只,注射99Tcm-EC-guanine,相同时间点进行平面显像,观察99Tcm-EC-guanine在小鼠体内各器官的分布.99Tcm-EC-guanine标记率98%,8 h内放化纯大于95%,在30 min内,正常小鼠除肾脏外的各组织、器官的%ID/g下降均明显.血液廓清速度快,主要通过肾排泄、肝代谢,5min时,在肾、肝的%ID/g分别为20.66和13.20,30 min、4 h时分别为15.43、7.03和11.37、7.31;脑的各时间点%ID/g均小于0.5;肌肉组织分布少,30 min时为1.11,4 h为0.65,在心、肺、脾、胃、肠及骨骼分布不多;显像结果与体内分布一致,荷瘤小鼠瘤体清晰显示.99Tcm-EC-guanine标记简便,标记率及放化纯高,小鼠体内生理分布表明其可能成为一种好的嘌呤代谢显像剂.     

新骨架N3S型肾功能显像剂的制备及其在小鼠体内的生物分布研究

以巯基乙酸为初始原料,通过5步反应设计合成了一个新的N3S型类肽配体,其结构经谱学鉴定（IR,1HNMR,元素分析）;并进行了^99Tcm放射性标记,研究了在小鼠体内的生物分布特征.活性实验结果表明,^99Tcm-MVGQ具有较高的肾初始摄取和较快的血清除速度,肾清除很快,具有成为新型肾功能显像剂的潜力.     

新骨架N3S型肾功能显像剂的制备及其在小鼠体内的生物分布研究

以巯基乙酸为初始原料,通过5步反应设计合成了一个新的N3S型类肽配体,其结构经谱学鉴定(IR,1HNMR,元素分析);并进行了99Tcm放射性标记,研究了在小鼠体内的生物分布特征.活性实验结果表明,99Tcm-MVGQ具有较高的肾初始摄取和较快的血清除速度,肾清除很快,具有成为新型肾功能显像剂的潜力.     

^99Tc^m—CQDO和^99Tc^m—CQDO—MeB牟小鼠体内分布和药代动力学比较

以氯化亚锡为还原剂制备了＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＣＱＤＯ及其甲基硼酸加成物＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＣＱＤＯ－ＭｅＢ经萃取纯化,其放化纯度均〉９０％。小鼠体内分布表明,两者均能被小鼠心肌迅速摄取;＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＣＱＤＯ的心肌清除快,１０ｍｉｎ时已清除至（５．８８±１．６６）％ＩＤ／ｇ;而＾９９Ｔｃ＾ｍ－ＣＱＤＯ－ＭｅＢ在心肌内却有较长的滞留时间,６０ｍｉｎ时心肌摄取仍有（７．４２±０．１７）％ＩＤ／ｇ。两者在血中     

99TcmN-DMCHI和99Tcm-DMCHI的制备及其生物分布

合成并表征了新的异腈配体2,3-二甲基环己基异腈(DMCHI)及其铜络盐。分别通过配体交换法和直接标记法制备得到放化纯大于95％的脂溶性配合物^99Tc^mN-DMCHI和^99Tc^m-DMCHI,二者在室温下均可稳定6h以上。在正常小鼠体内的生物分布实验结果表明,^99Tc^mN-DMCHI和^99Tc^m-DMCHI在血液中均有较高的摄取和很好的滞留,而且血／心、血／肝和血／肺比值均大于1,有望用于心血池显像。     

SUP>99/SUP>TcSUP>m/SUP>明

为考察明胶静脉注射后在机体内的吸收及分布情况,用99Tcm对明胶进行整体标记,然后将标记物99Tcm-明胶静脉注射于小鼠和家兔体内,检测不同时间后标记物的生物分布。结果表明,明胶可以被99Tcm所标记,且标记产物99Tcm-明胶放化纯大于95%;小鼠体内分布显示其具有较高肾摄取率,5 min时小鼠肾的摄取率达到29.36%/g,20 min时可以达到66.88%/g;家兔双肾显像清晰。说明99Tcm-明胶具有特异性肾分布的特点。     

碘标白藜芦醇及其小鼠体内分布

通过碘¹³¹标记白藜芦醇探讨白藜芦醇在小鼠体内的分布代谢。采用过氧化物酶法对白藜芦醇进行¹³¹I标记;经乙酸乙酯萃取纯化,以聚酰胺薄膜为支持介质,V(三氯甲烷)∶V(丙酮)∶V(乙醇)∶V(水)=4∶4∶0.5∶0.4为展开剂,测定标记物的标记率和放化纯;KM小鼠尾静脉注射¹³¹I白藜芦醇（每只0.185MBq,n=5）。¹³¹I白藜芦醇标记率达69.3%,萃取分离后其放化纯为959%,3、7和15d后分别为92.0%、90.4%、90.1%;动物实验显示,¹³¹I白藜芦醇在小鼠体内广泛分布,主要经肝和肾进行代谢,5min时每克组织百分注射剂量率(%ID•g^-1)分别为16.35、13.05,在肠中也有较高分布,10min时%ID•g^-1为11.70;甲状腺的摄取率随时间的延长而增加。碘标白藜芦醇标记物较稳定,可用于进一步的微量示踪研究。     

~(99)Tc~mN-DMSA的制备及其生物分布

以SnCl2 ·2H2 O为还原剂 ,丁二酰二酰肼 (SDH)为N3 -离子提供体 ,在室温下制备 [99TcmN]2 + 中间体 ,然后与二巯丁二酸 (DMSA)发生配体交换反应 ,得到放射化学纯度大于 90 %的 99TcmN DMSA配合物。99TcmN DMSA在室温下 6h内稳定 ,脂水分配系数lgP =- 3.74 ,表明是一水溶性化合物。99TcmN DMSA在小鼠体内生物分布表明 ,与作为肾显像剂的99Tcm DMSA相比 ,其生物分布发生了较大的变化 ,99TcmN核的引入导致了较高的骨摄取值和较低的肾摄取值     

99Tcm标记糖肽及其在荷瘤小鼠体内的分布与代谢动力学

Glucose and galactose are conjugated to the N- mercaptoacetyl-Val-Gly-Gly (MAVGG). The glycopeptides and MAVGG are labeled with 99Tcm. The partition coefficients between octanol and water (Pow) are measured. Glycopeptides or MAVGG labeled with 99Tcm areinjected into the mice bearing S180 tumor. 10μL blood samples are withdrawn at different time points and the radioactivities are counted to calculate the effective halflife (T1/2) using a bi-exponential fit. Biodistribution is measured at 3 h postinjection and the percentage of injected dose per gram ( ID%/g ) and tumor to normal tissue ratio (T/NT) were calculated. The assigned structures were confirmed on the basis of IR, NMR and MS. The 99Tcm labeling yield 巨radiochemical purity is greater than 90%. The lgPow of 99Tcm-Glu-MAVGG, 99Tcm-Gal-MAVGG and 99Tcm-MAVGG are –1.974, –2.128 and –1.378, respectively. The T1/2αof the three labeled peptides are 24.3, 37.1, 46.3 min and T1/2β are 221.5, 158.4 and 198.4 min, respectively. The tumor uptakes at 3 h postinjection are 1.46, 1.55 and 0.67 for 99Tcm-Glu-MAVGG, 99Tcm-Gal-MAVGG and 99Tcm-MAVGG, respectively. Their T/NT for tumor over muscle are 3.74、7.38 and 3.53, respectively. The results demonstrated that after carbohydrate conjugate of peptides, the lipophilicity is decreased , the blood clearance is increased and the tumor uptake is enhanced. Of the two glucopeptides, 99Tcm-Gal-MAVGG shows faster blood clearance, higher tumor uptake and T/NT, which suggests the potential utility of 99Tcm-Gal-MAVGG as a suitable tumor imaging agent.     

糖基化生长抑素99Tcm标记及生物学评价

以天然生长抑素(Somatostatin，SMS)、葡聚糖-10(Dextran¹⁰，Dx¹⁰)及巯基乙胺（Cysteamine）为原料，合成糖基化生长抑素配体化合物SMS-Dx¹⁰-Cysteamine；以¹²⁵I-奥曲肽（¹²⁵I-Tyr₃-Octreotide）为放射性配基，进行受体竞争结合实验，测定SMS-Dx¹⁰-Cysteamine的IC₅₀值；利用葡庚糖转换络合进行SMS-Dx¹⁰-Cysteamine 的⁹⁹Tc^m标记，重点探讨⁹⁹Tc^m标记条件及标记物体外稳定性；并用⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS进行正常SD大鼠体内分布、血浆清除及肿瘤模型动物显像实验。结果表明：配体化合物SMS-Dx¹⁰-Cysteamine保持了对生长抑素2型受体高亲和力，其IC₅₀值与SMS相近；在最佳标记条件：0.3 g/L SnCl₂，5 g/L SMS-Dx¹⁰-Cysteamine，标记介质pH=6.0，室温下反应30 min，⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS标记率约为85%，经分离纯化后，其放射化学纯度大于99%，标记物体外稳定；⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS在正常大鼠体内血浆半衰期为2.38 h，主要浓聚于肝、脾脏并经肾排泄；荷胰腺癌裸鼠显像表明，注射后6 h，肿瘤组织具有明显的放射性摄取，⁹⁹Tc^m-Cysteamine-Dx¹⁰-SMS有望成为一种生长抑素受体阳性肿瘤显像剂。     

荷人肺腺癌裸鼠的^99Tc^m-CD44-McAb放射免疫显像

采用^99Tc^m直接标记法标记抗CD44的单克隆抗体,并对标记抗体的特性进行鉴定;利用^99Tc^m-CD44-McAb对荷人肺腺癌裸鼠进行放射免疫显像及体内分布研究。结果显示,^99Tc^m-CD44-McAb的标记率为92．3％±4．1％,比活度为2．9±0．5TBq／g,放化纯度为96．2％±3．1％。放射免疫显像结果显示,肿瘤组织对^99Tc^m～CD44-McAb有较高的摄取,通过感兴趣区（Regional Interest,ROD技术测得肿瘤部位与对侧相应部位的放射性摄取比（T／NT）为2．29±0．56,明显高于对照组（P〈0．05）。标记抗体的小鼠体内分布结果与显像结果基本一致。以上研究结果说明,^99Tc^m-CD44-McAb用于荷人肺腺癌裸鼠的放射免疫显像能得到较理想的T／NT,CD44是肺腺癌放射免疫显像研究值得推荐的目标抗原之一。     

Annexin V的~(125)I标记及其在正常小鼠体内的分布

采用Iodogen法对Annexin V进行了125I标记,并观察了其在正常小鼠体内的分布情况。标记结果显示,125I-Annexin V标记率达94.9%,纯化后放化纯度达99%;室温放置72 h后,放化纯度仍保持在92%以上,表明其体外稳定性较好。生物分布结果显示,125I-Annexin V在肾脏中放射活性最高,其次为血液、肝脏、心、肺、脾;脑不吸收125I-Annexin V;肌肉、骨骼组织摄取亦较少;各组织、器官放射性摄取在1 h内除血液下降稍慢外,其余均有明显下降。表明125I-Annexin V适合用作核医学诊断试剂。     

~(99m)Tc-帕米膦酸盐的制备及骨分布

为观察99mTc标记的帕米膦酸盐(Pamidronate,PAM)的骨分布特点,以氯化亚锡为还原剂,优化99mTc直接标记PAM的条件,研究SnCl2(Ⅱ)含量、配体用量、pH及反应时间对标记率的影响,确定了优化的标记条件;考察99mTc-PAM的体外稳定性;评价99mTc-PAM在正常鼠体内的生物分布,尤其是骨摄取情况,比较99mTc-PAM与99mTc-MDP在正常小鼠体内的骨摄取。实验结果表明,PAM的99mTc标记方法简单,标记率大于95%,标记物体外稳定性好。正常鼠体内分布实验发现,99mTc-PAM骨摄取很高,且滞留时间长,在血液中清除快,在体内主要通过肾代谢;正常大鼠SPECT显像骨组织清晰可见,具有很好骨显像效果。与99mTc-MDP在正常小鼠体内的生物分布结果比较表明,99mTc-PAM的骨放射性摄取及骨与血放射性摄取比在不同时相均优于99mTc-MDP。研究表明,99mTc-PAM具有理想的骨显像性能,可用于骨显像、骨损伤探测以及肿瘤骨转移检测等应用研究。     

细胞凋亡显像剂99Tcm-HYNIC-AnnexinV的制备及其生物评价

合成了双功能螯合剂琥珀酰亚胺-6-肼基吡啶-3-甲酸(Annexin V。并将HYNIC成功地应用于Annexin V的偶连和标记中：每个Annexin V的蛋白分子能偶连2个HYNIC，标记率为98.8%，标记物的放化纯度在6 h后仍然保持95.1%；99Tcm-HYNIC-Annexin V在动物模型中能有效检测细胞凋亡并有望成为效检测肿瘤治疗效果的显像剂     

HSA微胶粒(SAA)药盒的制备及其99Tcm标记

用生理盐水将20%医用人血清白蛋白(HSA)静脉注射液稀释后,在碱性条件下加热制备HSA微胶粒(SAA),冻干制成药盒;电镜检查显示得到了粒径＜80 nm的SAA,颗粒范围适合于骨髓、淋巴和炎症显像.用Na 99TcmO4溶液对药盒进行标记,标记率＞99%,并可稳定至标记后4 h.小鼠生物分布结果提示,99Tcm-SAA主要从肾脏排泄,60 min时肝、脾和肾放射性较高;家兔显像结果显示给药后30～60 min骨髓可以清晰显影.该SAA药盒标记方法简单,质量稳定,骨髓摄取率高,有望成为一种新的胶体显像剂.