中草药对蛹虫草液体深层发酵的影响

运用均匀性试验,正交试验和Ｄ－最优设计等方法,以菌丝体干重为指标,对蛹昌菌进行液体发酵获得了最佳添加中草药培养基的配方,确定了最适培养条件。     

蚕蛹虫草液体培养基的研究

通过对蛹虫草菌丝体进行液体摇瓶培养，以菌丝干重为指标，选择出蚕蛹虫草发酵的最适种子培养基和发酵培养基。最佳斜面面子培养基：马铃薯２０％，葡萄糖２％，蛋白胨１％，ＫＨ２ＰＯ４０．１５％，ＭｇＳｏ４０．０５％，琼脂２％，ＶＢ１０．１％片，ｐＨ自然；或：花生粉１％，蔗糖２％，蛋白胨１％，ＫＨ２ＰＯ４０．０５％，琼脂２％，ｐＨ自然。最佳液体种子培养基：蔗糖２％，麸皮１％，玉米粉１．５％，全脂奶粉０．５％，     

蛹虫草菌产腺苷的培养基优化

以蛹虫草菌丝体中腺苷含量为指标,进行发酵培养,优化液体发酵培养基。通过单因素实验结果,选出最适宜的碳源是玉米淀粉,氮源是玉米浆粉和NH4Cl,金属离子是ZnSO4;然后采用9因素2水平Plackett-Burman设计实验得出对蛹虫草发酵水平影响显著的因素,分别为玉米淀粉、玉米浆粉和MgSO4;最后运用响应面分析方法对3个因素3个水平进行优化,获得最优组合浓度为玉米淀粉13.35g/L、玉米浆粉45.74g/L、MgSO4为0.40g/L,此时菌体腺苷含量为4 751μg/g。验证结果表明蛹虫草腺苷含量提高了210%,优化效果极为显著。     

统计学分析方法应用于蛹虫草发酵培养基的优化

应用Plackett-Burman设计法对影响蛹虫草发酵的培养基组分进行了筛选,选取的8个相关因素为蛋白胨、酵母浸粉、蔗糖、MgSO4.7H2O、KH2PO4、ZnCl2、VB1和(NH4)2SO4。确定了影响蛹虫草腺苷得率的关键因素为酵母浸粉、蔗糖和VB1。在此基础上,采用响应面法对影响蛹虫草腺苷得率的关键因素最佳水平范围进一步研究,通过二次方程回归求解得知,当酵母浸粉、蔗糖和VB1的用量分别为18.970、18.8500、.235 g/L时,模型预测值蛹虫草腺苷得率为5.176 mg/g,验证值为5.093 mg/g,预测值与验证值吻合较好。     

蛹虫草利用玉米芯发酵生产虫草素

考察了葡萄糖和木糖对蛹虫草深层液体发酵的影响,并研究了蛹虫草利用玉米芯发酵生产虫草素的可行性.结果表明,当以葡萄糖或木糖为唯一碳源时,最适碳源为30 g/L葡萄糖或20 g/L木糖,虫草素产量分别达到(144.63±19.48)mg/L和(50.61±0.66)mg/L.建立了葡萄糖-木糖两阶段发酵,虫草素生产强度达到...     

反相高效液相色谱法测定蛹虫草中虫草素的含量

建立了反相高效液相色谱法定量分析蛹虫草中虫草素(cordycepin)的方法。实验方法:色谱柱为Waters NOVAPAK C183.9mm×300mm,颗粒直径4μm;流动相为KH2PO4-K2HPO4缓冲液(0.01mol／L,PH=6.86)+1％四氢呋喃;流速为1.0mL／min,检测波长为260nm。在该实验条件下,虫草素的线性范围为3.23μg/mL-129.0μg／mL(r=0.9999),最小检出限为0.25ng。虫草素回收率平均值为97.5％,RSD为0.887％。该方法灵敏、快速、准确,适用于人工培植虫草中活性成分虫草素的检测。     

虫草中腺苷含量的快速测定

通过超声波提取,用薄层色谱(TLC)法定性和高效液相色谱(HPLC)定量来测定天然冬虫夏草、蛹虫草子实体及其液体培养菌丝体中腺苷及其含量。TLC分析显示三种样品均含腺苷,HPLC测得腺苷含量分别为48.17±0.61μg/g,(130.23±0.62)μg/g,(437.67±2.40)μg/g.HPLC结果表明:蛹虫草子实体及培养菌丝体中腺苷含量明显高于冬虫夏草。本文的TLC与HPLC比以往采用的同类方法具有分离速度快、样品处理较简单的特点,可作为虫草类产品的质量控制指标。     

北虫草液体培养基的研究

为选取北虫草的最适液体培养基,以三因素三水平的正交试验设计培养北虫草的液体培养条件,北虫草菌种的接种量为5%(体积分数)。培养条件为18℃,pH为6.5,转速为120r/min,培养时间为72h。通过对培养所得的北虫草菌丝体干质量的测定分析可以得出培养北虫草的碳源最优水平为葡萄糖,氮源最优水平为NH4NO3,无机离子最优水平为K2HPO4。从而得到该菌种的最适液体培养基的配方(质量浓度)葡萄糖,NH4NO3,K2HPO4分别为20,1,1g/L。根据数据分析的R值和F值均可以确定:碳源为最重要的因素,应将其控制在最优水平,所以培养北虫草应该选取最优葡萄糖水平。实验结果为进一步大规模培养北虫草提供了重要的依据。     

柞蚕蛹虫草的形态及其发酵液中多糖的含量

论述了人工培养的蛹虫草的形态、性状和液体发酵技术。接种在柞蚕蛹上的蛹虫草多部位丛生 ,长 8.5cm左右。在 30L液体深层培养器中连续发酵 ,获得蛹虫草总多糖( 0 .38～ 0 .67) g/10 0g和虫草素 ( 0 .2～ 0 .3)mg/10 0g。     

蛹虫草无性型原生质体制备条件的研究

以蛹虫草无性型为材料,通过液体培养获得菌丝体,经不同浓度的蜗牛酶、纤维素酶在不同条件下酶解处理菌丝体获得原生质体．实验结果表明：以培养6d的蛹虫草菌丝体为材料,0．5mol／L甘露醇溶液为稳渗剂,蜗牛酶浓度为1％,纤维素酶浓度为0．5％,两种酶混合的体积比为1：2,pH6．5,35℃条件下酶解3h,可得原生质体产量最高为1．36×10^8个／mL．这一研究结果为蛹虫草通过原生质体技术进行菌株的遗传改良提供了重要的理论依据．     

蛹虫草胞外多糖的提取和纯化

对蛹虫草液体深层发酵液的胞外多糖提取进行研究,确定了提取的工艺条件,并对所提取的粗多糖进行分子筛分,对主要多糖组分的糖成分进行测定。其结果为：蛹虫草液体深层发液的胞外粗多糖的提取率为10.0g／L;其粗多糖主要由4种蛹虫草多糖组成;而第4个组分占总粗多糖的32.14%,由葡萄糖构成。     

温度对蛹虫草生长发育的影响

蛹虫草是一种珍贵的药、食同源大型真菌,其市场需求量日益增加．为了实现蛹虫草的工业化生产,用3种不同的蛹虫草菌株CM1、CM2、CDM-003,研究揭示了温度对蛹虫草菌丝萌发、茵丝转色、子座分化、子座生长及产量的影响规律．结果表明,蛹虫草茵丝萌发、转色、子座分化的最佳环境温度为20℃;在人工栽培时,适宜的子座生长温度为20-24℃．该研究结果为蛹虫草规模化生产的环境控制提供了依据．     

蛋茵复合饮料工艺研究与产品开发

以蛹虫草发酵液和鸡蛋酶解液为基料,制备蛋菌复合营养蛋白饮料．实验以玉米粉为原料,接种蛹虫草并经液体深层发酵制成发酵液;以鸡蛋为原料,用木瓜蛋白酶水解得到酶解液．以发酵液和酶解液为主体加入辅料,经调配、均质、灌装、封口、杀菌、冷却等主要工序制成蛋菌饮料产品．通过蛋液酶法水解正交实验、蛋菌饮料稳定性实验与蛋菌饮料调配及口味优化实验,确定蛋菌饮料最佳配制方案．该蛋菌饮料是一种新型保健饮料．     

高温季节不同培养基栽培北虫草的实验研究

北虫草高温季节优质菌种接种在10种不同配方的培养基中,获得与野生北虫草形态一致的子实体。通过对比分析显示:以小麦为主料E1培养基子实体长势最好,以大米为主料的F1培养基生物转化效率最高。生物活性物质检测发现:10种不同配方培养基培养出的实体超氧化物歧化酶(SOD)含量基本相同;虫草素和腺苷的含量越高,多糖与虫草酸的含量越少。该研究结果为高温季节栽培北虫草提供有效的实验依据。