中西医结合抗绿脓杆菌生物膜作用的研究

研究了金银花水煎液体外抗铜绿假单胞菌生物膜的作用及与庆大霉素的协同作用：通过试管稀释法测定了金银花水煎液和庆大霉素对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度minimal in-hibitory concent ration , MIC）,用MTT法建立了体外铜绿假单胞菌生物膜并检定了金银花水煎液和庆大霉素不同MIC浓度的抗铜绿假单胞菌生物膜的作用．结果表明：金银花水煎液对绿脓杆菌的MIC为125mg／mL,SMIC也为125mg／mL;庆大霉素对绿脓杆菌的MIC为1．56μg／mL,SMIC为25μg／mL,与金银花的协同作用对绿脓杆菌的SMIC为1．56μg／mL．由实验结果可知金银花水煎液在体外能抑制铜绿假单胞杆菌（Pseudomonas aeruginosa,P．A）对固体表面的黏附能力及生物膜（biofilm,BF）形成能力,并能破坏P．A已形成的BF,增强庆大霉素对BF内铜绿假单胞菌的清除作用．     

L-半胱氨酸产生菌TS1138的补料分批发酵动力学研究

以DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸(DL-2-amino-Δ-2-thiazoline-4-carboxylic acid,DL-ATC)为底物,采用来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138的L-半胱氨酸合成酶系对DL-ATC进行生物转化合成L-半胱氨酸.以5 L发酵罐补料分批发酵试验数据为依据,对TS1138菌株的补料分批发酵动力学进行了研究,建立了菌体生长、产物形成和基质消耗的动力学模型,并应用MATALAB软件进行模型拟合,拟合模型较好地反映了L-半胱氨酸产生菌TS1138的补料分批发酵过程.     

一株PTA降解菌的分离和鉴定

我们从土壤中分离了一株降解ＰＴＡ的６－８１菌株。６－８１株定名为恶臭假单胞菌（ＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＰｕｔｉｄａ）。     

假单胞菌JW12脂肪酶的补料分批发酵

研究了假单胞菌ＪＷ１２脂肪酶在２Ｌ和２５Ｌ和容积发酵罐的补料分批发酵工艺。通过调整碳源补加速率，控制产酶期发酵液ＰＨ在８．２左右，能有效提高脂肪酶的酶活和表观生产率。在２５Ｌ标准发酵罐中，连续补加吐温－８０，最高脂肪酶酶活力１２９．２μｍｏｌ／（ｍｉｎ．ｍＬ），表观生产率为１５．９１。     

假单胞菌中聚羟基脂肪酸酯合成酶基因的克隆与分析

大多数二型聚羟基脂肪酸酯（Polyhydroxyalkanoates,PHA）合成酶（PhaC）发现于假单胞菌中，其基因组成形式为两个PhaC基因中间有一个PAH降解酶PhaZ基因，根据已知的假单胞菌PHA合成酶基因区域的特殊结构，设计了采用PCR方法从假单胞菌中克隆PHA合成酶基因的克隆方案，并成功地对一株硝基还原假单胞菌（Pseudomonas nitroreducens）和一株石竹伯克霍尔德氏菌（Burkholderia caryophylli）中的PHA合成酶基因进行了克隆。将克隆得到的phaC1，phaZ和phaC2 3个基因所编码的氨基酸序列与其他6株已知PHA合成酶基因的假单胞菌的相应序列进行比较，发现这3个蛋白质在假单胞菌中的相似性很高，由phaC1,phaZ和phaC2 3个基因所组成的基因区域在假单胞菌中非常保守，从对PhaC1,PhaZ和PhaC2的系统进化树分析可以发现，这3个蛋白质与整个PHA合成酶基因区域的系统进化树有着一致的结构。这表明假单胞菌中的PHA合成酶基因区域可能起源于共同的祖先，而其形成可能经历了一次PHA合成酶基因加倍的过程。     

红假单胞菌在煤系黄铁矿表面吸附量的测定

微生物在黄铁矿表面吸附量的大小，直接影响微生物对黄铁矿的表面改性，决定浮选脱硫效果的优劣．利用红假单胞菌，通过测定吸附前后菌液浓度的变化，对煤系黄铁矿进行吸附量测定试验，重点考察了菌种的浓度、矿浆浓度、pH值等因素对吸附量的影响．研究结果表明，红假单胞菌在黄铁矿表面的吸附量遵守Langmuir等温方程式，吸附量与矿浆浓度成反比，pH值对红假单胞菌吸附量有影响，在中性环境下吸附量最高，在碱性环境下吸附量较小，在酸性环境下吸附量最低．红假单胞菌与黄铁矿的吸附作用中，存在静电引力．     

BAF反应器中好氧反硝化菌的分子鉴定及分析

从处理高浓度蛋白质废水的BAF反应器中经富集分离出一株能以KNO3为唯一氮源生长的好氧反硝化菌N1。为进一步研究其分子生物学特性,采用传统的生理生化特征鉴定法及16SrDNA序列分析法对该菌株进行研究,并与已知种和相关种的菌株进行比较,得到系统发育树状图。结果表明,菌株N1的16SrDNA的核苷酸序列与蒙氏假单胞菌（Pseudomonas monteilii strainCIP 104883）的同源性为99.2%,在细菌系统发育分类学上属于假单胞菌属,蒙氏假单胞菌。好氧反硝化菌株N1的序列已向GenBank提交并得到登录号为HQ840771。关于蒙氏假单胞菌的反硝化研究在国内尚未见报道,此研究对于利用微生物技术治理环境中的氮污染具有较高的研究和应用价值。     

光合细菌降解苯酚的动力学参数研究

苯酚是炼焦（油）、塑料、化工等行业生产过程中的主要污染物。随着经济的快速发展,各类含酚废水已经严重威胁着人类的生存环境。利用微生物处理含酚废水是一种经济有效且无二次污染的方法。本文主要研究了光合细菌-沼泽红假单胞菌降解含酚废水的动力学参数。实验结果表明,沼泽红假单胞菌对含酚废水具有很好的降解性能,正常状态下,该菌最大比生长速率μmax为8.00 mg/g.h,半速率常数Ks为247.92 mg/L,产率系数Y为5.88 mg/mg,内源呼吸系数Kd为0.29 d-1。     

污水中拮抗性光合细菌的分离与纯化

实验利用平板划线法从池塘的污水中分离纯化出了荚膜红假单胞菌,球形红假单胞菌,胶质红假单胞菌和沼泽红假单胞菌四种光合细菌,并采用琼脂纸片扩散法证明了这四种光合细菌对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,枯草芽孢杆菌等病原菌有直接的拮抗功能。     

光合细菌处理尼龙66盐废水

在柱式反应器内,用泽沼红假单胞菌Ｙ６连续处理尼龙６６盐生产废水,当进水（ＣＯＤｃｒ含量）为１１４０ｍｇ／Ｌ,经过６０ｈ处理后出水中ＣＯＤｃｒ含量为１５０ｍｇ／Ｌ,光合细菌浓度（干重）为５．５９ｇ／Ｌ,建立了动力学模型,其参数Ｋｓ＝８４８ｍｇ／Ｌ,Ｙ＝０．４４７,Ｋｄ＝０．０１７３ｈ－１,μｍ＝０．２１ｈ－１,用所得到的动力学参数预测出水质浓度和菌体浓度,其预测值和实测值相对误差小于４％。     

石油污染土中微生物的分离鉴定及降解特性

为了为汽油污染土的微生物修复提供优良菌种,以LB培养基为基质,从石油污染土中对汽油降解菌进行了分离鉴定,以降油培养基为基质对分离得到的菌株进行汽油降解率的测定,以培养温度、培养基pH值及培养时间为参数对5种具有优良汽油降解性能的菌株进行单因素试验,基于单因素试验结果进行三因素三水平的正交试验后,以汽油降解率为响应值对试验结果进行响应面分析,筛选出具有优良降解性能的菌株,并确定了菌株降解汽油的最佳条件。结果表明：从石油污染土中分离出了9种具有汽油降解性能的菌株,其中,铜绿假单胞菌、假单胞菌属、苍白杆菌属、博得特氏菌属以及戈登氏菌属具有优良降解性能,这5种菌降解汽油的最优条件为：铜绿假单胞菌、假单胞菌属、苍白杆菌属、博得特氏菌以及戈登氏菌的最佳培养温度均为32℃,培养基pH值均为7.0,培养时间均为20 h,降油培养基中的汽油降解率分别为70.12%、76.42%、75.66%、77.50%和73.22%。     

球红假单胞菌原生质体的微波诱变及其煤炭降解转化

球红假单胞菌对煤炭具有降解转化效果,进行了原生质体的微波诱变育种以及煤炭降解转化试验研究,采用扫描电镜、热分析及红外光谱等分析测试技术分别对球红假单胞菌原生质体、煤炭及其降解转化产物进行测试分析.结果表明:球红假单胞菌原生质体的微波诱变菌株遗传性状稳定,在蔗糖浓度为20%,溶菌酶浓度为0.5mg/mL,EDTA浓度为0.2%,反应时间为40min的条件下,球红假单胞菌原生质体形成率为76.6%,再生率为9.8%,其原生质体再生菌对义马褐煤及经硝酸处理义马褐煤的最大降解转化率分别从7.82%和78.05%提高到38.68%和80.65%,取得了明显的效果.     

胆固醇氧化酶分批发酵动力学模型的建立

基于7L的发酵罐分批发酵实验数据，建立了发酵过程菌体生长、产物生成及基质消耗随时间变化的数学模型．Logistic方程、Luedeking．Piret方程能够很好地分别描述甾短杆菌菌体生长和发酵产酶过程．此外，还建立了基质消耗动力学模型，并将3个动力学模型的预测值和实验值进行了比较．所建立的分批发酵动力学模型能较好地反映胆固醇氧化酶分批发酵过程．     

供氧对L—异亮氨酸分批发酵的影响

对黄色短杆菌L－异亮氨酸高产菌XQ－4（AHV^rAEC^Suc^gSGr^Ethrα－AB^rIleHx^r）分批发酵供氧需求进行了研究,在2L台式发酵罐中进行分批发酵,当体积传氧系数（Kla）为385h^-1左右时,供氧比较适宜,在138g/L的葡萄糖溶液中可产生23．5g/LL-异亮氨酸。     

海洋假单胞菌PT-8胞外硒多糖的制备

研究了硒的添加量对海洋假单胞菌PT-8硒多糖产量的影响,考察了胞外硒多糖的流变性。对海洋假单胞菌进行发酵培养,确定Na2SeO3加入量为20μg/mL,培养6h后加硒,发酵时间为48h。富硒多糖通过海洋假单胞菌PT-8进行深层富硒发酵,得到富硒多糖产量为7.28g/L,硒质量分数为256.7mg/kg。流变性实验结果表明,在不同浓度、温度和剪切力条件下,多糖的黏度高于硒多糖黏度。多糖在pH为4时黏度达到最大,为96mPa·s;硒多糖在pH为5时黏度达到最大,为80mPa·s。初步确定该多糖为酸性多糖。     

除油好氧降解菌的筛选与除油效果初探

为筛选降解含油废水中石油烃的好氧降解菌株，选用炼油厂石油废水处理站曝气池活性污泥作为菌源，采用平板分离，得到39株菌。利用得到的菌株对含油废水中的CODcr和油进行降解效果试验，并进行混合菌的联合试验，确定出混合菌中假单胞菌（Pseudomonas sp）和芽孢杆菌（Bacillus sp）为优势菌属。通过单株菌与混合菌降解试验的比较，结果表明全混合菌的降解效果明显优于单株菌，从而说明共代谢作用增强了微生物的降解能力。试验表明，经过驯化后的混合菌，其降解效率稳定。     

假单胞菌多糖为壁材微胶囊的制备

对以明胶和假单胞菌PT-8胞外多糖为壁材制备红花油微胶囊的影响因素进行了研究,包括壁材质量浓度、交联剂质量分数、交联时间、壁材质量比、pH。通过单因素试验和正交试验确定最佳制备条件为:壁材质量浓度为50g/L,交联剂质量分数为3%,交联时间为140min,壁材质量比为5∶4,pH为3.6,此条件下微胶囊的包埋率为81.12%。经显微镜观察发现,微胶囊形态圆整,粒径均匀,分散性较好,粒径在1~10μm。假单胞菌PT-8胞外多糖可以作为制备红花油微胶囊的壁材。     

污染废水中Pb^2＋、Hg^2＋、Cu^2＋和Zn^2＋的微生物吸附研究

研究黑曲霉真菌和假单胞菌对模拟废水中Pb^2＋、Hg^2＋、Cu^2＋和Zn^2＋的吸附,结果表明：实验条件下,4种金属的最佳质量浓度吸附范围是60～80mg／L;在同一浓度情况下,4种金属离子的去除率大小为Zn^2＋〉Pb^2＋〉Cu^2＋〉Hg^2＋;黑曲霉真菌和假单胞菌最适合的加菌总量为10％（体积分数）;取样时间为20min;废水中的菲、芘、苯并（a）芘时Pb^2＋、Hg^2＋、Cu^2＋和Zn^2＋的去除均有一定的影响,影响强弱顺序为菲〉芘〉蓉并（a）芘：对4种金属离子的最适合的吸附温度差25℃。     

两株啤酒生产线中易污染细菌的分离与鉴定

从啤酒生产线的装罐车间杀菌机内分离出两株细菌,通过形态特征观察、生理生化特征测定、16SrDNA序列及其系统发育分析,鉴定菌株T-1和菌株T-2分别属于气单胞菌属（AeromonasSp．）和假单胞菌属（PseudomonasSaponiphila）,并采用柠檬酸溶液对两株菌的抑菌性进行检验,结果表明,在柠檬酸的质量浓度低至0．00125g／mL时,对两株细菌都存在较好的抑制作用,这对啤酒生产的微生物控制具有一定的参考。     

反硝化聚磷菌菌剂种子液制备条件及除磷机理

为获取高效反硝化聚磷菌（DNPAOs）菌剂种子液以控制水体富营养化,从安徽省天长市污水处理厂氧化沟活性污泥中分离得到1株具有高效脱氮除磷功能的恶臭假单胞菌B8（ Pseudo‐monas putida sp ．）。利用多聚磷酸盐颗粒（Poly‐P）染色得到具有高Poly‐P含量的B8菌剂种子液。其适宜的培养条件为：p H 6.5～7.0,温度30～32℃,溶解氧相当于70％～88％饱和溶解氧（摇床转速120～140 r／min）,培养时间15～20 h。所得的反硝化聚磷菌种子液B8具有良好的同步反硝化除磷效果,对于污水厌氧／缺氧（ A／A ）处理,其聚磷率、硝酸盐氮去除率分别达到89.73％和53.48％,而经厌氧／好氧（A／O）处理磷去除率最高可达94.09％。通过B8胞外聚合物（EPS）提取与磷去除实验表明其对磷酸盐去除源于B8胞内的吸收,而非胞外的生物吸附。