鲤鱼肽的酶法制备工艺及其抗氧化性

以鲤鱼肉为原料,采用酶解技术制备鲤鱼抗氧化肽,研究其制备工艺和抗氧化肽的抗氧化性能。结果表明:鲤鱼抗氧化肽的制备工艺筛选条件为:碱性蛋白酶酶用量100U/mL、酶解时间5h、酶解温度50℃、pH8.5,此条件下鲤鱼肉蛋白肽的最高水解度为15.22%。采用Sephadex G-50对鲤鱼水解产物进行分离,水解产物分成分子质量小于5000D和分子质量大于5000D两个部分,采用亚油酸-硫氰酸钾法、DPPH自由基法和邻苯三酚法分别测定鲤鱼水解产物的抗亚油酸过氧化能力、DPPH自由基清除能力和超氧阴离子自由基清除能力,发现分子质量小于5000D的鲤鱼蛋白多肽是水解物中主要的抗氧化成分。     

响应面法优化珍珠龙胆石斑鱼肉肽的酶法制备工艺及酶解产物的抗氧化活性

以珍珠龙胆石斑鱼肉为原料,利用蛋白酶酶解制备生物活性肽。以水解度和DPPH自由基清除率为指标,在单因素实验的基础上采用响应面分析法优化制备工艺。并采用超滤法对酶解产物进行分离纯化,同时进行抗氧化活性探究。结果表明:珍珠龙胆石斑鱼肉酶解工艺条件为:采用风味蛋白酶,酶添加量1050 U/g,在pH7.0、53℃、料水比1:3.5条件下酶解5.5 h,水解度为9.99%±0.39%。酶解产物与超滤组分均具有较强DPPH自由基清除能力,其IC₅₀值在0.63~0.88 mg/mL之间;EH-2(5~8 kDa)和EH-3(3~5 kDa)有较强的羟基自由基清除能力,其IC₅₀值分别为16.94和16.38 mg/mL;酶解产物与超滤组分均具有还原能力,且酶解产物还原能力最佳。优化的珍珠龙胆石斑鱼肉肽的酶法制备工艺合理且可行,其酶解产物与超滤组分具有较强的抗氧化性,可作为功能食品的基料应用。     

酶解发酵酸肉制备抗氧化肽的工艺优化

以侗族酸肉、苗族酸肉两种酸肉为原料,采用木瓜、碱性、风味及中性蛋白酶四种蛋白酶进行酶解,测定酶解液短肽得率、羟自由基及DPPH自由基清除率,结果表明碱性蛋白酶酶解液的短肽得率(侗族86.01%,苗族82.52%)、羟自由基(侗族87.48%,苗族79.88%)及DPPH自由基(侗族74.63%,苗族87.87%)清除率最高。通过比较分析苗族酸肉较侗族酸肉短肽得率更高,因此选择以蛋白酶种类、加酶量、酶解时间及料液比为自变量的单因素试验基础上,以苗族酸肉短肽得率及DPPH自由基清除率为评价指标,采用响应面优化最佳酶解条件。结果表明,酸肉抗氧化肽最佳酶解工艺为:碱性蛋白酶添加量12600 U/g、酶解时间1 h、料液比1:1.09(m:V)。在此最优条件下酶解获得的抗氧化肽得率为83.35%,是预测值的98.99%,DPPH自由基清除率力为84.01%,是预测值的97.33%,与预测值基本一致,表明以碱性蛋白酶酶解的酸肉肽具有较高的抗氧化活性及营养价值,同时为酸肉抗氧化肽的开发及利用提供理论依据。     

双酶法制备豌豆肽及其抗氧化活性

研究豌豆蛋白双酶水解的最佳工艺条件及产物的抗氧化活性。以豌豆蛋白粉为原料,通过单因素试验和正交试验优化出双酶分段水解豌豆蛋白的工艺条件,并初步研究豌豆肽的抗氧化活性。结果表明,双酶法制备豌豆肽的最佳工艺条件为:底物浓度10%,复合蛋白酶加酶量3.0%,pH 9.0,温度55℃,酶解3.5 h;用碱性蛋白酶酶解,加酶量3.0%,pH 9.5,温度50℃,酶解4.0 h。由此酶解得到水解物的水解度为39.61%。水解液蛋白浓度0.125 mg/mL时,其对Fe2+螯合能力为83.22%。试验表明和单酶水解相比,双酶水解工艺可提高豌豆蛋白的水解度和抗氧化活性。     

酶法水解制备鲅鱼可溶性肽的工艺研究

为确定木瓜蛋白酶水解鲅鱼的最佳条件,为低值小鲅鱼的开发利用奠定基础。采用木瓜蛋白酶水解脱脂后的鲅鱼粉,以蛋白质水解度为评价指标,通过正交试验考查了酶浓度、底物浓度、水解温度和水解时间对水解效果的影响。确定最佳水解条件为：酶浓度5 000U/g,底物浓度5%,水解温度50℃和水解时间6h,在该条件下水解,水解度可以达到33.21%。在此工艺条件下,鲅鱼蛋白水解效果较好,且水解液色泽较浅,有浓郁的鱼香味。     

皮蛋清抗氧化肽制备工艺优化及体外抗氧化性

以清料法腌制成熟的皮蛋清为原料,在单因素实验基础上,以物料比（皮蛋清与蒸馏水质量比）、酶解时间和酶添加量为考察因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,利用响应面试验优化设计得出皮蛋清抗氧化性多肽制备的最佳工艺参数:物料比1:10.4 g/mL、酶解时间4.1 h、酶添加量0.57%,该条件下的水解度为11.23%,DPPH自由基清除率为89.76%,最佳工艺下的酶解液具备一定的抗氧化性。当酶解液浓度为10.4 mg/mL时还原力、超氧阴离子自由基（O₂?·）清除率和羟基自由基（·OH）清除率分别为0.599、66.78%和79.63%。     

鸭肉蛋白源抗氧化肽的酶法制备工艺

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,采用响应曲面法（response surface methodology,RSM）优化胃蛋白酶制备鸭肉抗氧化肽的最佳酶解工艺条件。结果表明：以底物质量浓度、酶与底物质量比和酶解时间为自变量,以DPPH自由基清除率为响应值,得到的回归方程拟合度高（R2=0.995 7,R2Adj=0.992 7）。其中酶与底物质量比对DPPH自由基清除率的影响最大,其次是酶解时间,底物质量浓度的影响最小。胃蛋白酶的最优酶解工艺条件为底物质量浓度10.89 g/100 mL、酶与底物质量比0.013%、酶解时间3.54 h,此时DPPH自由基清除率的理论值可达84.23%,通过优化验证实验测得,在最优酶解条件下,DPPH自由基清除率的实际值为（83.57±0.20）%。     

双酶法制备混合蛋白肽的研究

利用双酶法同步水解动植物混合蛋白(大豆蛋白和虾粉)制备蛋白肽,最佳酶解条件为:大豆蛋白粉和虾粉混合蛋白(按照3∶2的比例混合)作为底物,底物浓度为12.0%、Flavourzyme风味蛋白酶的添加量为1.27%、Protamex复合蛋白酶的添加量为0.64%、水解温度55℃,起始pH值7.0,酶水解时间4h,此条件下水解度为29.0%。     

酶法制备花生源锌螯合肽工艺

分别采用碱性蛋白酶(alcalase)、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶对花生蛋白进行水解,结果表明,胰蛋白酶是制备花生源锌螯合肽的最佳水解酶。基于螯合率,对胰蛋白酶酶解花生蛋白工艺条件进行优化,通过正交试验确定最佳反应条件为:底物浓度3%、酶解温度50℃、pH 6、酶解时间2 h。在该条件下,螯合率为52.71%。研究表明花生源锌螯合肽具有较高的锌螯合活性,为新型补锌剂开发提供理论依据。     

利用啤酒废酵母酶法制备蛋白肽工艺研究

以啤酒废酵母为原料,选用碱性蛋白酶(Alcalase)酶,制备酵母蛋白肽.分别从底物浓度、酶解温度、加酶量、酶解pH值和酶解时间等因素来研究Alcalasc酶对啤酒废酵母水解度的影响,并通过正交试验优化酶解条件,其最佳酶解条件为:酵母浓度20%、pH8.0、加酶量0.5%、酶解温度55℃、酶解时间16h.在此条件作用下,酵母的水解度(DH)可达38.2%,水解液中酵母蛋白肽含量可达5.32mg/mL.     

鳄鱼肉蛋白酶解产物抗氧化性的研究

为更加充分利用优质的鳄鱼肉蛋白资源,采用木瓜蛋白酶、风味蛋白酶单酶酶解及木瓜蛋白酶与风味蛋白酶复合酶解制备了鳄鱼肉蛋白多肽,并对其抗氧化活性（DPPH自由基清除能力、亚铁离子螯合能力和还原力）进行分析。结果显示,酶解时间为Q5h、1h和2h木瓜蛋白酶和风味蛋白酶复合酶解产物的DPPH自由基清除能力显著（P〈0．05）,高于木瓜蛋白酶和风味蛋白酶单酶酶解产物的DPPH自由基清除能力;除酶解时间为0．5、1的风味蛋白酶鳄鱼肉蛋白多肽外,其它鳄鱼肉蛋白多肽的亚铁离子螯合率均大于80％;随酶解时间延长,木瓜蛋白酶和风味蛋白酶复合酶解鳄鱼肉蛋白多肽的还原力显著降低（P〉0．05）。鳄鱼肉蛋白酶解产物具备开发为功能食品的潜力。     

酶解蛋白制备生物活性肽进展

该文主要对国内外制取活性肽的蛋白质资源、其酶解物功能特性、蛋白酶解工艺和活性肽制取 方法进行分析;由于活性肽独特生理功能,在保健食品和饲料工业有着广泛应用。     

洋葱蛋白及多肽的制备及其体外抗氧化活性评价

对洋葱蛋白、4种不同水解度的粗洋葱多肽、4种分子量范围的纯化多肽组分的水解度、分子量、氨基酸组成、DPPH·清除能力进行了研究。结果表明,洋葱蛋白酶解后分子量大幅降低,必需氨基酸组分和支链氨基酸组分均有所提高,DPPH·清除能力大幅提高,且与水解度成正比;在4种水解度的粗洋葱多肽的纯化组分中,P-III(分子量为1～5kDa)的DPPH·清除能力均为最强,这归功于其合适的分子量分布。该研究为洋葱的高值化利用提供了理论依据。     

响应面试验优化酶解法制备海洋微藻微拟球藻抗氧化肽工艺

以海洋微藻饵料微拟球藻蛋白为原料,采用胃蛋白酶酶解制备微拟球藻抗氧化肽。以酶解产物的水解度和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除活性为评价指标,研究酶底比（质量百分比）、底物质量浓度、酶解温度和pH值对酶解产物的影响。在单因素试验的基础上,利用响应面法优化制备高抗氧化活性抗氧化肽的工艺条件,确定最佳酶解工艺条件为：底物质量浓度5.0?mg/mL、酶解温度32?℃、pH?1.36、酶底比6%。在最佳酶解条件下实际测得微拟球藻抗氧化肽的DPPH自由基清除率为51.85%。     

牦牛血红蛋白活性肽酶法制备工艺的优化及脱色技术研究

为开发具有保健功能的新型高附加值生物制品,本实验采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及AS1.398中性蛋白酶3种食品级内切蛋白酶对牦牛血红蛋白进行酶解,以水解度及三氯乙酸可溶性氮为评价指标,采用酶解-活性炭法对水解液进行脱色,筛选出AS1.398中性蛋白酶为最佳水解用酶。通过正交实验对其酶解工艺进行优化后,得出AS1.398中性蛋白酶最佳水解条件为:底物浓度5%,加酶量8000U/g,温度55℃,初始pH7.5,酶解时间5h。在此条件下水解产物为淡黄色,并具有较高的低分子量生物活性肽含量。