酸菜中降胆固醇功能植物乳杆菌的体外筛选

以分离自东北家庭自制酸菜中的9株植物乳杆菌为研究对象,采用邻苯二甲醛法筛选具有降胆固醇功能的乳杆菌,并通过耐酸、耐胆盐及抗生素敏感性实验,分析菌株的益生特性。结果表明,多株植物乳杆菌具有良好的降胆固醇功能,其中菌株S56的脱除胆固醇的量最高,达到22.40μg/mL。实验菌株均能耐受pH 3.0的酸度和10 g/L的牛胆盐。其中菌株S2-6、S2-5、S4-1和S56在pH 2.0的环境中能保持生长1 h,具有较强的耐酸性。     

植物乳杆菌C8的耐受性和体外降胆固醇活性研究

对一株分离自内蒙古奶豆腐中的植物乳杆菌C8进行了酸和胆汁盐耐受实验,抗生素敏感性试验以及体外胆固醇降解实验,并分析了其降胆固醇的作用机理.结果表明,C8能够耐受pH 3和高浓度胆盐(30g/L)环境;对所选10种抗生素均表现出一定的耐药性;该菌具有良好的降胆固醇活性,产生的游离胆酸的量与胆固醇移除能力呈正相关,且以在甘氨胆酸钠存在条件下最佳(5.39mmol/L).植物乳杆菌c8降胆固醇的作用机理主要是菌体细胞的表面吸附作用和胆固醇与胆盐的共沉淀作用.     

分离自Kefir的植物乳杆菌体外降胆固醇作用的研究

对分离Kefir中的植物乳杆菌体外降胆固醇作用进行了研究。结果表明，植物乳杆菌在含胆盐的培养基中具有良好的降胆固醇能力，24h后培养基中的胆固醇可降低60％(0．18g／L)；该菌体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶水解胆盐变为游离态的胆酸，与胆固醇形成复合物，在酸性pH值条件下发生共沉淀。同时，也发现该菌产生的胆盐水解酶对反应底物(各种胆盐)的特异性不同，以脱氧牛磺胆酸最佳。     

分离自酸菜汁的乳酸乳球菌体外去除胆固醇特性

将从自然发酵的酸菜汁中分离鉴定的乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)接种于高胆固醇培养液MRSO-CHOL中,分别改变茵的培养时间和接种量以及培养基中胆盐质量浓度和胆盐种类,发现乳酸乳球菌对培养液中胆固醇的体外去除率在72 h前随时间的增加而提高,72～96 h基本维持稳定,96 h后下降;随着接种量的增加,胆固醇的去除率增加;培养液不舍胆盐时,乳酸乳球菌的胆固醇去除率很低,仅为4.51%.胆盐质量浓度为0～0.3 mg/mL时,随着胆盐质量浓度的升高,胆固醇的去除率也逐渐升高.胆盐质量浓度高于0.3 mg/mL时,胆固醇去除率下降;牛磺胆酸钠对胆固醇的去除效果最佳.     

酸菜来源植物乳杆菌S4-5的降胆固醇作用

对酸菜来源植物乳杆菌S4-5的体外降胆固醇作用进行研究。采用单因素试验研究胆盐添加量、胆固醇添加量、培养基初始pH值及培养时间对植物乳杆菌S4-5降胆固醇能力的影响,结果表明:在胆盐质量浓度为1.0mg/mL和胆固醇质量浓度为175.7mg/L时,植物乳杆菌S4-5有最高的胆固醇移除率,分别为67.7%和62.2%;植物乳杆菌S4-5在培养基不同初始pH值条件下对胆固醇的移除率均在71.3%～77.2%之间;培养时间对植物乳杆菌S4-5的降胆固醇作用有显著性影响(P<0.01),在培养2h(延滞期结束)、14h(指数期结束)、24h和48h后植物乳杆菌S4-5对胆固醇的移除率分别为4.8%、66.7%、75.3%和84.0%。     

乳杆菌体外降解胆固醇特性研究

以实验室自主分离纯化的鼠李糖乳杆菌zxr01、嗜酸乳杆菌zrx02、植物乳杆菌zrx03, 3株乳杆菌体外降解胆固醇的特性以及不同金属阳离子对其影响进行了研究。嗜酸乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌体外胆固醇降解率分别为28.87%、25.61%、20.39%;当pH为3时,3株乳杆菌耐酸性分别为：52.77%、52.57%、59.82%;牛胆盐浓度为0.3%时胆盐耐受性为28.65%、27.40%、26.04%;嗜酸乳杆菌在氯仿中的疏水性最好,达到了19.88%,静置24 h后,嗜酸乳杆菌和植物乳杆菌的自凝聚力都达到了80%以上且3株乳杆菌产生白色沉淀说明能产生胆盐水解酶,在Ca2+浓度为0.02 N时,嗜酸乳杆菌的胆固醇降解率为35.4%和降解效果65.43μg/u。结果显示3株乳杆菌均能在体外降解胆固醇,嗜酸乳杆菌的降解胆固醇的能力要优于其它两株乳杆菌,添加浓度为0.02 N的Ca2+可以促进嗜酸乳杆菌胆固醇降解率和降解效力。本研究结果可为进一步研究胆固醇降解提供了试验依据,为开发降胆固醇食品提供材料。     

植物乳杆菌耐酸耐胆盐的体外试验及其降胆固醇作用

目的:研究产胆盐水解酶植物乳杆菌H13的耐酸、耐胆盐特性,在此基础上对其可能的降胆固醇作用机理进行体外试验研究.方法:采用MRS培养基,模拟人体胃酸环境(pH=3)和胆盐环境(0.3%),测定H13菌株在酸性及高胆盐环境作用后的存活菌数,并在此胆盐浓度下测定植物乳杆菌H13的胆盐水解酶活力、降解胆盐能力和胆固醇沉淀量.结果:菌体能够耐受pH 3的环境和0.3%的胆盐环境;该菌产生的胆盐水解酶在降低胆固醇方面具有重要作用,酶活性与游离胆酸量、胆固醇沉淀量呈正相关,而且胆盐水解酶对反应底物的特异性不同,以甘氨胆酸钠为佳.结论:植物乳杆菌H13体外降胆固醇作用的机理主要是其产生的胆盐水解酶使胆盐失去共轭作用,在酸性(pH<6.0)条件下,解共轭胆盐与胆固醇形成复合物共同沉淀下来.     

植物乳杆菌HLX37降胆固醇活性研究

HLX37是从福建南平地区农户自然发酵的酸乳中分离得到的一株植物乳杆菌,本文对该菌株的耐酸耐胆盐能力和体内外降胆固醇活性进行研究。结果表明,HLX37菌株在p H为3.0和胆盐浓度为3.0 g/L环境下培养4 h的存活率分别为59.1%±4.8%和48.2%±4.9%,且对添加胆盐的MRS+CHOL培养基中胆固醇具有良好的降解能力（24 h和48 h降解率分别达37.33%±2.55%和44.72%±2.74%）;连续灌胃HLX37发酵酸奶65 d可显著降低高胆固醇血症大鼠血清总胆固醇含量（p<0.05）,而将该酸奶灭活后,其降胆固醇效果显著下降（p<0.05）,说明HLX37活菌能够降低高胆固醇血症大鼠血清胆固醇水平。综上,HLX37菌株在体内外均显示出良好的降胆固醇活性,具有较大潜力应用于功能性发酵食品的生产中。      

植物乳杆菌发酵乳对小鼠降胆固醇作用

目的:利用从泡菜中分离的一株植物乳杆菌制备发酵乳并研究其降血脂功能。方法:采用该植物乳杆菌混合市售发酵剂制备发酵乳,发酵剂与植物乳杆菌接种量分别为0.05%(V/V)和2%(V/V),发酵温度为37 ℃,时间14 h。采用高血脂模型小鼠研究发酵乳的降血脂功能,将30只小鼠随机分成正常组、对照组和发酵乳组3 组,正常组喂基础饲料,对照组和发酵乳组喂高脂饲料,正常组和对照组灌胃生理盐水,发酵乳组灌胃发酵乳,正常组和对照组小鼠饲养14 d后采血,检测血清中的TC、TG含量,小鼠饲养28 d后,测定血清中的TC、TG、LDL-C、HDL-C含量以及肝脏中的TC、TG含量。结果表明:所得发酵乳具有清香、口感好的特点;动物实验显示,小鼠饲养14 d后,与正常组相比,对照组血清中的TC、TG含量显著升高(p<0.05),表明高脂模型诱导成功;28 d后,发酵组小鼠血清和肝脏中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)与对照组相比显著降低(p<0.05)。微生物检验结果表明,肝脏中没有发现乳酸菌,发酵乳在小鼠体内不会发生肝肠易位现象。结论:含有植物乳杆菌的发酵乳对高脂小鼠具有一定的降血脂功能,可以使小鼠血清和肝脏中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)显著降低(p<0.05)。     

植物乳杆菌NDC 75017的降胆固醇作用

植物乳杆菌NDC 75017分离自中国内蒙古传统发酵乳制品。本实验对其体外环境耐受性及其降胆固醇作用进行研究。采用活菌计数法检测植物乳杆菌NDC 75017在pH 2.0～3.0的酸性环境、胆盐质量浓度0.3g/100mL、NaCl质量浓度0～7g/100mL以及模拟人工消化液环境下的耐受情况;同时以邻苯二甲醛法测定其体外降胆固醇能力。结果表明:植物乳杆菌NDC 75017可耐受pH3.0及0.3g/100mL胆盐环境;在7g/100mL的高盐质量浓度条件活菌数仍可达108CFU/mL;可以通过胃进入肠道而保持活性,在肠道处理8h后存活率为58.73%。体外降胆固醇实验测得细菌发酵上清液、菌体洗涤液和细胞破碎液中的胆固醇脱除率分别为16.43%、26.35%和32.87%。植物乳杆菌NDC 75017环境耐受能力良好,具有体外降胆固醇作用,该菌株可以作为降胆固醇的潜在益生菌。     

三株植物乳杆菌降胆固醇机理的研究

测定了已筛选出的具有较高胆固醇去除能力和胆盐水解酶活性的3株植物乳杆菌(KLDS6.0330,KLDS6.0333,KLDS6.0335)的胆固醇同化作用,胆汁盐的去结合作用和胆固醇共沉淀作用。这3株植物乳杆菌能够同化较多的胆固醇(﹥43μg/mL);所有的菌株都表现出了对甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠的去结合作用,与牛磺胆酸钠相比,甘氨胆酸钠的去结合能够释放较多的胆酸;所有菌株都表现出了胆固醇与甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠去结合释放胆酸的共沉淀,与牛磺胆酸钠相比,甘氨胆酸钠去结合产生的胆酸表现出了与较多的胆固醇共沉淀;随着pH值的下降,解聚态的胆汁酸与胆固醇的共沉淀量增加,结合态胆盐与胆固醇的共沉淀量较少。结果表明这3株植物乳杆菌在体外可以通过3种机制去除胆固醇。     

Bile salt deconjugation and cholesterol removal from media by Lactobacillus strains used as probiotics in chickens

BACKGROUND: Bile salt deconjugation by Lactobacillus strains is often closely linked to bile tolerance and survival of the strains in the gut and lowering of cholesterol in the host. The present study investigated the deconjugation of bile salts and removal of cholesterol by 12 Lactobacillus strains in vitro. The 12 strains were previously isolated from the gastrointestinal tract of chickens. RESULTS: The 12 Lactobacillus strains could deconjugate sodium glycocholate (GCA, 16.87–100%) and sodium taurocholate (TCA, 1.69–57.43%) bile salts to varying degrees, with all strains except L. salivarius I 24 having a higher affinity for GCA. The 12 Lactobacillus strains also showed significant (P < 0.05) differences in their ability to remove cholesterol from the growth medium (26.74–85.41%). Significant (P < 0.05) correlations were observed between cholesterol removal and deconjugation of TCA (r = 0.83) among the L. reuteri strains (C1, C10 and C16) and between cholesterol removal and deconjugation of TCA (r = 0.38) and GCA (r = 0.70) among the L. brevis strains (I 12, I 23, I 25, I 211 and I 218). In contrast, although L. gallinarum I 16 and I 26 and L. panis C 17 showed high deconjugating activity, there was no correlation between cholesterol removal and deconjugation of bile salts in these strains. CONCLUSION: The results showed that the 12 Lactobacillus strains were able to deconjugate bile salts and remove cholesterol in vitro, but not all strains with high deconjugating activity removed cholesterol effectively. Copyright © 2009 Society of Chemical Industry     

一株植物乳杆菌体内降胆固醇的作用机制

目的:通过构建高胆固醇血症模型小鼠评价该菌株对小鼠体内胆固醇代谢及相关基因表达的影响。方法:以健康C57BL/6雄性小鼠为对象,设置空白组、模型组、低剂量组、高剂量组、普伐他汀对照组,分别以生理盐水、KLDS1.0386悬浊液和普伐他汀连续灌胃4周,检测小鼠血清胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白和高密度脂蛋白水平;采用Western blotting法检测小鼠肝脏胆固醇几个关键基因(HMGCR,LDLR,SREBP2,CYP7A1,FXR)表达水平的变化。结果:灌胃KLDS1.0386后,高剂量组小鼠血清甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白水平明显降低(P<0.05);HMGCR和FXR的表达明显受到抑制(P<0.05),CYP7A1的表达量增加(P<0.05)。结论:获得一株在体内具有高效降胆固醇能力的植物乳杆菌KLDS1.0386,该菌可用作降胆固醇的益生菌。     

植物乳杆菌中胆盐水解酶的研究现状及展望

益生菌的降胆固醇作用与它们所产的胆盐水解酶(bile salt hydrolase,BSH)有关,这使得胆盐水解酶成为近年来研究的热点之一。文中主要对植物乳杆菌中胆盐水解酶的克隆表达、生化特性以及降胆固醇作用等方面的研究现状进行了综述,并展望了它未来的发展方向。以期对植物乳杆菌胆盐水解酶的研究及其相关制品的开发利用提供一定的指导意义。      

The probiotic Lactobacillus rhamnosus BFE5264 and Lactobacillus plantarum NR74 promote cholesterol efflux and suppress inflammation in THP‐1 cells

BACKGROUND: The balance between the rate of cholesterol uptake/accumulation and the rate of cholesterol efflux is reflected in the amount of lipid accumulation in macrophages. Based upon the fact that liver X receptors (LXRs) play a role in cholesterol efflux, we studied the effects of probiotics on cholesterol efflux and anti‐inflammatory action in macrophages. We confirmed changes in LXR expression by treatment of LXR‐transfected CHO‐K1 cells with lactic acid bacteria (LAB), and co‐cultured THP‐1 cells with LAB to investigate changes in cholesterol efflux and inflammation. RESULTS: The experiment with CHO‐K1 cells showed upregulation of LXR‐β by LAB. Treatment of THP‐1 cells with LAB promoted LXR expression in THP‐1, which eventually led to significant upregulation of ABCA1 and ABCG1 expression. The treatment with live LAB also significantly promoted cholesterol efflux. LAB suppressed expression of interleukin (IL)‐1β and tumor necrosis factor (TNF)‐α, which resulted from activation of LXR. CONCLUSION: Our study shows that Lactobacillus rhamnosus BFE5264 and Lactobacillus plantarum NR74 activated LXR and induced cholesterol efflux by promoting expression of ABCA1 and ABCG1. Both strains also suppressed proinflammatory cytokines including IL‐1β and TNF‐α. This study could account for the observation that LAB may block foam cell formation by cholesterol efflux and immune modulation. © 2012 Society of Chemical Industry     

一株产胆盐水解酶植物乳杆菌的发酵培养基的优化

为了提高植物乳杆菌Lactobacillus plantarum KLDS1.0386的胆盐水解酶产量,本实验通过响应面法对其发酵培养基进行优化。通过单因素实验、Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验和Box-Behnken实验,最终获得最优培养基为:葡萄糖18.2 g/L、蛋白胨15.03 g/L、酵母粉9.97 g/L、乙酸钠3.13 g/L、柠檬酸氢二铵2.00 g/L、磷酸氢二钾2.00 g/L、硫酸锰0.25 g/L、硫酸镁0.58 g/L。优化前植物乳杆菌KLDS1.0386产胆盐水解酶的比酶活为1.04 U/mg,经过培养基的优化后,胆盐水解酶的比酶活为3.37 U/mg,比优化前提高了3.24倍。且实验结果与模型预测结果误差在允许范围内,说明该模型可以投入使用。