ELISA法测定牛奶中黄曲霉毒素M1不确定度评定

目的本实验对酶联免疫法检测牛奶中黄曲霉毒素M1含量的测定结果进行不确定度的评定,确保检测结果的准确性及可靠性。方法实验分析了酶联免疫法测定牛奶中黄曲霉毒素M1的不确定度的分量及其来源,并通过计算各分量的不确定度得出检测结果的合成标准不确定度。结果酶联免疫法测定牛奶中黄曲霉毒素M1的浓度为45.741 pg/m L,扩展不确定度为11.704 pg/m L,置信水平P=95%,k=2。结论不确定度的主要来源为测量的重复性、试剂盒的灵敏度、标准曲线拟合,而酶标仪测定OD值、ELISA法操作过程中导致的不确定度可以忽略不计。选用酶联免疫法检测黄曲霉毒素M1时增加平行样的测定、注意试剂盒的灵敏度、保持标准曲线的稳定性对于提高酶联免疫法检测的准确性和可靠性具有较强的实用价值。     

ELISA方法检测牛奶中叶酸含量

探讨牛奶中叶酸检测的酶联免疫反应(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法建立及其叶酸本底含量测定。用竞争性酶联免疫,棋盘法确定最佳抗体包被条件、封闭条件、酶标抗原浓度等,并进行性能评价测定,检测80例牛奶样品中的叶酸本底含量。结果表明:1最佳ELISA条件为:叶酸抗体以2μg/m L浓度,碳酸盐缓冲液4℃过夜包被,用1%牛血清白蛋白(BSA)封闭,叶酸-辣根过氧化物酶标记物(叶酸-HRP)工作浓度1μg/m L。2该方法最低检测限2.22 ng/m L;精密度测试CV5%;特异性检测与叶酸类似物的交叉反应率均≤0.1%;本方法与对照方法具有良好的样本测值相关性(r=0.960,P0.05);该方法加标回收率在94.50%~108.00%之间,回收效果良好;样品基质效应对该方法测值无显著影响。3牛奶样本叶酸本底含量范围为12.55 ng/m L~68.72 ng/m L,均值37.93 ng/m L。本研究建立的ELISA方法能够满足牛奶样品中叶酸含量的检测。     

酶联免疫法与LC-MS/MS法测定水产品中呋喃唑酮代谢物

运用酶联免疫法和LC-MS/MS法对水产品中呋喃唑酮代谢物残留进行测定.样品经2-硝基苯甲醛衍生化并用乙酸乙酯提取.向样品中分别添加0.60、2.00、6.00μ g/kg三个浓度水平的呋喃唑酮代谢物时,酶联免疫法平均回收率分别为99.2%、96.0%和100.0%,变异系数(RSD)为1.8%～12.6%,最低检测限为0.3μg/kg.LC-MS/MS法平均回收率分别为90.8%、94.3%和86.3%,RSD为6.2%～14.3%,最低检测限为0.1μg/kg.用酶联免疫法对150个样品进行检测,筛选出3个阳性样品,经LC-MS/MS确证为阳性,未发现假阳性样品,且测定结果基本一致.研究表明酶联免疫法重复性较好、准确度较高,是一种水产品中呋喃唑酮代谢物残留的快速筛选方法;液- 质/质联用法灵敏度高,适用于阳性样品的确证和精确定量.     

免疫亲和柱结合超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中的16种真菌毒素比较研究

目的 通过比较5种不同商品化多合一免疫亲和柱的可检测目标毒素种类、回收率和稳定性,筛选性能最优的免疫亲和柱,建立免疫亲和前处理-超高效液相色谱-串联质谱法(ultraperformanceliquid chromatography-tandem mass spectrometry, UPLC-MS/MS)测定牛奶中16种真菌毒的方法。方法 牛奶样品分别经5种不同多毒素免疫亲和柱进行净化富集,用优化后的UPLC-MS/MS,在多反应监测模式下测定,同位素内标法定量,筛选覆盖牛奶中真菌毒素污染种类全面、回收率和稳定性最佳的免疫亲和柱,并进行免疫亲和柱性能评价和方法学验证,最终将方法应用于实际样品检测。结果 免疫亲和柱A对牛奶中16种真菌毒素在低、中、高3个添加水平均具有良好的准确度和精密度,加标回收率在83.6%～126.8%之间,相对标准偏差为0.2%～18.4%。柱A内各毒素残留水平低于仪器检出限,柱容量在21.8～1317.5 ng之间。使用免疫亲和柱A富集净化样品,各目标毒素在线性范围内线性良好,相关系数均大于0.99,定量限为0.0010～0.2000ng/g。应用该方法对牛奶质...     

酶联免疫吸附和免疫亲和微柱法快速检测粮油食品中黄曲霉毒素B1的比较分析

用酶联免疫吸附-酶标仪分析法和免疫亲和微柱-荧光仪分析法分别对粮油样品中黄曲霉毒素B1进行测定,对其检测条件和结果进行差异性分析比较,两种检测方法都比较适宜在广大基层实验室推广应用。酶联免疫吸附分析法适宜大批量样品快速筛选;免疫亲和微柱分析法适宜单一样品现场快速检测,特别适宜对食用植物油中AFB1快速检测。     

基于量子点二抗偶联物的荧光免疫分析法测定牛奶中的氨苄青霉素

目的建立基于量子点二抗偶联物的荧光免疫分析法测定牛奶中的氨苄青霉素。方法采用共价偶联的方法将Qdot 655红色荧光量子点(quantum dots, QDs)与二抗偶联,利用制备好的QDs-二抗偶联物代替传统酶标二抗应用到检测牛奶中氨苄青霉素残留检测的荧光免疫分析方法中,并将该方法与酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)进行比较。结果该方法 50%抑制浓度(IC50)为8.3μg/L;检测限为2.5μg/L。空白牛奶加标回收率为94.0%～106.2%,变异系数为2.1%～9.2%。在实际样品的检测中,该方法与ELISA方法和HPLC方法测定的结果相比无显著差异(P0.05)。结论该方法准确、灵敏,适用于牛奶中氨苄青霉素残留的检测。     

直接竞争酶联免疫分析方法检测猪肉中的沙丁胺醇

建立了一种用于检测沙丁胺醇的直接竞争酶联免疫分析(ELISA)方法,方法灵敏度(IC50)为0.80μg/L,检测限(IC15)为0.06μg/L,检测的线性范围0.06～20.00μg/L。与克伦特罗的交叉反应率为100%,与特布他林的交叉反应率为10.5%,与其他结构类似物并无明显的交叉反应,因此可以采用本实验建立的直接竞争酶联免疫方法同时测定食品中的沙丁胺醇和克伦特罗。本实验的样品处理方法简便,猪肉样品中的检测限为0.6μg/kg,添加三个浓度的样品,其添加回收率均在85%～100%之间,RSD值小于5.51%。     

生物传感器法检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量

建立了一种基于酶电极技术快速检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的方法。将样品用75%甲醇溶液溶解,60Hz超声提取15min,在以黄曲霉毒素酶电极为核心元件,在pH7.2、0.2mol/L的磷酸盐缓冲液和300ug/kg的黄曲霉毒素B_1标准溶液反应体系中直接进行检测。结果表明:生物传感器法在黄曲霉毒素B_1浓度为1～300ug/kg的范围内检测线性良好,线性方程为y=1.0042x-3.4714,R~2=0.9999;稳定性好,连续测定十次,标准偏差为1.63%;加标回收率为99.1%～101.8%之间;只对黄曲霉毒素B_1进行测定,专一性强。将结果与酶联免疫法、高效液相色谱法测定结果进行比较,该方法测定奶粉中黄曲霉毒素B_1含量具有专一性好、准确度高、分析速度快、样品处理简单等特点,可用于奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的检测。     

酶联免疫吸附法快速测定不同样品 基质中三聚氰胺

目的 探求不同样品基质中三聚氰胺残留量的快速检测方法.为快速筛查不同种类食品中非法添加三聚氰胺提供技术保障.方法 采用酶联免疫吸附法在奶制品(奶粉、液态奶)、成品饲料(鸡饲料、猪饲料)、饲料原料(鱼粉、肉骨粉、豆粕、麸皮)、肉类(鸡肉、猪肉、内脏)等样品基质中添加一定浓度的三聚氰胺进行测定,并对检测结果进行分析.结果 酶联免疫试剂盒对奶制品和肉类检出限均能达到1.0 mg/kg;对成品饲料基质中的三聚氰胺的检测,检出限可达到2 mg/kg,而对饲料原料中的三聚氰胺的检测,检出限都不能达到2 mg/kg.结论 对奶制品中的三聚氰胺检测完全符合我国的临时限量标准;对成品饲料中的三聚氰胺残留的检测同样符合其限量标准(2.5 mg/kg),而对饲料原料中的三聚氰胺的检测,由于不同基质中检出限不同,不能直接采用酶联免疫法进行快速筛查;酶联免疫法也适用于肉类中的三聚氰胺的检测.     

胶体金免疫层析法快速测定玉米和小麦中玉米赤霉烯酮

采用高效液相色谱法对玉米赤霉烯酮阳性样品进行定值,将阳性样品制备为不同毒素含量的验证样品,对胶体金免疫层析法的准确性、重复性、稳定性、最低检出限、误差范围进行了验证试验,并且完成了对实际样品的检测,同时采用酶联免疫法（ELISA）进行对比,试验结果为：最低检出限为60μg/kg,其检测结果与酶联免疫法基本一致,方法具有...     

碳纳米管-壳聚糖复合物免疫传感器检测牛奶中的青霉素

建立了一种高灵敏度阻抗电化学免疫分析法测定青霉素的方法。利用层层自组装技术将多壁碳纳米管（MWCNTs）,壳聚糖（CS）,和Ⅷ冲标记青霉素抗体（HRP．Ab＊）共固定于玻碳电极表面,利用HRP可以催化H202的还原进一步促进对苯二酚的氧化,从而引起阻抗的变化,然后根据电流的变化从而实现了对牛奶中青霉素的定量测量。对于牛奶样品,需要盐析以除去其蛋白质和脂肪,同时对缓冲液的pH、免疫温度和时间都进行了优化。实验表明,在优化条件下,该传感器的响应电流与青霉素的浓度在0．05～5μgL-1范围内有较好的线性关系,相关系数为0．9853,检测限是1．05μgL皿。最后,通过和酶联免疫法（ELISA）对比,可知该法测定青霉素灵敏度高,重复性好,特异性高,可适合用于检测牛奶样品中的青霉素残留。     

酶联免疫法与液相色谱-串联质谱法检测猪肉中沙丁胺醇

运用酶联免疫法（ELISA）与液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）对猪肉中沙丁胺醇残留进行测定,并比较了二者在灵敏度、准确性和重现性等方面的差异。结果显示,ELISA法和LC-MS/MS法在猪肉样品中的检测限可达到0.5 μg/kg和0.25 μg/kg,分别向猪肉样品中添加3个质量浓度水平（1.0 μg/kg、2.0 μg/kg、4.0 μg/kg）的沙丁胺醇时,回收率分别为83.7%～90.9%和86.6%～93.5%,变异系数（CV）分别为5.4%～10.3%和6.0%～8.3%。用酶联免疫法实际样品进行检测,筛选出2个阳性样品,经液相色谱-串联质谱法确证亦为阳性,测定结果一致。研究表明,酶联免疫法重复性较好、准确度较高,适用于进行猪肉样品中沙丁胺醇的快速筛选,液相色谱-串联质谱法适用于阳性样品的确证和精确定量。     

QuEChERS-酶联免疫快速检测法测定茶叶中 黄曲霉毒素B1

目的建立QuEChERS-酶联免疫快速检测茶叶中黄曲霉毒素B1的方法,并对样品前处理条件进行优化。方法茶叶样品用70%乙腈水提取溶液进行提取目标物,离心后取上清液并用PSA+MgSO4进行净化处理后,采用酶联免疫快速检测方法进行分析测定。结果本方法的检出限为0.078μg/kg,线性范围为0.125~0.854μg/kg,IC50值为0.327 ng/m L。在三个不同添加水平下,样品的平均回收率为87.66%~97.17%,相对标准偏差为4.89%~7.16%。检测结果与高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)方法的相关系r2=0.9854,线性相关性良好。结论该方法更加简便、快速、高效,能够用于茶叶中黄曲霉毒素B1的检测。     

阿维菌素、埃比菌素的残留检测

为验证阿维菌素"三合一"酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测试剂盒对白菜、胡萝卜、干洋葱及高淀粉含量食物的检测效果,用酶联免疫检测法和国标中的液相色谱-质谱/质谱法对白菜、胡萝卜、干洋葱以及土豆4个样品中阿维菌素、埃比菌素残留量进行检测,比对两种方法试验结果间的差异。结果表明:ELISA检测试剂盒特异性强、灵敏度高,阿维菌素测定时4种样品平均回收率在92.0%~99.6%之间,埃比菌素测定时4种样品平均回收率在91.3%~100.1%之间,变异系数均小于10%,最低检测限为3μg/kg。该方法与国标液相色谱-质谱/质谱法检测样品的阴、阳性结果一致,检测结果稳定。     

气相色谱-质谱/质谱法测定牛奶和奶粉中的苯甲酸

建立了一种用GC-MS/MS测定牛奶和奶粉中苯甲酸质量分数的方法.奶粉样品溶于水后,牛奶直接称量,经去蛋白、过滤、调节pH值,二氯甲烷提取,用GC-MS/MS测定.该方法回收率为91.1%～104.6%,相对标准偏差为3.7%,最低检出限为0.5 mg/kg,且检测结果准确可靠,重复性好,灵敏度高,可进行牛奶和奶粉中苯甲酸的检测.     

农产品及饲料中常见的真菌毒素快速检测方法的比较

主要对真菌毒素的快速检测方法进行简单的介绍,用不同厂家的酶联免疫试剂盒对随机采购的玉米样本和饲料样本进行检测,并与液相色谱测定的数值进行对比,结果表明,酶联免疫法定量测定值与液相色谱测定值差异不显著(P0.05),对真菌毒素检测的准确度已接近液相色谱。     

胶体金免疫层析法快速测定玉米和小麦中脱氧雪腐镰刀菌烯醇

采用高效液相色谱法对脱氧雪腐镰刀菌烯醇阳性样品进行定值,将阳性样品制备为不同毒素含量的验证样品,对胶体金免疫层析法的准确性、重复性、稳定性、最低检出限、误差范围进行了验证试验,并且完成了对实际样品的检测,同时采用酶联免疫法（ELISA）进行对比,试验结果为：最低检出限小麦800 ng/g,玉米1000 ng/g。检测结果与酶联免疫法一致,具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性好、分析结果易于判定的特点,适用于样品的现场快速检测。     

双抗体夹心ELISA法测定食物中牛奶过敏原蛋白成分

建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定食物中牛奶过敏原成分.通过提取牛奶过敏原蛋白,免疫小鼠制备抗牛奶过敏原的多抗,免疫印迹法鉴定多抗与牛奶过敏原蛋白的反应,并建立双多抗央心ELISA法.结果表明,该法检测牛奶过敏原蛋白的最低检出限为25μg/L,标准曲线在25～1000μg/L范围内线性良好;同时对市场上食物标签标注含有牛奶、未舍牛奶成分以及标注不详共12种食品进行检测,结果10种食品检测结果与食物标签标注内容相符,而2种标示不详的食品检测结果一个呈现阳性,一个呈现阴性.这说明本方法对于未标注牛奶过敏原成份的食品检测具有一定的实际应用价值.     

牛奶蛋白纤维染色性能的研究

研究了酸性染料对牛奶蛋白纤维的染色性能,探讨了pH值、染色温度、时间、元明粉浓度等对染料上染百分率的影响,并测试分析了染色后的皂洗牢度和透染性能.得出酸性染料对牛奶蛋白纤维的最佳的染色条件:温度为90～100 ℃、染色时间为60 min左右.此外,染色pH值随染料不同而不同,羊毛专用酸性染料及弱酸性染料适宜pH值在4～5之间,强酸性染料适宜pH值在2～3之间.     

婴幼儿配方食品中乳铁蛋白含量测定方法比较研究

探讨不同检测方法对婴幼儿配方食品中乳铁蛋白检测结果的影响以及应用价值。采用乳铁蛋白酶联免疫试剂盒检测法(ELISA法)和高效液相色谱法(HPLC法)分别对婴幼儿配方乳粉和特殊医学用途婴儿配方食品中乳铁蛋白含量进行测定,并对结果做了对比。分析结果表明两种方法的检测结果没有显著性差异,显著性概率P0.05。酶联免疫试剂盒检测法操作简单,分析速度较快,可以同时进行大批量的样品分析,但重复性稍差。高效液相色谱法灵敏度高,结果准确可靠,但样品前处理需经肝素亲和柱净化,价格昂贵、操作复杂,不适合分析大批量的样品。