超声诊断胎儿致命性成骨发育不全1例报道

随着围产医学的不断发展,围产儿病死率逐渐下降,新生儿畸形成为导致婴儿死亡的一个重要原因.畸形儿产前诊断与筛查越来越受到重视,超声具有对母体及胎儿检查无创性、准确性等特点,已成为产前检查最常用工具.本文对超声诊断胎儿致命性成骨发育不全1例进行报道.     

副猪嗜血杆菌外膜蛋白pilA基因的克隆与表达

[目的]克隆和表达副猪嗜血杆菌菌毛蛋白pilaA基因.[方法]对已发表的HPS的pilA序列进行分析;合成引物,并以HPS血清5型基因组为模板,通过PCR扩增HPS的pilA编码基因,获得目的基因片段;构建重组表达质粒,经IPTG诱导表达至大肠杆菌BI21(DE3)中,进行SDS-PAGE与Western blot检测.[结果]表达的重组蛋白分子质量与预期的43 kD一致.[结论]该研究为制备亚单位疫苗和诊断试剂奠定了基础.     

表达Cre重组酶Cre-pCEP4载体的构建及其在Cre/loxP重组系统中的应用

目的:构建表达Cre重组酶的载体Cre-pCEP4,并验证其能够有效识别loxP位点,为人类疾病动物模型的建立提供依据.方法:构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,利用Fugene HD转染猪胚胎成纤维细胞(PEF)和MCF-7细胞系,利用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况.结果:成功构建重组载体Cre-pCEP4和pStop-eGFP,将2个载体瞬时共转染PEF;经潮酶素B筛选出Cre重组酶稳定表达的MCF-7细胞系瞬时转染pStop-eGFP,在荧光显微镜下观察2种细胞均有绿色荧光蛋白的表达.而单独转染pStop-eGFP的MCF-7细胞系和PEF均未见绿色荧光蛋白的表达.结论:重组载体Cre-pCEP4在细胞内能够表达Cre重组酶,并且表达的Cre重组酶能够识别loxP位点,删除两同向loxP间的DNA片段.     

富血小板血浆对体外培养条件下人真皮成纤维细胞增殖能力的影响

目的:探讨富血小板血浆(PRP)对人真皮成纤维细胞(hDFbs)在体外培养条件下增殖能力的影响,探讨PRP促进皮肤、黏膜伤口愈合的机制.方法:PRP和hDFbs来源于健康成年人,两次离心法制备PRP,倒置相差显微镜观察0、12.5%、25.0%、50.0%和100.0%PRP浓度作用下 hDFbs的增殖;免疫细胞化学检测50.0%浓度不同剂量PRP作用下细胞血小板源性生长因子(PDGF)的表达;荧光染色技术观察PRP作用下hDFbs在纯钛材料表面的生长;流式细胞术检测PRP培养后不同时间hDFbs细胞周期;CCK-8法检测不同浓度PRP培养条件下细胞增殖活力.结果:倒置相差显微镜下见PRP各浓度组细胞数量均多于对照组,细胞数量增加、折光性增强;免疫细胞化学检测,30 μL PRP组PDGF表达量最高且细胞密度最大,但10 μL PRP组累积吸光度值(IOD)高于20 μL PRP组(836.27±21.15 vs 794.35±30.26,P<0.05);荧光染色技术观察,PRP组材料表面hDFbs细胞密集,数量较对照组高;细胞周期检测,PRP促进细胞进入S期进行DNA复制,PRP作用后第2天PRP组S期细胞百分比高于空白组(34.41% vs 22.00%,P<0.05),第8天PRP组G0/G1期细胞百分比高于空白组(95.07% vs 89.70%,P<0.05);CCK-8测定细胞增殖活性,100.0%PRP组吸光度A450值高于12.5%PRP组(34.41% vs 22.00%,P<0.05).结论:高浓度的PRP虽然表现较强的促细胞增殖作用,但并不存在浓度、剂量依赖性,适宜浓度的PRP可促进hDFbs的增殖.     

穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因的亚克隆及表达

[目的]克隆并表达穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因.[方法]将穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因亚克隆到毕赤酵母表达载体 pPIC9K,再将构建后的表达载体电转化到毕赤酵母GS115中,并诱导表达该基因.[结果]重组酵母菌在0.5%甲醇中培养144 h后,所提取的酶蛋白具有穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶的活性,经SDS-PAGE 分析,确定其相对分子质量为58 kD.[结论]穿山龙薯蓣皂苷糖苷酶基因得到了表达.     

利用体细胞核移植技术生产表达红色荧光蛋白的猪转基因克隆胚胎研究

[目的]为生产转基因克隆猪奠定基础.[方法]以反转录病毒转染的带有红色荧光蛋白(RFP)基因的猪胎儿成纤维细胞作为核移植的核供体,利用体细胞克隆技术研究红色荧光蛋白克隆胚胎体外发育情况.[结果]RFP转基因细胞的融合率为83.87%,与未转基因细胞(80.56%)相比无显著差异(P>0.05);RFP转基因体细胞重构胚体外囊胚率为8.67%,与未转基因细胞组(6.56%)相比无显差异著(P>0.05);RFP转基因体细胞重构胚移植于15头受体后,尚无受孕个体.[结论]利用转红色荧光蛋白基因的细胞为供体细胞,能够成功克隆出转基因胚胎,并获得转基因囊胚.     

猪用配方稀土添加剂的研究

本文探讨了不同单一稀土，不同稀土化合物对仔猪、中猪和育肥猪生长发育的影响。研制成了猪用配方稀土添加剂，并研究了其饲喂效果。     

罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响

[目的]探讨罗格列酮和血清时猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPAγ基因表达的影响.[方法]利用胶原酶消化法分离了猪皮下前脂肪细胞,采用3种不同分化培养液对猪前脂肪细胞进行了诱导分化,借助油红O染色提取法比较了不同分化培养液对分化过程中细胞内脂肪含量变化的影响,并运用实时定量RT-PCR方法检测了不同分化培养液细胞分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的变化趋势.[结果]细胞内脂肪聚积以舍罗格列酮的MⅡ最快,不含罗格列酮的MI最慢.罗格列酮可极显著上调PPARγ基因的表达(P<0.01),而对PPARα基因的表达存在一定的抑制作用,但不显著.血清对PPARγ基因的表达有极显著的上调作用(P<0.01),而对PPARα基因的表达有极显著下调作用(P<0.01).[结论]罗格列酮可极大地促进PPARγ基因的表达,继而增进细胞内脂肪沉积;血清中可能存在PPARγ基因的激活剂,同时存在PPARα基因的抑制因子.     

大面积数字化成图DTM建立与地物编辑的方法研究

DTM建立与地物编辑方法是影响大面积数字化成图效率的主要因素．本文介绍如何在坎上下及地性线上加点，可以在建立DTM过程中不用考虑坎高及地性线等约束条件。从而提高DTM的建立速度。在数据分类基础上对地物进行分层绘制可以提高绘图效率．整幅绘制等高线及地物，利用窗口裁剪的方法进行分幅，可使地形图分幅达到无缝接边。     

基于错题库的个性化练习生成模型研究

目前的个性化练习研究中适合中小学的较少,对于复习过程的关注不够.文章根据学习条件理论、遗忘曲线理论和过度学习理论设计了针对中小学的练习生成模型--基于错题库的练习生成模型.该模型将实际学习过程中的练习分为三种类型,分别进行设计;使用知识点来组织试题,通过动态错题库机制将三种练习相互关联起来;从知识点和错题库双重角度设置学生练习,帮助学生提高学习效率,减轻课业负担.     

Effects of Samarium Chloride on Porcine Thyroid Cells in Vitro

ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＳａｍａｒｉｕｍＣｈｌｏｒｉｄｅｏｎＰｏｒｃｉｎｅＴｈｙｒｏｉｄＣｅｌｌｓｉｎＶｉｔｒｏＺｈｏｕＬｉ（周莉）；ＮｉｅＹｕ－Ｘｉｕ（聂毓秀）；ＣｈｅｎＹｕ－Ｌａｎ（陈玉兰）（ＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｏｆＮｏｒｍａｎＢｅｔ...     

牛胎肺间充质干细胞体外培养及生物学特性研究

[目的]建立牛胎肺间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外培养体系并对其进行生物学特性研究.[方法]取3-5月龄牛胎儿肺脏,得到MSCS.通过控制胰酶消化时间,去除难消化的上皮样贴壁细胞,获得纯化的牛肺MSCs,研究其形态、增殖情况及体外诱导分化潜能.[结果]牛胎肺MSCs可在体外扩增培养,传至24代以上,表达CD29,CD44和CD166,不表达CD34,CD45和BOLA-DR,并具有向成骨细胞诱导分化的潜能.[结论]从牛胎肺中可以分离出MSCs,可以在体外培养,并可诱导分化为成骨细胞.     

内嵌基因表达式编程及其在函数发现中的应用

为了提高表达效率,提出了新的基因解码方案,形成了内嵌基因表达式编程算法EGEP;提出了极大表达树、嵌套表达树和拼接表达树等概念;分析了基因的表达空间和算法的复杂度.实验表明,该算法提高了函数发现的成功率;在小规模种群的函数中其能力明显优于GEP.在单基因情况下,目标为一元函数和二元函数时,EGEP平均成功辈数分别为GEP算法的25.5%和16.3%;各种规模下,在EGEP算法中二元函数的成功率平均比GEP提高43%以上.     

犬IL-2基因克隆及原核表达

[目的]研究犬IL-2基因的克隆和表达,为开发新型免疫增强荆和基因工程疫苗提供理论支持.[方法]从犬全血中分离出白细胞,经刀豆素刺激培养20 h后,提取总RNA;根据GenBank 中犬IL-2基因序列,设计1对引物,进行PCR扩增,并构建原核表达载体pET-28a,将其转化到宿主菌B121中,经IPTG 诱导表达.表达产物用SDS-PAGE进行分析.[结果]RT-PCR 扩增出一条约500 bp的条带,与预期结果相符;重组质粒pMD18-T-IL2 经双酶切后,产生一个约500 bp基因片段,说明目的基因被成功克隆;表达载体pET-28a-IL2 经双酶切和PCR鉴定后,分别产生一个约500 bp目的片段,表明表达载体构建成功;表达产物经SDS-PAGE 分析,分子量约为20 kDa,与预期蛋白大小基本相同.[结论]IL-2基因被成功克隆和表达.     

Effect of Lanthanum on Expression of Recombinant Allophycocyanin Gene in Pichia Pastoris

The methylotrophic yeast ,Pichia pastorishasbeen developed to be an outstanding host for the pro-duction of foreign proteins since its alcohol oxidasepromoter was isolated and cloned ,and its transforma-tion was first reported in 1985[1 ,2].This organismh…     

梅花鹿鹿茸细胞端粒酶活性及其mRNA表达的检测

[目的]研究鹿茸生长期端粒酶的表达,为揭示鹿茸生长发育的调控机制提供了新思路.[方法]在鹿茸快速生长阶段,采用改进的TRAP(端粒重复序列扩增技术)法检测鹿茸顶端增殖区的间充质层、前软骨层和软骨层细胞及下端成熟区的端粒酶活性.同时,采用RT-PCR的方法检测各组织细胞中端粒酶催化亚基(TERT)mRNA的表达水平.[结果]在顶端增生区各组织细胞中均检测到了不同程度的端粒酶活性,间质细胞、前软骨细胞和软骨细胞中的相对端粒酶活力分别为91.2、46.4和13.7,而在成熟区组织中则检测不到端粒酶活性.RT-PCR法检测的各组织细胞中TERT mRNA的表达水平与端粒酶活性检测结果一致.[结论]在鹿茸快速生长阶段,其增殖区表达端粒酶,并且端粒酶活性随组织层细胞的分化程度的增高而逐渐降低,说明端粒酶可能在鹿茸的生长过程中起重要的调控作用.     

植物4CL基因家族结构功能与表达特性研究进展

4-香豆酸:辅酶A连接酶(4CL)是植物苯丙烷衍生物,如类黄酮和木质素等,生物合成途径的一种关键酶,在大多数雏管植物中4CL基因以基因家族的形式出现.4CL基因家族成员在植物组织中存在差异表达,并参与不同的苯丙烷类衍生物的生物合成.从4CL酶的基因结构、基因家族组成与表达特性等方面详细论述了当前最新研究进展,这将有助于更好地理解植物4CL基因参与苯丙烷类衍生物途径的合成与代谢机制.