浅蓝菌素对人成骨肉瘤细胞U2-OS在裸鼠体内生长抑制的作用

目的研究浅蓝菌素（cerulenin）对人成骨肉瘤细胞U2-OS在裸鼠体内生长抑制作用。方法建立人成骨肉瘤细胞U2-OS BALB/C裸鼠瘤模型。18只成瘤裸鼠按随机数字表分成3组,每组6只;对照组（DMSO溶剂）、低剂量cerulenin组（0.2 mL cerulenin配制液40 mg.kg-1.次-1）、高剂量cerulenin组（0.2 mL cerulenin配制液80 mg.kg-1.次-1）于腹腔隔日注射连续6次。动态观察3组肿瘤体积及裸鼠质量变化,用药结束后18 d处死裸鼠,测量瘤重、计算瘤重抑制率,测量肿瘤体积、计算肿瘤体积抑制率。肿瘤组织行形态学观察。TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况。结果高、低剂量cerulenin组肿瘤体积抑制率分别为51.2%和24.2%,瘤重抑制率分别为49.1%和25.5%。各组间瘤体体积与瘤重比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。瘤体组织学显示cerulenin组较对照组出现明显的细胞凋亡的超微结构改变,瘤细胞体积较小,多数细胞微绒毛消失,胞质密度增高。TUNEL法显示高、低剂量cerulenin组,对照组癌细胞凋亡率为（17.1±1.2）%、（10.3±0.8）%、（3.5±0.5）%,3组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 cerulenin能够有效诱导人成骨肉瘤细胞U2-OS在裸鼠体内凋亡,抑制肿瘤的生长。     

SGX523对舌鳞癌 Tca8113细胞增殖与 c-Met 表达的影响

目的：体外观察 SGX523对舌鳞癌细胞株 Tca8113中 c-Met 的表达情况及细胞增殖的影响。方法实验分为2组：对照组（Tca8113＋DMSO）；SGX 组（Tca8113＋不同浓度范围30～600 nmol· L－1的 SGX523）。采用Western blotting 检测不同浓度的 SGX523作用下的 Tca8113细胞中 c-Met、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和 AKT的表达情况，MTT 法检测不同浓度的 SGX523对 Tca8113细胞作用24、48、72 h 后细胞增殖的抑制率。结果与对照组相比，SGX 组在相同时段的 Tca8113细胞的增殖抑制率明显增加（P ＜0．01），表明 SGX523对 Tca8113细胞的增殖抑制作用具有浓度依赖性。在相同浓度（100 nmol·L－1）SGX523作用下，24、48、72 h 的半数抑制率 IC50分别为（60．31±7．11）、（26．71±4．54）、（7．87±4．92）nmol·L－1，组间比较差异有统计学意义（P ＜0．01），表明SGX523对 Tca8113细胞的增殖抑制作用有时间依赖性。对照组细胞抑制率在24、48、72 h 差异均无统计学意义（均 P ＞0．05）。Western blotting 法检测结果显示不同浓度 SGX523的 SGX 组 c-Met、MAPK 和 AKT 蛋白表达都明显下调，与对照组比较差异有统计学意义（均 P ＜0．05），且不同浓度 SGX523的 SGX 组间比较差异有统计学意义（P ＜0．01）。结论SGX523具有以浓度和时间依赖性方式抑制 Tca8113细胞增殖和下调 c-Met 蛋白表达作用，是一种有前景的舌鳞癌治疗的药物。     

雷帕霉素对K562细胞增殖和凋亡作用的影响

目的:探讨雷帕霉素(RAPA)对人慢性髓系白血病K562细胞株增殖和凋亡作用的影响。方法 :取对数生长期K562细胞,用不同浓度的雷帕霉素(25、50、100nmol/L)处理K562细胞24、48、72h后收集细胞,MTT比色法检测处理组细胞的生长抑制率,流式细胞术检测细胞早期凋亡率。结果:MTT法检测结果显示,与对照组相比,不同浓度的雷帕霉素对K562细胞的增殖均有明显的抑制作用,100nmol/L雷帕霉素处理72h后抑制率高达48%,且呈浓度和时间双重依赖性,与对照组相比具有统计学意义(t=6.691,p<0.05);流式细胞术检测25、50、100nmol/L雷帕霉素作用24h后,K562细胞早期凋亡率分别为13.12±0.32,18.56±0.12,25.95±0.16,均较对照组明显增高,48h、72h细胞凋亡率明显增高,两两比较差异具有统计学意义(t=4.900,t=14.640,t=16.830,p<0.05)。结论:雷帕霉素对K562细胞的生长具有抑制作用,并诱导细胞凋亡。     

熊果酸对顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响

目的探讨熊果酸对体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖与凋亡的影响。方法将熊果酸作用于体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞,采用MTT法检测不同浓度的熊果酸（0、10、20、40、50、60、80μmol.L-1）对SKOV3/DDP细胞生长的抑制作用,采用流式细胞术检测SKOV3/DDP的细胞凋亡和细胞周期。结果不同浓度的熊果酸对体外培养的SKOV3/DDP细胞均有明显的抑制增殖作用,并呈剂量、时间依赖效应（均P〈0.05）,熊果酸（60μmol.L-1）作用于SKOV3/DDP细胞48 h后,达到最大细胞凋亡率（31.22±1.98）%;熊果酸可影响SKOV3/DDP细胞增殖周期中的G0/G1期,使细胞在此期停滞,诱导其发生凋亡。结论熊果酸对体外培养的顺铂耐药人卵巢癌SKOV3/DDP细胞增殖有抑制作用,并能诱导细胞凋亡。     

二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响

目的探讨二价阳离子对人SKOV3卵巢癌细胞株细胞黏附、细胞侵袭和细胞转移的影响。方法将人SKOV3卵巢癌细胞株按常规方法进行培养,待细胞长到80%~90%汇合时用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液消化、传代。取生长良好的P3或P4代细胞按是否加入二价阳离子分为对照组（不加入二价阳离子）和实验组[加入二价阳离子：Ca2＋（2.5、5.01、0.0 mmol·L-1）组和Zn2＋（1.01、0.0 mmol·L-1）组]。在光学显微镜下对各组黏附细胞进行计数。在570 nm波长的酶标仪下测定各组侵袭和转移细胞的OD值,以OD值代表细胞侵袭率和细胞转移率。结果 Ca2＋对人SKOV3卵巢癌细胞黏附具有抑制作用,作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。Ca2＋细胞黏附抑制率范围为10.2%~62.2%,各Ca2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞黏附率与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Zn2＋浓度在1.0 mmol·L-1时,黏附细胞略有增多,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;在10.0 mmol·L-1时,黏附细胞数量显著降低,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Ca2＋、Zn2＋对人SKOV3卵巢癌细胞侵袭和细胞转移的抑制作用随药物浓度增加而增强,呈剂量依赖性。细胞侵袭抑制率：Ca2＋范围为24.9%~63.2%,Zn2＋范围为66.1%~87.8%;细胞转移抑制率：Ca2＋范围为22.5%~55.6%,Zn2＋范围为73.1%~91.7%。各Ca2＋、Zn2＋浓度组人SKOV3卵巢癌细胞侵袭率和细胞转移率与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论人SKOV3卵巢癌细胞株细胞受到体外二价阳离子浓度的影响,提示配制适当的二价阳离子溶液进行术中冲洗可能会减少卵巢癌细胞的种植和转移。     

重组人BMP-2对人肝癌SSMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察重组人骨形成蛋白2（rhBMP-2）对人肝癌SMMC-7721细胞迁移和侵袭能力的影响。方法以人肝癌SMMC-7721细胞株为研究对象,取对数期生长的SMMC-7721细胞随机分为4组：rhBMP-2200、400、600ug·L。组和对照组。rhBMP-2200、400、600ug·L。组分别加入rhBMP-2200、400、600ug·L-1,对照组加入2mLRPMI1640培养基。分别于12、24、48h后,用细胞划痕法检测细胞体外迁移能力,Transwell小室测定法检测细胞体外侵袭能力。结果rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞迁移率与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,且rhBMP-2200、400、600ug·L-1组各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24、48hSMMC-7721细胞穿膜数与对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,rhBMP-2200、400、600ug·L-1组各组间差异具有统计学意义（P〈0．05）。rhBMP-2200、400、600ug·L-1组12、24hSMMC-7721细胞迁移率、细胞穿膜数与48h比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）,浓度与时间无交互作用。结论BMP-2可增加入肝癌SMMC-7721细胞的侵袭和迁移能力,且呈时间-浓度依赖性;阻滞BMP-2的表达可能成为抑制肝癌转移的一个潜在靶点。     

1400W对缺氧培养人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS的影响

目的探讨缺氧条件培养下诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）抑制剂1400 W对人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS的影响。方法常规培养人舌鳞癌细胞系CAL-27后,实验组分别加入iNOS抑制剂1400W 50（50μmol.L-1组）、100（100μmol.L-1组）、200（200μmol.L-1组）、400（400μmol.L-1组）μmol.L-1的培养液缺氧条件下培养;对照组不加iNOS抑制剂1400 W培养液缺氧条件下培养。在缺氧条件下培养24、48、72、96 h后,采用硝酸还原酶法检测细胞培养上清液NO含量。结果 1400 W作用于人舌鳞癌CAL-27细胞后,实验各组细胞培养上清液NO含量与对照组比较明显下降（P〈0.05）,并且随作用时间和剂量的增加而相应递减。结论选择性iNOS抑制剂1400 W可显著抑制缺氧条件下培养的人舌鳞癌CAL-27细胞株iNOS的表达。     

山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤U266细胞株凋亡作用研究

目的研究山核桃叶总黄酮诱导人多发性骨髓瘤(U266)细胞株凋亡的作用及其作用机制。方法体外培养U266细胞,CCK-8比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术定量分析细胞凋亡程度,Western Blot分析不同浓度总黄酮对U266细胞蛋白激酶B(Akt)和p-Akt蛋白表达的影响。结果山核桃叶总黄酮以浓度依赖性方式显著诱导U266细胞株凋亡并抑制p-Akt蛋白的表达。结论山核桃叶总黄酮诱导U266细胞凋亡的作用与其抑制Akt磷酸化相关。     

IFN α-2b对白血病K562细胞增殖及FAK mRNA表达的影响

目的:研究重组人干扰素(IFN α-2b)对人慢性粒细胞白血病急变期细胞系K562细胞增殖及黏着斑激酶(FAK)mRNA表达的影响。方法:应用MTT法检测IFN α-2K562细胞的抑制率,采用RT-PCR技术检测各IFN α-2b浓度组对K562细胞FAK mRNA表达水平的影响。结果:增加IFN α-2b浓度及延长反应时间,除48 h和72 h外,抑制K562细胞增殖的比率逐渐升高;IFN α-2b作用48 h,浓度1万U/mL对抑制细胞增长的比率最高;随着IFN α-2b浓度增加,K562细胞的FAK mRNA表达增高,其中1万U/mL IFN α-2b实验组FAK mRNA表达水平最高,各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病K562细胞可能存在FAK mRNA异常表达,IFN α-2b可能通过上调正常FAK mRNA的表达水平抑制K562细胞增殖。     

五味消毒饮抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及促凋亡作用研究

目的:研究五味消毒饮抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖及促进凋亡的作用机制。方法:选取人表皮癌A431细胞株作为实验材料,将五味消毒饮作用于体外培养的人皮肤鳞状细胞癌A431细胞,设空白对照组、研究组,于培养细胞后的24 h、48 h、72 h,采用MTT法检测细胞抑制率,观察A431细胞形态,运用免疫组化法检测人皮肤鳞状细胞癌A431细胞的Bcl-2、Bax表达,并用流式细胞仪对细胞凋亡状况进行分析。结果:研究组人皮肤鳞状细胞癌A431细胞培养24h、48 h、72 h后的增殖抑制率均高于空白对照组,且随着时间延长细胞增殖抑制率不断增加,差异有统计学意义(P<0.05);形态学方面,空白对照组人皮肤鳞状细胞癌A431细胞表现为多边形、不规则形,折光性表现强,均匀分布,贴壁生长,细胞生长状态良好;研究组人皮肤鳞状细胞癌细胞A431生长表现不佳,细胞体积缩小,皱缩变圆,周围细胞的黏附力降低,细胞间的间隙扩大,随着培养时间延长,细胞不断脱落漂浮或死亡,细胞数明显减少;研究组Bcl-2细胞阳性率低于空白对照组,Bax细胞阳性率高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞学检测显示,研究组A431细胞凋亡率高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:五味消毒饮能减少Bcl-2表达,促进Bax表达,抑制人皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖,促进A431细胞凋亡,控制或抑制人皮肤鳞状细胞癌的发生、发展。     

奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞生长抑制与凋亡的影响

目的观察奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制和凋亡作用。方法将浓度为0、6.25、12.5、25、50、100μg.mL-1的奥沙利铂与人Burkitt-Raji细胞分别作用24、36、48 h,用CCK-8法检测奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡率,用免疫组化的方法检测奥沙利铂对人Bur-kitt-Raji细胞ki-67蛋白、bax蛋白的影响。结果奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞有生长抑制、促凋亡作用,其对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率随药物浓度和作用时间的增加而增大,流式细胞仪分析显示奥沙利铂将人Bur-kitt-Raji细胞阻滞于G2/M期。奥沙利铂浓度为100μg.mL-1作用48 h,Raji细胞生长抑制率为（94.73±1.40）%,Raji细胞的早期凋亡率为（8.25±1.79）%、晚期凋亡和继发坏死率为（14.61±2.18）%。结论奥沙利铂能够抑制人Burkitt-Raji细胞的增殖,可诱导人Burkitt-Raji细胞发生一定的凋亡。     

三氧化二砷对耐伊马替尼K562细胞株增殖、凋亡和bcr/abl基因表达的影响

目的观察三氧化二砷（ATO）对耐伊马替尼K562（K562G）细胞增殖、凋亡和bcr/abl融合基因（bcr/abl基因）表达的影响。方法用不同浓度的伊马替尼（STI571）（0.25、2.50、10.00μmol.L-1）、ATO（1.0、5.0、10.0μmol.L-1）以及两者联合作用于K562G细胞,用MTT比色法测定药物对K562G细胞生长抑制率的影响、PI单染色法流式细胞仪检测K562G细胞凋亡率、荧光定量PCR检测K562G细胞bcr/abl基因的表达水平。结果 STI571作用于K562G细胞的细胞生长抑制率、细胞凋亡率和bcr/abl基因水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,ATO作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）,bcr/abl基因表达水平明显降低（P〈0.05）;细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度5.0μmol.L-1时最明显。ATO＋STI571联合用药作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组以及单用ATO组比较差异有统计学意义（均P〈0.05）,细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度ATO（5.0μmol.L-1）＋STI571（2.50μmol.L-1）时最明显,bcr/abl基因水平降低比单用ATO组更明显（P〈0.05）。结论 K562G对≤10.0μmol.L-1浓度的STI571耐药;ATO能明显抑制K562G细胞生长和诱导K562G细胞凋亡,使K562G细胞bcr/abl基因表达水平降低;ATO与STI571联合用药作用于K562G细胞时,细胞抑制率和细胞凋亡率比单用ATO效果好,bcr/abl基因表达水平降低更明显,两者有协同作用。     

苦参碱逆转人胃癌细胞株SGC7901/VCR耐药性实验研究

目的研究苦参碱（Matrine）对人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR的多药耐药的逆转效应及其机制。方法以长春新碱（VCR）诱导的人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR为研究对象,MTT法研究苦参碱对体外培养的人胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR细胞增殖的影响及逆转效应、用间接免疫荧光法经流式细胞仪检测MRP的表达并分析其机制。结果 MTT法显示苦参碱在0.5、1.0、2.0 mg.mL-1浓度下处理SGC7901/VCR细胞72 h后,其生长抑制率依次为10%、15%、32%,且可以逆转SGC7901/VCR对VCR的耐药,呈剂量依赖性,逆转倍数分别为9.4、13.4、24.5倍。0.5 mg.mL-1苦参碱与SGC7901/VCR细胞共同培养24 h后,SGC7901/VCR细胞的MRP表达从（36.00±4.32）%降低至（25.00±3.85）%（P〈0.01）。结论苦参碱可以体外逆转人胃癌细胞多药耐药细胞SGC7901/VCR的耐药性,其逆转机制与降低MRP的表达有关。     

ILK在白蛋白诱导人HK-2细胞转分化中的表达和意义

目的 探讨整合素连接激酶（ILK）在白蛋白诱导人肾小管上皮细胞转分化（TMET）过程中的表达及其意义.方法 将体外培养的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞随机分为4组：1）空白对照组.仅加入DMEM/F12培养基培养细胞.2）白蛋白诱导组.加入含人纯化白蛋白的培养液,白蛋白终浓度为5cg·L-1（以下白蛋白终浓度为此浓度）.3）转化生长因子-β1（TGF-β1）中和抗体对照组.加入含TGF-β1中和抗体的培养液,TGF-β1中和抗体终浓度为5 μg·L-1（以下TGF-β1中和抗体终浓度为此浓度）.4）TGF-β1拮抗组.在加入人纯化白蛋白 15 min 前加入TGF-β1中和抗体.观察4组细胞形态的变化.采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测TGF-β1、ILK、纤维连接蛋白（FN）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）omRNA表达水平.结果空白对照组0、12、24和48 h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平与TGF-β1中和抗体对照组比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）.白蛋白诱导组、TGF-β1拮抗组12、24和48 h时TGF-β1、ILK、E-cadherin、α-SMA和FN mRNA表达水平均明显高于同组0 h时、空白对照组和TGF-β1中和抗体对照组（均P＜0.05）;TGF-β1拮抗组12、24和48 h时TGF-β1、ILK和FN mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组（均P＜0.01）,24、48 h时E-cadherin、α-SMA mRNA表达水平均显著低于白蛋白诱导组（均P＜0.01）.相关性分析结果显示,ILK mRNA表达与TGF-β1、α-SMA和FN mRNA表达均呈正相关（r=0.944、0.974和0.989,均P＜0.01）.结论白蛋白可以诱导HK-2细胞发生转分化,ILK在其中发挥促进作用.     

Aurora-B激酶在肺腺癌组织中的表达及其临床意义

目的检测极光激酶B（Aurora-B激酶）在肺腺癌组织中的表达情况,探讨Aurora-B表达与肿瘤转移的关系。方法采用免疫组化SP法及Western blot分析47例肺腺癌组织标本[肺腺癌组,其中转移（转移组）15例、非转移（非转移组）32例]及11例正常肺组织标本（正常对照组）中Aurora-B的表达。结果肺腺癌组阳性表达率为63.8%（30/47）,明显高于正常对照组的9.1%（1/11）,差异有统计学意义（P〈0.05）;转移组阳性表达率为86.7%（13/15）,明显高于非转移组的53.1%（17/32）,差异有统计学意义（P〈0.05）。转移组、非转移组、正常对照组阳性着色细胞比例分别为（26.7±9.2）%、（15.3±6.4）%、（3.1±2.3）%;非转移组阳性着色细胞比例明显低于转移组（P〈0.05）,转移组、非转移组阳性着色细胞比例均明显高于正常对照组（均P〈0.05）。结论 Aurora-B激酶在肺腺癌组织中呈高表达,可能参与了肺腺癌的远端转移。     

5-异丁基-3-( 2-氯) 苄氧基乙内酰脲对白血病细胞 K562 生长与凋亡的影响

目的：探讨5-异丁基-3-（2-氯）苄氧基乙内酰脲（YL3）对白血病细胞 K562细胞生长与凋亡的作用。方法将K562细胞置于含10％FBS的 RPMI-1640培养液中培养。实验分4个组：空白对照组、阴性对照组、阳性对照组（HU组）、受试药物组（YL3组）;除空白对照组外,其余3组均接种K562细胞;HU组、YL3组分5个亚组,分别加入10-3～10-7 mol·L-15个梯度浓度的 HU或 YL3。采用 MTT法检测 YL3对 K562细胞增殖的影响;AV/PI双染流式细胞术检测 YL3对 K562细胞凋亡的影响;瑞氏染色法观察细胞形态的变化。结果 YL3在10-3～10-6 mol·L-1浓度范围内显著抑制 K562细胞增殖（P＜0．01或 P＜0．05）,其半数细胞抑制浓度（IC50）值为88．5μmol·L-1;YL3有促进K562细胞凋亡的作用,其高剂量的凋亡率显著高于同剂量的 HU组（P＜0．01）,且呈量效关系（P＜0．05）。结论5-异丁基-3-（2-氯）苄氧基乙内酰脲具有抑制 K562细胞增殖,诱导其凋亡的作用。