Aurora-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用

目的探讨激光（Aurora）-B激酶特异性抑制剂AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用。方法用不同浓度的AZD1152-HQPA（0、10、50、100、500 nmol.L-1）体外作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS24、48、72 h,采用噻唑蓝（MTT）检测AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞的抑制作用;采用Western Blotting检测AZD1152-HQPA作用于人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞前后Aurora-B激酶的表达情况。结果 AZD1152-HQPA对人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞生长抑制作用明显,且抑制呈时间-浓度依赖性。50 nmol.L-1AZD1152-HQPA作用24、48、72 h,人骨肉瘤细胞株U2-OS细胞中Aurora-B激酶的表达随作用时间的延长而降低。结论 AZD1152-HQ-PA能抑制U2-OS细胞生长,并且抑制作用呈时间-浓度依赖性。     

蛞蝓有效提取物抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长

目的观察蛞蝓有效提取物(EL-3)对宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法制备宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤模型,检查EL-3对瘤体积、瘤重及VEGF蛋白表达的影响,评估EL-3在体内治疗宫颈癌的有效性。结果 EL-3(10、30和100 mg/kg)实验组的瘤体积显著低于生理盐水组(P<0.05),同时,其移植瘤的瘤重抑制率分别为42.0%、67.0%和83.0%,提示EL-3在体内抗宫颈癌作用较强,且呈剂量依赖性;采用免疫组化检测证实EL-3下调宫颈癌裸鼠移植瘤细胞VEGF蛋白表达。结论 EL-3具有抑制宫颈癌He La细胞裸鼠移植瘤生长的作用,其机理可能与抑制肿瘤血管生成有关。     

不良心理应激对小鼠人卵巢癌移植瘤dicer酶表达的影响

目的观察不良应激因素对小鼠人卵巢癌移植瘤dicer酶的表达影响。方法将人卵巢癌组织采用背部皮下接种法移植裸鼠,建立人卵巢癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型。成功造模后,取体质量及肿瘤大小相近的裸鼠按随机数字表法分为对照组和应激组,每组6只。对照组裸鼠自由供水和食物;应激组裸鼠采用束缚方法给予应激,束缚应激时将应激组裸鼠依次放入打孔通风的50 mL离心管,每天束缚6 h,5 d.周-1,束缚期间禁水、禁食,完成束缚应激后将裸鼠放出,恢复自由供水和食物,应激时间共2周。观察2组裸鼠生存状态、体质量及皮下移植瘤体积;完成应激后处死裸鼠,取皮下人卵巢癌组织,采用RT-PCR和免疫组织化学染色,比较2组人卵巢癌组织中dicer酶的表达水平。结果应激组裸鼠摄食及活动不佳,与对照组相比,应激组裸鼠体质量明显下降（P〈0.05）;2组比较,肿瘤体积差异无统计学意义（P〉0.05）;RT-PCR和免疫组织化学染色结果表明：与对照组相比,应激组裸鼠卵巢癌组织中dicer酶的表达量明显下降（P〈0.05）。结论不良心理应激因素能降低人卵巢癌移植瘤中dicer酶的表达。dicer酶的表达可成为研究不良心理应激对肿瘤生长影响的重要参考指标。     

扶正解毒方对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响

目的:探讨扶正解毒方对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的作用。方法:将10只大耳白兔随机分为扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组,对照组,环磷酰胺(CTX)组5组,每组各2只。扶正解毒方高剂量组、中剂量组、低剂量组分别按16 g·kg-1、8 g·kg-1、4 g·kg-1剂量口服灌胃;对照组给予相同剂量生理盐水,每日1次,连灌1周;环磷酰胺(CTX)组第1天予20 mg·kg-1腹腔注射。末次用药后1 h,各组均在无菌条件下心脏采血,分离血清。采用血清药理学方法,对A549细胞株进行体外培养,然后分别加入扶正解毒方高剂量、中剂量、低剂量含药血清、对照组含药血清、CTX含药血清,通过光学显微镜直观法、细胞计数法、MTT法、流式细胞仪法等对A549细胞生长及凋亡指标进行测定。结果:A549细胞在显微镜下呈现典型的凋亡形态学改变;细胞生长曲线提示,扶正解毒方对A549细胞的抑制作用呈明显时效和量效关系;MMT法提示,扶正解毒方对A549细胞生长的抑制率随浓度的增加而增加,呈效应-剂量依赖关系;流式细胞仪检测显示,细胞凋亡率随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增加,药物作用72 h后,扶正解毒方低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为(6.30±1.01)%、(15.72±1.54)%、(23.40±1.34)%,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:扶正解毒方可抑制肺腺癌A549细胞生长、诱导细胞凋亡。     

郁金含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制作用的影响

目的:观察郁金含药血清对肝星状细胞-T6(hepatic stellate cell-T6,HSC-T6)细胞增殖抑制的研究。方法:25只SD大鼠随机分5组:郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组(16.2 g·kg-1、8.1 g·kg-1、4.0 g·kg-1),秋水仙碱组(5g·kg-1)以及空白组(给予等体积生理盐水),连续灌胃给药4 d后,于第4天一次性给药1 h后,乙醚麻醉腹主动脉取血制备含药血清;将HSC-T6细胞分为6组,郁金含药血清高剂量组、中剂量组、低剂量组,空白组、秋水仙碱组、阴性对照组(加入等体积的PBS代替大鼠血清),分别取用体积分数5%、10%、20%的含药血清,同时作用于各组HSC-T6细胞24 h、48 h、72 h后,采用四氮噻唑蓝法在酶标仪(490 nm波长)上检测各组OD值,分别计算其增殖率和抑制率。结果:与阴性对照组比较,除作用24 h、体积分数5%组外,大鼠血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖速度,其增殖率与大鼠血清含量呈正相关。与空白组比较,除作用24 h、体积分数5%含药血清各剂量组、低剂量20%组以及秋水仙碱20%组没有明显抑制作用外,其余各郁金剂量组均有增殖抑制作用,其中体积分数10%组的抑制效果明显高于体积分数20%组(P<0.05)。作用48 h后,各干预含药血清的3个浓度组均有明显抑制作用,其中郁金体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.05);作用72 h后,除秋水仙碱组外,各郁金剂量组均有明显抑制作用,其中含药血清体积分数10%组的抑制效果明显高于其他体积分数组(P<0.01)。结论:大鼠郁金含药血清可以明显加速HSC-T6细胞的增殖;郁金含药血清在体外可以有效抑制HSC-T6细胞的增殖,但抑制率与含药血清体积分数、作用时间呈非线性关系,抑制率最为显著的是含药血清体积分数10%,作用时间48 h。     

海藻玉壶汤对Hep3B肝癌裸鼠肝功能及CyclinD1、Bax蛋白表达的影响

目的:观察海藻玉壶汤对人肝癌移植瘤裸鼠的抗癌作用,以及对肝功能指标血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartic transaminase,AST)和细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞凋亡调控基Bax蛋白表达的影响。方法:30只BALB/c裸鼠皮下接种Hep3B细胞,建立肝癌异位移植瘤模型,分为模型组(9 g·L~(-1)氯化钠溶液灌胃),阳性对照组(盐酸多柔比星腹腔注射),海藻玉壶汤高剂量组、中剂量组、低剂量组(海藻玉壶汤灌胃)。治疗21 d后,称量小鼠体质量,取肿瘤组织测瘤质量、常规HE染色;免疫组织化学检测肿瘤组织CyclinD1、Bax;生化分析仪检测血清ALT、AST。结果:各组小鼠体质量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。海藻玉壶汤高剂量组、中剂量组、低剂量组与模型组比较,移植瘤瘤质量较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。HE染色观察肿瘤组织病理学可见治疗组不同程度肿瘤细胞灶性坏死,胞核固缩深染。免疫组织化学可见海藻玉壶汤各组CyclinD1蛋白阳性表达下降(P<0.05),Bax蛋白阳性表达增强(P<0.05)。结论:海藻玉壶汤可剂量依赖性地抑制裸鼠Hep3B移植瘤生长,一定程度上保护肝功能,并通过影响细胞周期和凋亡发挥抗肿瘤作用。     

RGD修饰的葫芦素B纳米脂质载体对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用

目的:制备RGD修饰的葫芦素B纳米结构脂质载体(RGD-CuB-NLC),观察RGD-CUBNLC对乳腺癌细胞的体外抑制作用和对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法:采用薄膜分散法制备得RGD-CuB-NLC,按照贴壁细胞的培养方法,制成MCF-7乳腺癌单细胞混悬液,接种于96孔培养板,建立RGD-CuB-NLC组,CuB-NLC、RGD-NLC为对照组,另设NLC空白组,计算不同条件的抑制率。建立裸小鼠移植瘤,将合格的30只移植瘤裸小鼠随机分成五组,每组6只。分别尾静脉注射CuB注射液,CuB-NLC,RGD-NLC,RGD-CuB-NLC和0.9%氯化钠溶液,每间隔24 h给药1次,共7次,记录鼠重、瘤体质量并计算抑瘤率。结果:RGD-CuB-NLC:形态为圆形,包封率>80%,粒径<150 nm,平均为(115.6±2.1)nm,多分散系数为(0.217±0.033),电位为(-12.31±0.76)mV。不同脂质体对乳腺癌细胞体外抑制率分别为:NLC组为0,CuB-NLC组为(46.3±2.21)%,RGD-NLC组为(55.7±3.22)%,RGD-CuB-NLC组为(75.6±5.67)%,比较差异有统计学意义(P<0.05)。0.9%氯化钠溶液组、CuB组、CuB-NLC组、RGD-NLC组与RGD-CuB-NLC组抑瘤率比较差异均有统计学意义(P<0.05);CuB组、CuB-NLC组、RGD-NLC组、RGD-CuB-NLC组与0.9%氯化钠溶液组抑瘤率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:RGD修饰的葫芦素B纳米结构脂质载体能够抑制乳腺癌细胞的增值和肿瘤的生长。     

RNA干扰Livin基因对甲状腺乳头状癌的增殖及侵袭抑制作用及其分子机制

目的:探讨Livin对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡及侵袭的影响以及可能的调控分子机制。方法:构建靶向Livin基因的慢病毒sh RNA载体,转染甲状腺乳头状癌细胞株TPC-1,实验分为干扰组、阴性对照组和空白组。应用RT-PCR和Western印迹检测转染Livin-sh RNA后细胞Livin m RNA和蛋白表达水平的变化。应用MTT、流式细胞仪、Western印迹与Transwell侵袭实验检测Livin对甲状腺乳头状癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。并接种于裸鼠模型中,进一步确定Livin在体内对甲状腺乳头状癌细胞的影响。结果:慢病毒Livin-sh RNA载体成功抑制TPC-1细胞中Livin m RNA和蛋白的表达;转染Livin-sh RNA后TPC-1细胞的增殖能力受到明显抑制(P<0.01),转染Livin-sh RNA组、阴性对照组和空白组的凋亡率分别为(15.72±0.21)%,(4.54±0.13)%和(4.87±0.22)%,三组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。干扰组穿膜细胞数明显少于阴性对照组和空白组(P<0.05)。与空白组和阴性对照组相比,干扰组细胞AKT、p-AKT及PDK1蛋白表达量均下调(P<0.05),而PTEN蛋白明显上调(P<0.05)。甲状腺乳头状癌裸鼠模型结果表明干扰组肿瘤的生长速度、肿瘤质量[(1.11±0.08)g]明显小于空白组[(1.90±0.15)g]和阴性对照组[(2.10±0.12)g]。结论:沉默Livin基因能抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭及体内生长,促使甲状腺乳头状癌细胞凋亡的发生,可能是通过抑制PI3K-AKT信号转导通路来发挥作用。     

EPO对阿霉素所致心衰大鼠氧化应激能力及细胞凋亡水平的影响

目的评价红细胞生成素（EPO）对阿霉素所致心力衰竭大鼠氧化应激和细胞凋亡水平的影响,并探讨其抗心力衰竭的可能机制。方法30只SD大鼠随机分为EPO组、心衰组和对照组（予相同体积生理盐水）,每组10只。采用腹腔注射盐酸阿霉素（ADR）建立心衰大鼠模型,EPO组每日给予EPO50U·kg-1;心衰组每日给予相同体积生理盐水,观察10周。第11周行心脏超声检测并测定大鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平及心肌组织中FasmRNA的表达,Tunel法测心肌细胞凋亡。结果与心衰组相比,EPO组左室射血分数显著提高、MDA及FasmRNA的水平降低、心肌细胞凋亡指数（AI）减少、SOD活力增加（均P〈0．01）;与对照组相比,心衰组大鼠SOD活力下降、MDA水平升高、FasmRNA的表达及心肌细胞AI指数增加（均P〈0．01）。结论EPO能显著减轻阿霉素诱导的血流动力学障碍、改善心功能,且此作用可能与氧化应激能力及细胞凋亡水平降低有关。     

奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞生长抑制与凋亡的影响

目的观察奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制和凋亡作用。方法将浓度为0、6.25、12.5、25、50、100μg.mL-1的奥沙利铂与人Burkitt-Raji细胞分别作用24、36、48 h,用CCK-8法检测奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析细胞周期的变化、检测细胞凋亡率,用免疫组化的方法检测奥沙利铂对人Bur-kitt-Raji细胞ki-67蛋白、bax蛋白的影响。结果奥沙利铂对人Burkitt-Raji细胞有生长抑制、促凋亡作用,其对人Burkitt-Raji细胞的生长抑制率随药物浓度和作用时间的增加而增大,流式细胞仪分析显示奥沙利铂将人Bur-kitt-Raji细胞阻滞于G2/M期。奥沙利铂浓度为100μg.mL-1作用48 h,Raji细胞生长抑制率为（94.73±1.40）%,Raji细胞的早期凋亡率为（8.25±1.79）%、晚期凋亡和继发坏死率为（14.61±2.18）%。结论奥沙利铂能够抑制人Burkitt-Raji细胞的增殖,可诱导人Burkitt-Raji细胞发生一定的凋亡。     

靶向沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:研究沉默RACK1基因对人肺腺癌细胞株A549裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法:使用人肺腺癌细胞株A549建立裸鼠皮下移植瘤模型。待肿瘤直径为0.3~0.5 cm时将荷瘤裸鼠随机分成3组,每组6只,分别于瘤内注射生理盐水(空白组)、空载质粒-脂质体复合物(空载组)及shRNARACK1质粒-脂质体复合物(实验组)。观察三组裸鼠的皮下移植瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线,并用Western blot检测各组肿瘤组织中RACK1蛋白的表达。结果:移植瘤形成后第28天,与空白组和空载组比较,实验组移植瘤生长速率、肿瘤体积和重量均明显降低(P<0.05)。转染干扰载体RACK1-shRNA对裸鼠肺腺癌移植瘤的的抑瘤率为39%。Western blot结果显示,实验组移植瘤组织中RACK1蛋白的表达明显低于空白组和空载组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:沉默RACK1基因对肺腺癌裸鼠移植瘤生长有明显抑制作用。     

ECHS1经线粒体途径调控HepG2细胞凋亡

目的:观察烯脂酰辅酶A水合酶短链1(enoyl-CoA hydratase short chain 1,ECHS1)对HepG2细胞凋亡的影响。方法:构建ECHS1基因的干扰质粒,转染HepG2细胞后通过嘌呤霉素筛选稳定干扰ECHS1的细胞株(HepG2-siECHS1),利用Western blot验证其干扰效率;利用流式细胞仪及TUNEL方法检测ECHS1干扰后HepG2细胞凋亡情况,再采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达水平。结果:成功构建了ECHS1的干扰质粒;Western blot验证了ECHS1干扰后HepG2细胞株中ECHS1表达低于空白对照组(未转染HepG2细胞)及阴性对照组(空载体pU6转染HepG2细胞)(P<0.05);流式细胞仪术显示HepG2-siECHS1组细胞株凋亡率(14.98±1.07)%,阴性对照组(10.55±0.19)%,两者差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL实验显示HepG2-siECHS1组细胞株凋亡率(6.13±0.12)%,阴性对照组(2.89±0.21)%,两者差异有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组比较,ECHS1干扰后p53、促凋亡蛋白Bax及Bid均表达增加。结论:ECHS1通过线粒体途径拮抗HepG2细胞凋亡。     

丹参对感染性休克大鼠脑组织保护作用的实验研究

目的研究丹参对感染性休克大鼠脑组织的保护作用。方法健康雄性Vistar大鼠42只,按随机数字表法分为4个组：正常对照组（n=6）、感染性休克组（n=12）、丹参治疗组（n=12）和丹参联合重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗组（n=12）。除正常对照组外每个组分为2个时间点（6h和12h）,各时间点6只。感染性休克组：由大鼠尾静脉注入内毒素的脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）5mg.kg-1制备感染性休克模型;正常对照组：注入等量生理盐水代替LPS;丹参治疗组：模型大鼠出现休克症状后立即腹腔注射丹参5mL.kg-1;丹参联合rhEPO治疗组：模型大鼠出现休克症状后立即腹腔注射rhEPO 5 000U.kg-1,半小时后注射丹参5mL.kg-1。术后各组各时间点大鼠分批腹腔麻醉后行眼球摘除术采血及断头取脑组织：血清行血清神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase,NSE）检测;脑组织匀浆行NO检测;提取脑组织标本进行病理切片,行HE染色和TUNEL染色检查。结果与正常对照组比较,感染性休克组海马部位神经元损伤明显,可见大量TUNEL阳性凋亡细胞,NO、NSE含量显著升高（均P〈0.01）;丹参治疗组可减轻上述变化,丹参联合rhEPO治疗组更为明显。结论丹参可减轻感染性休克时脑组织损伤及降低海马区神经元细胞的凋亡,其机制可能与抑制NO的过量生成有关。     

温通法对S180荷瘤小鼠生存期及细胞凋亡的影响

目的:观察温通法对荷S180肿瘤细胞昆明小鼠生存期的影响,从诱导肿瘤细胞凋亡方面揭示温通法抑瘤机制。方法:建立S180小鼠模型,随机分为空白组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组、环磷酰胺组,每组16只,8只观察生存期,其余8只取材。中药高剂量组、中剂量组、低剂量组小鼠于造模次日给予不同浓度的中药灌胃,每只0.4 mL,每天1次;空白组于造模次日给予生理盐水灌胃,每只0.4 mL,每天1次;环磷酰胺组造模72 h后给予环磷酰胺0.3 mL腹腔注射,隔日1次;各组于造模第12天停止用药。每组处死8只小鼠,瘤体制作细胞悬液,采用Annexin-Ⅴ-FITC/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡率;分光光度法检测Caspase-3活性。另外每组8个小鼠,记录各小鼠生存时间并做生存分析。结果:生存期实验中,空白组中位生存期为16 d,环磷酰胺组中位生存期为32 d,中药低剂量组中位生存期为24 d,中药中剂量组中位生存期为30 d,中药高剂量组中位生存期为35 d。中药3个剂量组随着剂量的增加中位生存期逐渐增高。经Log-rank假设检验,与空白组比较,中药中剂量组、高剂量组及环磷酰胺组中位生存期均较长,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。凋亡率检测实验中,中药高、中、低剂量组细胞凋亡率分别为(58.07±4.77)%、(54.89±3.29)%、(49.01±4.20)%,环磷酰胺组细胞凋亡率为(38.11±3.07)%,与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);中药3个剂量组随着剂量的增大细胞凋亡率有所增高;各组间两两比较,中药高剂量组与中药低剂量组比较,均有显著性差异(P<0.05);中药各剂量组细胞凋亡率均高于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.01)。与空白组比较,中药各剂量组及环磷酰胺组瘤细胞Caspase-3活性均较高,差异有统计学意义(P<0.01);中药3个剂量组间随着剂量的增大瘤细胞Caspase-3活性逐渐提高;中药各剂量组瘤细胞Caspase-3活性均高于环磷酰胺组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:温通法可明显延长S180荷瘤鼠生存期,诱导S180荷瘤鼠细胞凋亡,其作用机制可能是通过线粒体途径现实的。     

化痰消瘤方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的:探讨化痰消瘤方含药血清对肺腺癌A549细胞增殖的影响。方法:体外培养肺腺癌A549细胞,分为化痰消瘤方低剂量组、中剂量组、高剂量组,环磷酰胺组,空白组。分别于含药血清中培养24 h、48 h、72 h后,进行观察和检测,独立重复实验3次。采用MTT法检测细胞增殖情况,显微镜下观察细胞形态学变化。结果:各药物干预组吸光度在同一时段内与空白组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);化痰消瘤方各剂量组吸光度同一时段内与环磷酰胺组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。化痰消瘤方含药血清对A549细胞增殖的抑制率随药物浓度的增加不断提高。除化痰消瘤方低剂量组外,其余各组随着时间的延长,对A549细胞增殖的抑制率不断提高。显微镜下可见化痰消瘤方各剂量组肺腺癌A549细胞出现胞膜皱缩内陷的细胞凋亡征象。结论:化痰消瘤方含药血清可抑制A549细胞增殖,且具有一定的浓度及时间依赖性,同时可诱导细胞凋亡。     

NF-κB在高糖诱导“代谢记忆”致心肌细胞损伤的作用机制

目的探讨代谢记忆损伤心肌细胞的分子机制。方法体外培养20只SD大鼠乳鼠心肌细胞,每组5只,分为4组：持续低糖组、持续高糖组、代谢记忆组和PDTC组。计算细胞凋亡指数,免疫组化检测核内NF-κB的表达,Western Blot检测NF-κB蛋白,TUNEL检测细胞凋亡。结果代谢记忆组蛋白表达水平（15.12±2.32）和持续高糖组的（17.10±3.12）均较持续低糖组（5.23±2.13）的NF-κB核内蛋白水平显著升高（P〈0.01）,PDTC预处理后,NF-κB核内蛋白水平（7.12±2.41）较代谢记忆组（17.10±3.12）显著降低（P〈0.05）;同时,代谢记忆组（19.42±3.22）和持续高糖组（22.36±3.45）凋亡指数较持续低糖组（8.56±0.23）有明显的增加（P〈0.05）,而PDTC组（10.33±1.34）较代谢记忆组心肌细胞凋亡指数（19.42±3.22）有明显降低（P〈0.05）。结论 PDTC能抑制代谢记忆中所致的心肌细胞的损伤,NF-κB的激活可能介导了高糖诱导的代谢记忆所致的心肌细胞的损伤。     

重组人促红细胞生成素对感染性休克大鼠脑组织的保护作用

目的研究重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）对感染性休克（septicshock,SS）大鼠脑组织的保护作用。方法将健康雄性Vistar大鼠36只按随机数字表法分为正常对照组（n=12）、感染性休克组（n=12）、rhEPO治疗组（n=12）,每组再分成2个时间点（61、2 h）,各时间点6只。感染性休克组和rhEPO治疗组以尾静脉注射内毒素（LPS）5 mg.kg-1制备感染性休克模型,rhEPO治疗组在出现休克症状时立刻腹腔注射rhEPO 5 000 U.kg-1;正常对照组大鼠给予等量生理盐水。术后各组各时间点大鼠分批腹腔麻醉后行眼球摘除术采血及断头取脑组织：取血清行NSE检测、脑组织匀浆行NO检测;提取右半侧脑组织海马区进行病理切片,行HE染色和TUNEL染色检查。结果与正常对照组比较,感染性休克组脑海马CA1区神经元损伤明显,可见大量TUNEL阳性细胞,NO、NSE含量显著升高（均P〈0.01）;rhEPO治疗组TUNEL阳性细胞和NO、NSE含量较感染性休克组明显降低（P〈0.01或P〈0.05）。结论 rhEPO可减轻感染性休克时脑组织损伤及海马区神经元细胞的凋亡,其机制可能与抑制NO的过量生成有关。     

三氧化二砷对耐伊马替尼K562细胞株增殖、凋亡和bcr/abl基因表达的影响

目的观察三氧化二砷（ATO）对耐伊马替尼K562（K562G）细胞增殖、凋亡和bcr/abl融合基因（bcr/abl基因）表达的影响。方法用不同浓度的伊马替尼（STI571）（0.25、2.50、10.00μmol.L-1）、ATO（1.0、5.0、10.0μmol.L-1）以及两者联合作用于K562G细胞,用MTT比色法测定药物对K562G细胞生长抑制率的影响、PI单染色法流式细胞仪检测K562G细胞凋亡率、荧光定量PCR检测K562G细胞bcr/abl基因的表达水平。结果 STI571作用于K562G细胞的细胞生长抑制率、细胞凋亡率和bcr/abl基因水平与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,ATO作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率明显增高（P〈0.05）,bcr/abl基因表达水平明显降低（P〈0.05）;细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度5.0μmol.L-1时最明显。ATO＋STI571联合用药作用于K562G细胞的细胞生长抑制率和细胞凋亡率与对照组以及单用ATO组比较差异有统计学意义（均P〈0.05）,细胞抑制率呈剂量依赖性,细胞凋亡率以中浓度ATO（5.0μmol.L-1）＋STI571（2.50μmol.L-1）时最明显,bcr/abl基因水平降低比单用ATO组更明显（P〈0.05）。结论 K562G对≤10.0μmol.L-1浓度的STI571耐药;ATO能明显抑制K562G细胞生长和诱导K562G细胞凋亡,使K562G细胞bcr/abl基因表达水平降低;ATO与STI571联合用药作用于K562G细胞时,细胞抑制率和细胞凋亡率比单用ATO效果好,bcr/abl基因表达水平降低更明显,两者有协同作用。     

局部注射胆固醇包裹let-7a miRNA模拟物下调人3种Ras表达抑制裸鼠皮下肝癌移植瘤的生长和转移

目的　研究胆固醇包裹let-7a模拟物（mimics）是否能通过下调人3种Ras抑制肝癌发展，寻找肝癌的潜在治疗策略。方法　采用MTT增殖分析、PI单染和Annexin V/FITC双染方法检测let-7a mimics在体外对肝癌细胞的作用。使用裸鼠皮下移植瘤模型和通过肿瘤局部注射方法观察let-7a mimics对体内肝癌的作用。采用实时定量PCR和Western blot方法检测let-7a及其靶点Ras的表达。结果　与阴性对照组相比，let-7a mimics转染的肝癌细胞let-7a水平升高，细胞增殖缓慢(P均＜0.05)；let-7a mimics阻滞更多肝癌细胞停留在G0-G1期且促进肝癌细胞凋亡(P均＜0.05)。经let-7a mimics治疗的裸鼠体内肿瘤体积较阴性对照组减小，是阴性对照组的54.97%(P=0.039)；局部浸润和肝脏转移较阴性对照组明显减轻。肝癌细胞和移植瘤组织内let-7a上调的同时，人K-Ras、H-Rras和N-Ras mRNA和蛋白的表达降低（P均＜0.05）。 结论　let-7a mimics下调人3种Ras mRNA和蛋白的表达，影响细胞周期，进而抑制细胞增殖和促进细胞凋亡。瘤周多点注射胆固醇包裹的let-7a mimics能抑制移植瘤的生长、浸润和转移。提示let-7阻断Ras可成为肝癌治疗的研究策略。     

华蟾酥毒基诱导人骨肉瘤细胞U-2OS凋亡的实验研究

目的:观察华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞U-2OS增殖和凋亡的影响,从而探讨华蟾酥毒基诱导骨肉瘤凋亡的可能机制。方法:应用四甲基偶氮唑蓝比色法检测华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞U-2OS增殖的影响;应用流式细胞术检测华蟾酥毒基及华蟾酥毒基联合泛Caspase抑制剂Z-VAD-FMK对人骨肉瘤细胞U-2OS细胞凋亡的影响;应用蛋白质印迹法检测华蟾酥毒基对凋亡通路相关蛋白表达的影响。结果:四甲基偶氮唑蓝比色法实验结果表明,华蟾酥毒基以时间和浓度依赖的方式抑制U-2OS细胞生长。流式细胞术结果显示,100 n M华蟾酥毒基干预后,U-2OS细胞凋亡率为(46.87±11.23)%,但当华蟾酥毒基与泛Caspase抑制剂Z-VAD-FMK共同干预后,细胞凋亡率仅为(2.34±0.98)%,与空白对照组及华蟾酥毒基联合Z-VADFMK组相比,华蟾酥毒基能显著提高细胞凋亡率(P<0.01)。蛋白质印迹法结果显示,华蟾酥毒基能够显著提高促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-8、Cleaved Caspase-9的表达。结论:华蟾酥毒基对人骨肉瘤细胞U-2OS的生长有显著抑制作用,并能够促使肿瘤细胞凋亡,其作用机制可能与激活Caspase依赖的凋亡途径有关。