阿魏酸化学修饰溶菌酶及扩展抑菌谱的研究

为了使溶菌酶扩展抑菌谱,同时作用于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,本文采用了阿魏酸修饰溶茼酶.采用EDAC作为缩合剂,使溶菌酶赖氡酸残基上的ε-氨基共价结合阿魏酸的羧基,形成一定程度的阿魏酸修饰酶结果显示:与天然溶菌酶相比,修饰酶的酶活力略有下降,但是修饰酶扩展了抑菌谱,对革兰氏阴性菌的抑菌作用增强.修饰酶对大肠杆菌和沙门氏菌的最小抑菌浓度均为0.5mg/mL,而对金黄色葡萄球菌的抑菌作用略有下降.     

高效液相色谱法同时测定沙枣果实中5种酚类化合物

建立了高效液相色谱法检测沙枣果实中绿原酸、咖啡酸、香豆酸、肉桂酸和阿魏酸等5种酚类物质的方法。样品用乙腈超声提取,色谱柱为HypersilODS100mm×4.6mm（i.d）,5μm柱;流动相为乙腈和磷酸缓冲液（0.6%）,梯度洗脱;流速为1mL/min;检测波长为323nm和280nm;进样量为10μL。5种组分在一定范围内有良好的线性关系,相关系数为0.991～0.997,平均回收率为93.3%～98.1%,相对标准偏差为3.1%～7.4%（n=6）。结果表明：沙枣果实中绿原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸和肉桂酸的含量分别为0.472、0.373、0.425、0.529、0.381mg/kg。     

HPLC法同时测定采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的含量

为探讨采后莲雾果实贮藏期间酚酸含量变化对果实木质化代谢的影响,建立高效液相色谱法同时测定采后木质素代谢途径中5种酚酸(肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸、芥子酸)的方法。采用InfinityLab Poroahell C18色谱柱为固定相,以甲醇和乙酸溶液(p H 2.4)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.8 mL/min,柱温25℃,紫外检测器于波长279 nm和320 nm处进行检测。各酚酸组分的线性范围较宽,相关系数均大于0.999 4,检出限为0.01～0.03 mg/kg,定量限为0.03～0.09 mg/kg,相对标准偏差小于5%,加标回收率为86.18%～99.05%。该方法准确度、灵敏度高,操作简便,适用于采后莲雾果实木质素代谢途径中5种酚酸的同时测定。测得莲雾贮藏期间肉桂酸、对香豆酸、咖啡酸、阿魏酸和芥子酸的含量范围分别为11.46～24.69、0.92～1.45、2.31～5.32、8.86～20.58 mg/kg和9.48～22.62 mg/kg。     

雪莲果叶酚酸提取物抑菌活性研究

以食品中常见的3种病原微生物为供试菌,采用滤纸片法和两倍稀释法研究了雪莲果叶中酚酸提取物的抑菌活性,结果表明:雪莲果叶酚酸对革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌均有良好抑制生长作用,对于供试的3种菌,雪莲果叶酚酸对金黄色葡萄球菌抑制作用最强,其次为大肠杆菌,经纯化后的酚酸对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度分别为1.25 mg/mL、2.5 mg/mL、10 mg/mL。     

几种酚酸对木聚糖酶活力的影响

采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定酶解后还原糖释放量,研究4种不同酚酸(阿魏酸、对-香豆酸、水杨酸、单宁酸)对木聚糖酶活力的影响。结果表明:阿魏酸、对-香豆酸、水杨酸能提高木聚糖酶活力,当这3种酚酸质量浓度为0.75mg/mL时,酶活力分别提高65.59%、46.21%和12.83%。单宁酸抑制木聚糖酶活性,添加量为0.50mg/mL时,抑制率达37.18%。动力学研究表明:上述4种酚酸均能提高酶与底物的亲和力,对-香豆酸能提高酶反应速度,但单宁酸会使反应速度显著降低。     

肉桂酸及其衍生物抗氧化活性研究

目的:研究肉桂酸及其衍生物等8种中草药有效成分对超氧阴离子自由基的清除和抑制脂质过氧化的作用和规律,以期为食品和药物等抗氧化剂的筛选和应用提供理论依据。方法:O2·测定采用改良的硝基四氮唑蓝-(NBT)还原法,微粒体脂质过氧化产物丙二醛(MDA)测定采用TBA分光光度法。结果:咖啡酸、氯原酸、连翘酯甙和阿魏酸对O2·具有较强的清除能力,对-羟基香豆酸、邻-羟基香豆酸和间-羟基香豆酸对O-2·的清除-能力较弱,肉桂酸则没有,清除O2·的能力强弱顺序为:咖啡酸>氯原酸>连翘酯甙>阿魏酸>对羟基香豆酸>邻-羟基香豆酸>间羟基香豆酸;对肝脏微粒体脂质过氧化产物MDA的形成具有抑制作用,作用的强弱关系与清除O2·能力基本一致。结论:除肉桂酸外,7种肉桂酸衍生物均具有抗氧化作用,而肉桂酸没有,进一步表明各-药物的抗氧化能力与其结构有明显的关系。结构—活性显示:-CHCHCOOH基团不是肉桂酸衍生物抗氧化的活性基团,而酚羟基是其抗氧化的必需基团;在肉桂酸-CHCHCOOH基团的对位含有酚羟基的化合物比在邻位或间位含有酚羟基化合物清除O2·活性强;在肉桂酸衍生物酚羟基的邻位有含孤对电子的杂原子取代基(-OH,-OCH3)时,-其清除O·的能力进一步提高。-2     

枯草芽孢杆菌细菌素A32的抑菌机理研究

将酸沉淀法提取的枯草芽孢杆菌细菌素A32作用于大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,利用牛津杯法、分光光度法、扫描电镜技术和电导率法、SDS-PAGE电泳法探讨细菌素A32的抑菌活性和抑菌机理。结果显示,细菌素A32对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑菌性,最小抑菌质量浓度为1.25 mg/mL;对指示菌的生长曲线、细胞形态结构、细胞膜渗透性、细胞膜通透性、细胞膜和细胞壁完整性、细胞中蛋白质的合成均有影响;且随着细菌素A32质量浓度的增大,对指示菌的影响也逐渐增大。以上现象表明,细菌素A32的抑菌性主要是通过破坏革兰氏阴、阳性菌壁膜的通透性和完整性,使内容物外漏,进而影响菌体代谢和生长。孔道形成理论是细菌素A32对革兰氏阴、阳性菌的作用机理。研究结果为细菌素A32作为绿色生物防腐剂的开发应用奠定了理论基础。     

HPLC-DAD法同时测定金银花中7种多酚类物质

建立了高效液相色谱-二极管阵列法(HPLC-DAD)同时测定金银花中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、香豆酸、肉桂酸、芦丁和木犀草苷的方法。采用岛津Shim-packVP-ODS C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,2%甲酸-2%甲酸甲醇溶液为流动相梯度洗脱,柱温35℃,流速0.7mL/min。结果表明:绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、香豆酸、肉桂酸、芦丁和木犀草苷分别在1.04~520、1.02~510、1.59~530、1.26~630、1.89~560、1.62~540、0.29~58mg/L范围内线性关系良好(r值范围为0.9964~0.9999),检出限(RSN=3)为0.001~0.078mg/L,精密度RSD小于3.27%,平均回收率为93.42%~102.53%。本方法操作简单,灵敏度高、重现性好,可用于金银花中7种多酚类物质的定量分析和质量监控。     

溶菌酶与壳聚糖复配液抑菌作用的研究

本实验以溶菌酶和壳聚糖联合使用以增强对三种模型菌(大肠杆菌(E.coli)、金黄色葡萄球菌(St.aureus)及白色念珠菌(C.albicans))的抑菌效果。首先采用抑菌圈法考察不同浓度醋酸溶液对不同浓度壳聚糖溶液抑菌效果的影响,其次通过对倍稀释法测定壳聚糖溶液和溶菌酶溶液的最小抑菌浓度(MIC),并采用定量法确定复配液的配比,最后通过酶标法监测加入复配抑菌剂后三种模型菌的生长曲线。结果表明,1%的醋酸溶液与壳聚糖的协同抑菌效果最好;壳聚糖溶液对三种模型菌的最小抑菌浓度均为0.1562mg/m L,溶菌酶溶液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度分别为0.625mg/mL、1.25mg/mL和1.25mg/mL,而复合液对三种模型菌的抑制作用优于单独使用溶菌酶或壳聚糖;复配液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用主要表现在对数生长期,而加入材料后白色念珠菌由延迟期直接进入稳定期内。     

模型反应中不同酚酸物质抑制PhIP形成效果分析

2-氨基-1-甲基-6-苯基-咪唑[4,5-b]吡啶(2-amino-1-methyl-6-phenyl-imidazole[4,5-b]pyridine,PhIP)是食品加工和烹饪中含量较高且有致癌风险的杂环胺类化合物。该文在以苯丙氨酸和肌酐为前体物质的模型体系中,考察阿魏酸、咖啡酸、对香豆酸3种单体酚酸以及混合酚酸对PhIP形成的抑制效果,并进一步探讨酚酸类物质在模型体系中对PhIP形成的抑制效果是否存在相互协同作用。结果表明,在单体酚酸模型中,当酚酸浓度为10^-10mg/mL或10^-9mg/mL时,从整体效果比较3种单体酚酸对PhIP形成的抑制效果,由强到弱分别为咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸,而当酚酸浓度为10^-8mg/mL时,阿魏酸对PhIP形成的抑制效果强于对香豆酸;在混合酚酸模型中,阿魏酸+对香豆酸的组合对PhIP形成抑制效果最强,抑制率为56.37%,咖啡酸+对香豆酸的组合对PhIP形成抑制效果最弱,抑制率为13.33%。推测其反应机理可能是酚酸类物质与前体物质发生反应生成新的化合物,消耗掉前体物质的量,从而抑...