苦荞蛋白的分离及其体外抗氧化活性的研究

目的:提取苦荞蛋白并评价苦荞蛋白各组分的体外抗氧化能力。方法:采用不同溶剂分级提取苦荞中的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,并采用考马斯亮蓝蛋白定量法测定各组分的蛋白含量,SDS-PAGE电泳观察各蛋白组分的分子量分布情况;采用比色法测定各蛋白组分在体外抑制超氧阴离子自由基(O2-·)的能力和清除羟自由基(·OH)的能力。结果:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白占总蛋白的百分含量分别为42.65%、14.08%、9.54%和33.73%,清蛋白含量最高,醇溶蛋白含量最少;各蛋白组分的分子量分布不一样;清蛋白和球蛋白均具有清除羟自由基(·OH)的能力和抑制超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,且球蛋白高于清蛋白(p0.05),而醇溶蛋白和谷蛋白无抗氧化能力。结论:苦荞中的清蛋白和球蛋白具有体外抗氧化能力。     

薇菜多糖的分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法制备薇菜粗多糖（water-soluble polysaccharide of Osmunda japonica,WOJP）,并用二乙氨乙基（diethylaminoethyl,DEAE）-纤维素层析法对其进行分离纯化,获得2?个多糖组分薇菜中性糖（neutral WOJP,WOJP-N）和薇菜酸性糖（acidic WOJP,WOJP-A）。WOJP-N的分子质量为31.8?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为9.1∶5.7∶13.3∶37.6∶5.6∶11.8;WOJP-A的分子质量为15.7?kDa,由鼠李糖、半乳糖醛酸、半乳糖和阿拉伯糖组成,对应各成分物质的量比为7.0∶56.4∶26.1∶5.2。傅里叶变换红外光谱分析结果表明,WOJP-N主要由β-构型的半乳糖组成;WOJP-A主要由吡喃半乳糖醛酸组成,且存在部分酯化修饰。体外抗氧化活性实验结果表明,WOJP的Fe3＋还原能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）清除能力和超氧阴离子清除能力与VC相当,具有较好的抗氧化活性,其中WOJP-N和WOJP-A在WOJP发挥抗氧化活性时具有协同作用,两者均是WOJP发挥抗氧化活性的多糖组分。本研究结果可为进一步研究薇菜多糖的构效关系和开发功能性食品提供依据,并为薇菜的应用提供理论参考。     

紫苏叶多糖分离纯化及体外抗氧化活性

通过水提醇沉法得到紫苏叶粗多糖（Perilla frutescens leaf polysaccharides,PFP）,并用DEAE-52纤维素层析法对其进行分离纯化,获得4个多糖组分PFP-1、PFP-2、PFP-3和PFP-4。PFP-1为中性低聚糖,但总糖含量较低;PFP-2重均分子量为4.7 kDa,峰位分子量为2.2 kDa,主要组成单糖为半乳糖醛酸;PFP-3主要由两种分子量段的多糖组成,主要峰位分子量为5.2 kDa和40.0 kDa,为杂多糖,所含单糖种类较多,主要含半乳糖醛酸和半乳糖;PFP-4分子量较小,主要组成单糖为半乳糖和阿拉伯糖。体外抗氧化活性试验表明,PFP的DPPH自由基清除能力、ABTS+自由基清除活性和Fe3+还原能力较强,具有良好的抗氧化活性,其中组分PFP-3和PFP-4抗氧化活性与PFP接近,是其发挥抗氧化作用的关键组分。     

鹿茸多糖分离纯化及抗氧化活性研究

采用DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸粗多糖进行分离纯化,并通过对DPPH自由基、羟基自由基（·OH）、超氧阴离子自由基（O2-·）清除能力和还原能力的测定,研究了粗多糖及纯化后多糖的抗氧化能力。结果表明:DEAE-52离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶排阻层析对鹿茸多糖分离效果较好,可以分离纯化得到一种单一多糖;粗多糖和纯化后多糖对DPPH·、·OH、O2-·均有清除作用,且具有一定的还原能力,纯化后多糖抗氧化活性和还原能力均大于粗多糖。      

板栗多糖的分离纯化及抗氧化活性研究

从板栗中分离纯化得到多糖并研究其抗氧化活性.采用沸水提取、Sevag法除蛋白、80%乙醇沉淀的方法从板栗中提取得到板栗多糖CPS.CPS经DEAE-纤维素柱分离纯化后,于蒸馏水洗脱液中得到一个纯化多糖组分CPS1.以VC为对照,试验了CPS与CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除能力及还原能力.结果表明,CPS与CPS1均具有一定的清除羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的能力及还原能力,而且与多糖的浓度成正相关性.其中,CPS对过氧化氢的清除作用效果与VC相当.另外,经纯化精制后的CPS1对羟自由基、超氧阴离子自由基、过氧化氢的清除作用及还原能力均低于CPS.     

芦荟多糖的纯化与体外抗氧化活性的研究

本实验对醇沉淀得到的库拉索芦荟多糖先后用DEAE—纤维素和SephendexG—200进行了分级纯化,得AP—A—2中性多糖单一组分,并研究了其体外抗氧化活性。实验证明,AP-A-2有较高的清除和H2O2能力,但对·OH的清除能力较弱,对脂质过氧化无明显抑制。-O2·     

广东淮山水溶性多糖的分离纯化及体外抗氧化活性的研究

广东淮山经热水提取、乙醇沉淀得粗多糖，再经脱脂、脱蛋白、脱色、两次Sephadex G-75柱层析纯化得多糖精品，经纸层析、旋光度测定、紫外光谱鉴定为均一多糖。在体外设计产生超氧阴离子自由基、羟基自由基和脂质自由基等3个体系，分别加入广东淮山不同浓度的多糖粗品和精品，结果表明，广东淮山多糖粗品及精品对超氧阴离子自由基和羟自由基均有较高清除作用，但对脂质自由基的清除能力较弱，而且经纯化精制后的广东淮山多糖对超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用均小于其粗品。     

绿球藻多糖分离纯化及抗氧化活性研究

天然多糖具有良好的生物活性和功能,而微藻具有生长速度快、适应性强、在人工培养下能够大量繁殖、占地面积小、生产成本低等特性。为深入挖掘更多的微藻多糖资源,采用传统热水浸提方法对绿球藻(Chlorococcum sp.GD)多糖进行分离,并采用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-150柱层析对所获得的粗多糖进行纯化,并研究其抗氧化活性。结果表明:1)粗多糖提取率为6.07%,通过分级纯化,得到4个组分CPP-Ⅰ、CPP-Ⅱ、CPP-Ⅲ和CPP-Ⅳ,且纯度较高;2)绿球藻纯化多糖对DPPH自由基和羟基自由基具有明显的清除效果,清除率分别超过90%和70%,且纯化组分CPP-Ⅳ的效果优于粗多糖;3)绿球藻纯化多糖对超氧阴离子和ABTS+自由基也具有一定的清除效果,清除率分别超过50%和27%,且还原力为0.404。研究结果虽然低于VC的清除率,但仍然表明绿球藻多糖纯化后具有较好的抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加。     

马齿苋多糖组分的分离纯化及抗氧化活性研究

本文对马齿苋总多糖进行了纯化分离,得到了POLⅠb、POLⅡa、POLⅢ’三种单一的多糖组分,分子量分别为18kD、56kD和410kD;均是非单一组分多糖,POLⅠb、POLⅢ’主要由葡萄糖、半乳糖组成,含有α-糖苷键;POLⅢ含有六种单糖,分别是阿拉伯糖、木糖、果糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖,含有β-糖苷键。三种多糖体外实验证明均有一定的抗氧化功能,POLⅢ对于·OH有较高的灭活作用。     

人参果多糖的分离纯化及体外抗氧化活性研究

通过水提法得到人参果中的总多糖(WGBP),并通过离子交换层析对WGBP进行分离纯化,得到一个中性糖WGBP-N和三个酸性糖级分(WGBP-1、WGBP-2、WGBP-3)。利用高效液相色谱及分子筛层析法对各个级分的单糖组成、分子量等进行了分析,并对结构特点进行了概括。通过DPPH和羟自由基清除实验分析了各级分的抗氧化活性。结果表明,WGBP主要由鼠李糖(rhamnose,Rha)、半乳糖醛酸(galacturonic acid,GalA)、半乳糖(galactose,Gal)、阿拉伯糖(arabinose,Ara)和葡萄糖(glucose,Glc)组成,分子量分布广泛。WGBP-N主要由Gal、Ara和Glc组成,比例为62.7:17.0:17.1。三个酸性糖主要由不同比例的Rha、GalA、Gal和Ara构成。WGBP具有明显的DPPH·和羟自由基清除活性,且清除率随浓度的升高而逐渐增强。当WGBP浓度为2.0 mg/mL时,DPPH·清除率为62.7%;当浓度为0.2 mg/mL时,羟自由基清除率为81.2%。WGBP对DPPH·和羟自由基清除活性优于四个子级分。     

苦荞抗氧化活性研究

苦荞作为一种食药两用的粮食作物,其营养丰富,具有很高的抗氧化活性.近年来,随着我国人民生活水平的提高,其抗氧化活性逐渐受到人们的青睐.文中介绍了苦荞抗氧化活性成分,总结了其抗氧化功能研究现状及开发利用现状.     

苦荞醋及其多糖物质的抗氧化性能研究

对苦荞醋及其多糖物质的抗氧化性能进行研究。以山西宁化府生产的苦荞醋为原料,采用乙醇沉淀法制备苦荞醋多糖,分析其单糖组成。通过清除DPPH(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)自由基、羟基自由基(·OH)及测定总还原力等方法对苦荞醋及其多糖物质的抗氧化性能进行研究。结果表明:苦荞醋多糖得率为8.52mg/mL,主要由阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)和葡萄糖(Glc)组成,并含有少量甘露糖(Man)和半乳糖(Gal),其摩尔比为2.15∶3.98∶2.35∶1.0∶1.0。苦荞醋及其多糖物质均具有良好的抗氧化清除自由基能力,其中苦荞醋的抗氧化能力强于多糖物质。     

苦荞糊和苦荞茶挥发性香气成分分析

采用固相微萃取法（SPME）对苦荞茶和苦荞糊中的挥发性香气成分进行提取,并经气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术定性分析。从苦荞茶和苦荞糊中分别检测出30种和41种挥发性香气成分,相同成分有15种,其中含量较高的是烃类、醛类和杂环类,三者在苦荞茶和苦荞糊中含量分别为24.56%、35.04%、18.42%和46.97%、21.22%、7.22%。研究表明,顶空固相微萃取具有快速简便、不使用溶剂和样品检测非破坏性等优点,结合气-质联用技术可以很好的分析苦荞产品中挥发性物质,并说明不同加工工艺制得的苦荞产品其挥发性物质存在一定差异。     

不同苦荞蛋白酶解产物抗氧化活性研究

以苦荞蛋白作为底物,采用碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶以及胃蛋白酶加胰蛋白酶模拟体内蛋白消化,制备苦荞麦蛋白水解物。采用DPPH及ABTS~+·法比较不同的蛋白水解物与水解前苦荞蛋白的体外抗氧化活性。结果表明:不同蛋白酶水解产物水解度由高到低的顺序为:碱性蛋白酶胃蛋白酶~胰蛋白酶胃蛋白酶木瓜蛋白酶胰蛋白酶,其中碱性蛋白酶水解苦荞蛋白水解度达29.95%。苦荞蛋白本身具有一定的抗氧化能力,其中DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别达71.91%及11.25%,但均显著低于阳性对照Vc。随着水解程度的增加,苦荞蛋白水解产物抗氧化能力逐渐增强。其中,以碱性蛋白酶酶解产物抗氧化活性最高,其DPPH清除率及ABTS~+·清除率最高分别为91.65%(0.5 mg/mL)及16.67%(1 mg/mL),均显著高于原苦荞蛋白。其中,碱性蛋白酶水解产物的DPPH自由基清除率在高浓度(0.5mg/mL)条件下,与阳性对照Vc持平。同时碱性蛋白酶酶解产物抗氧化性(DPPH清除率及ABTS~+·清除率)显著优于其他蛋白酶解产物。因此,苦荞麦蛋白采用碱性蛋白酶解制备苦荞水解产物可作为天然的抗氧化剂。     

苦荞茶和荞麦面条中芦丁及槲皮素含量分析

采用高效液相色谱法分析苦荞茶和荞麦面条中的芦丁和槲皮素含量.结果表明:造粒型和非造粒型(全麦和全胚)苦荞茶中芦丁和槲皮素的含量(质量分数)具有明显差异,非造粒型苦荞茶中芦丁的质量分数较高(0.518 3％～0.850 6％),槲皮素的质量分数较低(0.0573％～0.252 1％);而造粒型苦荞茶和荞麦面条中槲皮素的质量分数较高(0.481 6％～1.022 2％,0.034 9％～0.072 0％),芦丁的质量分数较低(0.029 7％～0.031 4％,0.008 1％～0.024 4％),这可能是由于荞麦中存在的芦丁降解酶分解芦丁产生槲皮素的缘故.由此可见,并非所有的苦荞茶和荞麦面条都是以芦丁作为主要的黄酮类物质,单纯以芦丁和总黄酮的质量分数来评价荞麦制品的品质是不准确的.     

苦荞中D-手性肌醇的纯化及其抗氧化活性研究

采用超声浸提法提取苦荞D-手性肌醇（DCI）,通过高碘酸钠氧化法测定DCI含量,利用活性炭柱分离纯化苦荞粗提物,高效液相色谱法（HPLC）分析粗提物和纯化产物的组成及含量。以VC、BHT为对照,通过对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子的体外抗氧化评价体系和总还原力的测定,评价对比苦荞DCI粗提物和纯化产物的抗氧化活性。结果表明,苦荞粗提物中D-手性肌醇的含量仅为0.129%,经活性炭柱纯化后,苦荞中D-手性肌醇的含量可以达到27.26%;苦荞DCI提取物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基均具有不同程度的清除作用,同时具有较好的还原性,且DCI纯化产物的抗氧化活性要明显强于DCI粗提物。      

苦荞麦麸碱提多糖的制备与分析

以苦荞麦麸为原料、0.2 mol/L NaOH溶液为提取介质分离碱提多糖,并采用DEAE-SephroseCL-6B柱层析技术进行分级纯化.结果表明:苦荞麦麸碱提多糖(ABP)主要由葡萄糖(Glc)组成,并含有少量阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、半乳糖(Gal)和微量甘露糖(Man),初步推测ABP主要为β-葡聚糖.ABP经离子交换柱层析分级为2个组分:ABP1和ABP2,ABP1的多糖含量(85.30%)较ABP(64.53%)有所提高,且只含有Glc和少量Xyl,其中n(Glc)∶n(Xyl)=9.47∶1.ABP1经凝胶色谱鉴定为均一组分,其相对分子质量为8.5×104.     

苦荞小曲酒生产工艺

以苦荞为主料,大米、高粱、小麦为辅料,采用传统小曲酒酿造工艺经泡粮、蒸粮、培菌糖化、发酵、蒸馏等工序酿制小曲酒。经研究确定苦荞小曲酒最佳生产工艺条件为:泡粮时间13 h、初蒸50 min、闷粮8 min、复蒸70 min、曲种接种量为0.5%、培菌糖化时间24 h、出箱温度37℃、入桶发酵温度28℃、发酵时间7 d。经10批生产试验所得苦荞小曲酒基酒的出酒率在44.44%左右,基酒乙醇体积分数为59.3%,总酸(以乙酸计)、总酯(以乙酸乙酯计)可达0.45~0.60 g/L、1.00~1.3 g/L,固形物含量在0.25~0.31 g/L。     

苦荞芽苗茶饮料发酵前后营养、风味及抗氧化活性的变化

采用植物乳杆菌发酵苦荞芽苗茶饮料,通过对发酵前后苦荞芽苗茶饮料中芦丁、槲皮素、山奈酚-3-O-芸香糖苷、总黄酮、氨基酸、挥发性化合物、DPPH和ABTS自由基清除率等指标进行测定,研究发酵前后营养、风味及抗氧化活性的变化规律。结果表明,发酵后芦丁含量基本保持不变,槲皮素和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量有稍许降低,总黄酮含量从(120.6±1.9)μg/mL微降至(114.6±1.7)μg/mL。苦荞芽苗饮料中包含6种必需氨基酸(EAA)和11种非必需氨基酸(NEAA),发酵后必需氨基酸/总氨基酸(EAA/TAA)为38.32%,EAA/NEAA为62.13%,显著高于发酵前。分离鉴定出8类54种挥发性物质,发酵前含有46种,发酵后含有43种,通过发酵,阈值较低的芳香性风味物质含量明显提升。发酵后DPPH和ABTS自由基清除率均升高,乳酸菌发酵可以提高苦荞芽苗茶饮料的抗氧化活性。     

In vitro potential of flavonoids from tartary buckwheat on antioxidants activity and starch digestibility

The effects of various flavonoids of Tartary buckwheat (rutin-enhanced flavonoid extract [REFE and quercetin-enhanced flavonoid extract [QEFE]) and individual flavonoids (rutin, quercetin and kaempferol) on the antioxidant activity, inhibition of α-glucosidases and α-amylase and starch digestibility were evaluated. Quercetin possessed the highest antioxidant activity and inhibition of α-glucosidases and α-amylase activity followed by kaempferol and rutin. REFE and QEFE have similar antioxidant and inhibition of α-amylase activities, but QEFE has much higher α-glucosidases inhibition than REFE. Tartary buckwheat flour has the lowest content of rapidly digestible starch and predicted glycaemic index (pGI) compared to maize flour, wheat flour and rice flour. Addition of rutin and quercetin to wheat flour showed a weak or no effect on digestion inhibition, but they inhibited starch digestion under solid complex conditions. Our results may help explain the benefits of supplementing the diet with food rich in flavonoids.