雪梨多酚氧化酶酶学特性及其果汁褐变控制技术研究

雪梨在加工过程中极易发生酶褐变,为抑制雪梨汁的酶褐变,试验以雪梨为原料制备多酚氧化酶(Polyphenol oxidase,PPO)粗酶提取液,加入邻苯二酚为底物,采用分光光度法对其PPO的酶学特性及不同护色剂对PPO活性的影响进行了研究;并选择L-半胱氨酸、D-异抗坏血酸钠、抗坏血酸3种添加剂对雪梨汁进行护色,通过响应面优化试验确定雪梨汁最优护色组合。结果表明:雪梨PPO的最适pH为4.5,最适温度为30 ℃;雪梨PPO具有一定的热稳定性,随着温度的提高,抑制PPO活性所需要的时间逐渐减少;雪梨PPO催化底物邻苯二酚的酶促反应动力学与米氏方程高度符合,最大反应速率Vmax=217.39 U/min,米氏常数Km=0.152 mol/L。雪梨汁加工的最优护色剂组合为:6.56 mmol/L的L-半胱氨酸、4.58 mmol/L的D-异抗坏血酸钠和6.18 mmol/L的抗坏血酸,在此条件下对雪梨汁褐变的抑制率可达90.82%。     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶（PPO）的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca²⁺和Mn²⁺对蓝莓PPO有抑制作用,Cu²⁺、Mg²⁺、Zn²⁺、Fe³⁺对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。      

山楂多酚氧化酶的酶学特性研究

研究山楂多酚氧化酶(PPO)的酶学特性。采用分光光度法测定PPO的酶活性,考察底物特异性、p H值、温度、热稳定性、底物浓度、金属离子以及抑制剂对PPO酶活性的影响。实验结果表明,山楂PPO的最适底物为邻苯二酚;最适p H值为6.5;最适温度为40℃;90℃热处理1.0 min或85℃处理1.5 min PPO酶活基本完全丧失;山楂PPO最适底物浓度为0.10 mol/L,PPO酶促褐变反应动力学符合米氏方程,相应的动力学参数Km=55.83 mmol/L,Vmax=98.04 U/min;Al3+对PPO酶活的抑制作用较强,Mn2+、Ca2+和Zn2+次之,Cu2+和Mg2+对PPO酶活抑制作用不明显,Fe3+对PPO酶活有一定的促进作用;四种抑制剂对山楂PPO酶活均有一定的抑制作用,且抑制效果与抑制剂浓度呈量效关系,相同浓度下抑制效果由强到弱顺序为:抗坏血酸L-半胱氨酸亚硫酸氢钠柠檬酸,抗坏血酸的抑制效果最为显著。     

蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性

为分析蓝莓中多酚氧化酶的酶学特性,本文对影响蓝莓多酚氧化酶(PPO)的酶活力的主要因素:p H、温度、金属离子、抑制剂及热稳定性进行了研究。结果表明:蓝莓中PPO最适p H为6.5,最适温度为30℃,Ca~(2+)和Mn~(2+)对蓝莓PPO有抑制作用,Cu~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Fe~(3+)对蓝莓PPO有激活作用。柠檬酸、抗坏血酸、L-半胱氨酸及亚硫酸氢钠能抑制PPO酶活,但柠檬酸抑制效果较差。热稳定性实验结果表明:蓝莓果PPO耐热性较差,高温短时可显著抑制PPO酶活性。     

小麦多酚氧化酶酶学特性的研究

选取3个小麦品种作为试验材料,以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在410 nm处测定小麦多酚氧化酶的活性,研究温度、pH值、底物浓度对其活性的影响以及酶促动力学常数Km,结果表明:小麦多酚氧化酶的最适温度范围为60～75℃,最适pH值为4.0～4.6,描述的单底物酶促反应动力学,相应的动力学参数km=0.19 mol/L,vmax=4.04×102(mol·L-1)·min-1.     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶（PPO）的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明：以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH 值为6.0,最适反应温度为40 ℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90 ℃热处理2.5 min或85 ℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

白萝卜多酚氧化酶的酶学特性研究

白萝卜作为我国第二大蔬菜。其贮运和加工过程中的褐变多以酶促褐变为主,全面系统地了解白萝卜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性,并研究其抑制手段,对提升白萝卜及其制品的品质和商品价值有着重要的意义。本文以新鲜白萝卜为原材料,采用丙酮洗涤、0.2 mol/L磷酸盐缓冲溶液匀浆法从中提取PPO,考察了pH、温度对酶活的影响,分析了其温度稳定性、底物浓度对PPO活性的影响,探讨了过程的反应动力学,并对多种酶抑制剂对PPO活性的影响进行了比较,为控制加工过程中白萝卜的酶促褐变提供了理论依据。试验结果表明:以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH值为6.0,最适反应温度为40℃,Km和Vmax值分别为53.8 mmol/L和588 U/min。90℃热处理2.5 min或85℃热处理3.5 min可基本完全钝化其活性,Vc、异Vc和L-cys对PPO酶活的抑制较为明显。     

芋艿褐变底物及多酚氧化酶特性研究

以威海产芋艿为材料,研究了芋艿中酚类物质的分布状况及主要成分,结果表明,芋艿中酚类物质主要分布于近皮部位和中部的脉管中,酚类物质主要是绿原酸和酪氨酸。对芋艿多酚氧化酶（PPO）的特性研究表明:鲜切芋艿PPO的最适pH为8.0;最适温度为40℃;PPO对酚底物的亲和力存在差异,PPO以儿茶酚为底物时活力最强;低浓度NaHSO3和4-HR对芋艿PPO的抑制作用很明显,其次为抗坏血酸、L-Cys,而植酸需要较高的浓度才能抑制芋艿PPO的活力。      

金银花叶多酚氧化酶的酶学特性

对金银花叶多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行研究。以新鲜金银花叶片为原料,采用溶剂法从中提取多酚氧化酶粗液,研究不同的温度、pH值、底物浓度、抑制剂等因素对PPO活性的影响,建立酶促褐变动力学方程。研究结果表明,金银花叶PPO的最适温度45℃,最适pH6.5,安全、经济的褐变抑制剂柠檬酸;当以邻苯二酚为底物时,金银花叶PPO活性与底物浓度关系符合米氏方程的酶促反应动力学规律,最大反应速度Vmax=313U/min,Km=0.0197mol/L。     

烟草中多酚氧化酶的酶学特性研究

从新鲜的烟叶中提取多酚氧化酶,该酶在55℃时经过10分钟酶的活性就达到高峰,但持续的时间很短,热稳定性差;在40℃时经过20分钟酶的活性才达到高峰,但持续的时间较长,具有良好的热稳定性。烟草中的多酚氧化酶在 pH 值为6时,酶的活性最高:pH 值高于6或低于6,活性均下降。烟草中的多酚氧化酶与焦儿茶酚(二元酚)的结合力最强,三元酚次之,一元酚不作用。烟草中的多酚氧化酶是一种含酮的蛋白质,增加铜离子的浓度能增强多酚氧化酶的活性;EDTA、亚硫酸氢钠、硼酸、柠檬酸都是烟草多酚氧化酶的良好抑制剂。     

马铃薯多酚氧化酶酶学特性及热稳定性模型的研究

目的:研究马铃薯中多酚氧化酶（polyphenol oxidase,PPO）的部分酶学性质及热稳定性并拟合数学模型预测酶活变化过程。方法:采用紫外可见分光光度计测定马铃薯多酚氧化酶活力,利用Matlab软件拟合二元多项式热稳定性数学模型,SPSS软件对多项式模型回归分析。结果:马铃薯多酚氧化酶的最适pH为5.5,最适反应温度为40℃,最适底物浓度为8.33mmol/L,加工温度、时间与酶活残存率的函数关系为:Z=24.5439+6.1163X+3.4064Y-0.0269X2-0.2361XY-0.0351Y2-0.0002836X3+0.001326X2Y+0.0012XY2,其中R2=0.981,F=100.695,p<0.001。结论:二元三次多项式模型能够较准确的反映并预测马铃薯多酚氧化酶在热加工过程中酶活的变化趋势。      

赵州雪花梨多酚氧化酶酶学特性研究

研究赵州雪花梨多酚氧化酶的酶学特性.结果表明:以邻苯二酚为底物,雪花梨中多酚氧化酶的最适pH值为7.0, 最适温度为25 ℃;底物浓度与酶活成正相关,90 ℃处理4 min 可钝化其活性;酶反应动力学研究表明,以邻苯二酚为底物时,Vmax=437 U/min,Km=0.015 6 mM.     

曹州木瓜多酚氧化酶的酶学特性

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法对曹州木瓜多酚氧化酶(PPO)的酶学特性进行了研究。结果表明:曹州木瓜PPO的最适pH为5.0,最适温度为30℃;PPO在60⁹0℃内的热失活曲线具有双相特征,活化能Ea=112.95 kJ/mol;PPO催化的酶促褐变反应动力学符合米氏方程,且相应动力学参数为K m=6.92 mmol/L,V max=769.23 U;5种抑制剂对PPO的抑制效果从大到小依次为:亚硫酸氢钠>抗坏血酸(Vc)>L-半胱氨酸(Lcys)>柠檬酸>EDTA-2Na;Na+和K+对PPO活性的影响不明显,Al3+、Ba2+、Cu2+对PPO具有抑制作用,Mg2+、Mn2+、Ca2+在低浓度(1 mmol/L)时对PPO具有激活作用,高浓度(10 mmol/L)时具有抑制作用。     

茯苓多糖的研究进展

多糖具有多种生物活性,其中,药食两用真菌多糖已成为食品、医药和生物领域的研究热点。近年来,有关真菌多糖治疗与保健功能的报道越来越多,茯苓多糖是从茯苓菌分离提取出来的真菌多糖,具有显著的抗肿瘤功能。本文对茯苓多糖的成分、性质、发酵制备和功能用途等进行比较全面的阐述,旨在为进一步研究与开发茯苓多糖,保护药食用真菌资源提供参考。     

茯苓皮三萜类物质抗氧化活性研究

以茯苓皮三萜甲醇提取物为材料,熊果酸为对照,通过化学发光法和比色法评价其体外抗氧化活性。结果表明：茯苓皮三萜能有效清除超氧阴离子自由基(O2－)、羟自由基( ·OH)和过氧化氢(H2O2),半数抑制率(IC50)分别为1.01、0.91、0.87mg/mL,且清除率与质量浓度存在剂量依赖关系;进一步体外抗氧化实验表明,茯苓皮三萜具有抑制家鸡红细胞溶血作用,对小鼠肝脂质过氧化产生的丙二醛(MDA)有较好的清除效果。     

茯苓多糖的酶解工艺及抑菌性研究

采用β-葡聚糖酶酶解茯苓多糖获得水溶性茯苓多糖,优化水溶性茯苓多糖的最佳酶解提取工艺,测定酶解产物抑菌效果。通过苯酚-硫酸法测定其含量,以水溶性茯苓多糖含量为评价指标,采用L9（34）正交试验设计,优化酶解工艺条件为酶解反应温度55 ℃,pH值5.5,时间150 min,酶用量9 000 U。在此条件下获得水溶性多糖含量达到9.20%。牛津杯法测定其抑菌活性,结果表明,酶解产物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌产生较好的抑菌作用,抑菌圈直径分别为14.67 mm、8.89 mm,对枯草芽孢杆菌未见产生明显抑菌圈,为茯苓水溶性多糖深度开发提供前期研究数据。     

大孔树脂吸附纯化茯苓多糖工艺研究

以茯苓提取粗多糖为原料,考察7种大孔树脂纯化茯苓提取粗多糖的效果。通过静态吸附-洗脱试验结果表明,AB-8型大孔树脂对茯苓提取粗多糖的脱色率与多糖回收率均优于其它种类树脂。通过动态吸附-洗脱试验结果,得到最佳纯化茯苓提取粗多糖的工艺条件为:配制5.0 mg/m L的茯苓粗多糖提取液,以2 BV/h流速上样至柱体积为7 BV的AB-8型大孔树脂内吸附,随后采用5 BV的50%乙醇溶液,以2 BV/h流速洗脱。通过定量分析结果表明,在最佳纯化工艺条件下,茯苓提取粗多糖的脱色率达到85.2%,多糖回收率为75.4%。     

茯苓液体发酵培养条件优化

茯苓的生产主要为固体培养和液体发酵培养2种方式。其中,固体培养为传统人工栽培,该方法存在木材消耗量大、产量不高、不能满足大规模工业生产需要等缺点;而茯苓液体发酵培养能够连续地大规模进行工业化生产,通过控制培养条件,能在短期内获得大量预期的代谢产物。试验对茯苓液体发酵培养条件进行优化,从培养温度、接种量、培养时间3个影响因素进行考虑,通过单因素和响应面试验,确定茯苓液体发酵培养最佳条件为:培养温度27℃、接种量4%、培养天数5 d。在此优化条件下,茯苓菌丝体干质量为8.329 g·L^-1。     

苹果中多酚氧化酶的性质

以冷冻丙酮制备苹果多酚氧化酮粉,用分光光度法研究pH、温度、抑制剂对酶活性的影响。结果表明：以邻苯二酚为底物,PPO的最适pH为6．6,最适温度为28℃;酶热失活遵循一级动力学,80℃半衰期为1．1min亚硫酸钠,半胱氨酸,抗坏血酸为强烈抑制剂。