离子交换层析分离纯化发酵米糠中的γ-氨基丁酸

以米曲霉发酵处理的米糠为研究对象,研究发酵米糠中γ-氨基丁酸的分离纯化方法,采用超声波辅助提取对米糠发酵物进行初步提取,然后采用离子交换层析法进行纯化,提取液经过离心、脱色、脱盐等预处理,通过静态吸附实验和吸附动力学试验确定离子交换层析的最适条件。结果表明,选取732型强酸性阳离子交换树脂、上样p H为3.0、上样液浓度2 mg/m L,流速2 m L/min,洗脱液p H 8.0~10.0,收集馏分,测得其γ-氨基丁酸的纯度为73%,计算得提取纯化γ-氨基丁酸的得率为44.9%。     

重组大肠杆菌生物合成γ-氨基丁酸的发酵条件优化

目的:在摇瓶水平上对重组大肠杆菌发酵生产γ-氨基丁酸的发酵条件进行优化。方法:首先对培养基组分中的碳源、氮源、底物浓度和无机盐进行优化,之后对诱导温度、诱导剂浓度、诱导培养的p H值、调整p H时间、装液量、诱导发酵时间进行优化,以确定最佳发酵条件。结果:在最佳培养基组分和培养条件下,发酵液中γ-氨基丁酸的产量达19.18 g/L。与初始发酵培养基发酵所得γ-氨基丁酸的产量3.98 g/L相比,γ-氨基丁酸的产量增加3.82倍。结论:研究结果为γ-氨基丁酸的产业化应用奠定了良好的基础。     

乳酸菌发酵提高麦胚可溶性蛋白和总酚含量及抑制脂质体氧化能力的研究

以可溶性蛋白及总酚含量为指标,在单因素实验基础上,采用正交实验设计优化乳酸菌发酵麦胚的条件,并考察了发酵产物在脂质体体系下的抗氧化能力。结果表明,起始p H影响显著,可溶性蛋白和总酚累积的最适发酵条件分别为p H5.0、VB6浓度150μmol/L、发酵时间12 h、发酵温度35℃及p H5.0、VB6浓度100μmol/L、发酵时间36 h、发酵温度35℃。在优化条件下,麦胚发酵产物水溶性组分中蛋白及总酚含量分别为24.86 mg/m L和0.876 mg/m L,比原料提高了1.74和1.45倍。同时,乳酸菌发酵提高了麦胚水溶性组分抑制脂质体氧化的能力,其脂质体氧化抑制率可达45.5%。通过对·OH清除及对Fe~(2+)螯合能力的实验表明,麦胚发酵产物抑制脂质体氧化的能力与其羟基自由基清除能力有关。     

高效液相色谱法测定乳酸菌发酵液中γ-氨基丁酸

通过对衍生试剂浓度、衍生时间、衍生温度、检测波长、流动相比例与柱温条件的选择,建立了一种高效液相色谱（HPLC）法灵敏检测发酵液中γ-氨基丁酸（GABA）含量的方法。以邻苯二甲醛为衍生化试剂,衍生时间5 min,衍生温度为室温,色谱条件为：检测波长228 nm,流动相为乙腈-20 mmol/L结晶乙酸钠溶液（21∶79,V/V）,柱温30℃,流速0.8 m L/min。结果表明,在γ-氨基丁酸含量0.05μg/m L～0.50 mg/m L范围内线性关系良好（相关系数R2=0.999 4）,平均加标回收率为91.87%～105.58%,精密度试验结果相对标准偏差（RSD）为0.55%～3.74%(n=5),检出限为0.02μg/m L。采用该方法检测发酵液中γ-氨基丁酸含量,其含量范围在0.157～0.369 mg/m L之间。该方法操作简单、灵敏、准确可靠,适用于发酵液中γ-氨基丁酸含量的检测。     

活性化糙米富集γ-氨基丁酸的雾化液组分优化

通过单因素试验和正交试验,优化了糙米湿润活性化富集γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的雾化液p H值、VB6及Ca Cl2浓度,同时研究了最优条件下活性化糙米谷氨酸脱羧酶活力及主要物质含量变化。结果表明:最优培养条件为雾化液p H 3.5、VB6浓度2 mmol/L和Ca Cl2浓度10 mmol/L;在此条件下,活性化糙米中GABA含量可达7.67 mg/100 g,为原料糙米的2.74倍。随着活性化时间的延长,糙米中游离氨基酸、还原糖含量及谷氨酸脱羧酶活力呈现逐渐增加的趋势,可溶性蛋白及淀粉含量呈现逐渐下降趋势。相关性分析表明,GABA含量与谷氨酸、游离氨基酸、可溶性蛋白含量之间均显著相关。     

米糠发酵产γ-氨基丁酸条件优化的研究

以新鲜米糠为原料,加入乳酸菌进行发酵生产米糠γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric,GABA),对发酵条件进行研究。探讨了在不同的发酵温度、发酵时间、乳酸菌添加量和嗜热链球菌S1和保加利亚乳杆菌L1比例对米糠发酵液中γ-氨基丁酸含量的影响。在单因素试验的基础上,选择四因素三水平进行正交试验优化工艺参数。结果表明,乳酸菌添加量3%、发酵温度48℃、嗜热链球菌S1∶保加利亚乳杆菌L1=1∶2、发酵时间24 h。在此条件下γ-氨基丁酸含量为320.61 mg/100 g。     

响应面法优化假丝酵母Y6产γ-氨基丁酸发酵工艺

从火龙果果实表面上筛选出一株发酵产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)假丝酵母菌菌株Y6(Candida sp.)。用反相高效液相色谱测定发酵液中GABA含量。响应面试验确定其最适培养基成分为:蔗糖23 g/L、麸皮65 g/L、L-谷氨酸6 g/L、磷酸吡哆醛0.5 mmol/L。最适培养条件为初始p H 4.5、培养温度28℃、转速200 r/min、培养时间3.5 d。结果表明:优化之后GABA的产量提高了72%。     

生产γ-氨基丁酸的乳酸菌菌株的筛选

本试验以自然发酵泡菜为原料,用平板划线分离得到10株菌株,通过对菌株个体特征观察和部分生理生化特征的鉴定,以及纸层析法进行定性分析,改良纸层析法与HPLC法结合的定量分析,得到产γ-氨基丁酸的优势乳酸菌B2,产量为1.18mg/m1。     

糙米发芽富集γ-氨基丁酸工艺优化的研究

利用响应面分析法优化糙米发芽富集γ-氨基丁酸的工艺参数,分析得出最佳条件下糙米发芽富集γ-氨基丁酸的含量。糙米发芽是糙米富集γ-氨基丁酸的一种形式,通过单因素试验确定出糙米发芽的发芽率,利用纸层析法测量,测量γ-氨基丁酸的含量。最佳的富集条件是:浸泡温度为30℃,浸泡时间为24 h,发芽温度30℃,发芽时间为28 h。     

乳酸菌发酵米糠产γ-氨基丁酸最适条件的研究

使用乳酸菌发酵米糠,以菌种、菌种添加量、发酵温度、发酵时间为单因素研究其对米糠发酵液中γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响,在最适条件下,采用混料设计法,使用混合乳酸菌发酵米糠,以发酵液中GABA含量为指标,确定乳酸菌发酵米糠的最优条件为:在混合菌种嗜热链球菌S1添加量为1.55%,保加利亚乳杆菌L1添加量为1.45%,50℃下发酵米糠14h,发酵液中GABA含量最高,为287.975mg/100g。     

γ-氨基丁酸产生菌的选育及发酵条件优化

目的:从自然界中筛选γ-氨基丁酸产生菌,研究其最佳发酵条件;方法:采用乳酸菌分离纯化方法挑出γ-氨基丁酸产生菌,对其形态和生理生化特征进行鉴定.随后分别采用正交试验及单因素法对菌株产γ-氨基丁酸的培养基组成和培养条件进行优化;结果:根据伯杰细菌鉴定手册,所筛菌株初步确定为乳酸链球菌(Streptococcus laetis).试验优化的培养基组成为:蔗糖10g/L,丁二酸钠10 g/L.胰蛋白胨5g/L,酵母膏5g/L;优化后的最佳发酵条件为:培养基初始pH为6.5、培养温度为32℃、培养时间为48h;结论:在最佳培养基组合和发酵条件下,发酵液中γ-氨基丁酸的含量达4.23g/L,菌种可作为γ-氨基丁酸产生菌.     

利用低pH处理促进酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽

根据酿酒酵母2-10515摇瓶发酵生产谷胱甘肽发酵曲线特点,设计了一种低p H环境,即将种子液先在p H3.5条件下培养6 h,经接种后以适应发酵过程中长时间的低p H环境从而促进其合成谷胱甘肽的能力。低p H环境中的种子液接种发酵过程中,发酵液生物量、胞内谷胱甘肽总产量及胞内谷胱甘肽含量最大值分别为9.7 g/L、25.6 mg/L、4.1 mg/g,比未经处理条件下最大值分别提高了38.3%、39.5%、5.8%。此结果表明,利用低p H处理能够提高酿酒酵母2-10515生产谷胱甘肽能力。     

γ-聚谷氨酸发酵工艺研究

采用发酵技术,利用枯草芽孢杆菌发酵生产γ-聚谷氨酸,对γ-聚谷氨酸发酵工艺进行研究。主要研究碳源、氮源、装液量、接种量、发酵时间、p H以及前体谷氨酸钠和促进剂氯化铵对γ-聚谷氨酸发酵的影响。前期研究表明,γ-聚谷氨酸发酵液黏度与其产量线性相关,故本研究中采用发酵液黏度作为γ-聚谷氨酸产量的衡量指标。通过单因素试验和正交试验,对发酵培养基和发酵条件进行优化,最后得到最佳发酵培养基配方和发酵条件。通过单因素及正交试验,确定最佳发酵培养基配方为:葡萄糖4%,酵母膏0.5%,谷氨酸钠3%,Mg SO4·7H2O 0.025%,K2HPO40.2%,氯化铵0.3%;最佳发酵条件为:初始p H 9.5,装液量50m L,接种量6%,摇床转速为220 r/min,37℃振荡培养72 h。     

γ-氨基丁酸测定方法的研究

在用乳酸菌发酵生产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)时,为了对发酵液中的GABA进行定性与定量分析,本文对纸层析法、高效液相色普法(HPLC)进行了研究,结果发现用本文中实验所确定的改良纸层析法进行初步的定性与定量分析是可行的,再配合PITC柱前衍生-紫外检测的HPLC法进行精确定量分析,结果准确,重复性好。     

发芽糙米植物蛋白露发酵工艺研究

以发芽糙米、大豆分离蛋白、蔗糖为主要原料进行新型饮品发酵工艺研究。在单因素试验基础上进行复配正交试验,通过理化指标及感官品质评价确定最佳的原料配比和发酵条件。最佳原料配比为(kg/40 L):发芽糙米3.5,大豆分离蛋白1.5,蔗糖3.5。最佳发酵条件是:接种量9%,发酵温度39℃,发酵时间(7~8)h,发酵终点p H4.9,在5℃后熟15 h。产品技术指标:总固形物15.65%,蛋白质含量为2.77%,γ-氨基丁酸(GABA)含量为4.6 mg/100 m L,p H(4.35~4.40),乳酸菌3.63×10~8 cfu/m L。产品感官品质优异,是营养保健的全谷食品,适用人群广泛,工艺简便可行,为发芽糙米在食品领域中开辟了更广阔的应用前景。     

乳酸菌发酵香菇柄酶解物产γ-氨基丁酸的研究

为了提高香菇柄的功能性,研究了香菇柄酶解产谷氨酸的工艺,并在此基础上以酶解物为培养基,进行了乳酸菌发酵产γ-氨基丁酸的试验。结果表明:香菇柄酶解最优工艺条件为酶解温度55℃,加酶量0.35%,酶解时间60min,固液比1:20,该工艺下谷氨酸含量达到6.982mg/m L;产GABA的最佳发酵条件为接种量4%,发酵温度37℃,发酵初始p H值6.0,发酵时间60h,在此条件下,GABA产量为84.34mg/L,是发酵前GABA产量的2.65倍。研究结果为今后开发新型功能性香菇制品提供了基础。     

红茶菌发酵咖啡液制备低咖啡因饮料

为研制出一种具有保健功能的咖啡饮品,采用红茶菌为菌种发酵咖啡液,研制低咖啡因发酵饮料。以发酵液的p H、还原糖含量和感官评定作为指标,通过对咖啡液浓度、糖浓度和发酵时间的单因素试验、正交试验和极差分析,探究发酵最佳工艺条件及发酵过程中咖啡因含量的变化。结果表明,36℃恒温静置培养条件下最优配比组合为咖啡浓度2 g/100 m L,糖浓度4 g/100 m L,发酵时间8 d。经检测,最优组合发酵液中主要含乳酸菌5.0×10~6 cfu/m L、醋酸菌4.8×10~6 cfu/m L和酵母菌5.3×10~6 cfu/m L,咖啡液经发酵后咖啡因含量降低了13.04%。这不仅丰富了红茶菌饮料的口味,也为降低咖啡中的咖啡因含量提供了新方法。     

富含γ-氨基丁酸的发酵糙米米粉工艺研究

利用响应面分析法对植物乳杆菌接种的发酵糙米米粉发酵工艺进行研究。以γ-氨基丁酸含量为响应指标,以发酵时间、接种量、发酵温度为单因素考察指标,在Box-Behnken实验设计原理的基础上采用三因素三水平的响应面分析法研究了各因素的显著性及交互作用。确定的最佳发酵条件为:发酵时间52h、接种量2%、发酵温度40℃。此条件下的发酵样γ-氨基丁酸的含量为3.14mg/g,与预测值的相对误差为0.8%,加工成型后的糙米粉γ-氨基丁酸含量为2.92mg/g。     

挤压米糠发酵生产γ-氨基丁酸的工艺条件优化

米糠经双螺杆挤压机挤压处理后作为原料,以米曲霉为菌种,采用液体和固体两种发酵方法生产γ-氨基丁酸(GABA),研究米糠挤压处理工艺对GABA产量的影响。结果表明：米糠经不同挤压条件处理后进行发酵生产,其产物中γ-氨基丁酸的含量也不同。米糠的最适挤压处理条件为：物料米糠含水率20%、螺杆转速200r/min、挤压温度150℃,使用该条件处理得到的米糠进行发酵生产γ-氨基丁酸,液体发酵产物中γ-氨基丁酸含量为118.6mg/100g,固体发酵产物所得γ-氨基丁酸含量为121.1mg/100g。     

高产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及鉴定

利用MRS选择性培养基,从酸菜、泡菜等中分离出6株产γ-氨基丁酸的乳酸菌,经过复筛得到γ-氨基丁酸高产菌株F13、F14和F15.这3株菌在含有10g/L谷氨酸钠的发酵培养基中33℃培养60h,发酵液中γ-氨基丁酸含量分别达到5.72g/L、5.01g/L和4.98g/L.根据乳酸菌的形态特征和生理生化特征,初步鉴定这3株菌分别为短乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌.