大豆蛋白酶水解物抗氧化活性的研究

采用碱性蛋白酶水解大豆蛋白,研究大豆蛋白酶水解物的抗氧化活性。通过测定水解物的亚铁还原能力,对卵磷脂脂质氧化体系的氧化抑制作用,DPPH(二苯代苦味肼基)自由基清除能力,研究大豆多肽抗氧化活性的大小。结果表明,大豆多肽的抗氧化能力与底物浓度、加酶量、水解时间、pH值、温度等有关,水解的最佳工艺条件是底物质量浓度50 mg/mL,pH 8.0,加酶量(E/S)2%,温度60℃,水解时间为5 h。研究表明,碱性蛋白酶制备的大豆蛋白水解物,在卵磷脂脂肪氧化体系中可以降低硫代巴比妥酸值(TBARS),且具有较好的清除DP-PH自由基的能力。     

双酶酶解驴骨泥工艺优化及酶解液抗氧化性、氨基酸含量分析

为充分利用驴骨资源,利用酶解技术获得抗氧化性高和氨基酸含量丰富的酶解液。以驴骨泥为原料,以水解度、可溶性多肽得率为指标,筛选酶种类及双酶组合方式。采用正交试验优化双酶分段水解工艺参数,并对酶解液的游离氨基酸组成进行测定,通过测定酶解液的总还原能力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力及羟自由基清除能力来评价其抗氧化活性。结果表明：风味蛋白酶和复合蛋白酶分段水解为最佳酶解工艺,其最适酶解条件：先在50℃、pH 7.0、加酶量1.5%、固液比1∶2（g/mL）条件下利用风味蛋白酶酶解3 h,随后加入复合蛋白酶,固液比1∶2（g/mL）、加酶量2.5%、酶解时间4 h,在此条件下酶解液水解度、可溶性多肽得率分别可达15.74%、20.34%;酶解液中含有17种氨基酸,其中丙氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、精氨酸、脯氨酸、甘氨酸含量高于30 mg/100 mL;所得酶解液对超氧阴离子自由基、羟自由基和DPPH自由基都有很好的清除作用,其清除率最高分别达到31.65%、44.40%和71.43%。综上,双酶酶解驴骨泥蛋白可以制备高氨基酸含量和高抗氧化性的酶解液。     

灵芝蛋白酶解产物分析及其抗氧化活性的研究

采用商品蛋白酶Alcalase和Protamex对灵芝蛋白进行水解,并对灵芝蛋白水解前后抗氧化活性的变化进行了比较。结果表明:灵芝蛋白经过蛋白酶Alcalase和Protamex水解10 h后,氨基酸态氮含量从酶解前的0.15 mg/mL分别增长到0.61 mg/mL和0.54 mg/mL;Protamex酶解得到的游离氨基酸Lys、Val、Leu、Thr、Phe、Ala、Arg、Ile、Cys、His和Try含量较高,Alcalase酶解得到的游离氨基酸Ala、Val、Glu、Leu、Arg、Try和Thr含量较高;灵芝蛋白经过蛋白酶Alcalase和Protamex水解后,清除羟自由基的能力显著增强,水解前.OH自由基清除率为28.70%,水解后分别为39.10%和33.30%;还原力亦显著增强,水解前OD700值为0.21,水解后分别为0.35和0.34。     

应用电子自旋共振(ESR)法测定猪血浆蛋白水解物抗氧化活性的研究

将猪血浆蛋白(4% 浓度,W/W)用碱性蛋白酶水解0.5～5h。分别用FRAP 法和电子自旋共振(ESR)法测定水解物的还原能力和自由基清除能力。结果显示,水解物的还原能力随着水解度(DH)的增大而显著增强(p ＜ 0.05),并且水解物对DPPH 自由基、羟基自由基以及超氧自由基的清除能力随着水解时间的延长和蛋白浓度的增大而显著增强(p ＜ 0.05)。尽管未水解的猪血浆蛋白也有一定的抗氧化活性,但远远低于水解物的抗氧化活性(p ＜ 0.05)。此外,猪血浆蛋白碱性蛋白酶水解物的抗氧化活性和自由基清除能力与水解度(DH)和蛋白浓度密切相关。由于猪血浆蛋白水解物具有一定的抗氧化活性和自由基清除能力,所以可以作为一种有效的抗氧化剂而应用于食品工业中。     

鸡骨酶解物的抗氧化活性研究

分别选用复合风味蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、Alcalase蛋白酶、胰酶、胰蛋白酶、AS.1398中性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解鸡骨泥,研究鸡骨酶解物(蛋白质含量3 mg/mL)对DPPH、羟自由基(OH·)的清除能力及其还原性.试验结果表明:Protamex复合蛋白酶酶解鸡骨产物的DPPH清除率最强,即81.44%;复合风味蛋白酶酶解物OH·清除率达30.32%,还原性测定的吸光值为0.3.总之,鸡骨酶解物的DPPH清除能力强于羟自由基清除能力和还原力.在研究不同浓度和水解度对鸡骨酶解物清除DPPH活性的影响时发现,随着酶解物蛋白质质量浓度的增大,酶解物的DPPH清除率升高.复合风味蛋白酶、Protamex复合蛋白酶的鸡骨酶解物蛋白质质量浓度分别为4、6mg/mL时,其DPPH清除率分别达91.49%、97.3%.但DPPH清除率与水解度不呈正相关性,只有在特定水解度下,使抗氧化肽含量最高时,水解物才表现出最强的抗氧化能力.例如复合风味蛋白酶、AS.1398中性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶、胰酶的最佳水解度分别为12.59%、23.78%、14.45%、20.04%.     

不同酶水解菜籽蛋白的水解物的抗氧化活性研究

使用alcalase、protamex、flavourzyme、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶共6种蛋白酶水解菜籽蛋白,研究水解物清除DPPH自由基能力、还原能力和抑制亚油酸过氧化活性。结果表明,6种蛋白酶水解菜籽蛋白的水解物都具有抗氧化活性,但水解物的抗氧化活性与水解所用酶的种类和水解时间有关,胰蛋白酶和flavourzyme水解物显示了较强的清除DPPH自由基和还原能力,6种蛋白酶水解物抑制亚油酸过氧化活性高于VE,但略低于BHT。alcalase水解菜籽蛋白时,水解10~45 m in的水解物清除DPPH自由基和还原能力较强,延长水解时间并不能提高其抗氧化活性。     

花椒籽仁抗氧化肽水解用酶的筛选研究

采用Protamex、Alcalase2.4L、Flavourzyme500MG、Neutrase0.5L、木瓜蛋白酶5种酶制剂水解花椒籽仁蛋白制备抗氧化肽,以水解度(DH)、多肽含量和水解产物的总抗氧化能力(TAC)、DPPH自由基清除能力、在亚油酸体系中的抗氧化性为指标对水解过程进行了分析,结果表明,Alcalase2.4L蛋白酶是制备花椒籽仁抗氧化肽的最适水解酶,其水解物的水解度(DH)为20.42%,多肽含量为21.83mg/mL,总抗氧化能力(TAC)和DPPH自由基清除能力分别为0.44mmol/L、65.47%,此外在亚油酸体系中具有一定的抗氧化性。     

由碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物抗氧化活性的研究

通过碱性蛋白酶水解乳清蛋白以研究乳清蛋白水解物的抗氧化活性。通过测定水解物对卵磷脂脂质氧化体系的氧化抑制作用、亚铁还原能力、DPPH自由基清除能力,研究乳清多肽抗氧化活性的大小。结果表明,乳清多肽的抗氧化能力与底物浓度、加酶量、水解时间、pH值、温度等有关,水解的最佳工艺条件是底物质量浓度50g／L,pH值8．5,加酶量（E／S）2％,温度65℃,水解时间为5h。研究表明,碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物在卵磷脂脂肪氧化体系中可以降低硫代巴比妥酸值（TBARs）,且具有较好的还原能力和清除自由基的能力,因而具有较好的抗氧化活性。     

茶渣多肽制备及其对羟自由基的清除能力

分别以酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶以及复合蛋白酶水解茶渣粗蛋白制备茶渣多肽,并对多肽的羟自由基清除能力进行考察。通过单因素试验证明:复合蛋白酶的效果最好,其最佳水解工艺条件为粗蛋白液质量分数0.5%、加酶量600U/g、温度55℃、pH8.0、水解5h,在此条件下,多肽对羟自由基的清除能力达27.3%;碱性蛋白酶的效果也较好,其最佳工艺为蛋白液质量分数0.5%、加酶量400DU/g、pH8.5、温度50℃、时间1.0h,在此条件下,多肽对羟自由基的清除能力达25.3%,与前者的清除能力没有显著差异,但用时少4h;利用碱性蛋白酶作为酶源制得茶渣多肽粗品中含有蛋白质、多肽、游离氨基酸分别为28.4%、11.0%、1.5%,其对羟自由基的半清除率IC50为8.432mg/mL,相同条件下VC的IC50为0.897mg/mL。     

棘胸蛙肌肉水解物的制备及抗氧化活性评价

以棘胸蛙腿部肌肉为研究材料,利用木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶两种酶,以成品率和水解度为指标,通过单因素结合响应面分析的方法优化棘胸蛙水解物的酶解工艺,同时对棘胸蛙水解物抗氧化能力进行研究。结果表明,棘胸蛙水解物经木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶的最佳酶解条件为：在各酶最适pH和温度的条件下,料液比为1:15(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量为2%(m/m);该工艺条件下,棘胸蛙水解物的水解度分别为19.23%、23.51%,成品率分别为22.66%、15.32%,清除DPPH自由基的IC₅₀值分别为2.61、2.95mg/mL,清除ABTS⁺自由基的IC₅₀值分别为3.46、3.20 mg/mL,清除羟基自由基的IC₅₀值分别为8.20、9.23 mg/mL。综上,通过响应面法优化的棘胸蛙水解物酶解工艺方便可行,制备得到的水解物具有较强抗氧化活性,为棘胸蛙资源的开发提供了理论基础。