瑞士乳杆菌产氨肽酶和X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶发酵条件的优化

采用MRS液体培养基培养瑞士乳杆菌,并对其液体发酵工艺进行了优化试验,确定了发酵产氨肽酶和X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶活力的最佳条件。实验采用单因素试验和响应面分析法考察了培养基的初始pH值,发酵温度以及发酵时间对氨肽酶和X-脯氨酰-二肽酰基-氨基肽酶产生的影响。实验确定了发酵产酶的最佳条件：初始pH值6.0、发酵温度33℃、发酵时间16h。实验证明运用响应面分析法优化产酶条件是可行的。     

海藻酸钠固定瑞士乳杆菌条件优化

采用海藻酸钠固定瑞士乳杆菌,制备具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的酸乳,通过单因素试验和L9(34)正交试验确定其最优固定条件。结果表明,最优固定条件是1.5g/100mL海藻酸钠溶液、菌液浓度1:10(m/V)、0.1mol/L CaCl2溶液、固定时间1h。将固定化的瑞士乳杆菌与传统酸乳发酵剂(保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌)复配接入到11g/100mL牛乳中,在37℃条件下发酵至凝乳,凝乳时间为8h,pH值为4.2,凝乳状态好,口感柔和、细腻,成品酸乳ACE抑制活性为70.3%。     

瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶提取研究

瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶是其蛋白水解系统中一个非常重要的蛋白酶。本实验采用螯合Ca2+的方法对瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取进行了研究,并确定了细胞壁蛋白酶提取的最佳实验条件。菌体用含有30mmol/LCaCl2的50mmol/LTris-HCl(pH7.10)缓冲液洗涤三次,然后用含有45mmol/LEDTA-Na2的50mmol/LTris-HCl(pH6.50)缓冲液悬浮,43℃保温,蛋白酶就会释放出来,90min后取出离心(4500r/min,20min,4℃),上清液即为粗酶液。粗酶液再经DEAE Sepharose CL-6B纯化,比酶活力提高了1.8倍。     

瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性条件的优化

本实验探讨了发酵条件对瑞士乳杆菌发酵牛乳产生抗ACE活性的影响。在单因素试验的基础上,进行正交试验,得出能产生较高抗ACE活性的最佳工艺条件是:发酵温度为37℃,发酵时间为12h,无脂乳固形物浓度12%(W/V)。     

瑞士乳杆菌AJT产细菌素的发酵条件优化

瑞士乳杆菌AJT是一株广谱抗菌活性菌株,对革兰氏阳性、革兰氏阴性细菌和真菌均有较好的抑制作用。通过优化试验确定其最优的培养基成分为:乳糖15.0 g/L、酵母浸出粉7.0 g/L、胰蛋白胨6.0 g/L、牛肉浸膏12.0 g/L、乙酸钠7.0g/L、柠檬酸钠7.0 g/L、磷酸氢二钾2.0 g/L、硫酸镁200 mg/L、硫酸锰40 mg/L,吐温-80 1.0 g/L,起始pH6.5;最佳培养条件:接种量2.0%,37℃培养20 h。与未优化发酵条件相比,粗提取的瑞士乳杆菌AJT细菌素对蜡状芽孢杆菌的抗菌活性提高了53.8%,对黄色镰孢的抗菌活性提高了41.5%,对大肠杆菌的抗菌活性提高了68%。     

瑞士乳杆菌TUST005发酵干酪乳清产物的工艺条件优化

以瑞士乳杆菌TUST005、干酪乳清为原料,在单因素实验基础上,采用四因素三水平的正交实验方法研究了不同的接种量、培养时间、培养温度和初始pH值对游离氨基酸质量浓度的影响。结果表明,瑞士乳杆菌TUST005制备发酵干酪乳清的最佳工艺条件:新鲜干酪乳清经灭菌后,接种3%(体积分数)的发酵剂,培养时间为30 h,发酵液初始pH值为6.5,36℃静止培养,游离氨基酸的质量浓度为1.74μg/mL。     

瑞士乳杆菌高活力蛋白酶发酵条件的优化

本研究采用正交试验的方法对瑞士乳杆菌TS6024发酵乳清蛋白相关发酵条件进行优化,以达到瑞士乳杆菌分泌高水平蛋白酶能力的目的。实验结果表明,优化的发酵条件为:温度35℃、发酵初始pH6.5、接种量2.0%、静置发酵16h后,发酵液中生成游离氨基酸的水平达到994.170×10-5mol/L,分泌蛋白酶的活力达到62.136U。     

瑞士乳杆菌发酵乳的研究

本文选用瑞士乳杆菌作为发酵剂菌种制作酸奶,利用其产酸产粘特性好的特点,研究了在乳中的生长特性。在12％的脱脂复原乳,在40度下培养所制得的酸奶凝乳时间为4.3h,凝乳时PH为4.46,酸度为87°T,经过后熟,凝乳质地光滑,口感细腻,无乳清分离和不良发酵气味,活茵数4.1×109个/mL。利用喷雾干燥设备制得的酸奶粉活菌数大于109个/g,经过活化可作为酸奶的发酵剂和含有活性乳酸菌食品的配料。     

壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。     

瑞士乳杆菌发酵乳清产物抗氧化活性的条件优化

应用产蛋白酶活力强的瑞士乳杆菌发酵乳清,讨论了发酵时间、发酵温度、发酵初始pH值和瑞士乳杆菌接种量等条件对产物抗氧化活性的影响。在单因素实验的基础上,进行正交实验,得到抗氧化活性最高产物的发酵条件为发酵温度37℃、乳清初始pH值为6.0、瑞士乳杆菌接种量(体积分数)5%和连续培养18 h。在此条件下,发酵产物的羟自由基清除能力达到54.73%。证明了瑞士乳杆菌发酵乳清产物具有优于未发酵乳清的较强抗氧化活性,在现有酶解法的基础上开辟了制备乳清源抗氧化肽的新途径。     

热激修饰对瑞士乳杆菌细胞性质的影响

根据瑞士乳杆菌生理特性,优化了其最佳生长条件:接种量2%,温度40℃,初始pH值7.1,培养时间12 h。在此条件下培养,菌液浓度可达108~109mL-1。探讨了瑞士乳杆菌特性与热激温度、时间的相关性。结果表明,低于67℃或时间少于15 s,对抑制细胞产酸无明显影响;高于69℃或时间超过20 s,胞内酶残留率不足20%,优化出热激条件为温度67~69℃,时间15~20 s。     

瑞士乳杆菌发酵乳制备ACE 抑制肽的条件优化

本研究以脱脂乳为主要原料,对瑞士乳杆菌发酵产生血管紧张素转化酶(angiotensin I-converting enzyme,ACE)抑制肽工艺条件进行研究。通过单因素试验和响应面试验设计,确定瑞士乳杆菌发酵脱脂乳生产ACE 抑制肽的最佳工艺条件为：脱脂乳浓度9.67%(m/V)、底物灭菌时间30min、接种量3%(V/V),温度38.82℃、发酵时间6.26h,测得ACE 抑制率为92.26%。研究结果证实利用发酵法生产乳源ACE 抑制活性肽对控制高血压具有重要意义。     

瑞士乳杆菌和嗜酸乳杆菌的益生免疫特性的研究

以瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1、KLDS AD2为研究对象,详细研究了它们对体外模拟人工胃肠道的耐受性,并评估了三株乳杆菌对小鼠脾淋巴细胞增殖活性的影响,初步探讨了三株乳杆菌的免疫活性。结果表明,三株乳杆菌对人工胃液、人工肠液、胆汁盐环境具有很好的耐受性,瑞士乳杆菌KLDS 1.8701和嗜酸乳杆菌KLDS AD1较强于嗜酸乳杆菌KLDS AD2。乳杆菌对脾淋巴细胞增殖活性的作用表现出明显的量效关系,活菌数为107CFU/mL时,对脾淋巴细胞活性影响大小为KLDS AD1>KLDS 1.8701>KLDS AD2;KLDS 1.8701对脾淋巴细胞的增殖具有很好的促进作用,只有当KLDS AD1的活菌数达到107CFU/mL时才具有促进作用,而KLDS AD2没有促进作用。      

瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的条件优化

对瑞士乳杆菌发酵乳清蛋白产生血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽的发酵条件进行探讨。通过单因素分析和响应面试验设计,确定发酵乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳工艺条件：发酵时间为17.52h,发酵温度为37.07℃,乳清质量浓度为114.1g/L,其ACE抑制率可达89.337%。